麻疹实验室网络现状及工作要求课件

麻疹实验室网络 及工作要求 江西省疾病预防控制中心 2011年5月11日 主要内容 中国麻疹实验室网络及监测工作 2010年麻疹监测情况 2011年工作要求 一、中国麻疹实验室网络及监测工作 Measles case definition 麻疹病例的临床诊断 Case with fever of 38OC, maculopapular rash, with either cough, coryza or conjunctivitis or any case which a physician thinks is measles 发热 38OC，出现斑丘疹和至少伴有以下一种症状：咳嗽，鼻炎或结膜 炎或医务人员疑为麻疹 Echoviruses Echo病毒 Measles麻疹 Parvovirus B19微小病毒B19 Dengue登革热 HHV-6 Rubella 风疹 Others 其它 实验室在麻疹诊断和鉴别诊断中的作用消除阶段越显重要 The important role of laboratory in measles diagnosis and differentiate diagnosis 中国麻疹实验室网络建立的背景 l1998年：中国开始逐步建立了三级麻疹/风疹实验室网络。 l2001年：国家麻疹实验室正式建立。 l2001年：国家麻疹实验室通过WHO认证, 被任命西太区麻疹参比实验室 。 l2005年：西太区设立了2012年麻疹消除的目标, 实验室网络的 职能将越来越重要。 l现在：中国大陆已经建立了由一个国家麻疹实验室,31个省级麻疹实验 室和331个地市级麻疹实验室组成的363个实验室网络。 麻疹实验室网络麻疹实验室网络 31 Provincial labs31 Provincial labs 331 Prefecture Labs331 Prefecture Labs The designation employed and the presentation of material on this map do not imply the expression of any opinion whatsoever on the part of the secretariat of the World Health Organization concerning the legal status of any country, territory, city or area or of its authorities, or concerning the delimitation of its frontiers or boundaries. Dotted lines on maps represent approximate border lines for which there may not yet be full agreement. 154 Sub-National Labs154 Sub-National Labs Global Specialised Labs Global Specialised Labs National Laboratories National Laboratories Regional Reference LabsRegional Reference Labs 166166 Measles Strain Banks 166 countries166 countries Proposed National LabsProposed National Labs 10 Sub-National Labs10 Sub-National Labs l 中国麻疹实验室网络（363个实验室）WHO麻疹实验室网络的重要成员 执行WHO西太区麻疹风疹参比实验室职能和国家麻疹实验室职能 WPR Measles and Rubella Laboratory Network +331 prefectural labs 在麻疹控制和消除中扮演重要的角色 q可疑麻疹病例血清学诊断 q麻疹疫苗相关病例的诊断 q血清流行病学研究 q麻疹疫苗质量和免疫效果的评定 q通过分子流行病学研究，鉴定病毒的传 播来源，传播路线，是本土，还是输入 q实验室网络在麻疹强化控制和消除中提 供有效的科学支持 实验室网络职能 31个省级实验室 国家麻疹实验室 WHO西太区参比 实验室 331个地市级实验室 l 麻疹病毒分离株的基因定型 l 开展省级麻疹实验室的质量控制和考核认证 l 为各省实验室网络的建设提供技术支持 l麻疹病毒分离和鉴定 (中和实验，PCR PCR-RFLP, real time PCR） l开展地市级麻疹实验室的质量控制和考核认证 l为各地市级实验室网络的建设提供技术支持 l疑似麻疹病例的实验室血清学诊断 l标本的采集 n n 我国三级麻疹监测实验室网络框架我国三级麻疹监测实验室网络框架 执行WHO西太区麻疹风疹参比实验室职能和国家麻疹实验室职能 实验室网络在麻疹强化控制和消除中扮演重要的角色实验室网络在麻疹强化控制和消除中扮演重要的角色 部分县级疾控机构也开展了血清学检测工作 31个省级实验室 1个国家麻疹实验室/ WHO西太区参比实验 室 331个地市级实验室 l 麻疹病毒分离株的基因定型 l麻疹病毒分离和鉴定 (RT-PCR, PCR-RFLP, rRT-PCR） l标本的采集 l疑似麻疹病例的血 清学诊断 各上级实验室对下级实验室 l进行质量控制和考核认证 l提供技术支持 我国各级麻疹网络实验室各 司其职，为消除麻疹提供实 验室技术平台和科学保障 u 覆盖全国 涵盖全国麻疹监测和检测实验室机构 u 三级管理 国家级、省级和地市级三级实验室网络 u 个案专报 疑似麻疹病例逐级报告，依据实验室结果进行 病例分类 u 资源共享 国家级、省级、地市级和县级共享数据库 n n 总体目标已经初步达到总体目标已经初步达到 构建我国麻疹病例实时监测网络体系构建我国麻疹病例实时监测网络体系 u 覆盖全国 涵盖全国麻疹监测和检测实验室机构 u 三级管理 国家级、省级和地市级三级实验室网络 u 个案专报 疑似麻疹病例逐级报告，依据实验室结果进行 病例分类 u 资源共享 国家级、省级、地市级和县级共享数据库 n n 总体目标已经初步达到总体目标已经初步达到 构建我国麻疹病例实时监测网络体系构建我国麻疹病例实时监测网络体系 麻疹监测方案的制定 标准操作规程 生物安全规范 各级实验室职能 血清和病毒库 信息数据库 技术储备 n系统运作 为流行病人员对“可疑麻疹病 例”采取快速处理措施提供科学指 导 血清学监测的作用 50% 麻疹散发疑似病 例为实验室证实的 2010年疑似麻疹 散发病例的血清学证实 数据来源： 麻疹监测信息报告管理系统 全国麻疹监测方案要求： l麻疹散发疑似病例血标本采集率应 80%（79.62%） 2010年疑似麻疹 爆发病例的血清学证实 全国麻疹监测方案要求： l麻疹爆发疫情血清学确诊率应90% l 采集病原学标本的爆发疫情应80% 数据来源： 麻疹监测信息报告管理系统 病毒学监测在麻疹消除中的作用 需要病毒学监测来证实麻疹消除：证实12 月无本土麻疹病毒的传播 病毒学监测与流行病调查资料结合在一起，可 以: 追溯病毒传播途径 鉴定病毒来源，确定本土还是输入 区分疫苗、野毒引起的疑似病例 辅助血清学实验进行病例诊断：发病早期 ，补充IgM检测的不足 B3 B2 B3 B3 B3 B3 B3 B3 B2 C2 B3 B3 D2 D2 D2 D2 D2 D2 D6 D6 D3 D3 D4 D4 D4 D4 D4 D4 D4 D4 D4 D4 D4 D5 D8 D7 D7 D7 D8 D8 D9 G2 G3 G2 D5 D9 H1 H1 D10 H2 H1 D5 H1 B3 H1 G3 D6 B2 D6 D7 B3 B3 B2 B2 D4 B3 D4 B3 D4 B3 H1 B3 D4 D9 D4 D4 D4 H1 B3 D4 D5 D6 B3 D4 D8 B2 B3 D4 D6 D7 麻疹基因型全球分布：1995-2010 D11 v在有本土麻疹病毒流行的地区，可能有一种或多种本土基因型 v已经达到麻疹消除阶段的国家，可检测到多种基因型（输入） v 全球已经发现24个基因型 v所有疫苗株都属于基因型A v 4个国家成功研制减毒活疫苗 美国（Edmonston）前苏联 中国（S191、C47) 和日本 v现有疫苗对现流行野病毒各个基因型都有保护作用 麻疹病毒基因型分布特征 MVs/California.USA/11.10/2 MVi/California.USA/11.10/1 manches.unk 94 d8 MVi/Kentucky.USA/14.10 vic.aus 85 d7 illin.usa 99 d7 chicago.usa 89 d3 montreal.can 89 d4 MVs/Washington.USA/7.10 MVs/Massachusetts.USA/27.10 MVs/Connecticut.USA/27.10 palau.bla 93 d5 bangkok.tha 93 d5 vic.aus 99 D9 MVs/California.USA/17.10 MVs/California.USA/6.10 MVs/Nebraska.USA/20.10 nj.usa 94 d6 mvp.uk 74 d1 johann.soa 88 d2 uganda-01-d10 madrid.spa 94 f ed-wt a jm.usa 77 c2 wtf.deu 90 c2 tokyo.jpn 84k c1 braxator.deu 71 e libreville.gab 84 b2 yaounde.cae 83 b1 ny.usa 94 b3 MVs/California.USA/17.10/1 MVs/Arizona.USA/06.10 ibadan.nie 97 b3 97 g2 gresik.ino 02 G3 berkeley.usa 83 g1 beijing.chn 94 h2 hunan.chn 93 h1 MVs/Massachusetts.USA/22.10 MVs/California.USA/11.10/3 5 美国美国20102010年年监测监测监测监测 到多到多 个基因型个基因型输输输输入入 D8 D8 D4 D9 B3 H1 在省级引入分子检测方法： l荧光定量RT-PCR l常规RT-PCR lRT-PCR RFLP：快速诊断和鉴别诊断麻疹疫苗株和H1野毒株 麻疹消除阶段麻疹病毒监测方法 u麻疹消除前后需要对早期病例及时进行诊断和鉴别诊断（尤其3天内采血 IgM阴性的） u病例很少的情况下，对每一例病例的诊断和排除都很谨慎 u需要多种检测方法同时进行 l病毒分离：经典，但周期长 l序列测定，基因分型:病毒学监测 1993-2010年麻疹病毒分离株 YearIsolates No. 1993-2003297 200467 2005213 2006234 2007276 2008351 2009277 2010278 Total1993 1993-2008年我国麻疹野毒株代表株 与WHO参考毒株的基因亲缘性关系树 l依据 WHO参考毒株序列标准 麻疹病毒病原学基因分型研究证实： H1、H2和A 三个基因型 其中，H1基因型又分为 H1a、 H1b和 H1c三个亚型 基于N基因3端450个核苷酸片段构建 2009年我国麻疹病毒分离株和基因型鉴定结果 l从 27省分离了277 株麻疹病毒 l 274 H1a l 1 D4, 1 D9, 1D11（新基因型） Province No. of isolates Genotype Anhui 3H1a Beijing 14H1a Chongqing 6H1a Fujian 1H1a Gansu 1H1a Guangdong 5H1a Guizhou 2H1a Hainan 1H1a Hebei 17H1a Heilongjiang 27H1a Henan 35H1a Hubei 2H1a Hunan 4H1a Innermongolia3H1a Jiangsu 63H1a Jiangxi 2H1a Jilin 9H1a Liaoning 32H1a Ningxia 29H1a Qinghai 2H1a Shandong 4H1a Shanghai 9H1a Shanxi 1D4 Sichuan 11H1a, 1D9 Tianjin 1H1a Yunnan 1d11 Zhejiang 1H1a Total 274H1a, 1D4, 1D9, 1d11 D4 D9 新基因型-d11 l2009年我国连续发现3起其它基因型（包括一起新基因型 的发现）麻疹病毒输入事件，给我国2012年消除麻疹带来 了更严峻的挑战。 中国2009年麻疹病毒分离株的基因亲缘亲缘 性关系树树* Among 277 isolates l 274 isolates were H1a l 1 imported D9 l 1 imported D4 l 1 imported d11, a new genotype Unpublished data H1aH1a *：based on the 450 nucleotide sequence of N gene lD11基因型是我国首次在全球发现的第24个新基因型麻 疹病毒，该新基因型的鉴定已经得到了WHO的认可。 l首次将澳大利亚2001年分离株和英国2004年病毒株的基 因型认定进行了更新。 l麻疹病毒D11新基因型病毒于2009年12月引起了我国云 南孟连县的麻疹爆发，流行病学上证实是从缅甸输入的 。 l由于缅甸所在的东南亚区尚未开展麻疹病毒的监测工作 ，D11新基因型麻疹病毒的首次发现对于WHO东南亚区及 其相邻的我国所属的西太区的麻疹病毒流行和传播的监 测工作具有非常重要的意义。 麻疹病毒新基因型D11 2010年我国麻疹病毒分离株和基因型鉴定结果 ProvinceNo. of isolatesGenotype Beijing19H1a Chongqing1H1a Gansu13H1a Guizhou 2H1a Hainan1H1a Hebei30H1a Heilongjiang46H1a Henan42H1a Hubei2H1a Innermongolia 4H1a Jiangsu14H1a Jiangxi2H1a Liaoning14H1a Ningxia 54H1a, 1D9 Qinghai3H1a Shandong14H1a Shanghai3H1a Shanxi 10H1a Sichuan98H1a, 1A-VL Tianjin36H1a Yunnan4 1H1a, 1A-VL, 2d11 Zhejiang4H1a Total273H1a, 2A-VL, 1D9, 2d11 l从 22省分离了278 株麻疹病毒 l 273 H1a l 2 A-VL, 1 D9, 2 D11 2 A-VL 1 D9 2 D11 年份类别 采样数分离病毒数阳性率（%） 所用 细胞 咽拭子尿液其它咽拭子尿液其它咽拭子尿液其它 2003年 麻疹3266.67 B95a 风疹 腮腺炎 其它 2006 麻疹 风疹55100vero 腮腺炎 其它 2007 麻疹8450 Vero/ slam 风疹 腮腺炎 其它 2008 麻疹8225 Vero/ slam 风疹13753.85vero 腮腺炎 其它 江西 省麻疹风疹实验室病毒分离情况 年份类别 采样数分离病毒数阳性率（%） 所用 细胞 咽拭子尿液其它咽拭子尿液其它咽拭子尿液其它 2009年 麻疹4424.55 Vero/ slam 风疹 腮腺炎 其它 2010年 麻疹5240 Vero/ slam 风疹4125very 腮腺炎 其它 江西 省麻疹风疹实验室病毒分离情况 二、2010年麻疹监测情况 麻疹监测指标-全国麻疹监测方案 1.以省为单位排除病例报告发病率2/10万 2. 各省80%的县排除病例报告发病率1/10万 3. 麻疹疑似病例48小时完整调查率（80%） 4. 麻疹疑似病例血标本采集率（80%） 5. 实验室血清检测结果7天内及时报告率（80%） 6. 麻疹暴发疫情血清学确诊率（90%） 7. 采集病原学标本的暴发疫情数占暴发疫情总起数 百分比（80%） 疑似病例报告个案比例：零个省为100% 全国91%，5省 麻疹实验室诊断病例数 麻疹IgM(+)病例数 麻疹实验室诊断病例数 表3：监测指标6、7 2010年各省麻疹监测指标综合排名 ？ n5主要指标得分加权相加 u所有疑似