农药残留测定方法

1、第五章 农药残留测定方法,学习指南,观察思考,课外,复习自测,退出本章,演示文稿,本章目录,辽农职院 工程系 质检中心,目的要求：掌握GC/HPLC中各种参数的设置方法，如色谱柱、柱温、进样方式以及检测器的选择等。 学习要点 一般掌握： GC/HPLC的结构；进样系统；仪器的维护及故障诊断技术等。 重点掌握： 最佳分析条件的设置，常见异常峰的优化。,学习指南,本节首页,退出本章,第五章 农药残留测定方法,第一节 气相色谱仪 一、气路系统 二、进样系统 三、分离系统 四、检测系统 五、检测条件的优化,本节首页,退出本章,第二节 液相色谱仪 一、流动相系统 二、进样系统 三、分离系统 四、检测系统

2、 五、检测条件的优化,第一节 气相色谱仪,一、气路系统,（一）、气源与载气种类,本节首页,退出本章,1、 惰性（不与样品或固定相反应） 2、 容易得到并易纯化 3、 满足检测器要求 常用载气：N2 H2 He Ar 辅助气：氧气或空气,（二）、气体的净化,本节首页,退出本章,1、气体不纯的不良影响 样品失真或消失 柱失效 对固定液保留特性的影响 对检测器的影响,（二）、气体的净化,本节首页,退出本章,氧气捕集器：氧气破坏色谱柱，降低ECD 检测器的功能。,（三）、气体管路,本节首页,退出本章, 专用铜管或不锈钢管。 塑料管会渗透O2和其它污染物。 管子使用前先用溶剂冲洗，载气吹干。 每用完3瓶

3、气，应更换过滤器。 每隔一定时间，对所有外加接头检漏。,二、样品的进样系统 与进样技术,本节首页,退出本章,作用: 使样品以一种可重复可再现的方式契入到气相色谱柱中。 被引入的样品应具有代表性，除特殊要求外样品引入过程不应发生任何化学反应。,（一）、进样方式,本节首页,退出本章,针进样： 手动进样；自动进样 阀进样：气体进样阀；液体进样阀 其它进样装置：吹扫捕集；顶空,1、 针进样,应使样品象一个塞子一样地被进样。 为了得到重复性好的，尖锐的峰形，进样动作应迅速且稳定。,2、针进样技术比较,3、 进样垫,注：以岛津公司产品为例,知识窗,色谱柱进样垫通用技术,使用轻触点 - 不能过紧。 保持清洁

4、。 避免污染 - 指纹、油脂等。 检查使用的密封垫是否有裂纹、碎片、或其它的损坏。,知识窗,进样垫相关问题,应在推荐温度范围内避免： 泄漏、降解、样品丢失、出现鬼峰 减少或者避免鬼峰的出现： 进样口带有隔垫吹扫功能。 应使用耐高温的相应进样垫。,作用：可重复，可再现的方式契入色谱柱中。被引入的样品应具有代表性，除特殊要求外样品引入过程不应发生任何化学反应。,本节首页,退出本章,（二）、进样口类型,进样口类型气路控制,本节首页,退出本章,分流/不分流进样口 EPC 与 non-EPC 隔垫吹扫填充进样口 EPC 与 non-EPC 冷柱头进样口 只有EPC 程序升温汽化进样口 只有EPC 挥发进

5、样口 只有EPC,分流/不分流进样口,本节首页,退出本章,分流方式是特为毛细管柱GC设计的样品引入方式,1、分流进样 进样前,防止样品 歧视现象, 进样时刻, 样品与载气混合,为了保证分流比的概念真实有效，样品（溶剂+分析物）必须与载气充分混合，形成一个均匀的混合物。 这一混合物的一小部分将会从进样口的底部进入色谱柱，而大部分的混合物则会从分流出口流出。, 衬管过载,如果进样量过大，溶剂会膨胀为很大的体积，致使进样口衬管过载。 其结果必将导致样品从吹扫出口流出而造成样品损失，同时也会造成载气输入管路的污染。,知识窗,本节首页,退出本章,1、衬管过载的后果,其结果必将导致样品从吹扫出口流出而造成

6、样品损失，同时也会造成载气输入管路的污染。,知识窗,本节首页,退出本章,2、溶剂膨胀计算公式,微升=22400ABC A=密度/分子量 B=15/(15+柱前压psi） C=（进样口温度+273）/273,知识窗,本节首页,退出本章,3、溶剂膨胀计算例子,知识窗,4、常用溶剂的膨胀率,进样口温度为250，柱前压为13psi,本节首页,退出本章, 分流比计算,分流出口流量 = ？, 总流量,本节首页,退出本章,隔垫：13ml或3 6ml 分流流量：分流流量/柱流量 如100：1或50：1 柱流量：受柱前压控制，流量与压力在 一定范围内呈正相关关系, 如何实现分流,2、不分流进样系统, 进样前 进

7、样阀关闭,关闭分流阀使气流不能从衬管外逃出。由于柱前压并未改变，所以柱流量将会保持恒定。原来吹过衬管的气流现在必为通过隔垫吹扫管路流出。, 进样时刻 分流阀关闭,样品会扩展到进样口的底部。使用250uL的衬管以及柱流量，很容易使衬管过载，特别是当进样体积大于1uL且使用非烃类溶剂时。, 样品的汽化 分流阀关闭,由于样品组分与溶剂的扩散率的不同（更小体积/低分子量），组分在衬管中分层。与载气混合成为低临界状态，这是因为保存时间长且几乎所有的样品都经过衬管而进入到色谱柱中了。通过使用某一种“捕集”技术可将样品聚集在柱头。, 样品的注入 分流阀关闭,到此被分析物转移入柱已经完成。仍有一些溶剂留在衬管

8、之中。如果依然保持分流阀关闭，则余下的所有溶剂都转移入柱子中，那么溶剂色谱峰将会严重拖尾。, 样品的注入 分流阀关闭,将分流阀从关闭位置转为开启状态以将留在衬管中的剩余溶剂吹出衬管。这个过程将会有效地减小溶剂峰的拖尾，以保证先流出峰的定量更加真实可信。, 样品注完 分流阀开启,衬管的体积太小以及通过衬管的流量太低可能会导致使用非烃类溶剂的样品进样量过大。 对于不分流进样来说，进样量过大会造成定量结果的准确性与精确性双方面的明显误差。, 样品过载 分流阀关闭, 溶剂效应：设定柱温的初始温度低于溶剂的沸点，致使溶剂在柱关上冷凝，相当于膨胀了固定相并捕集分析物。,本节首页,退出本章,样品进入色谱柱后

9、，减少分流出口的载气流量以节约载气。 柱前压和柱流速仍保持不变，只有分流出口的流量减少。可用于分流和不分流方式。 节省载气启动的时间应选在样品进入色谱柱后。,（三）、节省载气装置,知识窗,本节首页,退出本章,尾 吹,毛细管柱内流动相流速低，流量小，组分会因柱后死体积突然增加而发生严重的纵向扩散，从而导致峰形展宽，有可能使在柱中以分离的组分在柱后再次重叠，影响分离。 也可在使用FID时受阻于引入的H2压力而出柱困难。 增加尾吹气将改善这一状况。,（四）、分流平板,此部件须非常清洁,1、在溶剂中超声处理 - 常用样品或清洗剂 2、使用金属纱布擦磨清洁 - 高光洁度可提高其功效- 不要干擦 3、用溶

10、剂清洗 - 避开氯化溶剂 - 先惰性洗涤 - 甲苯 - 再用醇类清洗 - 甲醇,（五）、毛细管衬管,未去活性的衬管的清洗 1) 移去玻璃毛 2) 在溶剂或酸液中超声振荡 3) 清洗且干燥 4) 更换去活性的玻璃毛 5) 去活性 - 硅烷化 6) 干燥 7) 精心维护衬管的内表面避免划伤,毛细管衬管结构图,本节首页,退出本章,（六）、进样口系统中注意点,1、 进样口常见问题 非代表性样品、堵塞、温度不正确、污染、泄漏 2、 操作条件的选择 1) 汽化室温度的选择 2) 进样垫的材料与处理 3) 进样量,本节首页,退出本章,3、进样口的日常维护,更换隔垫 清洗或更换进样针 进行泄漏测试和维修 清洗或更换衬管/内插件 清洗或更换分流