医学微生物学课件：17 呼吸道病毒

1、呼吸道病毒,是指主要以呼吸道为传播途径，侵犯呼吸道粘膜上皮细胞，并引起呼吸道局部感染或呼吸道以外组织器官病变的一类病毒。 据统计：90%以上的急性呼吸道感染由该类病毒引起。,主要呼吸道病毒及其所致疾病,副粘病毒,粘病毒 是指对人或某些动物细胞表面的粘蛋白有亲和性的病毒。核酸类型为单股负链RNA，有包膜。正粘病毒、副粘病毒的分别以其核酸是否分节段为标准，分节段者为正粘病毒，不分节段者为副粘病毒。,正粘病毒,具有分节段RNA基因组、抗原变异频率高。只有流行性感冒病毒，简称流感病毒一个种。,一、生物学性状,1. 形态、大小 球形（ 80130nm） 丝状（1300nm） 2.结构 由核衣壳和包膜组成

2、,流感病毒,流感病毒的结构,分节段的（-） SSRNA 核蛋白（NP），具有型的特异性 RNA聚合酶,基质蛋白（M1+M2）：具有型的特异性,包膜,脂蛋白，镶嵌2种刺突,核衣壳,核糖核蛋白,血凝素HA,神经氨酸酶NA,分亚型,（RNP）,NA,HA,M2蛋白 参与病毒复制,流感病毒的结构,78个节段的 （-） SSRNA,M1蛋白 与病毒组装有关,RNA,核蛋白 （NP）,RNA 聚合酶,核衣壳（RNP）,PB2PB1PA,（1）分节段RNA基因组：甲、乙型流感病毒有8个节段；丙型流感病毒则只有7个节段，缺少第6个节段，其第4节段编码 HA+NA。,吸附宿主细胞,HA,凝集多种动物和人红细胞,

3、免疫原性,HA的结构与功能 呈柱状，为三聚体，是一种糖蛋白，它基本上以相同的间距覆盖了病毒的全部表面。,分亚型的依据（116）,（2）血凝素（hemagglutinin，HA）,HA,NA,HA（糖蛋白）+ RBC表面糖蛋白受体血凝 HA 机体 抗HA （血凝抑制抗体） V(HA) + 抗HA + RBC(HA-R)RBC凝集被抑制 保护性Ab 中和病毒作用,血凝抑制（HI）试验,该试验可用于流感病毒HA亚型（116）的鉴定，也可用于血清中有无HA抗体的测定。,（3）神经氨酸酶（neuraminidase，NA）,NA,参与病毒释放,促进病毒扩散,免疫原性,NA的结构与功能 呈蘑菇状，为四聚体

4、，其末端呈扁球形，并不平均分布在病毒表面，而是聚合成群。,分亚型的依据（19）,HA,NA,NA +底物（胎球蛋白）可使胎球蛋白释放出唾液酸，唾液酸经碘酸盐氧化，再经硫代巴比妥酸作用形成粉红色色团。 NA 机体 抗NA （抗神经氨酸酶抗体） V(NA) +抗NA + 胎球蛋白等不出现粉红色？ 该试验可用于流感病毒NA亚型（19）的鉴定，也可用于血清中有无NA抗体的测定。,神经氨酸酶抑制（NI）试验,（1）分型：根据NP和MP的不同，流感病毒被分为甲、乙、丙三型： 甲型（型）流感病毒: 可感染哺乳动物及禽类，如主要感染人类的H1N1、H2N2、H3N2亚型；高致病性禽流感H5N1、H7N7等亚型

5、可引起的人类。抗原性极易发生变异。成为当前防疫难题。 乙型（型）流感病毒可感染人类及猪，丙型（型）流感病毒只感染人类；变异幅度小。,3.分型与变异,如果同一细胞同时感染了人和动物的甲型流感病毒，病毒之间可发生基因重组。由此产生的病毒HA和NA发生全新转变，而使得人群没有免疫力。近年来流行的人甲型H1N1流感病毒与猪H1N1流感病毒的关系最为密切，可能是人H1N1和猪H1N1流感病毒基因重组而成。,猪H1N1流感病毒,人H1N1流感病毒,新型的H1N1流感病毒,（2）亚型：甲型流感病毒根据其表面HA和NA的不同，又分为若干亚型。 HA有16种（116）、NA有9种（19）。 亚型 HN组合的可能

6、=144种不同。不过，目前仅发现H1N1、H2N2、H3N2亚型主要感染人类，其它许多亚型的自然宿主是多种禽类和动物。,（3）变异：流感病毒易于发生抗原性变异、温度敏感性变异等。 抗原性变异的类型：抗原性漂移、抗原性转变。 抗原性变异的意义：,基因组片段,第一次突变,第二次突变,红,红和蓝,抗原性漂移,抗原性漂移：HA或NA基因点突变造成，HA 和NA氨基酸变异幅度小于1%或连续变异 RNA聚合酶缺乏校正机制，核酸复制错误频率高达1/104，而DNA聚合酶为1/109。属量变，即亚型内变异，也称变种变异。往往导致流感的局部中、小型流行。,抗原性转变：HA和/或NA基因的大幅度变异，往往是由于两

7、种或以上甲型流感病毒感染同一细胞时发生基因重组造成，HA氨基酸的变异率为2050%，属质变，导致新亚型的出现（如H2N2H3N2、 H1N1H2N2等）。由于人群完全失去免疫力，往往引起世界性的暴发流行。 如果抗原转变仅是HA变异，而NA则不发生变化或仅发生小变异，称作亚型变异；如果HA和NA同时转变，称作大型变异。,猪H1N1流感病毒,人H1N1流感病毒,新型的H1N1流感病毒,抗原性转变： 主要由基因重组造成。,亚型变异,大型变异,抗原性漂移,抗原性转变,流感病毒抗原性变异的意义,亚型内变异（变种变异）： H、N均小变异 经常发生，导致中、小流行。 亚型变异： 甲型流感 H大变异，N不变或

8、小变异 病毒变异 约10年发生一 次， 可致大流行。 大型变异： H、N均大变异， 约3040年发生一次， 致大流行或暴发流行。,亚型名称 抗原结构 流行年代 最初流行地 原甲型 H1N1 1918-1957 西班牙 亚洲甲型 H2N2 1957-1968 亚洲 香港甲型 H3N2 1968-1977 香港 香港甲型与新甲型 H3N2、H1N1 1977- 俄罗斯,甲型流感病毒抗原变异情况,？,4. 培养特性 流感病毒虽可在组织培养细胞（人羊膜、猴肾等细胞）中增殖，但不引起明显的CPE，可用红细胞吸附试验判定有无病毒增殖。 流感病毒能在鸡胚羊膜腔和尿囊腔中增殖。增殖的病毒游离于羊水或尿囊液中，

9、用红细胞凝集试验即可检出。,5. 抵抗力 流感病毒抵抗力较弱，不耐热，5630分钟即可使病毒灭活。室温下传染性很快丧失，但在04能存活数周，70以下或冻干后能长期存活。病毒对干燥、日光、紫外线以及乙醚、甲醛、乳酸等化学药物也很敏感。,二、致病性与免疫 （一）致病性 传染源：患者、隐性感染者、被感染动物。 传播途径：飞沫传播 致病机制 在呼吸道粘膜上皮细胞增殖，不引起病毒血症。 致病特点是发病率高，死亡率低，死亡通常是合并细菌感染所致。,流感病毒,呼吸道,毒性物质进入血流,呼吸道炎症,全身中毒症状,流感病毒主要侵犯呼吸道粘膜上皮细胞导致细胞变性、坏死，粘膜充血、水肿和分泌物增加。流感病毒产生的的

10、毒素样代谢产物以及细胞坏死释放产物、干扰素可入血可出现全身症状。 但高致病性禽流感病毒感染后常表现为很快发展成肺炎，甚至急性呼吸窘迫综合征等。,流感与普通感冒的区别,流 感 普通感冒,（二）免疫性,体液免疫：SIgA，可短暂存留几个月。 血清抗HA抗体：IgM、IgG，可持续数月至数年。 细胞免疫：CD4+ T细胞；CD8+细胞。 病后对同亚型流感病毒产生较持久的免疫。,1.分离与鉴定 咽漱液 鸡胚羊膜腔 +双抗 培养液+RBC 鼻咽拭子 人胚肾细胞,血凝？,三、微生物学检查,培养液+抗HA（116）+RBCRBC凝集被抑制？ 培养液+抗NA（19）+胎球蛋白等不出现粉红色？,2.血清学诊断 作为血清学诊断时必须收集急性期和恢复期双份血清，如恢复期血清特异性抗体较急性期增高4倍以上，即可诊断。急性期血样应尽早