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文档简介
,医 学 微 生 物 学(Medical Microbiology),细菌学,球菌,.,教学目标,掌握: 各种病原性球菌的形态染色、培养特性、致病物质和所致疾病。熟悉: 葡萄球菌、链球菌的抗原构造及分类。了解: 病原性球菌的微生物学检查方法,防治原则。,.,思考:,系统思考感染性疾病检查的方案设计?能引起创伤感染的细菌都有哪些?,.,/20130314/n368796448.shtml,爱美女孩挤痘痘险些危及性命,小娜脸上长出一些青春痘,女孩爱美,她时常用手挤痘,想让痘痘快点消失。一周前,小娜又挤掉了几颗,第二天就开始发烧,接着全身疼痛。在当地医院治疗4天后,症状更加严重,左手臂肿胀得无法动弹,全身发紫,家人忙将她送到武汉市儿童医院求医。经查,小娜患的是重度的脓毒血症、骨髓炎,双肺有脓肿。,.,1、球菌(coccus) 指个体形状呈球形、椭圆形、矛头状、咖啡豆状的一大类细菌。,2、病原性球菌(pathogenic coccus)又称化脓性球菌(pyogenic coccus) 指球菌中对人类有致病性的球菌,主要引起机体化脓性炎症。,.,除引起创伤感染外,还可引起毒素性疾病,包括: 葡萄球菌属:G球菌 链球菌属: G球菌 肠球菌属: G球菌 奈瑟菌属: G-球菌,.,.,.,.,分布广泛,多数不致病 主要致病菌是S. aureus 最常见的化脓性球菌 医源性感染的重要来源,第一节 葡萄球菌属(Staphylococcus),.,20岁,男性,工人。右手指皮肤碰伤伴有化脓性炎症,破损后第6天出现发热、烦躁、腹痛、四肢厥冷,脉搏细微而扪不清。入院时血压50/30mmHg,皮肤呈猩红热样皮疹,间有出血点。当即进行抗休克治疗,抽血做血培养,金黄色葡萄球菌阳性。经抗生素治疗后好转。,.,问题:1)为何取血做细菌培养?2)试述金黄色葡萄球菌的致病物质与所致疾病。,.,一群大学生在饭店就餐后四小时先后出现恶心、呕吐和腹泻症状,以呕吐为主。讨论:此例食物中毒可能由什么细菌引起?如何明确病原学诊断?,.,1.形态与染色 球形,葡萄串状,G;少数菌株有荚膜样粘液物质,(一)生物学性状,一、金黄色葡萄球菌(S. aureus),.,2.培养特性与生化反应,分解葡萄糖、甘露醇产酸不产气。触酶阳性(与链球菌区分标准),营养要求不高;产脂溶性金黄色色素;血平板上溶血,.,.,3.抗原构造,3.SPA 90%以上的金黄色葡萄球菌。,1.荚膜多糖 利于粘附2.多糖抗原 磷壁酸,.,SPA功能,具有激活补体,抗吞噬、促细胞分裂、引起超敏反应、损伤血小板等,体内作用:,.,SPA功能,设计协同凝集试验(coagglutination) 用于多种微生物抗原检测。,体外作用:,.,4.分类 根据色素和生化反应分类,.,根据有无凝固酶分型: 凝固酶阳性菌株和凝固酶阴性菌株, 凝固酶阳性菌可分23个噬菌体型。,根据核酸的遗传学分型: 16S rRNA,40个种,.,5.抵抗力, 无芽胞菌中对外界抵抗力最强 对碱性染料(龙胆紫)敏感 易产生耐药性,特别对青霉素G的耐药菌株已达90%以上。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)已成为医院内感染最常见的致病菌,.,(1)血浆凝固酶 游离/结合,有无致病性的指标,(二)致病性,1.致病物质,.,2.耐热核酸酶 耐热,降解核酸3.葡萄球菌溶素 破坏细胞膜完整性 主要是溶血素,外毒素4.杀白细胞素 主要攻击中性粒细胞和巨噬细胞5.肠毒素 外毒素,耐热,抗胃蛋白酶 引起呕吐为主的食物中毒6.剥脱性毒素 引起表皮剥脱性皮炎7.毒素休克综合症毒素1(TSST-1),.,侵袭性 局部感染 全身感染,毒素性 食物中毒 TSS SSSS,2.所致疾病,.,(1)侵袭性疾病 主要引起化脓性炎症,甚至败血症皮肤及软组织感染 病灶局限,脓汁粘稠(2)内脏器官感染 脓胸、中耳炎等(3)全身感染 败血症和脓毒血症,.,.,甲下出血,脓疱,脓疱,足坏疽,.,趾出血,败血症,脓疱,痈,产褥热败血症,肺炎气胸,.,(2)毒素性疾病 食物中毒 夏秋季常见 恶心呕吐为首要症状,随后腹泻腹痛 烫伤样皮肤综合症 20病死率 婴幼儿和免疫力低下成人 毒素休克综合症 突然高热、呕吐、腹泻、红疹等,重者心肾衰竭,甚至休克,.,烫伤样皮肤综合症,中毒休克综合症,.,(三)免疫性,1.人类有一定的天然免疫力,2.感染后能获得一定的免疫力,但不强难以防止再次感染。,.,ELISA,标本,分离培养与鉴定,凝固酶发酵甘露醇耐热核酸酶,直接涂片镜检,生长现象,生化反应,毒素检查,(四)微生物学检查法,.,防,注意个人卫生,防医源性感染,防耐药性产生,治,药敏试验,自身菌苗疗法,(五)防治原则,注意消毒隔离,.,20岁,男性,工人。右手指皮肤碰伤伴有化脓性炎症,破损后第6天出现发热、烦躁、腹痛、四肢厥冷,脉搏细微而扪不清。入院时血压50/30mmHg,皮肤呈猩红热样皮疹,间有出血点。当即进行抗休克治疗,抽血做血培养,金黄色葡萄球菌阳性。经抗生素治疗后好转。,.,问题:1)为何取血做细菌培养?2)试述金黄色葡萄球菌的致病物质与所致疾病。,.,一群大学生在饭店就餐后四小时先后出现恶心、呕吐和腹泻症状,以呕吐为主。讨论:此例食物中毒可能由什么细菌引起?如何明确病原学诊断?,.,二、凝固酶阴性葡萄球菌,Coagulase negative staphylococcus, CNS,医源性感染的常见重要病原菌 医院内各类感染中,居病原菌的第2位 诊治困难,特点:,临床常见的种类 表葡菌、腐葡菌、溶葡菌、人葡菌等30多种。,.,所致感染:,机会感染 仅次于大肠杆菌常见 泌尿系统感染:急性膀胱炎(年轻妇女、老年男性)、尿道炎 细菌性心内膜炎:心瓣膜修复术、人工瓣膜 败血症 仅次于大肠杆菌和金葡菌 术后及植入医用器械引起的感染,.,微生物检查法及防治原则,诊断依据: 凝固酶阴性,不分解甘露醇、不产生金黄色脂溶性色素。 防治原则: 严格执行无菌技术,控制医院感染。 依据药敏试验选择敏感抗生素(如诺氟沙星、万古霉素)治疗,避免耐药菌株产生。,.,第二节 链球菌属(Streptococcus),.,病例: 患儿,男,5岁,因发热、出疹入院。患儿昨出现发热、伴畏寒、咽痛,无头痛、恶心、呕吐。今晨患儿耳后及颈部开始出现皮疹,后遍及全身,无瘙痒。体检:T38.5,P112次/分,R22次/分。急性病容,面部潮红,口周苍白。咽部充血明显,双侧扁桃体肿大,充血。舌红,舌乳头粗大。全身皮肤弥漫性充血潮红,散步针尖大小、密集而均匀的点状充血性斑疹,并与毛囊一致,部分隆起突出呈鸡皮样疹。,.,(一)分布,(二)分类,1.溶血现象分类:三类,(1)甲型溶血性链球菌,亦称草绿色链球菌:草绿色溶血环。条件致病菌。(2)乙型溶血性链球菌,亦称为溶血性链球菌:完全透明的溶血环。致病力强。(3)丙型链球菌,无溶血环,无致病性。,.,2.按抗原构造分类 胞壁抗原不同分20个群, 对人致病的多在A群,3.按对氧的需要分类,.,一、A群链球菌或溶血性链球菌,1.形态与染色 球形或椭圆形,链状排列,G,(一)生物学性状,.,2.培养特性,营养要求高;液体培养为沉淀生长血平板多数有透明溶血环,.,3.生化反应,1)分解葡萄糖,产酸不产气2)菊糖(-),胆汁溶解(-)(鉴别甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌)3)触酶(-),与葡萄球菌区别,.,4.抗原结构,2)多糖抗原(C抗原) 群特异性抗原 A群致病菌,1)表面蛋白抗原: 壁外的菌毛样结构含M蛋白,具型特异性,M蛋白与致病性有关。,.,5.抵抗力,不耐热,60 30min可被杀死,对常用消毒剂敏感。对青霉素、红霉素,四环素、杆菌肽和磺胺药等敏感。,.,(二)致病性,1.致病物质 三大类,侵袭酶类 透明质酸酶、链激酶、链道酶、胶原酶,胞壁成分,外毒素 致热外毒素 、链球菌溶素,黏附素:脂磷壁酸和F蛋白,M蛋白(M protein),肽聚糖,.,致热外毒素 又称红疹毒素或猩红热毒素 引起猩红热,有如下生物学作用 (1)致热作用 直接作用于下丘脑 (2)细胞毒作用 对脾细胞和巨噬细胞 (3)内毒素休克 增加对内毒素的敏感性溶血素 乙型溶血性链球菌产生 SLO:蛋白质,免疫原性强 SLS: 糖肽,无免疫原性,造成-溶血,.,2、所致疾病,(1)化脓性疾病甚至败血症皮肤及皮下组织感染丹毒、蜂窝织炎、淋巴管炎等特点:病灶与正常组织界限不清,脓汁稀薄带血。其它系统感染化脓性扁桃体炎、咽炎、咽峡炎、中耳炎、产褥热等。,.,乙型链球菌脓疱,金葡菌脓疱,乙型链球菌丹毒蝶翅样皮疹,乙型链球菌丹毒急性期,乙型链球菌丹毒恢复期,.,丹毒急性期,扁桃体炎,蜂窝织炎,丹毒恢复期,败血症,口腔底咽颊炎,.,咽颊炎侧面,扁桃体炎,败血症,咽颊炎正面,.,扁桃体脓肿,扁桃体炎,扁桃体滤泡,扁桃体炎,.,(2)毒素性疾病猩红热:高热,咽炎,全身弥漫性鲜红皮疹,疹退后脱屑,.,丹毒,乙链猩红热白草莓舌,乙链猩红热红草莓舌,乙链猩红热口周苍白,乙链猩红热躯干红疹,.,乙链猩红热手部脱屑,乙链外科猩红热伤口,乙链猩红热肢体红疹,.,(2)毒素性疾病猩红热:高热,咽炎,全身弥漫性鲜红皮疹,疹退后脱屑(3)超敏反应性疾病风湿热、急性肾小球肾炎,.,乙链过敏反应结节红斑,.,病例: 患儿,男,5岁,因发热、出疹入院。患儿昨出现发热、伴畏寒、咽痛,无头痛、恶心、呕吐。今晨患儿耳后及颈部开始出现皮疹,后遍及全身,无瘙痒。体检:T38.5,P112次/分,R22次/分。急性病容,面部潮红,口周苍白。咽部充血明显,双侧扁桃体肿大,充血。舌红,舌乳头粗大。全身皮肤弥漫性充血潮红,散步针尖大小、密集而均匀的点状充血性斑疹,并与毛囊一致,部分隆起突出呈鸡皮样疹。,.,(三)免疫性,产生多种抗体但各型间无交叉免疫。猩红热患者可建立牢固的同型抗毒素免疫,.,标本,直接涂片镜检,分离培养,脓汁,血液,咽喉拭子,(四)微生物学检查法,生化反应,(一)分离培养与鉴定,(二)血清学试验,抗链球菌溶血素“O”试验(ASO test),PYR试验:特异检测有无氨基肽酶,.,治疗:首选青霉素。,(五)防治原则,预防: 积极治疗病人和带菌者,减少传染源 严格消毒空气、器械和敷料等 彻底治疗急性咽炎、扁桃体炎、儿童链球菌感染,,.,二、肺炎链球菌或肺炎球菌,.,男性患者,20岁。1周前外出遇雨,不久“感冒”,随后畏寒、发热、咳嗽、胸膜剧烈疼痛,咳铁锈色痰。查体:体温 39.70C,右肺呼吸音稍低。血白细胞17.7*109/L,中性粒细胞89%,胸片见左上肺大片致密影。问题:1)患者最可能患的疾病是什么?该病原体形态有何特征?2)检查该病原体菌落时应注意什么?如何进行特异性预防?,.,二、肺炎链球菌或肺炎球菌,在自然界广泛分布; 常寄居于正常人的鼻咽腔中,在机体抵抗力下降时引起疾病; 主要引起大叶性肺炎,约占细菌性肺炎的80%。,.,肺炎球菌荚膜(荧光染色) 1000,肺炎球菌荚膜1000,透射电镜42 000,.,1.形态与染色,矛头状双球菌,平面相对,尖面相背G球菌,厚荚膜,(一)生物学性状,2.培养特性,营养要求较高。 与甲型溶血性链球菌区别: 1)产生自溶酶“脐形”菌落; 2)胆汁溶菌试验(+);,.,.,神经氨酸酶、,(二)致病性,1致病物质,(1)荚膜 主要毒力因子,肺炎链球菌溶素,(2)脂磷壁酸、,.,(1)大叶性肺炎,可继发胸膜炎、脓胸 (2)急性或慢性支气管炎 (3)其他疾病:副鼻窦炎、中耳炎和儿童化脓性脑膜炎,2所致疾病,肺炎链球菌仅在感染、营养不良和抵抗力下降等因素致呼吸道异常或受损伤时才引起感染,,.,2.直接涂片镜检,3.分离培养:,肺炎球菌荚膜(1000),(四)微生物学检查法,1.标本,4.鉴别和快速诊断: 胆汁溶解试验 Optochin敏感试验 荚膜肿胀试验 动物毒力试验,.,23价肺炎球菌荚膜多糖菌苗,1)预防,2)治疗,1.青霉素G、头孢类 2.耐药者可选用万古霉素等敏感药物,(五)防治原则,对象:65岁以上老人,2岁以上儿童,慢性病患者,.,男性患者,20岁。1周前外出遇雨,不久“感冒”,随后畏寒、发热、咳嗽、胸膜剧烈疼痛,咳铁锈色痰。查体:体温 39.70C,右肺呼吸音稍低。血白细胞17.7*109/L,中性粒细胞89%,胸片见左上肺大片致密影。问题:1)患者最可能患的疾病是什么?该病原体形态有何特征?2)检查该病原体菌落时应注意什么?如何进行特异性预防?,.,甲型溶血性链球菌,又名草绿色链球菌,特性: 常寄居于鼻咽、口腔、龈隙、消化道、女性生殖道。可引起机会感染 血平板上呈溶血 种类:对人类致病的有五个种 变异链球菌、唾液链球菌、米勒链球菌、轻型链球菌、血链球菌,.,所致疾病 两种 龋齿:变异链球菌(厌氧菌)。 亚急性细菌性心内膜炎(subacute bacterial endocarditis, SBE)致病机制:停留在病损心瓣膜或人工瓣膜上繁殖,.,第四节 奈瑟菌属 Neisseria,人类是奈瑟菌属细菌的自然宿主 大多数寄居呼吸道对人有致病性的有两种 脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌,.,一、脑膜炎奈瑟菌N. meningitidis,.,患者男性,22岁,郊区某建筑工地工人。因发热、头痛三天,神志不清1天入院。3天前无明显诱因出现发热,伴有寒战,明显头痛,喷射状呕吐胃内容物,全身肌肉关节疼痛,病后第二天发现皮肤散在紫红色斑点,逐渐增多,压之不褪色。第三天出现妄语、烦躁不安、四肢抽搐、小便失禁。体检:体温39.5,脉搏121次/分。神志不清,全身皮肤密布大小不等的瘀点、瘀斑,颈抵抗,对光反射迟钝。上颚可见出血点。,.,问题:1)该病例最有可能的疾病是什么?2)由哪种病原体感染所致?3)该病原体在形态与培养上有何特征?4)检查时应注意哪些问题?5)如何进行特异性预防?,.,一、脑膜炎奈瑟菌N. meningitidis,脑膜炎奈瑟菌俗称脑膜炎球菌,是流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)的病原体。,.,1.形态与染色 肾形或豆形,双球菌,G,有菌毛,患者脑脊液中常位于中性粒细胞内。,2.分离培养 专性需氧菌,初次分离需供给5-10的CO2,营养要求高,产生自溶酶。,(一)生物学性状,.,3.抗原构造与分类,1)群特异性抗原-荚膜多糖,分群 13个血清群,以C群致病力最强,我国95%以上为A群2)外膜蛋白型特异性抗原 群中分型 3)脂寡糖抗原(LOS)-主要致病物质,.,4.抵抗力极弱,四怕:热、寒冷、干燥、消毒剂强调!由于脑膜炎奈瑟菌对低温和干燥极敏感,标本采取后应注意保暖、保湿并立即送检,最好床边接种,.,1.致病物质,菌毛,荚膜,IgA1酶,内毒素(LOS):主要,(二)致病性,.,2.所致疾病,传播途径:呼吸道传播,飞沫或接触,传染源:病人和带菌者,流行性脑脊髓膜炎,简称流脑,人类是脑膜炎奈瑟菌唯一易感宿主。,易感人群:5岁以下儿童 6个月至2岁儿童发病率最高,.,脑膜炎奈瑟菌脑膜炎并发症坏死性紫癜,脑膜炎奈瑟菌脑膜炎早期皮疹,脑膜炎奈瑟菌脑膜炎体征,.,1.普通型: 约占90%左右。,临床类型:三种,2.暴发型:少见。起病急、病情凶险、常于24h内危及生命。,3.慢性败血症型:少见,多为成人,反复发作,易误诊。,(1)上呼吸道感染期(2)败血症期(3)脑膜炎期(4)恢复期,.,(三)免疫性,体液免疫为主 正常个体可获得交叉免疫 母体的IgG可通过胎盘传给胎儿,故6个月内婴儿有免疫力。,.,1.标本,2.直接涂片镜检,4.快速诊断,对流免疫电泳、SPA协同凝集试验、ELISA等,(四)微生物学检查法,3.分离培养与鉴定,.,(五)防治原则,1.尽快控制传染源、切断传播途径和提高人群免疫力。 2.早发现、早诊断、早治疗和早控制。 3.特异性预防 流脑荚膜多糖疫苗 4.流行期间可口服磺胺药物等预防。 5.治疗首选药物为青霉素G,剂量要大,过敏者可选用红霉素。,.,患者男性,22岁,郊区某建筑工地工人。因发热、头痛三天,神志不清1天入院。3天前无明显诱因出现发热,伴有寒战,明显头痛,喷射状呕吐胃内容物,全身肌肉关节疼痛,病后第二天发现皮肤散在紫红色斑点,逐渐增多,压之不褪色。第三天出现妄语、烦躁不安、四肢抽搐、小便失禁。体检:体温39.5,脉搏121次/分。神志不清,全身皮肤密布大小不等的瘀点、瘀斑,颈抵抗,对光反射迟钝。上颚可见出血点。,.,问题:1)该病例最有可能的疾病是什么?2)由哪种病原体感染所致?3)该病原体在形态与培养上有何特征?4)检查时应注意哪些问题?5)如何进行特异性预防?,.,二、淋病奈瑟菌,淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae)俗称淋球菌,是人类淋病的病原菌。我国的性传播疾病中淋病发病率最高。,.,患者李某,男性,32岁,以尿频、尿急、尿痛为主诉就诊。门诊检查,尿道口黄白脓性分泌物。分泌物涂片可见大量白细胞,且细胞内多见咖啡豆样革兰阴性双球菌,分泌物用巧克力培养基培养有圆形、凸起、灰白并光滑菌落。细菌氧化酶试验阳性。既往史:患者曾有与多位异性
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