微生物检验的最新动态课件

微生物检验的最新动态,卫生部 抗菌药物临床应用管理办法颁布,抗菌药物管理分三级： 非限制使用级 限制使用级 特殊使用级 本办法自2012年8月1日起施行,非限制使用级：长期临床应用证明安全、有效，对细菌耐药性影响较小，价格相对较低的抗菌药物； 限制使用级：指经长期临床应用证明安全、有效，对细菌耐药性影响较大，或者价格相对较高的抗菌药物；,特殊使用级： 具有明显或者严重不良反应，不宜随意使用的抗菌药物； 2.需要严格控制使用，避免细菌过快产生耐药的抗菌药物； 3.疗效、安全性方面的临床资料较少的抗菌药物； 4.价格昂贵的抗菌药物。,医疗机构应当开展细菌耐药监测工作,医疗机构应当开展细菌耐药监测工作，建立细菌耐药预警机制，并采取下列相应措施： （一）主要目标细菌耐药率超过30%的抗菌药物，应当及时将预警信息通报本机构医务人员； （二）主要目标细菌耐药率超过40%的抗菌药物，应当慎重经验用药； （三）主要目标细菌耐药率超过50%的抗菌药物，应当参照药敏试验结果选用； （四）主要目标细菌耐药率超过75%的抗菌药物，应当暂停针对此目标细菌的临床应用，根据追踪细菌耐药监测结果，再决定是否恢复临床应用。,送检标本种类与临床意义,临床意义低的标本 痰、咽拭子 粪便、肛拭子 临床意义中等的标本 尿 脓、伤口分泌物 临床意义大的标本 血、脑脊液、胸腹水、无菌体液,痰标本的检验,涂片：要求常规涂片 鳞状上皮细胞如果10个/低倍，说明非下呼吸道标本，不做药敏（包括金葡、铜绿、不动等） 鳞状上皮细胞如果25个/低倍，存在肺泡巨噬细胞和柱状上皮细胞，是好的下呼吸道标本。 注意：如果上皮细胞和中性粒细胞均少，有致病菌大量生长，也视为合格，可能为免疫力低下的原因。,铜绿假单胞菌：如果出现露滴状菌落，那么该菌是产生生物膜的菌株，对抗生素有较强的抵抗力，应该提示临床：本菌为粘液型假单胞菌，建议用大环内脂类联合用药。 毛霉菌：如果呼吸科有大量毛霉菌生长，不能单纯以为是污染菌，应该通知临床，重留标本，也可能是致病菌。可以用胶带粘菌丝后镜检，区分毛霉还是曲霉。有隔菌丝是：曲霉菌；无隔菌丝是：毛霉菌。 酵母菌：痰里的酵母菌一般认为是口腔污染菌，为非致病菌。,痰液如果有1-2种致病菌生长，而且痰液标本合格，都要做鉴定。如果多于2种致病菌，则报告混合菌丛，不做鉴定和药敏。,咽拭子,主要用于诊断咽炎或口腔化脓性炎症的致病菌。 主要致病菌为：A群溶血链球菌（咽颊炎最常见的致病菌，造成严重的免疫系统疾病，主要是化脓性链球菌） C群、G群溶血链球菌（食源性，引起咽颊炎爆发） 溶血隐秘杆菌（选择报告，可引起咽炎和扁桃体化脓）,不报告咽炎中的非致病菌： 金黄色葡萄球菌 肺炎链球菌 流感嗜血杆菌（定植） 卡他莫拉菌 溶血链球菌 所有G-杆菌和所有酵母菌,咽拭子标本不能用于下呼吸道疾病的诊断。 小儿科病人诊断肺部感染可以吸痰或肺泡灌洗液。,血培养,推荐双侧双瓶 发热前0.5-1小时采样，采血量要足。 双侧双瓶采血后2-5天无需重复采血。 对于可能心内膜炎患者，起始采集3套血培养，如果24小时仍报告阴性，则继续采集两套血培养，全部培养一共为5套。,结果判断,一瓶阳性如果是凝固酶阴性葡萄球菌，可以做药敏。报告单可以提示1瓶阳性为*菌，药敏是*，其余3瓶无细菌生长。 如果1瓶有其他细菌生长，要做培养+药敏。 如果双侧双瓶均为G+球菌，成对排列，可同时贴奥普托欣纸片，鉴别肺炎链球菌（+）,血培养如果48小时以后，也有超过4天阳性，涂片看到G-小杆菌，分离培养2天后，出现灰色小菌落，就要小心布鲁菌。可做尿素实验，快速阳性，就可认定是布鲁菌。 也可以做鉴定，但要在生物安全柜中操作！ 如果确定是布鲁菌，立刻高压灭菌，不能保留菌株。,血培养建议三级报告制度 血培养已开单但未收到 检测中，尚无结果 24小时无生长 48小时无生长 阳性培养结果 如果血培养阳性，立即涂片染色镜检，危急值报告，并及时记录。不管是否污染菌。,尿培养,接种10ul,如果生长10个菌落，则1000cfu/ml,需要做药敏+鉴定 1-2种致病菌，均做鉴定+药敏，2种，报告混合菌群。,脓液,如果是封闭性脓肿：可以穿刺或引流采样，应在用药前采集，注意是否有厌氧菌存在的可能。 开放性伤口应先用无菌生理盐水冲洗表面污染菌，去除旧的分泌物，采集病灶深部的分泌物，或感染部位下的组织送检。 如果培养2种以内细菌，则均鉴定+药敏 2种则报混合菌群生长，可适当加描述，不做药敏。 脓液或伤口分泌物最好针吸，不要用棉拭子。因为里面含有：脂肪酸、树脂、福尔马林抑制细菌生长。,脓液无细菌生长原因,1.标本采集前已使用抗生素。 2.只做了需氧非苛养菌培养，而对厌氧菌、L型细菌以及一些对氧有特别需要的细菌都不能培养出来。 3.标本采集后没有及时送检或及时接种，造成细菌死亡。 脓液组成物是坏死的白细胞和溶解的细菌、组织碎片，自然没有活细菌生长。 建议除抽吸脓液送检外，再送坏死和新鲜交界处的组织。这里有血供，细菌生长好，有活力，阳性率高。,组织或吸取物标本革兰染色评价,如果出现鳞状上皮细胞，那么考虑皮肤菌群污染。 如果存在大量中性粒细胞，应该仔细寻找病原菌，如果中性粒细胞内吞噬有细菌，则很有价值。 当需氧培养有3种或更多肠道细菌生长，则报告“混合细菌生长”。也可适当加以描述。,脑脊液、组织、胸腹水,脑脊液要离心，接种血平板和巧克力平板，CO2环境培养。一定要