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完成实验完成实验提出问题提出问题作出假设作出假设设计实验设计实验分析结果,得出结论分析结果,得出结论探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 该该 探究活动中探究活动中 涉及涉及 4个科学个科学方法:方法:( 1)数学模型法;)数学模型法;( 2)抽样检测法;)抽样检测法;( 3)显微观察法;)显微观察法;( 4)微生物培养法。)微生物培养法。探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 关注本实验中的几个关键点:关注本实验中的几个关键点: 酵母菌的计数酵母菌的计数利用血球计数板在显微镜下直接计数,是一种利用血球计数板在显微镜下直接计数,是一种常用的微生物计数法,也叫做显微镜直接计数常用的微生物计数法,也叫做显微镜直接计数法。法。优点:直观、快速。优点:直观、快速。适用于稀释的菌悬液(或孢子悬液),即液体适用于稀释的菌悬液(或孢子悬液),即液体培养基中菌体的计数。培养基中菌体的计数。此法计得的是活菌体和死菌体的总和,又称为此法计得的是活菌体和死菌体的总和,又称为总菌计数法总菌计数法 。 酵母菌的计数酵母菌的计数( 1)计数工具)计数工具 血球计数板血球计数板实物图实物图正面图正面图侧面图侧面图计数室计数室滴液处滴液处 血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。 计数时,常采用 样方法 。 探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 酵母菌的计数酵母菌的计数( 1)计数工具)计数工具 血球计数板血球计数板探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 放大后的计数池放大后的计数池每块计数板由每块计数板由 H形凹槽分为形凹槽分为 2个个同样的计数池。同样的计数池。每个计数池分为每个计数池分为 9个大方格。个大方格。25个中格个中格16个小格个小格16个中格个中格25个小格个小格25X16 = 400小格小格16X25 = 400小格小格每个计数室(大方格)共有每个计数室(大方格)共有 400小格,总容积为小格,总容积为 0.1mm3* * * *抽样检测:抽样检测:516=80 个小格个小格抽样检测:抽样检测:425=100 个小格个小格 酵母菌的计数酵母菌的计数( 2)计算:)计算:每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少?探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 酵母细胞个数酵母细胞个数 /mL=所数小方格中细胞总数所数小方格中细胞总数 x400x104x稀释倍数稀释倍数所数的小方格数所数的小方格数 酵母菌的计数酵母菌的计数( 3)计数的操作)计数的操作 稀释:将酵母菌培养液进行适当的稀释;若菌液不浓稀释:将酵母菌培养液进行适当的稀释;若菌液不浓 ,可可不必稀释。不必稀释。 镜检计数室:在加样前,先对计数板的计数室进行镜检镜检计数室:在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。若有污物,则需清洗后才能进行计数。若有污物,则需清洗后才能进行计数。 加样品:在清洁干燥的血球计数板加样品:在清洁干燥的血球计数板 盖上盖玻片盖上盖玻片 ,再用,再用 无无菌细口滴管菌细口滴管 将稀释的酵母菌液由将稀释的酵母菌液由 盖玻片边缘盖玻片边缘 滴入一小滴滴入一小滴(将计数室充满即可),让菌液沿缝隙(将计数室充满即可),让菌液沿缝隙 自行渗入自行渗入 计数室计数室。 注意不可有气泡产生注意不可有气泡产生 。探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 酵母菌的计数酵母菌的计数( 3)计数的操作)计数的操作 显微计数:静止显微计数:静止 5分钟后,先用低倍镜(分钟后,先用低倍镜( 1610 )找)找到到 计数室所在的位置。然后根据血球计数板规格,计数室所在的位置。然后根据血球计数板规格,每个计数室选取每个计数室选取 5个(或个(或 4个)中方格中的菌体进行计个)中方格中的菌体进行计数。每个小方格内约有数。每个小方格内约有 5-10个菌体为宜。个菌体为宜。 对于压在小对于压在小方格界线上的酵母菌应取方格界线上的酵母菌应取 相邻两边及顶角相邻两边及顶角 计数。计数。 如如 遇遇酵母出芽酵母出芽 ,芽体大小达到母细胞的一半时,即作为,芽体大小达到母细胞的一半时,即作为 两两个个 菌体计数。计数一个样品要从两个计数室中计得的菌体计数。计数一个样品要从两个计数室中计得的值来计算样品的含菌量。值来计算样品的含菌量。探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 酵母菌的计数酵母菌的计数( 4)血球计数板的清洗:)血球计数板的清洗: 使用完毕后,将血球计数板在水龙头上用水柱冲洗,使用完毕后,将血球计数板在水龙头上用水柱冲洗,切勿用硬刷洗刷切勿用硬刷洗刷 ,洗完后自行晾干或用吹风机吹干。,洗完后自行晾干或用吹风机吹干。镜检,观察每个小格内是否有残留菌体或其他沉淀物镜检,观察每个小格内是否有残留菌体或其他沉淀物。若不干净,则必须重复洗涤至干净为止。若不干净,则必须重复洗涤至干净为止。探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 酵母菌的计数酵母菌的计数( 5)注意事项:)注意事项: 进行计数前,应先将试管进行计数前,应先将试管 摇匀摇匀 ,目的是使,目的是使 酵母菌在培酵母菌在培养液中混合均匀养液中混合均匀 ,以减少计数误差。,以减少计数误差。 显微镜计数时,对于压在小方格界线上的酵母菌,应显微镜计数时,对于压在小方格界线上的酵母菌,应取取 相邻两边及顶角相邻两边及顶角 计数。计数。 若一个小方格内酵母菌数量过多,难以数清时,则可若一个小方格内酵母菌数量过多,难以数清时,则可将培养液将培养液 稀释稀释 一定倍数后再计数。一定倍数后再计数。 本实验本实验 无无 对照实验,酵母菌每天的数量变化可形成对照实验,酵母菌每天的数量变化可形成 前前后对照后对照 。 血球计数板使用后,切勿用硬物洗刷,可采用血球计数板使用后,切勿用硬物洗刷,可采用 浸泡和浸泡和冲洗冲洗 的方法清洗。的方法清洗。探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 酵母菌的计数酵母菌的计数( 6)讨论:)讨论: 计数前还应有哪些步骤?需注意些什么?探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 酵母菌培养:酵母菌培养:培养液配制培养液配制灭菌灭菌接种接种培养培养配制质量分数为配制质量分数为 5的葡萄糖溶液(葡的葡萄糖溶液(葡萄糖萄糖 20g, 1000 mL水),分装到水),分装到 5个个烧杯中(烧杯中( 200mL/烧杯)烧杯)用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计数时所用的滴管分别灭菌。贴标签数时所用的滴管分别灭菌。贴标签接种时要在酒精灯附近,用灭菌干净的接种时要在酒精灯附近,用灭菌干净的1mL刻度吸管每次吸取刻度吸管每次吸取 0.1mL酵母菌酵母菌母液,往每个烧杯中加入。注意母液,往每个烧杯中加入。注意 : 滴加滴加量不要太多,避免初始菌数过多量不要太多,避免初始菌数过多将烧杯置于将烧杯置于 28 的恒温箱中培养的恒温箱中培养无菌无菌操作操作 结果分析结果分析( 1)数据记录)数据记录以汤麦式血球计数板的数据记录为例。下表为某一次的以汤麦式血球计数板的数据记录为例。下表为某一次的数据记录表,其中,数据记录表,其中, A表示五个中方格的总菌数;表示五个中方格的总菌数; B表示表示菌液稀释倍数:菌液稀释倍数:探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 各中格的总菌数各中格的总菌数 A B 二室平二室平均数均数菌数菌数/ml1 2 3 4 5第一室第一室第二室第二室 结果分析结果分析( 1)数据记录)数据记录下表为一周的数据记录表:下表为一周的数据记录表: 探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 时间时间次数次数 1 2 3 4 5 6 7123平均平均 结果分析结果分析( 2)构建数学模型:)构建数学模型:探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 实验再探究实验再探究 温度、营养物质影响酵母菌的生长吗?某同学按下温度、营养物质影响酵母菌的生长吗?某同学按下表完成了有关实验。表完成了有关实验。试管试管编号编号培养液培养

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