分离复习题.ppt

1、1离心分离法通常可分为 离心和 离心。 2 、 和 可用作蛋白质的特殊沉淀剂。 3等电点沉淀一般适用于疏水性 的蛋白质，而对于亲水性 的蛋白质则不太适用。 4超临界流体，就是温度和压力略超过或靠近 和 的流体。 5. 膜材料主要分成 、 和 三大类。 6中空纤维膜组件比表面 ，可方便采用 方式清洗，造价低，工业上普遍使用。 7 是膜技术应用的最大限制因素。,8层析技术，根据固定相形状，可分为 、 和 ；根据流动相流动方向，可分为 和 。 9常用的商品化凝胶过滤介质主要有 凝胶、 凝胶和其他凝胶。 10亲和作用体系可分为 特异性体系和 特异性体系。 11生物物质中常见的亲和作用体系有：酶与其 ；

2、蛋白质作为抗原与其 等。,判断题 1、恒压过滤操作中，滤饼阻力不断上升，过滤速度不断下降。 2、革兰氏阳性菌的细胞较兰氏阴性菌难破碎。 3 、溶液中pH值接近蛋白质pI值时，蛋白质溶解度最小。 4、一般在盐析沉淀后不需进行脱盐处理，即可进行后续的分离纯化操作。,5、盐析沉淀高分子量蛋白质所需的盐浓度较低。 6、有机溶剂萃取中，对青霉素等弱酸性电解质，在较高的pH下，有利于其在有机相中的分配。 7、双水相系统的相图中，同一系线上各点均分成体积相同而组成不同的两相。 8超滤膜两侧渗透压可忽略，甚至可在常压下操作。 9HIC采用降低流动相离子强度的梯度洗脱法进行洗脱。,1、 细胞破碎的目的是什么？

3、2、 试列举出两种用于细胞破碎的机械破碎法，并分别阐述其破碎原理及操作。 3、操作温度对盐析沉淀的效果有何影响。 4、简述乳状液膜的制备过程。 5、反胶团萃取中，静电相互作用如何影响蛋白质的萃取率。,8、 简述离子交换层析的分离原理。 9、利用GFC如何实现未知蛋白质相对分子量 的测定。 10. 亲和膜与亲和错流过滤技术有何区别。 11. 简述亲和双水相分配的分离原理,1 、 和 可用作蛋白质的特殊沉淀剂，常用的盐析盐是 。 2向水中加入表面活性剂，浓度达到一定值后，会形成 ；向有机溶剂中加入表面活性剂，浓度达到一定值后，会形成 。 3反胶团溶解蛋白质提出的四种模型中，对于亲水性蛋白质，普遍接

4、受 模型。 4乳状液膜膜相组成中的必需成分是 ，主要依靠它来维持液膜的稳定。 5中空纤维膜组件常采用 和 方式清洗。,一、 判断题： 1等电点沉淀一般适用于亲水性很强的蛋白质。 2盐析沉淀回收蛋白质，应选择溶解度受温度影响小的无机盐。 3蛋白质在高离子强度的溶液中溶解度会降低。 4反胶团萃取一般使用非离子型表面活性剂。 5超临界流体尤其适于提取固体原料内的有用成分。,6、超临界流体的密度接近气体，粘度和自扩散系数则接近液体。 （ ） 7一般来说，膜分离技术中所使用的滤膜孔径均有较大的分布范围。 （ ） 8超滤膜比微滤膜孔径大，用于悬浮液过滤。 （ ） 9目前，超滤膜和反渗透膜多为对称膜，而微滤

5、膜大多为不对称膜。 （ ） 10膜分离操作通常采用终端过滤形式，可大大减轻浓度极化现象。,一、 简答题： 1细胞的机械破碎法与化学破碎法相比有何优缺点？ 2简述双水相萃取用于胞内蛋白质萃取的优势及实际操作过程。 3图示并说明膜分离用于蛋白质或菌体浓缩的开路循环和闭路循环操作方式。 4试比较四种主要商品膜组件的优缺点。 5简述GFC在分级范围内，如何实现相对分子量不同的两种蛋白质的分离。 6IEC和HIC的洗脱操作中通常都采用改变流动相离子强度的梯度洗脱法，有何区别，为什么？ 7简述亲和层析的操作过程，可采用哪两种洗脱方法，各有何特点。,一、双水相萃取技术用于分离提取胞内目标蛋白质时，应从哪些方

6、面着手分析，选择合适的双水相系统。 二、试从分离原理、膜材料、操作特性和适用范围等方面比较超滤和微滤这两种最常用的膜分离技术有何异同。 三、超临界流体萃取操作在分离阶段依分离方法的不同可分为哪三种基本方式？它们分别适用于什么场合？ 四、如何通过试验确定盐析沉淀某种特定蛋白质所需无机盐的饱和度范围？,一、为什么离子交换层析常用梯度洗脱法？该法有何优点。 二、利用盐析沉淀进行蛋白质的初步分离，一般需在沉淀后进行脱盐处理，可供选择的分离技术有哪些，分别说明其脱盐的原理，并比较在实际应用中的优劣。 一、珠磨法破碎大肠杆菌细胞，破碎速率常数k=0.048min-1。 （1）若采用间歇破碎操作，试计算破碎

7、率达到90所需的时间； （2）若采用连续破碎操作，破碎室的有效体积为10L，在稳态操作条件下，试计算使破碎率达到90以上的最大料液流量。,细胞的机械破碎主要有哪些方法？简述各法的基本原理。 简述离子交换层析的分离原理。 在分离体系、分离机理、操作过程和各自特点等方面反胶束萃取和液膜萃取技术有何异同。 细胞破碎的化学法与机械法相比各有何优缺点。 对称膜与不对称膜在膜的结构及分离性能上有何差别。,例题,简述离子交换层析的分离原理。为什么离子交换层析常用梯度洗脱法？该法有何优点。用增加盐离子强度的方法，从指定的离子交换柱上洗脱下列蛋白质，指出它们被洗脱下来的先后顺序，并说明理由。已知细胞色素C的pI=10.6，溶菌酶pI=11.0，卵清蛋白pI=4.6，肌红蛋白pI=7.0，胃蛋