VEGF在早期肾癌免疫治疗中的作用.doc

VEGF在早期肾癌免疫治疗中的作用 摘要 目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）在早期肾癌免疫治疗中的作用。方法 采用免疫组化方法检测50例肾癌组织的表达情况。17例VEGF表达阳性者术后行干扰素(INF)300万IU隔天皮下注射，12周为1个疗程。对照组未进行免疫治疗。结果 50例肾癌组织中VEGF表达阳性33例(66%)；免疫治疗组与未治疗组在5年肿瘤进展方面差异有显著性。结论 VEGF可以作为早期肾癌进行免疫治疗的判断指标。 关键词 VEGF；肾癌；免疫治疗 Effect of VEGF expression in early renal cell cancer before immunotherapied Abstract Objective To evaluate the effect of VEGF expression in early renal cell cancer before immunotherapied.Methods VEGF immunostaining was successfully performed in 50 cases.17 cases with positive VEGF expression were subcutaneous injected INF 300IU Qod.A course of treatment was 12 weeks.Cases with negative VEGF expression were not immunotherapied.Results The positive rates of VEGF expression in RCC was 66%(33/50).There was significant correlation in the 5 year tumor progression.Conclusion VEGF was an early immunotherapeutic factors in early RCC. Key words vascular endothelial growth factor；renal cell cancer；immunotherapy 目前发现功能最强、特异性最高的促进血管内皮细胞分裂增殖的生长因子是内皮生长因子（VEGF）。我们应用免疫组化方法检测肾癌组织中VEGF的表达，并根据VEGF表达的情况制订下一步的治疗方案，探讨它在早期肾癌免疫治疗中的作用。 1 资料与方法 11 一般资料 取分院和总院1996年6月2005年6月手术治疗的原发性肾细胞癌标本（经病理证实）50例，其中男37例，女13例；年龄2180岁，平均517岁；均为单侧发病，左侧27例，右侧23例；术前结合B超、CT或MRI确诊为早期肾癌（T1T2N0M0）；均行肾癌根治术。将VEGF表达阳性者随机分为两组，其中一组17例术后行干扰素（IFN）300万IU隔天皮下注射，12周为1个疗程，休息24周重复同样治疗23个疗程；每2周复查肝功能、肾功能和血常规。另一组16例VEGF表达阳性者和VEGF表达阴性者分别作为对照组，未进行免疫治疗。随访12131个月，平均563个月。 12 免疫组织化学方法及结果判定 SP超敏试剂盒：购自北京中山生物技术有限公司。抗体：鼠抗人VEGF多克隆抗体（150），购自Santa Cruz公司；兔抗人VWF单克隆抗体(1400)，购自DAKO公司。 重新阅片，并找到相应的石蜡包埋块。然后将石蜡包埋块连续切片3张，厚4 ，分别做HE染色、免疫组化染色及空白对照。 VEGF阳性标准：显微镜下观察，参照Bot1等方法对结果判断，以肿瘤细胞膜或胞浆着色浅黄色、棕黄色或棕褐色者为阳性细胞。以每张切片中随机4个高倍镜(40)视野阳性细胞数10%为阳性切片。胞浆或胞膜着色10%或未着色者为阴性。 13 统计学方法 用统计学软件SPSS 100对实验结果所得的计量资料和计数资料进行分析。P005认为差异有显著性。 2 结果 21 VEGF在肾癌中的表达 按2002 UICC及AJCC标准划分：组织类型：透明细胞癌32例，乳头状细胞癌13例，嫌色细胞癌5例。50例肾癌组织中VEGF表达阳性33例(66%)(见图1)，VEGF表达在组织类型中差异无显著性（P0333，P005），其关系见表1。表1 VEGF表达与组织类型的关系 （略） 22 治疗和随访结果 VEGF表达阳性免疫治疗组与未治疗组比较，见表2。VEGF表达阳性免疫治疗组：无一例因明显并发症而终止治疗。1年随访：肿瘤进展：复发、转移或死亡1例；5年随访：复发、转移或死亡1例。VEGF表达阳性未治疗组与VEGF表达阳性组的比较，见表3。VEGF表达阳性未治疗组：1年随访：肿瘤进展1例；5年随访：肿瘤进展6例。VEGF表达阴性未治疗组：1年随访：肿瘤进展1例；5年随访：肿瘤进展2例。 表2 VEGF表达阳性免疫治疗组与未治疗组的比较 （略） 3 讨论 由于VEGF具有特异的促血管生长潜力，临床上广泛研究了它在肾癌中表达的意义。Paradis等2应用免疫组化法研究VEGF在RCC中的表达，结果发现VEGF阳性表达与肿瘤分级和大小密切相关。研究还表明3，VEGF表达强的肿瘤，比VEGF表达弱的病人病情发展迅速、复发快、术后无复发、生存时间短。因此，认为组织和血液中VEGFmRNA表达和(或)蛋白水平可作为评价肿瘤状况和预后不良的指标4。因此本组研究也是建立在以上的理论基础之上的。 本组研究中，VEGF表达在细胞类型之间差异无显著性，说明血管形成与组织来源无关，癌细胞类型对血管形成无决定性作用。 对于晚期肾癌采用免疫治疗已经得到大家的认可，但是否对早期的肾癌患者应该采用免疫治疗大家仍有争议。常用的免疫制剂有IFN、IL-2等，IFN的抗肿瘤机制5：（1）上调肿瘤细胞MHC-I类抗原表达，增强NK细胞及巨噬细胞杀伤肿瘤细胞的能力；（2）直接抑制肿瘤细胞增殖；（3）抗血管生长作用。大量的VEGF促进大量的肿瘤血管生成，提供更多的营养支持肿瘤的生长，IFN的抗血管生长作用阻止肾癌的进展。鉴于VEGF是肾癌预后的重要指标，我们用它来确定是否进行免疫治疗。在本文研究中，VEGF表达阳性采用免疫治疗组在1年肿瘤进展差异无显著性（P00477），但在5年差异有显著性（P0039）；而VEGF表达阳性未采用免疫治疗组与VEGF表达阴性未治疗组在肿瘤进展方面无差异，这就说明了VEGF表达阳性的早期肾癌术后行免疫治疗是有益于患者的。 综上所述，我们认为VEGF可以作为早期肾癌进行免疫治疗的判断指标。 参考文献 1 Bot FJ，Godschalk JCJ，Keihuadth KK，et al.Prognostion factors in renal cell carcinoma immunohistochemical detection of P53 protein versus clinicopathaological parameters.Int J Cancer，1994，57(5):634-637. 2 Paradis V，Lagha NB，Zeimoura L，et al.Expression of vascular endothelial growth factor in renal cell carcinoma.Virchows Arch，2000，436(4):351-356. 3 Folkman J.The influence of angiogenesis research on management of patients with breast cancer.Breast Cancer Res Treat，1995，36:109-112. 4 Nicol D，Hii SI，Walsh M，et al.Vascular endothelial growth factor expression is increased in renal cell carcinoma.J Urol，199