蓝芩口服液质量标准研究.ppt

蓝芩口服液 质量标准的研究,ppt演讲者：xxxxx 0xxxxx1010 其他成员：xxxxx 0xxxxx1003 xxxxx 0xxxxx1006 xxxxx 0xxxxx1007 xxxxx 0xxxxx1009 xxxxx 0xxxxx1048,蓝芩口服液 lanqin koufuye,板蓝根,黄芩,栀子,黄柏,胖大海,水提醇沉法1 按处方称取合格药材，加适量水煎煮3次，合并煎煮液，浓缩至相对密度为1.10，加入乙醇，使含醇量在60%左右，于05 下静置24h以上，取上清液，减压回收乙醇至尽，浓缩至相对密度为1.151.20，加适量纯化水调成体积约为药材量的0.6倍，即得蓝芩清膏。,调节ph,加水搅匀,滤过,灌装,灭菌,参考文献: 1 李赛荣,曹玉明,卜令斌.蓝芩口服液絮凝澄清工艺研究j.中国药业,2005,14(2):51-52.,本品为棕红色的澄清液体，味甜、微苦。,鉴别、检查、含量测定,1、用薄层色谱法（tlc）对蓝芩口服液中黄芩苷、栀子苷、盐酸小檗碱等主要成分进行鉴别。 2、主要通过检验蓝芩口服液的相对密度、ph值及其他有关规定项应符合中国药典规定。 3、用高效液相色谱法（hplc）对蓝芩口服液中栀子苷含量进行测定。,取本品5ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录 b)试验，吸取上述两种溶液各5l，分别点于同一用4醋酸钠溶液制备的硅胶g薄层板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5:3:1:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。,图1 黄芩苷tlc图,取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录 b)试验，吸取【鉴别】(1)项的供试品溶液与上述对照品溶液各5l，分别点于同一硅胶gf254薄层板上，以氯仿-甲醇(3:1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。,图2 栀子苷tlc图,取本品10ml，用正丁醇提取2次，每次10ml，合并正丁醇提取液，置水浴上蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，加在已处理好的中性氧化铝柱(中性氧化铝3g，100120目，内径约10mm，干法装柱)上，以氯仿25ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取盐酸小檗碱对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录 b)试验，吸取上述两种溶液各4l，分别点于同一硅胶g薄层板上，以苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液(6:3:1.5:1.5:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点。,图3 盐酸小檗碱tlc图,相对密度 应不低于1.05(中国药典2010年版一部附录 a)。 ph值 应为4.05.5(中国药典2010年版一部附录 g)。 其他 应符合合剂项下有关的各项规定(中国药典2010年版一部附录 j)。,照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录 d)测定。 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；0.05mol/l磷酸氢二钠-甲醇(70:30)为流动相；检测波长为238nm。理论板数按栀子苷峰计算应不低于1200。 对照品溶液的制备 精密称取栀子苷对照品4mg ，加50甲醇制成每1ml含0.04mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备 精密量取本品1ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，静置，取上清液用0.45m的微孔滤膜滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液1ml，置10ml量瓶中，加50甲醇至刻度，摇匀，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10l，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。 本品每支含栀子以栀子苷(c17h24o10)计，不得少于25.0mg。,hplc法测定蓝芩口服液中的栀子苷含量2 1 仪器与试药 岛津 lc- 10at 型高效液相色谱仪，岛津spd- 10avp 型紫外可见光检测器。 甲醇(色谱纯 )，磷酸氢二钠(分析纯 ) ，栀子苷对照品 ( 中国药品生物制品检定所) ，蓝芩口服液供试品 ( 江苏扬子江药业集团生产, 批号:030426 和表 1),参考文献: 2 黄淑萍,李雪兰,陈铁山,张玉斌,付永山.hplc法测定蓝芩口服液中的栀子苷含量j.中国药事,2005,19(11):667-669.,表1 10 批样品的栀子苷含量测定表,2 方法及结果 2.1 色谱条件: 色谱柱: kronasil c18柱 (5m, 4.6mm x 250mm) ; 流动相: 0.05mol l-1磷酸二氢钠-甲醇 (70:30) ; 流速: 1.0mol min-1, 检测波长:238nm。柱温: 室温; 进样量: 20 l; 理论板数:按栀子苷峰计算应不低于 1200。 2.2 溶液配制 对照品溶液的制备 精密称取栀子苷对照品4mg, 置于100ml量瓶中,加入甲醇-水 (1:1)至刻度,摇匀后作为对照品溶液。 供试品溶液的制备 精密量取蓝芩口服液1ml置于10ml量瓶中, 加入甲醇稀释至刻度,摇匀,静置。取上清液用滤膜(0.45m) 过滤, 再精密吸取续滤液1ml置10ml量瓶中,加甲醇-水 (1:1)稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。 阴性对照溶液的制备 取除栀子药材之外的其它药材,按【制法】项下的方法制备样品,精密量取样品1ml,同法制备阴性对照溶液。 测定 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各10l, 注入液相色谱仪、记录色谱图,测定,即得。,本品中以 每支含栀子苷( c17h 24o10) 计, 不得低于25mg。,2.3 线性关系考察 精密称取4. 8mg栀子苷对照品,置于100ml量瓶中,摇匀作为贮备液,再精密吸取贮备溶液2、4、6、8、10ml分别置于10ml量瓶中, 加入甲醇-水(1:1)稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。再精密吸取各对照品溶液20l, 注入色谱仪,记录栀子苷的峰面积。以进样量为横坐标, 栀子苷峰面积为纵坐标, 得回归方程: y= 280.1 +80093.2x, r= 0.9999。结果表明栀子苷在 0.192 0.96gml-1范围内线性关系良好。 2.4 精密度试验 取样品溶液,照含量测定项下的方法进行测定,连续进样6次, 测得峰面积平均值为 46061,相对标准偏差为1.3% 。 2.5 重复性试验 取同一批号样品, 按含量测定项下方法制备5份供试品溶液进行测 定,栀子苷平均含量为4.37mg /支, rsd为1.2% 。 2.6 稳定性试验 将批号 ( 030426)样品依法制备,每隔 2小时测定一次, 平均峰面积为 42459, rsd为1.3% ,结果表明10小时之内样品稳定。,2. 7 加样回收试验 精密吸取蓝芩口服液(含量4.41mgml-1)1ml置于10m l量瓶中,再加入精密称取的栀子苷对照品, 按照供试品的处理和测定方法进行测定,计算栀子苷的回收率, 见表2。,表2 栀子苷加样回收率的测定结果表,2.8 样品的测定 原方法: 精密量取样品溶液10l, 照薄层色谱法试验, 点于硅胶 gf254薄层板上,使成条状。另取栀子苷对照品溶液 ( 1mgml-1) 5l 点于供试品条斑一侧作为对照,以氯仿-甲醇(3:1)为展开剂, 展开, 晾干。置紫外光灯(254和365)下检视, 刮取样品色谱与栀子苷对照色谱相应位置上的斑点。同时刮取相应位置上等面积的空硅胶gf254, 分别置于10m l具塞试管中,各精密加10ml甲醇, 剧烈振摇5分钟, 离心, 倾取上清液。以第二管作空白, 用分光光度法试验, 测定在239nm波长处的吸收度,根据标准曲线计算出样品溶液中栀子苷的含量。 取10批样品, 按原含量测定方法(薄层扫描分光光度法)与修改的含量测定方法测定(hplc法), 结果见表 1。,表1 10 批样品的栀子苷含量测