标准解读
《GB/T 34796-2017 水溶液中核酸的浓度和纯度检测 紫外分光光度法》是一项国家标准，该标准规定了使用紫外分光光度计测定水溶液中脱氧核糖核酸（DNA）或核糖核酸（RNA）浓度与纯度的方法。此方法基于核酸在特定波长下的吸收特性来评估其浓度及纯度。
标准首先介绍了适用范围，适用于各种类型的核酸样品，包括但不限于基因组DNA、质粒DNA、总RNA等，在生物医学研究、分子生物学实验等领域具有广泛应用价值。接着详细描述了所需仪器设备及其技术参数要求，如紫外可见分光光度计应具备良好的线性响应范围、低噪声水平等特性；同时明确了试剂的选择与配制方法，比如TE缓冲液作为溶解介质时的具体成分比例。
对于实际操作流程，《GB/T 34796-2017》给出了详细的步骤指导，包括样品准备、空白对照设置、测量条件设定等方面内容，并强调了每一步骤中的关键点。例如，在进行核酸溶液吸光值读取之前，需确保比色皿内外清洁无污染，且每次更换样品后都应用去离子水彻底冲洗比色皿再用待测样本润洗三次以上以减少交叉污染的可能性。
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- 现行
- 正在执行有效
- 2017-11-01 颁布
- 2018-05-01 实施
©正版授权
文档简介
ICS07080 A 40 . 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T347962017 水溶液中核酸的浓度和纯度 检测 紫外分光光度法 Quantificationandpurityanalysisofnucleicacidconcentrationin solutionUltravioletspectrophotometry2017-11-01发布 2018-05-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发 布 中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会 GB/T347962017 前 言 本标准按照 给出的规则起草 GB/T1.12009 。 本标准由全国生化检测标准化技术委员会 提出并归口 (SAC/TC387) 。 本标准起草单位 中国测试技术研究院生物研究所 上海市计量测试技术研究院 中国测试技术研 : 、 、究院 四川中测生物科技有限公司 、 。 本标准主要起草人 谭和平 周李华 许丽 刘刚 马丽侠 李妍 叶德萍 梁文 王智 丁敏 孙登峰 : 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 。 GB/T347962017 水溶液中核酸的浓度和纯度 检测 紫外分光光度法 1 范围 本标准规定了使用紫外分光光度法检测水溶液中核酸的浓度和纯度的原理 样品制备及检测方法 、 。 本标准适用于水溶液中核酸的浓度和纯度检测 可对浓度在 及以上的水溶液核酸样品定 , 5ng/L 量检测和纯度分析 。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 凡是注日期的引用文件 仅注日期的版本适用于本文 。 , 件 凡是不注日期的引用文件 其最新版本 包括所有的修改单 适用于本文件 。 , ( ) 。 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T6682 实验室 计 GB/T11165 pH 双光束紫外可见分光光度计 GB/T26813 移液器检定规程 JJG646 3 缩略语 下列缩略语适用于本文件 。 脱氧核糖核酸 DNA: (deoxyribonucleicacid) 核糖核酸 RNA: (ribonucleicacid)4 原理 核酸中嘌呤和嘧啶碱基有共轭双键 具有吸收紫外光的性质 其最大吸收值在波长为 , , 250nm 之间 碱基与戊糖 磷酸形成核苷酸后其最大吸收峰不会改变 最大吸收波长约 吸收270nm 。 、 , 260nm, 低峰在 在波长 处 单位 值的光密度相当于双链 浓度为 单链 230nm。 260nm ,1 OD DNA 50g/mL、 及 为 单链寡核苷酸为 利用此量和浓度关系 可用于计算核酸样品DNA RNA 40g/mL、 33g/mL , , 的浓度 。5 试剂和材料 除非另有规定 本方法所用试剂均为分析纯 水为 规定的一级水 , , GB/T6682 。51 DNA 标准溶液 . 小牛胸腺 标准溶液 DNA 。52 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 1mol/LTris-HCl pH74 . ( , .) 称取 置
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