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微生物检测技术 冯世鹏 2016年8月 课程内容 前言 第一章 显微技术 第二章 染色技术 第三章 灭菌和消毒技术 第四章 接种、分离纯化和培养技术 第五章 菌种保存技术 第六章 微生物常规鉴定技术 第七章 细菌学诊断新技术 实验内容 实验内容待定 时间:等通知 地点:东副楼4-5楼 前言 微生物简介 微生物检测范围 微生物简介 一什么是微生物? 微生物是指广泛分布于自然界中的一群肉眼 看不到的微小生物,具有单细胞或简单的多细 胞结构,或没有细胞结构的一群最低等的生物 。 微生物不是生物分类系统中的某个单一类群 整个微生物家族的主要成员有:病毒、细菌 、霉菌、酵母、蓝细菌 、螺旋体、立克次氏 体、衣原体、支原体、 放线菌、微细藻类 、 原生动物 。 生物的分类 我国著名昆虫学家陈世骧,于1979年提出3个总界六界系统: 非细胞生物总界:包括病毒界 原核总界:包括细菌界和蓝藻界 真核总界:包括真菌界、植物界和动物界 微生物大小 肉眼所见物体 微生物的分类 病毒 没有细胞结构的专性寄生的大分子生物。 如SAS病毒、肝炎病毒(人体病毒), 鸡瘟病毒、口蹄疫病毒(动物病毒), 烟草花叶病毒、番茄丛矮病毒(植物病毒) , 噬菌体(细菌和放线菌病毒)等。 细菌 单细胞原核生物,一般在普通光学显 微镜(油镜)下放大一千倍以上并染 色才能清楚看见其个体。 如人体肠道内的大肠杆菌、粪链球菌, 用于酿醋的醋酸杆菌,使牛奶变酸的乳酸 杆菌,生产味精的谷氨酸短杆菌,生产淀 粉酶的枯草杆菌等。 酵母菌 单细胞真菌,最低等的真核生物。一 般用高倍镜(400600倍)观察其个 体细胞形态。 如面包酵母、酿酒酵母、红酵母等。 霉菌 真核生物,单细胞或多细胞丝状真菌 可用低倍或高倍镜观察其形态。如酿 制小曲酒的根霉、制豆腐乳的毛霉、 生产葡萄糖的曲霉菌、生产青霉素的 青霉等。 蓝细菌(蓝绿藻) 原核微生物,单细胞或细胞聚合体。 支原体、衣原体、立克次氏体 单细胞,介于细菌与病毒之间的 一类原始而小型的原核微生物, 不能自主产生ATP。 肺炎支原体 沙眼衣原体 微细藻类 单细胞藻类。如红藻、绿藻、小球藻等 。 原生动物 单细胞,无真正细胞壁。 如变形虫、草履虫、眼虫等。 二微生物的特性 主要有四个方面 种类多 分布广 繁殖快 变异频 1种类多 到目前为止,人们已认识的 微生物已有10多万种。 2分布广 微生物因其形体微小,重量轻,故可以 随着风和水流到处传播。 岩石、土壤、海洋、湖泊、河流、大气 。 动物、植物、人体表面及与外界相通的 腔、道。 3繁殖快 微生物惊人的生长繁殖速度是其他任 何生物都望尘莫及的。一般细菌的世 代时间为几十分钟到一百多分钟。在 最适宜的条件下,人们最熟悉的大肠 杆菌每1320min就可分裂出新的一 代。 4变异频 结构简单,易受内外环境的影响而变异; 速度快,细胞数量多,因而尽管其自发突 变率很低,也会造成在短时间内产生较多 的变异后代。 三、常见微生物形态结构 病毒 细菌 放线菌 原核生物 病毒形态 细菌的形态 菌落 放线菌孢子 原生动物 实验室中微生物生长(培养)在液体 或固体培养基中。细菌生长的培养基应 含所有生长的基本需求:水分、碳源、 氮源、无机盐及生长因子等营养物质。 细菌生长所需的营养物质 四实验室微生物的培养 生长的环境条件 温度 氧浓度 PH 水活度 温度 嗜冷微生物适合于10生活的 细菌,最适生长温度在20左右 。嗜温微生物生长温度在15 45之间,最适生长温度在37 左右的细菌。嗜热微生物生长温 度在3075之间,最适生长温 度在55,在100以上温度生长 ,称为嗜高热微生物。 氧浓度 根据细菌对氧要求的不同分为好氧 菌,厌氧菌,包括专性厌氧菌、兼 性厌氧菌、严格厌氧菌和耐氧菌 微好氧在正常大气氧浓度20情况 下就受到损伤,只能在更低的氧浓 度下才能存活。 pH值 嗜碱菌(alkaliphiles):生长在 高pH(8.511.5)的微生物。 嗜酸菌(acidophiles):生长在 低pH(05.5)中的微生物。 水活度 像所有生物一样,微生物对周 围环境的渗透压是敏感的。低 渗透压时,水将聚集于细胞内 ,高渗透压时水逸出。 五微生物的生长 1细菌以二等分裂方式( 124)分裂,细菌的生长为 指数生长。群体细胞数目加倍 所需的时间为倍增时间(td) 。 细菌典型生长曲线 log10 稳定期(平衡期) 活 细 对数期 衰亡期(死亡期) 胞 延迟期 (指数期) 数(延滞期) 培养时间 2真菌的生长 真菌是丝状的、无光合作用 的、营异养性营养的真核微 生物。 真菌生长的各个时期 稳定期 细 减速期 胞 直线期 自溶期 数 目 延迟期 指数期 培养时间 微生物检测相关概念 2、微生物检测范围 生产环境:水、空气、地面、墙壁等 原辅料检验 加工、贮存、销售等环节 从业人员的卫生状况、工具、包装材料等 出厂产品、可疑产品、发生毒害作用的产 品等。 3、微生物检测对象和指标 食品 化妆品 药品 一次性用品及其他生活用品 应施检疫的出口动物产品 环境:自来水、空气等 有关国际条约和其他法律、法规规定的强 制性卫生检验的进出口商品 4、微生物检测的基本任务 研究各类产品的样品采集、运输、保存以 及预处理方法,提高检出率。 根据各类产品的卫生要求,选择最佳的检 验方法。 对检验结果进行及时统计、分析、处理, 并及时准确地进行报告。 对影响产品卫生质量及人类健康的相关环 境微生物进行调查、分析与质量控制。 5、微生物检测的意义 微生物检测是衡量动植物产品卫生质量的 重要指标之一。 可判断食品和药品加工原料、生产环境卫 生情况及成品被污染程度做出正确的评价 ,为卫生管理提
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