无名高热的理论及其解决思路 ppt课件

无名高热的理论及其解决思路近年来猪越来越难养、病越来越多！根本原因何在？猪群的健康状态下降两大免疫抑制性疾病猪繁殖与呼吸综合征(蓝耳病 PRRS)猪圆环病毒 2型感染(PCV-2)猪蓝耳病 (PRRS)1.PRRS的危害2.目前的流行特点3.关于病毒的血清型4.如何诊断？5.疫苗使用存在的问题？6.PRRSV 致病机制7.利用猪只免疫及攻毒试验测试PRRS免疫营养剂的功效性蓝耳病 (PRRSV disease)呼吸与繁殖综合症Porcine respiratory disease complex (PRDC)o母猪流产及死亡症状Sow Abortion and Mortality Syndrome (SAMs)o仔猪多系统综合衰竭消耗症Postweaning Multisystemic Wasting Syndrome (PMWS)蓝耳病毒的感染哺乳期怀孕期 保育期 育肥期胎儿胎盘PRRSV 母猪 症状：发烧、嗜睡、厌食、无乳、发情不顺链球菌、 TGE圆环病毒圆环病毒、 猪瘟沙氏杆菌、巴氏杆菌副嗜血杆菌圆环病毒、附红细胞体放线杆菌 AP仔猪泌乳PRRSV 保育猪PRRSV 肥猪PRRSV死胎、木乃伊胎 晚期流产 呼吸症状、肺炎 下痢、脐带出血 免疫下降、死亡 化脓性脑炎 肺炎、PDWN虚弱、死亡 呼吸道症状 整体免疫下降 肺炎除此而外，公猪也会感染 PRRSV已感染 PRRS的精虫 未感染 PRRS的精虫黑点PRRSV与猪瘟免疫感染 PRRSV后对猪瘟抗体有很大的免疫抑制性感染 PRRSV后即使做了猪瘟疫苗免疫仍然会爆发猪瘟由于 PRRSV的存在，使猪瘟疫苗免疫失效PRRS对于猪瘟疫苗功效性的影响PRRSV HC vaccine CSF virus dpc ill / dead- - V 2 / 911- V V no symptomV - V 2 / 911V V V 23 / 6- - - no symptom第一组给予猪瘟病毒之攻毒而不免疫疫苗第二组注射猪瘟疫苗并于三周后进行猪瘟病毒攻毒第三组进行 PRRS病毒 (01NP1, 美洲病毒株 )攻毒后隔四周再给予猪瘟病毒之攻毒第四组进行 PRRS病毒攻毒后一周免疫注射猪瘟疫苗 ， 再隔三周进行猪瘟病毒之攻毒第五组 为本试验之空白组 ， 不免疫疫苗亦不攻毒任何病毒 。 泰国病理学家 Kesdangsakonwuti 等人 (2005)也就是说 ,即使您打了猪瘟疫苗 ,因为 PRRSV的侵袭 ,使猪瘟疫苗失去了保护力 ,用猪瘟病毒攻毒时 ,照样引起感染猪瘟而死亡 !结论：oPRRSV潜在的危害很大o猪群的生产性能下降o猪群免疫力下降o呼吸道疾病发病率上升o继发感染增多o母猪发情障碍、滞后产现象增多PRRS病毒的血清型o 国际上分美洲型和欧洲型o 我国分离的毒株都属美洲型o 我国猪群中还未发现欧洲型毒株如何诊断 ?o明确猪场各阶段猪群的蓝耳病病毒感染率（用 ELISA试剂盒进行抗体监测）o监测感染动态情况（每季度 1次），是否升高或降低o出现繁殖障碍问题，应同时检测（胎儿体内、母猪血清中）病毒和抗体，单纯的抗体阳性并不能说明就是由蓝耳病造成的繁殖障碍当一个猪场符合以下 3点时应诊断患 PRRS1.猪群表现典型的 PRRS症状及有 PRRS患病史2.猪群出现 PRRS病变3.患病猪中找到 PRRS病毒如果仔猪出现典型的临床症状、病变、血液中有 PRRS抗体时，又知该猪群没有注射 PRRS疫苗的则可诊断患有 PRRS。疫苗使用存在的问题：1.使用活疫苗造成蓝耳病暴发已是不争的事实（国内外均有实例）2.活疫苗的返强、变异、重组可产生新病毒3.免疫接种猪造成疫苗毒的持续性感染和长期带毒；引起免疫猪场和猪群处于长期感染状态PRRSV 致病机制猪的肺泡巨噬细胞上的 Heparinlike接受器与 PRRS病毒母体蛋白的接合情况(Involvement of the Matrix Protein in Attachment of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus to a Heparinlike Receptor on Porcine Alveolar Macrophages) pSn = receptor for PRRSV ORF5 ORF6C-S-S-CPRRSVSialo-adhesin protein(涎黏着蛋白 ) Heparinlike ReceptorNucleus核ORF5 ORF6MhcIIMhcIMhcIMhcIICD8+cellCD4+cellNT domain结合部位Host cells, Antigen present cells利用猪只 免疫 及攻毒试验测试PRRS免疫营养剂的功效性(1)猪只免疫及攻毒试验代号 免疫营养剂组别 头数H 高剂量 6L 低剂量 6BK 空白组 6组别 1st immunized 2nd 3rd challenge 高剂量低剂量空白组2128 days3-wk age 5-wk 7-wk 9-wkHalf-dose Half-dose Full-dose3-wk age 5-wk 7-wk 9-wkImmunization and challenge in pigs modelGroup coating antigenIgM-ELISA titres (S/BK) IFA titres NT titresH dose group 310 1030 1632 1632 L dose group 3 10 16 832 BK groupNegative CTL 1 1 8 8(2)各试验组免疫三次后 2周 (9周龄 )之血清免疫力价分析(3)攻毒后 (14-DPC)临床症状及健康情形 ：攻毒后之 DPI-14之临床症状 (P8)P10- experiment group 总头数 发烧 咳嗽 死亡 毛粗(H ) High dose 6 1 1 0 2(L) Low dose 6 2 12 0 2(BK ) Placebo (15% ISA 206) 6 45 34 0 35疫苗组 ， 于攻毒后一至二天内都有一至二头发生 40.5 以上发烧反应 ， 但是二周后大都回复原来之 40.3 以下 ， 攻毒后(H)及 (L)显然大多较活泼健康、不再咳嗽、皮毛渐渐恢复亮丽，而 (BK)对照组之猪只咳嗽现象比较频繁。以下表为攻毒后 114-DPC观察之将康状态及患病情形观察项目 点数 观察项目 点数1.粪便 3.关节坚固 1 正常 1半固状 2 肿胀 2下痢 3 无法支撑重量 3死亡 4 死亡 42.行为 4.步行活泼机警 1 正常 1昏睡 2 跛行 2挤在一堆 3 不能站立 3死亡 4 死亡 4观察项目 点数 观察项目 点数5.食欲 8.毛发正常 1 平滑 1食量减少 2 粗糙 2无食欲 3 竖立 3死亡 4 死亡 46.身体状况 9.皮肤腹部圆满 1 正常 1消瘦 2 疹斑 2脊骨突出肋骨明显3 发疳 3死亡 4 死亡 47.神经肌肉 10.呼吸正常 1 正常 1歪头斜头 2 快速 2震颤 3 呼吸困难，咳嗽3死亡 4 死亡 4健康状况与临床症状观察指标表每只动物每日需作 10项观察指标，每个观察项目正常为 1点，每日总计正常为 10点，最严重的临床症状为 30点，死亡 40点。 攻毒后之 14-DPC依观察项目计分之临床症状P10 观察项目 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 T*H dose 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.2 1.0 1.3 1.2 1.2 10.9L dose 1.0 1.2 1.2 1.2 1.2 1.2 1.0 1.5 1.5 1.2 12.2BK 1.5 1.8 1.7 1.7 2.0 2.2 1.5 2.5 1.5 2.3 18.7 P10 观察项目 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 T*H dose 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.2 1.0 1.3 1.2 1.2 10.9L dose 1.0 1.0 1.0 1.2 1.2 1.2 1.0 1.3 1.5 1.2 11.6BK 1.5 1.8 1.7 1.7 2.0 2.2 1.5 2.3 1.5 2.3 18.5 *：观察 10项之临床症状，每一组 6头猪分别给分后取其平均值后分别填入表格， T为 10项临床症状之总分。攻毒后之 21-DPC依观察项目计分之临床症状(4)试验猪只在免疫及攻毒后重量变化情形攻毒*:The blood samples of tested pigs can be detected PRRSV infected by RT-PCR running(5)猪只攻毒试验后病毒血症检出情况组别 疫苗名称 头数 2-DPC 7-DPC* 14-DPC 21-DPCH 6 0 2 1 0L 6 0 2 2 0BK Placebo 6 1 3 6 3(6)各试验组攻毒后 21DPC解剖后肺脏之病变严重性分析猪只攻毒后，第 21天起进行试验猪只之屠体解剖，观察肺部之肉眼病变结果可知，空白组之 6头猪都有明显的间质性肺炎，坏死病变症状之病变指数 Lesion score约在 15-40，高剂量组有一肺脏病变严重，可能有二次感染发生，其指数约在 25左右，其他 5头的指数都在 15以下。Lesion scoreHigh dose 25 15 10 8 8 5Low dose 20 18 15 10 5 5BK 40 35 30 26 25 15各组的 6头猪只其肺脏病变指数(7)各试验组攻毒后 21DPC解剖后分析肺脏组织切片病理分析间质性肺炎之严重性耳號 scoreHigh dose vaccine 1001 11002 11003 11004 11005 01006 1Low dose vaccine 1011 11012 11013 11014 11015 21016 1BK 1021 61022 51023 61024 61025 51026 6C 1031 01032 11033 0空白组的感染指数最高结论：由猪只免疫及攻毒试验模式可知：高剂量及低剂量的 PRRS免疫营养剂经前二次半剂量及第三次全量免疫仔猪后，该免疫的猪只对于 PRRSV（ 5 T-type1;TCID50 = 104)攻毒 皆具有相当强的保护力！PRRSV 感染途径与免疫营养增强剂的开发策略多重感染路 径 ：Step1. 上呼吸道及下呼吸道上皮 细 胞感染路 径Step2. 呼吸道 周边组织 的 mon