红掌愈伤组织高效再生体系建立研究

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 红掌愈伤组织高效再生体系建立研 究 摘要 红掌愈伤组织高效再生体 系建立研究结果表明：1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+2，4-D 0.4 mg/L+NAA 0.3 mg/L+KT 0.3 mg/L 红掌诱导愈伤组织效 果最佳，诱导率达 50%；1/2 MS+6-BA 0.4 mg/L+KT 0.1 mg/L+蔗糖 25 g/L+NAA 0.3 mg/L 产生丛生芽的效果最 好，愈伤分化率达 90%。 中国论文网 /8/view-12902360.htm 关键词 红掌；组培苗；激素； 诱导；分化 中图分类号 S682.14；Q813.1+2 文献标识码 A 文章编号 1007- 5739（2012）03-0243-01 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 红掌（Anthurium andraeanum Lind.）又名安祖花、火鹤花、花烛，原 产于美洲、南美洲热带雨林，是天南星 科花烛属的多年生常绿草本植物1-2。 因其花色鲜艳夺目、外被蜡质、保鲜期 长而成为高档盆花、插花摆设，具有较 高的观赏价值和经济价值3，研究和开 发红掌这一名贵花卉，对满足国内外花 卉市场的需求及出口创汇具有重要的意 义。但是红掌是肉质根系，生长缓慢， 分蘖较少，常规分株繁殖方法难以满足 规模化生产的种苗需求4。因此，组织 培养凭借无性繁殖的独特优势，成为红 掌脱毒与快速繁殖的主要途径5。在红 掌的组织培养研究与实践中发现红掌的 顶牙、茎段及地下部分表面和内部都带 菌，不利于外植体灭菌和建立无菌材料 6-7。而红掌幼叶灭菌相对容易，且外 植体采集对原母株伤害小。鉴于此，笔 者以粉冠军为接种材料，系统研究了红 掌植株再生的途径，以期为红掌组培苗 工厂化生产提供理论依据和技术支撑。 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 1 材料与方法 1.1 试验材料 供试红掌品种为粉冠军，选择新 抽出的长势旺、无病斑并完全伸展的幼 叶作试验材料。 1.2 试验方法 1.2.1 材料处理。先用自来水冲 洗干净，再用 75%的酒精处理 20 s 后置 于 0.1%升汞灭菌 810 min，最后用无 菌水冲洗 45 次，再将幼叶分别剪成带 主脉的叶片小块（1 cm1 cm1 cm） ， 以备接种。 1.2.2 愈伤组织的诱导。经灭菌 的外植体分别接种于添加不同浓度激素 的 1/2 MS 诱导培养基上，置于无菌纸 箱内进行黑暗培养，利用正交设计法 L9（34）探讨培养基中 6-BA、2，4- D、NAA 和 KT 4 种因素对红掌愈伤组 织诱导的影响，具体试验设计见表 1。 将叶片接种在附加不同水平 6- BA、2，4-D、NAA 及 KT 的 1/2 MS 培 养基上，45 d 后观察愈伤组织的诱导情 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 况。每组接 10 瓶，每瓶接种 2 个材料。 1.2.3 愈伤组织的分化。将产生 的愈伤组织接种到添加不同浓度激素的 1/2 MS 分化培养基上进行光照培养，培 养温度为 2528 ，光照强度为 2 000 lx，每天光照 16 h。利用正交设计法 L9（34）探讨培养基中 6-BA、KT、蔗 糖和 NAA 等 4 种因素对红掌愈伤组织 分化形成不定芽的影响。具体试验设计 见表 2。将大小基本一致、生长情况良 好的愈伤组织转接到不同水平 6- BA、NAA、KT 及蔗糖的 1/2 MS 培养 基上，30 d 后观察愈伤组织的分化情况。 每瓶接种 1 个材料。 1.2.4 芽的增殖培养和生根壮苗。 分化培养 50 d 左右（不定芽长至 0.5 cm 时）转接于 1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+KT 0.1 mg/L 培养 基上进行第 1 次继代培养。继代培养时， 应尽量减少切面（切口） ，以免影响芽 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 体分化和延长继代周期。当不定芽长至 1.01.5 cm，第 2 片、第 3 片完全叶形 成时，将其从基部切下，转接于 1/2 MS+NAA 0.1 mg/L 上生根。 2 结果与分析 2.1 不同外源激素水平对红掌愈 伤组织诱导的影响 处理外植体接种 25 d 左右叶片切 口边缘开始产生少许嫩黄色的泡状物， 4560 d 泡状物逐渐长大成嫩黄的瘤状 突起的愈伤组织。由表 3 可知，处理 A1A9 均能诱导出愈伤组织，处理 A3 诱导率最高，达 50%。因此，最佳组合 为 1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+2，4-D 0.4 mg/L+NAA 0.3 mg/L+KT 0.3 mg/L。 2.2 不同外源激素水平和不同蔗 糖浓度对红掌愈伤组织分化的影响 愈伤组织转接到分化培养基上 20 d 左右开始由原来的黄色转变成黄绿色， 7 d 后开始出现萌动的小芽。由表 4 可 知，愈伤组织均能分化出小芽，其中处 理 B4 芽分化率最高，达 90%。因此， -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 愈伤诱导最佳组合为 1/2 MS+6-BA 0.4 mg/L+KT 0.1 mg/L+蔗糖 25 g/L+NAA 0.3 mg/L。 3 结论与讨论 红掌组培快繁中，利用完全展开 的幼嫩叶片为外植体诱导愈伤组织，产 生不定芽，不同外源激素 6-BA、2，4- D、KT 和 NAA 的合理组合能提高愈伤 组织的诱导率，并产生大量丛生芽。试 验结果表明：1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+2，4-D 0.4 mg/L+NAA 0.3 mg/L+KT 0.3 mg/L 是诱导红掌愈伤组织 的最佳培养基，1/2 MS+6-BA 0.4 mg/L+KT 0.1 mg/L+蔗糖 25 g/L+NAA 0.3 mg/L 是产生丛生芽的最佳培养基。 高度大于 1.0 cm 的芽即可转入生根培养 基，红掌的最佳生根培养基是 1/2 MS+NAA 0.1 mg/L。外植体接种 45 d 后部分较小的愈伤组织转接到诱导培养