双语医学寄生虫学实验指导供医学专业本科生使用.doc

医学寄生虫学（Medical Parasitology）实 验 指 导（医学本科生使用）Parasitology Department of Kunming Medical College昆明医学院基础医学院寄生虫学教研室 杨照青、王卫群编写二0一0年七月实 验 注 意 事 项 医学寄生虫学是一门基础医学课程，它与预防医学、临床医学紧密联系，属形态学范畴。因此，实验课是我们学习本课程的重要部分，其目的就是通过实物标本的观察、实验技术操作的训练，使理论联系实际，培养自己动手的能力。为此必须做到以下几点：一 实验操作前必须明确实验指导中的内容和要求,严格按照实验指导的顺序进行实验。二 上实验课时务必带上实验指导、教科书、图谱和绘图铅笔及绘图本，并按要求完成作业和实验报告。三 爱护显微镜、标本及各种实验器材，不慎发生损害时，应立即报告带教老师并按规定照价赔偿。四 仔细操作，认真观察标本，培养实事求是的作风。提高独立思考、分析问题和解决问题的能力。 五遵守课堂纪律，保持安静、爱护卫生、轮流作好值日，离开实验室前必须关好门窗、水电。本科寄生虫学教学进度表周次（week） 理 论(lecture) 实 验(lab class)学时(academic hour) 内容（contents）学时(academic hour) 内容（contents）一2总论 (introduction)2溶组织内阿米巴（Entamoeba histolytica）、阴道毛滴虫(Trichomonas vaginalis）2原虫(protozoa)概论、溶组织内阿米巴（Entamoeba histolytica）自学:阴道毛滴虫(Trichomonas vaginalis）二2疟原虫(Plasmodium)（一）2疟原虫(Plasmodium)（一）2疟原虫(Plasmodium)（二）、弓形虫 (Toxoplasma gondii)三2吸虫(trematoda)概论、并殖吸虫(Paragonimus)自学:姜片吸虫(Fasciolopsis buski)、华支睾吸虫(Clonorchis sinensis） 2疟原虫(Plasmodium)（二）、弓形虫(Toxoplasma gondii) 2血吸虫（Schistosome）（一）四2血吸虫（Schistosome）（二）2并殖吸虫(Paragonimus)2绦虫(cestode)概论、包生绦虫（Echinococcus granulosus）五2猪、牛带绦虫、亚洲带绦虫（Taenia spp） 2血吸虫（Schistosome）（一）2血吸虫（Schistosome）（二）六自学:卡氏肺孢子虫（Pneumocystis carinii）、隐孢子虫(Cryptosporidium)七2线虫(nematode)概论、蛔虫（Ascaris lumbricoides）自学：结膜吸吮线虫（Thelazia callipaeda）2包生绦虫（Echinococcus granulosus）、猪、牛带绦虫（Taenia spp）2钩虫（hookworm）八2旋毛虫（Trichinella spiralis）、鞭虫（Trichuris trichiura）2蛔虫（Ascaris lumbricoides）、钩虫（hookworm）2旋毛虫（Trichinella spiralis）、鞭虫（Trichuris trichiura）、蛲虫（Enterobius vermicularis）九2医学节肢动物(arthropod)概论、蝇(fly)2蝇(fly)、蚊(mosquito)2蚊(mosquito)十2蜱(ticks)、螨(mites)2蜱(ticks)、螨(mites)、混合虫卵复习十一2实验考试（test）实验一 溶组织内阿米巴（Entamoeba histolytica） 阴道毛滴虫（Trichomonas vaginalis）一、实验目的要求 1掌握溶组织内阿米巴（Entamoeba histolytica）滋养体（trophozoite）和包囊(cyst)的形态。 2熟悉溶组织内阿米巴（Entamoeba histolytica）的生活史(life cycle)。 3掌握阴道毛滴虫（Trichomonas vaginalis）滋养体（trophozoite）的形态及诊断方法。 4了解阴道毛滴虫（Trichomonas vaginalis）的生活史(life cycle)及其感染方式。二、实验内容 示教标本溶组织内阿米巴滋养体染色标本：在油镜下，经铁苏木素染色后的虫体，体积较大，细胞质呈灰蓝色，外质(ectoplasm)明显，内质（endoplasm）中吞噬的红细胞呈黑兰色。细胞核(nucleus)一个，呈圆形，核仁(nucleolus)常位于中心，核膜内缘有一圈大小相等、排列整齐，染色较深的核周染色质粒(chromatin granules)。核膜与核仁之间有核丝相连。 自看标本 1包囊(cyst)：经铁苏木素染色后，包囊呈圆球形。细胞质呈灰蓝色，内含1-4个细胞核，分别称单核包囊，双核包囊和四核包囊，核的结构同滋养体，未成熟包囊内的空泡为糖原泡(glycogen vacuole)，极少数未成熟包囊内可见到棒状的拟染色体(chromatoid body)；成熟包囊内有四个核。 2阴道毛滴虫滋养体染色标本：用油镜观察，虫体呈梨形或圆形，前端有四根前鞭毛(anterior flagellum)和一根后鞭毛(recurrent flagellum)，后鞭毛(recurrent flagellum)在虫体的一侧与波动膜(undulating membrane)外缘相连，细胞核大呈紫红色椭圆形，细胞质呈淡蓝色，轴柱(axostyle)从前向后纵贯虫体，并伸出体后。三、作业 绘阴道毛滴虫（Trichomonas vaginalis）滋养体(trophozoite)染色形态图及溶组织内阿米巴（Entamoeba histolytica）包囊(cyst)形态图。四、思考题 1造成阴道毛滴虫（Trichomonas vaginalis）感染的因素有哪些？怎样才能降低感染率？ 2怎样发现和确诊滴虫性阴道炎患者？ 3检查溶组织内阿米巴（Entamoeba histolytica）滋养体(trophozoite)和包囊(cyst)时，在操作上和形态鉴别上应注意哪些问题？ 4阿米巴痢疾病人和带虫者(cyst carrier)在本病的传播上是否都同样重要？为什么？实验二 疟原虫(Plasmodium) 一、实验目的要求 掌握间日疟原虫(Plasmodium vivax)红细胞内期形态特征及被寄生的红细胞变化。二、实验内容 自看标本间日疟原虫(Plasmodium vivax)薄血片姬氏染色标本：先在低倍镜下观察，在红细胞涂布均匀的部分加镜油一滴，在油镜下仔细按顺序观察。红细胞被染成桔红色，疟原虫胞质被染成天蓝色，核染成紫红色。但并非任何一个红色或蓝块即为疟原虫。因为有可能是染料沉渣或其他异物。区别异物主要是调节显微镜的细调节器，通过它的上下移动，若蓝、红颜色块与红细胞在同一平面，而且具有一定的结构并具有疟色素（malarial pigment）者是疟原虫(Plasmodium)。反之，则是异物。当确定为疟原虫(Plasmodium)后，再进一步辨认它为红细胞内期的哪个发育阶段。被寄生的红细胞有胀大和褪色。 在薄血片中还常见到各种白细胞，应加以区别。三、作业 绘间日疟原虫(Plasmodium vivax)环状体（ring form）、大滋养体(trophozoite)、未成熟裂殖体(immature schizont)、 成熟裂殖体(mature schizont)和雌、雄配子体(female and male gametocyte)形态图。四、思考题1 简述间日疟原虫(Plasmodium vivax)在人体内的发育过程。2 疟疾(malaria)的症状发作(paroxysm)与疟原虫生活史(life cycle)有何关系？3 以间日疟原虫(Plasmodium vivax)为例，比较输血和被蚊子叮咬引发的疟疾(malaria)有何不同？4 疟疾贫血的原因有哪些？实验三 疟原虫(Plasmodium) 刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)一、实验目的要求 1掌握恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)红内期(erythrocytic stage)环状体(ring form)和配子体(gametocyte)的形态特征。2掌握弓形虫滋养体(the trophozoite of Toxoplasma gondii)的形态特征。3了解三日疟原虫(Plasmodium malariae)和卵形疟原虫(Plasmodium ovale)红细胞内期(erythrocytic stage)的主要形态特征。二、实验内容 示教标本 1三日疟原虫(Plasmodium malariae)带状滋养体是三日疟原虫的大滋养体，被寄生的红细胞不胀大，疟原虫的细胞质呈圆形或带状。滋养体横跨红细胞，细胞质呈蓝色。细胞核一个，呈紫红色，疟色素（malarial pigment）为深褐色的粗大颗粒。常沿胞质边缘分布。2卵形疟原虫(Plasmodium ovale)：基本形态似间日疟原虫(Plasmodium vivax)。被卵形疟原虫寄生的红细胞略胀大，有的细胞变长，边缘成锯齿状；薛氏点(Schuffners dots)较间日疟原虫(Plasmodium vivax)的粗大，而且出现早，在环状体期(ring form)即出现。 自看标本1恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)环状体(ring form)染色标本：观察方法同间日疟原虫(Plasmodium vivax)，被恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)寄生的红细胞不胀大、不褪色；环状体(ring form)小（其直径相当于红细胞直径的1/5），环状体(ring form)常位于红细胞边缘，一个红细胞内常可见到两个以上的环状体(ring form)寄生（重复感染）、环状体(ring form)的环纤细，具有两个核的环状体较常见。 2恶性疟原虫配子体(gametocyte)染色标本：配子体寄生的红细胞已被胀破，所以通常见到的配子体(gametocyte)是游离在红细胞之外或旁边仅有红细胞的遗迹。 雄配子体(male gametocyte)：蜡肠形，两端钝圆，细胞质呈蓝色而略带红色，核疏松呈淡红色，位于细胞质中央，疟色素呈黄棕色小杆状，在核的周围分布较多。 雌配子体(female gametocyte)：新月形、两端尖、细胞质呈蓝色，核结实较小呈深红色，疟色素多位于核的周围。 3刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)滋养体(trophozoite)染色标本：油镜下观察虫体呈香蕉形或半月形，一端较尖，另一端较钝圆；一边较扁平，另一边较弯曲。细胞核位于虫体中央，呈红色。三、作业 绘恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)环状体和雌、雄配子体(female and male gametocyte)及弓形虫滋养体(the trophozoite of Toxoplasma gondii)形态图。四、思考题1确诊疟疾（malaria）常用什么方法？采血时间何时最好？为什么恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)在末梢血液中只能查到环状体(ring form)和配子体(gametocyte)？2疟疾(malaria)流行有何特点？3常用的抗疟药物有哪些？ 4弓形虫(Toxoplasma gondii)发育的全过程可分为哪几个阶段？实验四 并殖吸虫(Paragonimus)【（肺吸虫）(lung fluke)】一、实验目的要求1掌握并殖吸虫卵(the egg of Paragonimus)形态。2掌握并殖吸虫的生活史(life cycle of Paragonimus)并了解其各发育阶段的基本形态。二、实验内容 示教标本 1肺吸虫成虫(adult Paragonimus)瓶装标本（未染色）：肉眼可见虫体肥厚呈短椭圆形，腹面扁平，背面隆起，形似半粒花生，色深灰。 2肺吸虫尾蚴(cercaria of Paragonimus)染色标本：低倍镜下观察，注意虫体末端似连非连的小圆球形尾部，故称微尾型尾蚴。 3肺吸虫囊蚴(metacercaria of Paragonimus)染色标本：低倍镜下观察，囊蚴(metacercaria)呈圆形、囊壁一般有两层，但外壁在制片过程中已脱落。囊腔内被卷曲的蚴虫所占据。蚴虫中部黑色的囊状体为排泻囊(excretory bladder)。排泻囊(excretory bladder)两侧弯曲透明的为肠管，有时还可见到腹吸盘(ventral sucker)。 4肺吸虫第一中间宿主(the first intermediate host)川卷螺(Semisulcospira)或拟钉螺(Tricula humida)。肉眼观察，注意其大小，色泽及螺壳的形态特征。 5肺吸虫第二中间宿主(the second intermediate host)溪蟹(freshwater crab)和虫刺蛄(crayfish)。 6肺吸虫(Paragonimus westermani)所致肺部(lung)病变大体标本：肉眼可见肺(lung)表面有蚕豆大小的球状囊肿。 自看标本1低倍或高倍镜下观察并殖吸虫卵(the egg of Paragonimus)的涂片：详见附录。2低倍镜下观察并殖吸虫成虫(the adult of Paragonimus)染色标本：虫体前端有一圆形具放射状肌纤维的口吸盘(oral sucker)，口吸盘(oral sucker)中央之开口为口腔，口腔之后为膨大的咽，食道细短。肠分二支，沿虫体两侧向后端延伸，末端为盲管。生殖系统最明显的特征是两个睾丸(testis)左右并列于体后端；卵巢(ovary)与子宫(uterus)左右并列于虫体中部的腹吸盘(ventral sucker)后缘。子宫(uterus)内充满金黄色的虫卵(egg)、卵黄腺(vitelline gland)甚发达。三、作业绘肺吸虫卵(the egg of Paragonimus)的形态图。四、思考题1肺吸虫病(paragonimiasis)的病原学诊断(diagnosis)方法有哪些？应如何取材？ 2肺吸虫(Paragonimus)的预防措施(the main methods of prevention)中哪个环节最重要？ 3何谓转续宿主(paratenic host或transport host)。实验五 日本血吸虫（日本裂体吸虫）(Schistosoma japonicum) 一、实验目的要求 1重点掌握血吸虫生活史(life cycle of Schistosoma japonicum)及成熟虫卵(mature egg)的形态结构。 2了解血吸虫成虫(adult of Schistosoma japonicum)及尾蚴(cercaria)的形态结构。二、实验内容 示教标本 1肉眼观察血吸虫成虫(adult of Schistosoma japonicum)寄生于兔肠系膜静脉血管内的大体标本。2肉眼观察未染色的日本血吸虫成虫(adult of Schistosoma japonicum)标本： 雄虫：虫体短粗，向腹面弯曲，呈乳白色。 雌虫：前端纤细、后端较粗，呈灰褐色。 雌雄合抱虫体(copulating schistosome)：雌虫有部分嵌于雄虫抱雌沟(gynecophoral canal)中。 3显微镜下观察血吸虫尾蚴(the cercaria of Schistosoma japonicum)标本，尾蚴(cercaria)分体部和尾部，尾部细长、末端分叉，故名叉尾型尾蚴(cercaria)。 自看标本 1低倍镜下观察血吸虫雄虫染色标本：在虫体前端可见口、腹吸盘(oral sucker, ventral sucker)，自腹吸盘(ventral sucker)后虫体两侧向腹面弯曲形成沟状，称为抱雌沟(gynecophoral canal)。消化系统开口于口吸盘(oral sucker)中央，食道周围有食道腺，肠管在腹吸盘(ventral sucker)附近分为二支，伸向体后，约在体后1/3处又汇合为单一盲管。在腹吸盘(ventral sucker)的背后方有5-8个红染的睾丸(testis)，生殖孔开口于腹吸盘(ventral sucker)的后缘。 2低倍镜下观察血吸虫雌虫染色标本：虫体前端纤细，体后半部则较粗。虫体中部可见一椭圆形、色深染细长的卵巢(ovary)，子宫(uterus)位于虫体前端，内含虫卵(egg)。其两旁可见分支的肠管，肠支在卵巢(ovary)后汇合，肠管内是宿主红细胞被消化后剩余的色素，常使虫体后部呈灰褐色或黑色。在体后部的肠管周围可见排列成串的卵黄腺(vitelline gland)。 3低倍镜下观察雌雄合抱的血吸虫(copulating schistosome)染色标本：可见雌虫体有部分位于雄虫的抱雌沟(gynecophoral canal)内，并可见到雌雄两虫的结构同时存在。 4低倍镜或高倍镜下观察日本血吸虫成熟虫卵(mature egg of Schistosoma japonicum )形态：（详见附录）。三、作业 绘日本血吸虫成熟虫卵(the mature egg of Schistosoma japonicum ) 图，并简述形态特征。实验六 日本血吸虫（日本裂体吸虫） (Schistosoma japonicum) 一、实验目的要求 1掌握血吸虫病(schistosomiasis)的病原学诊断方法及原理(the method and rationale of diagnosis)。 2了解光壳钉螺(0ncomelania hupensis)、肋壳钉螺的外部结构与拟钉螺(Tricula humida)的区别点。 二、实验内容1观察粪便重力沉淀法（自然沉淀法）和毛蚴孵化法的用具器皿和操作程序。2肉眼观察光壳钉螺、肋壳钉螺、拟钉螺的螺壳，注意三者的个体大小，螺壳的厚薄及螺旋表面有无纵肋和螺口外侧缘有无唇嵴。光壳钉螺肋壳钉壳拟 钉 螺成螺高度6mm8-10mm5mm壳厚薄稍薄厚薄体螺旋明显膨大明显膨大膨大不明显纵 肋无有无唇 嵴无有无栖 息水、陆水、陆水 三、课堂讨论题1 日本血吸虫(Schistosoma japonicum)的发育经历了哪几个阶期？其中哪几个时期致病？何期致病最重？为什么？2 血吸虫成虫寄生在终宿主的门静脉、肠系膜下静脉，为何虫卵可随宿主粪便排出体外？ 3 简述日本血吸虫虫卵肉芽肿对宿主机体有何利弊？ 4 血吸虫病(schistosomiasis)的实验诊断(laboratory diagnosis)（病原学诊断和免疫学诊断）方法有哪些？目前对这些诊断方法的评价如何？ 5 我国血吸虫病(schistosomiasis)流行区(epidemic area)的类型及其特征是什么？ 6 为什么防治血吸虫病(schistosomiasis)要采取综合性防治措施？其内容主要包括哪些？ 实验七 链状带绦虫（猪带绦虫）(Taenia solium)肥胖带绦虫（牛带绦虫）(Taenia saginata) 细粒棘球绦虫（包生绦虫）(Echinococcus granulosus）一、实验目的要求 1掌握三种带绦虫的生活史(life cycle)及带绦虫卵(egg)的形态。 2掌握猪囊尾蚴(cysticercus of Taenia solium)、牛囊尾蚴(cysticercus of Taenia saginata)和棘球蚴(hydatid cyst)的形态。 3了解三种带绦虫所致四种疾病的实验诊断(diagnosis)。二、实验内容 自看标本 1牛带绦虫(Taenia saginata)成熟节片(mature proglottid)染色标本：其形态结构与猪带绦虫(Taenia solium)的成熟节片(mature proglottid)基本相似，但卵巢(ovary)只分两叶，无中央小叶。 2猪带绦虫(Taenia solium)和牛带绦虫(Taenia saginata)妊娠节片(gravid proglottid)染色标本：用肉眼或放大镜或低倍镜观察，在妊娠节片(gravid proglottid)内仅见到充满虫卵(egg)的高度分支的子宫(uterus)，其他生殖器官退化。这两种绦虫的妊娠节片(gravid proglottid)鉴别特点为每一侧子宫(uterus)分支数不同，猪带绦虫为7-13支，牛带绦虫为15-30支。 3头节翻出的猪囊尾蚴(cysticercus of Taenia solium)压片染色标本：头节(scolex)呈球形，其上有四个吸盘(suckers)、顶突(rostellum)和小钩(hooklets)。4带绦虫卵(egg)形态：猪、牛带绦虫卵和包生绦虫卵形态相似，在光学显微镜下不易区别。呈圆球形，棕黄色，卵壳已脱落之虫卵，仅见厚而具放射状条纹的胚膜，卵内含有一具三对小钩的六钩蚴(onchosphere)，大小31-43m。5棘球蚴砂（hydatid sand）染色标本：棘球蚴砂（hydatid sand）包括游离于囊液中的原头蚴(protoscolex)、生发囊(brood capsule)、 小的子囊(daughter cyst)及囊壁碎片。而染色片于低倍镜下观察以原头蚴(protoscolex)为主，呈椭圆形，具有四个吸盘(suckers)，数十个小钩(hooklets)和顶突(rostellum)。由于吸盘重叠，常仅能见到2个。 示教标本1成虫(adult)标本 猪带绦虫(Taenia solium)和牛带绦虫(Taenia saginata)成虫(adult)大体标本：肉眼观察两种绦虫的形态，可见虫体呈带状、乳白色、背腹扁平、分节, 头节(scolex)细小，直径0.6-2毫米，紧接头节(scolex)的为颈部(neck)，其后为链体(strobilus)。猪带绦虫(Taenia solium)的链体(strobilus)由700-1000个节片(proglottids/segments)组成，牛带绦虫(Taenia saginata)由1000-2000个节片(proglottids/segments)组成。接近颈部(neck)的节片(proglottids/segments)宽度大于长度，是幼节(immature proglottid )，其后为成节(mature proglottid)和孕节(gravid proglottid)。这三种节片(proglottids/segments)是逐渐发育形成的，无绝对分界线。猪带绦虫(Taenia solium)长2-4米，牛带绦虫(Taenia saginata)长4-8米。 猪带绦虫(Taenia solium)成熟节片(mature proglottid)染色标本：用低倍镜观察，每一节片内都具有雌、雄生殖器官各一套。雄性生殖器官包括：睾丸(testis)数百个、呈滤泡状，分布于节片背面，各发出一根输出管。输出管汇合成输精管(vas deferens)，开口于节片侧面的生殖孔(genital pore)。雌性生殖器官：在节片后中部有三叶椭圆形色较深的卵巢(ovary)。其中央一叶较小。卵巢(ovary)后方呈块状结构的是卵黄腺(vitelline gland)。节片中央有一棒状的子宫(uterus)。阴道(vagina)与输精管(vas deferens)平行，也开口于生殖孔(genital pore)。 细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus）成虫(adult)染色标本：解剖镜下可见，成虫体形较小、仅由4-5节构成，体长2-7mm，除头节(scolex)、颈部(neck)外，链体(strobilus)上的幼节(immature proglottid)、成节(mature proglottid)、孕节(gravid proglottid)仅各一节。头节(scolex)上有四个吸盘(suckers)及顶突(rostellum)和小钩(hooklets)。 2幼虫(larva)标本 猪囊尾蚴(cysticercus of Taenia solium)大体标本：头节(scolex)未翻出来的猪囊尾蚴(cysticercus of Taenia solium)，乳白色、黄豆大小、呈椭圆形半透明的囊状物，囊内充满液体，囊内乳白色小点是头节(scolex)。 牛囊尾蚴(cysticercus of Taenia saginata)头节(scolex)翻出来的压片染色标本：镜下观察，头节(scolex)呈方形，其上仅有四个吸盘(suckers)，无顶突和小钩。 猪囊尾蚴(cysticercus of Taenia solium)寄生于猪的肌肉的大体标本：在猪的肌肉组织间隙中可见到大量的猪囊尾蚴(cysticercus of Taenia solium)。 棘球蚴(hydatid cyst)大体标本：肉眼观察仅能见整个幼体为一个白色球体，内含棘球蚴液（hydatid fluid）和棘球蚴砂（hydatid sand）。三、作业 绘高倍镜下的带绦虫卵(egg)形态图。四、思考题 1猪带绦虫(Taenia solium)的头节(scolex)与猪囊尾蚴(cysticercus of Taenia solium)的头节(scolex)有无区别，为什么？ 2比较猪带绦虫(Taenia solium)和牛带绦虫(Taenia saginata)对人的危害性。 3驱猪、牛带绦虫时应注意什么？ 4何谓包虫病(hydatid disease/dydatidosis/echinococcosis)？实验八 似蚓蛔线虫（蛔虫）(Ascaris lumbricoides) 美洲板口线虫（美洲钩虫）(Necator americanus)十二指肠钩口线虫（十二指肠钩虫）(Ancylostoma duodenale)一、实验目的要求 1掌握受精蛔虫卵(fertilized egg)及未受精蛔虫卵(unfertilized egg)的形态特征。2掌握钩虫(hookworm)的生活史(life cycle)及钩虫卵(hookworm egg)的形态结构。 3熟悉蛔虫(Ascaris lumbricoides)对人的致病性。二、实验内容 示教标本 1蛔虫(Ascaris lumbricoides)成虫(adult)大体标本：雌虫(female)大于雄虫，雄虫(male)尾部向腹面弯曲，雌虫则不弯曲。 2蛔虫(Ascaris lumbricoides)成虫解剖标本：雌虫(female)生殖器官为双管型，雄虫(male)生殖器官为单管型。 3蛔虫性肠梗阻大体标本。5钩虫(hookworm)成虫形态：经固定后，成虫呈乳白色。十二指肠钩虫(Ancylostoma duodenale)体态呈“C”形，美洲钩虫(Necator americanus)呈“S”形，雄虫尾端具交合伞。 6钩虫(hookworm)口囊(mouth capsule)：在十二指肠钩虫(A. duodenale)口囊的腹面两侧可见两对钩齿(hookteeth)，而美洲钩虫(N. americanus)只有一对板齿(cutting plate teeth)。7钩虫(hook worm)交合伞(copulatory bursa)：十二指肠钩虫(A. duodenale)交合伞(copulatory bursa)略呈圆形，背辐肋(dorsal rays)由远端分为两支，每支又分为三小支。美洲钩虫(N.americanus)的交合伞(copulatory bursa)似扇形。背辐肋(dorsal rays)由基部分为两支，每支远端又分为两小支。8病变标本：在肠壁上能见到许多钩虫利用口囊咬附在肠粘膜上。 自看标本 1镜下观察受精蛔虫卵及未受精蛔虫卵的形态： 受精蛔虫卵(fertilized egg)：短椭圆形，棕黄色、卵壳厚（主要是壳质(chitin)）。壳外常有一层波浪状的蛋白质膜。卵内含有一大而圆的卵细胞，卵壳两端与卵细胞之间具有月牙形间隙。大小为45-7535-50m，有些虫卵的蛋白质膜脱落，注意与日本血吸虫卵进行区别。有些虫卵在外界置留过长，卵内的卵细胞已发育成一幼虫。 未受精蛔虫卵(unfertilized egg)：较狭长，呈长椭圆形、棕黄色、卵壳及蛋白质膜较受精卵薄，卵内含有许多大小不等具有折光性的颗粒，卵的大小为88-9439-44m。 2. 镜下观察钩虫卵(hookworm egg)形态：十二指肠钩虫与美洲钩虫卵在光学显微镜下并无明显差别，大小为56-7636-40m，呈长椭圆形，无色透明，壳薄如细铅笔所描之痕迹，随粪便排出不久的虫卵，内含4-8个卵细胞，如果粪便搁置过久，卵内细胞继续分裂为多个细胞（ 称桑椹期）甚或发育为幼虫（胚胎期）。卵细胞与卵壳之间有一定距离的透亮区。三、作业绘高倍镜下的受精和未受精蛔虫卵、钩虫卵形态图。四、思考题 1脱蛋白质膜的蛔虫卵易与哪些蠕虫卵相混淆？钩虫感染（hookworm infection）或钩虫病(hookworm disease)的病原学检查应注意哪些问题？ 何谓钩蚴性皮炎？比较蛔虫(Ascaris lumbricoides)与钩虫(hookworm)生活史的异同。实验九 旋毛形线虫（旋毛虫）(Trichinella spiralis) 毛首鞭形线虫（鞭虫）(Trichuris trichiura) 蠕形住肠线虫（蛲虫）(Enterobius vermicularis)一、实验目的要求 1掌握旋毛虫(Trichinella spiralis)幼虫囊包(larva cyst)及鞭虫(Trichuris trichiura)卵(egg)的形态结构。2掌握三种线虫(nematode)的生活史(life cycle)及致病情况。3掌握蛲虫(Enterobius vermicularis)卵的形态特征。4熟悉蛲虫病(enterobiasis)的诊断方法。5了解旋毛虫病（trichinellosis）的实验诊断。二、实验内容 教师介绍有关蛲虫(Enterobius vermicularis)的内容 示教标本 1鞭虫(Trichuris trichiura)成虫标本：认清其头端和尾端。虫体呈鞭状，长约30-50mm，雌虫稍长于雄虫，虫体前3/5纤细如丝，后2/5粗如鞭柄，雄虫(male)尾部向腹面弯曲，雌虫(female)尾部直，末端钝圆。2蛲虫(Enterobius vermicularis)卵：呈不对称椭圆形或肾形，一侧较平，另一侧稍凸，无色透明，壳厚，内含有一蝌蚪期胚胎，虫卵的大小为50-6020-30m。3蛲虫(Enterobius vermicularis)成虫标本：虫体乳白色，细小似棉线头，雌虫(female)尾端长而细，雄虫(male)尾端向腹面卷曲。4操作示范：透明胶纸法，棉签拭子法。 自看标本 1对感染旋毛虫(Trichinella spiralis)的实验动物的新鲜肌肉进行检查： 取米粒大小的待检横纹肌，置于载玻片上，加50%甘油一滴，盖上另一载玻片，均匀用力压平（压得越薄越好），在低倍镜下观察幼虫囊包(larva cyst)的形态。其外形呈柠檬形。囊包纵轴与横纹肌纤维走向一致。囊壁由增生的纤维组织形成，囊内含1-2条卷曲的旋毛虫幼虫，幼虫头端可见由杆细胞（stichocyte）组成的杆状体（stichosome)结构。 2镜下观察旋毛虫幼虫囊包(larva cyst)的染色标本（压片或切片）。3镜下观察鞭虫(Trichuris trichiura)卵的形态结构：该虫卵外形较特殊，呈纺锤形。黄褐色，卵壳(shell)较厚。两端各具一透明塞状突起(opercular plug)，内含未分裂的卵细胞(ootid)。虫卵的大小为50-5422-23m。三、作业 绘鞭虫卵的形态图。四、思考题 1人感染旋毛虫(Trichinella spiralis)后，旋毛虫在人体内如何移行，对人体造成哪些危害，可出现哪些症状？ 2评述旋毛虫病（trichinellosis）的诊断。 3为何蛲虫病(enterobiasis)易反复感染？实验十 蝇（fly）、蚊(mosquito)一、实验目的要求1掌握蝇(fly)的结构与传播疾病的关系。2掌握三属蚊各期的主要鉴别要点。 3熟悉蝇(fly)的发育过程及生活史各期的一般形态特征。4熟悉蚊(mosquito)的发育过程及生活史各期基本形态。 二、实验内容 示教标本 1蝇(fly)生活史各期形态：卵(egg)幼虫(larva)（蛆）(maggot)蛹(pupa)成虫(adult)。 雌雄成蝇区别：一般雌蝇的两复眼(compound eyes)间距离较宽，雄蝇的两复眼(compound eyes)间距离较窄。 2蚊(mosquito)生活史属完全变态：有卵(egg)、幼虫(larva)、蛹(pupa)和成虫(adult)四个时期。 自看标本 1家蝇(Musca domestica)头封片标本：在低倍镜下可见复眼(compound eye)一对（由很多六角形单眼组成）。头顶有单眼(ocelli)三个，成倒“品”字形排列。触角(antenna)一对，位于两复眼中下方，各由三节组成，第三节基部外侧有1根触角芒(arista)。家蝇(Musca domestica)口器(mouth part)（喙）(proboscis)为舐吸式，由基喙(rostrum)、中喙(haustellum)和一对唇瓣(labella)组成，基喙漏斗状，近下端前面两侧有一对触须(palp)。唇瓣(labella)很发达，由对称排列的凹沟（似气管样结构）组成。 2蝇足封片标本：蝇足多毛，末端有爪(claw)和爪垫(pulvilli)各一对，爪垫上有细毛，并能分泌粘液，以利于在光滑面上爬行，可携带病原体，两爪垫间有爪间突(empodium)。 3蝇幼虫(larva)封片标本：低倍镜下可见经制片后的幼虫仅留虫体外皮、头咽骨及后气门。头咽骨位于虫体前端，一对黑色小钩，称口钩。后端有气门(stigma)一对，后气门由气门环、气门裂和钮孔组成。其形态因蝇种不同而异，是分类的依据。4成蚊：用放大镜观察三属蚊成蚊大体标本雌蚊、雄蚊的区别：视触角上轮毛的长短与密度而定。雄蚊轮毛长而密，雌蚊轮毛短而疏。按蚊(Anopheles)：体灰褐色，翅上大多具黑白斑。库蚊(Culex)：体黄褐色，翅上大多无黑白斑。伊蚊(Aedes)：体大多为黑色，身有白斑，翅上无黑白斑。 5幼虫(larva)：低倍镜下观察三属蚊幼虫玻片标本：按蚊幼虫：无呼吸管，仅有气门，有掌状毛（palmate hair）。库蚊幼虫：呼吸管(siphon)细而长，呼吸管毛数对，无掌状毛。伊蚊幼虫：呼吸管(siphon)短而粗，呼吸管毛一对，无掌状毛。三、作业: 绘蝇幼虫(larva)后气门形态图.四、思考题 1蝇(fly)的传病方式有哪些？ 2蝇(fly)有哪些主要的形态结构和生态习性与传病有关系？ 3三属蚊各传播哪些重要疾病？4蚊(mosquito)有哪些主要的生态习性？实验十一 蜱（tick）、螨(mite) 混合虫卵复习一、实验目的要求1掌握蜱螨类的生活史，发育过程中哪些时期营寄生生活和传播疾病。2掌握硬蜱（hard tick）、软蜱（soft tick）、恙螨(chigger mite)各传播什么主要疾病。3掌握恙螨幼虫的形态特征及传播疾病的方式。4熟悉硬蜱（hard tick）和软蜱（soft tick）的鉴别特征。5了解蜱(tick)、螨(mite)的一般特征。 二、实验内容 示教标本 1全沟硬蜱(Ixodes persulcatus)固定标本虫体呈卵圆形，从背面能看到躯体（idiosoma）前端的颚体（gnathosoma），背部具有一块盾板（scutum），故称硬蜱（hard tick）。盾板（scutum）的大小是区分雌、雄的标志。 2软蜱（soft tick）的固定标本从背面不能看到颚体（gnathosoma）、躯体（idiosoma）、无盾板，故称软蜱。 3解剖镜下观察硬蜱（hard tick）整体标本：颚体（gnathosoma）由颚基（capitulum basis）、螯肢（chelicera）、口下板（hypostome）和须肢（pedipalp）构成，螯肢（chelicera）分为杆及趾。口下板（hypostome）具倒齿，触须分四节，成虫