《转基因与制药》PPT课件.ppt

药物基本研制流程 立题上游研究 中试工艺研究 连续三批产品自检、送检 临床前研究 资料整理、报批 、期临床试验 试生产 期临床 正式生产 期临床 论证 论证 论证 1、调研 （1）市场分析 （2）技术分析 （3）条件保障 2、召开立题论证会 3、配置研究队伍 二、立题 转基因与制药 杨花榆荚无才思，惟解漫天作雪飞柳絮纷飞 杨树、柳树被加入带鱼、海豹的基因-诱导基因变异，树 叶散发寄生虫讨厌的味道-毛毛虫少了，飞絮不会增加呼 吸道疾病了 生态失衡-毛虫少了-鸟雀、青蛙、蟾蜍少了-食叶型蜗牛泛 滥成灾 一 转基因食品风暴 1 转基因太多，红绿灯指路 大豆磷脂、大豆蛋白、玉米淀粉食品原料和添加剂 奶粉、饮料、油盐酱醋都有可能 需要标示红绿灯的食品有： 食用油、糖果和巧克力、冲调饮品、婴儿食品和奶粉、膨 化食品及方便面、雪糕、饼干、啤酒、饮料（包括奶制饮 料）、调味品 一 转基因食品风暴 2 著名品牌争相脱红挂绿 可口可乐、多美滋、康师傅、旺旺、伊利绿灯 雀巢、和路雪、百威强硬态度有所转变 一 转基因食品风暴 3 转基因食品 安全无定论 转基因技术初衷是在农作物中加入抗虫害、除草剂等，发 展到现在20年，对人体健康还未定论。 动物实验发现对小白鼠的某些器官造成了损害 以转基因玉米花粉为食的北美大斑碟的死亡率达到44%。 转基因油菜（加拿大）一发不可收 1996年来没有发现对人体有害的案例 一 转基因食品风暴 3 转基因食品 安全无定论 专家建议：多了解一些， 比如原有营养成分可能被改变， 转入新基因后的食品是否有毒性 转入新基因后生成的新蛋白质有可能引起过敏等。 一 转基因食品风暴 4 卡夫食品的转基因风暴 乐之饼干欧洲中国双重标准，引起风暴 2000.9月生产的脆皮玉米饼中发现有Starlink的玉米转基 因成分，被证明会引起过敏。卡夫公司损失达到1000万美 元。 2002年美国、加拿大、澳大利亚等又发现该公司产品有转 基因成分，发生示威游行 遗传带给人的十大困扰 1 酗酒：有酒瘾的父亲下一代有酒瘾的概率比没 有的高2-3倍，是多基因共同作用结果，性别上传 男情况大于传女。 2 乳腺癌：特殊基因BRCA1和BRCA2基因会导致 。 3 色盲：全世界2亿每年仍400万色盲儿童诞生。 红绿色盲，男大于女，因为负责形成红绿感受器 的基因位于X染色体 遗传带给人的十大困扰 4 暴力倾向：MAOA基因缺陷造成，会影响其大 脑发育，但基因异常的儿童只有接受了不良教育 才会有暴力倾向。 5 肥胖：美国8000万，费用990亿美圆/年。基因 占80%作用。远古时期帮助我们祖先渡过饥饿的 基因今天起了反作用。 6 心脏病：父亲55岁前，母亲65岁前，子女发生 概率男性2.6倍/正常人，女性2.3倍/正常人，先天 性心脏病遗传概率非常大，1%/正常人。 遗传带给人的十大困扰 7 生育双胞胎：也是一种遗传缺陷，越是高等动物一次生 育次数越少。 8 痤疮：25-40岁女性中发生41%，具体遗传模式不清， 如果父母患有丘疹，子女极有可能有该病。 9 乳糖不耐：病人体内缺少小肠细胞分泌的乳糖酶。 10 秃顶：雄性激素受体基因异变，该基因来自于遗传自 母亲的X染色体。也许父亲遗传基因也有关，但还没有被 证实。 什么是转基因动物？ 外源DNA导入（包括同一物种的DNA)动物的基因组而产 生了可以遗传的改变： 外源DNA片段至少整合到一条染色体的一个位点上； 外源DNA的插入使基因组中任何一个基因的结构发生改变 外源DNA的插入使染色体发生重排； 导入可以持久存在的遗传实体。 为什么要研究和应用转基因动物 动物体内细胞以有序的三维结构组成各种动物组织，由动 物输送血液来维持它们需要的营养，同时还和周围其他类 型细胞接触，接受旁分泌的刺激。-离体环境条件不允许 有些基因转入动物细胞系中，与把它们转入转基因动物中 的行为有很大差别。 可以研究很多复杂的生物学过程-发育、分化、脑的功能 、行为学和免疫反应等 转基因方法 1 显微注射 构建外源基因表达载体并生产用于注射的DNA 溶液 准备供注射用的胚胎并制定显现原核的技术方案 实施显微注射并将注射后的胚胎进行相应的技术处理，然后 移植到受体母畜中。 对出生的幼畜进行基因整合和表达的检测，对筛选出的动物 进行繁殖传代，建立转基因的家系和群体。 转基因方法 2 体细胞克隆生产转基因动物 获得和培养体细胞，在细胞中实现基因整合甚至表达 用转基因细胞作为核供体，使用去核卵母细胞作为细胞质 受体，通过克隆过程生产重构胚胎。 重构胚胎进行融合、激活和培养等技术发育 将发育的胚胎移植到同期化的受体动物中发育成幼崽。 转基因方法 其它转基因方法 反转录病毒载体：反转录病毒是一种广泛感染动物和人类 的RNA病毒，当它的基因组RNA侵入动物细胞后，就被转 录成DNA。利用反转录病毒载体转染胚胎 精子介导：只有彻底去除精清残留物的精子才能结合DNA 分子，该物质可能是一种糖蛋白。 动物乳腺生物反应器 优点： 1. 乳腺生物反应器生产目标产品的产量高- 一头优质乳牛在305天的 产奶期内可以生产牛奶10 000 kg，在高峰期每天可以产出牛奶100 kg，山羊也可2000kg/年。 2. 产品质量好：有能力按照遗传信息来合成任何一种蛋白质，而且具 备一整套机制对翻译的产品进行天然的后加工。 3.成本低：用凝血因子治疗贫血的费用可以养20头产凝血因子的牛。 4 提取产品比较简单。简单的工业层析技术。 例 羊奶妈挤出人乳养分 1 母乳营养转入羊奶 2 克隆带来动物药厂 动物种类的选择 主要是奶牛、奶羊、奶山羊、猪和兔 生产畜群的建立所需要的时间（月） 动物 G0 G1 G2 G3 10kg 100kg 牛 9 32 55 78 32 78 绵羊 5 18 31 44 57 70 山羊 5 18 31 44 44 70 猪 4 15 26 37 26 37 兔 1 7 14 20 34 动物种类的选择 2 可供选择的技术： 体内培养系统：体内受精，把受精卵取出来后进行DNA 注射，然后送回体内去发育。 没有屠宰场且卵巢来源可靠，牛不考虑主要是经济原因 体外培养：从屠宰场获得废弃卵巢，抽取未成熟卵子，体 外培养成熟，受精注射DNA并培养后移植到体内。 动物种类的选择 3 动物饲养管理费用 与生产品种有关：医用蛋白质、营养蛋白质、工业用蛋白 质。 例生产100 kg产品，需要5头牛，20000只兔子，由于