新GMP下的液体除菌过滤解决方案

1、通过比较中外GMP法规的要求，从四个方面总结了新GMP对液体灭菌和过滤的相关规定，并提出了解决方案；目前，行业内广泛关注的灭菌过滤器(过滤器)的相关验证工作也在文中进行了详细的阐述和列举。与GMP(98)相比，新版GMP(2010)在制药生产的硬件设置、软件管理和人员培训等多方面提出了更高的要求。此外，由于新的GMP在很大程度上也是指欧盟和世界卫生组织的GMP，所以称之为“国际GMP”也是恰当的。严格来说，液体“灭菌和过滤”过程是指最终灭菌方法(包括热灭菌)由于产品的不稳定性而不能被采用，并且要求滤液无菌的过程。由于无菌保证固有的高风险，新的药品生产质量管理规范与国际药品生产监管法规一样，非常

2、重视灭菌和过滤。通过比较中外GMP法规的要求，从四个方面总结了新GMP对液体灭菌和过滤的相关规定，并提出了解决方案；在文章的后半部分，我们将对目前业界广泛关注的灭菌过滤器(装置)的验证工作应考虑的项目做一个更详细的陈述和列举。灭菌方法决策和灭菌过滤的内在风险目前，在总结长期药学实践经验的基础上，中西药品监管部门规定了各种批准的药品灭菌方法，并提出了决策的顺序和原则以及风险判断的原则。新版药品生产质量管理规范在“附录1无菌药品”中设置了“第11章灭菌技术”，其中第62条规定：“灭菌可采用湿热灭菌、干热灭菌、离子辐射灭菌、环氧乙烷灭菌或过滤灭菌。”本条规定明确了“灭菌和过滤”是一种可选的灭菌方法，

3、本条还规定了附录1后续条款中提及的“灭菌方法”和“灭菌过程”的范围。关于制药实践中上述灭菌方法的选择顺序，新药品生产质量管理规范附录1第61条规定“无菌药品最终应尽可能加热灭菌，”，欧盟药品生产质量管理规范附录1“无菌药品生产”第83条也有相同表述。在接下来的“第12章灭菌方法”中，新版GMP的排列顺序是从湿热灭菌、干热灭菌、辐射灭菌、环氧乙烷灭菌到过滤灭菌，这也与欧盟GMP附录1的排列顺序一致。根据上述规定，灭菌方法的决策可以通过EMA颁布的灭菌方法决策树更直观、更形象地进行总结。决策树指出，在所有的灭菌方法中，终端热灭菌法应该是首选，即无菌药品的最终产品应该灭菌；当由于产品成分的热不稳定性

4、而不能采用过度灭菌的热灭菌条件时，应考虑其他最终灭菌方法和/或无菌保证水平(SAL)的参数，这些方法和参数已经过验证并符合法律法规的要求；只有当产品不能耐受上述最终灭菌条件时，才考虑将灭菌过滤技术与无菌操作相结合来生产药物。如果产品不能耐受灭菌过滤，或不能进行灭菌过滤，最大风险的生产过程是无菌配药和灌装(密封)。中国新的药品生产质量管理规范附件1第75条第(1)款规定：“能够最终灭菌的产品，不得以过滤灭菌代替最终灭菌。”欧盟GMP附件1第110条规定.蒸汽灭菌应该是目前可用的灭菌方法中的首选。”都表示灭菌和过滤过程的风险相对较高。因此，为了降低风险，新药品生产质量管理规范附录1第75条第(2)

5、款规定：“建议安装第二个灭菌过滤器过滤液体介质。”“无菌药品生产中使用的所有灭菌方法，如湿热灭菌和干热灭菌，都应根据法律法规的要求进行验证。作为一个比热灭菌风险高得多的过程，验证它的必要性和重要性是毋庸置疑的。”董伟，波尔中国生命科学部监管事务经理液体灭菌(等级)过滤器的定义目前，在上述高风险步骤灭菌和过滤中使用的核心设备液体灭菌(等级)过滤器的定义已被各国监管机构统一认可，并已写入国家标准、GMP法规或指南。在中国药典(2010年版)第二部分和第三部分的附录中，灭菌法下的“过滤灭菌法”规定：“过滤器孔径的定义来自过滤器对微生物的截留，而不是平均孔径的分布系数。”它还规定，用于灭菌过滤的液体灭

6、菌过滤器的过滤效率应达到每平方厘米有效过滤面积不少于7的微生物对数减少值(LRV)，并且通常使用的挑战微生物是假单胞菌缺陷(假单胞菌属，ATCC19146)。在无菌工艺生产无菌药品工业指南(以下简称无菌药品工业指南)(2004年)的“过滤效率”一节中，灭菌过滤器的标准挑战方法与中国药典一致。美国ASTM MF-838标准目前被认为是确认和验证液体灭菌级过滤器的微生物拦截效率的标准。除判断标准与上述规定一致外，还规定了具体的挑战方法、实验设备设置和挑战微生物鉴定。完整性检测虽然灭菌(级)过滤器是根据微生物的截留效率来定义的，但微生物挑战实验是一种破坏性的方法，它会污染符合GMP要求的生产场所和制

7、药生产中使用的过滤器，因此不可能将其用作日常制药生产中的监测手段。因此，完整性检测作为拦截效率指标的重要性不言而喻。新药品生产质量管理规范附录1第75 (3)条规定：“使用灭菌过滤器后，必须立即用适当的方法检查并记录其完整性。”欧盟GMP附录1第113条规定：“需要在过滤前和使用后立即通过适当的方法确认无菌过滤器的完整性”EMA解释说：“过滤器的完整性应在使用前、消毒后和使用后进行两次测试。”美国食品和药物管理局的无菌药品行业指南(2004年)指出：“过滤器的完整性测试可以在使用前进行，并应在使用后定期进行。”目前，国内外诚信检测法律法规的主要区别在于，在检测时点，制药企业需要利用产品和工艺知

8、识进行风险评估，并根据不同时点诚信检测的不同目的，在药品生产过程中科学设置检测点。灭菌前的完整性测试将确认具有正确精度的完整滤芯已正确安装在过滤器外壳中。灭菌后完整性测试提供与灭菌前测试相同的信息，并能更好地解释灭菌过程中滤芯是否损坏。执行灭菌后完整性测试时，应采取措施确保系统下游保持无菌。过滤后，完整性测试可以发现过滤过程中过滤器的泄漏或穿孔。诚信是一种身体测试。在过滤过程中，过滤膜的孔隙率变化和大量颗粒造成的大孔堵塞可能分别对过滤后的扩散流法和泡点法的完整性测试值产生“正”影响，即使完整性测试值“优先”，从而导致药品生产厂家判断掩盖过滤缺陷。如果过滤前存在此缺陷，则滤液可能是非无菌的。基于

9、这一考虑，了解过滤前后的完整性测试值非常重要。比较过滤前后完整性测试值的变化，有助于药品生产企业判断上述现象是否发生，并指导药品生产企业评估该现象是否有影响以及影响的程度，从而有效降低灭菌和过滤的潜在风险。关于完整性测试的另一个要点是，正如美国食品和药物管理局无菌制药行业指南(2004年)所指出的，“成品过滤器的完整性测试限值应与细菌拦截验证研究的数据一致。”也就是说，完整性检测的限值需要通过实验方法与过滤器的细菌截留效率相关联，以便完整性检测的测量数据及其限值可以作为过滤器截留效率的“指标”和控制标准，并作为无菌药品生产中的质量控制手段。为节省篇幅，请参考SFDA药品认证中心最新药品GMP指

10、南(无菌药品)中“10.6灭菌过滤器”的详细说明，了解“冗余”设置的灭菌等级过滤器的完整性判断，与单极设置的区别，以及何时才是真正的“冗余”设置。图3细菌拦截装置示意图液体灭菌过滤器和灭菌过滤过程的确认和验证新的药品生产质量管理规范中有五条关于液体灭菌过滤器和灭菌过滤过程的规定，即附录1第41条：“过滤器不应尽可能多地脱落纤维。含石棉的过滤器是严格禁止的。过滤器不得因与产品反应、物质释放或吸附而对产品质量产生不利影响。”第62条“灭菌可以通过湿热、干热、离子辐射、环氧乙烷或过滤灭菌进行。每种灭菌方法都有其特定的适用范围，灭菌过程必须符合注册批准的要求，并应经过验证。”第63条：“在任何灭菌过程

11、投入使用之前，必须使用物理检测手段和生物指标来验证其对产品或物品的适用性以及所有部件的灭菌效果。”第七十五条第四款；“过滤灭菌过程应经过验证，过滤一定量的药液所需的时间和过滤器两侧的压力应在验证时确定。对任何明显偏离正常时间或压力的情况都应进行记录和调查，并将调查结果归入批次记录。”第75条第(5)款：“同一规格型号的灭菌过滤器的使用期限应予核实，一般不得超过一个工作日。”欧盟GMP附录1第112 115条与中国新GMP相似。作为一种特殊的商品，药品应该以一种高度保证的方式生产，以满足所有预定的标准。无菌药品生产中使用的所有灭菌方法，如湿热灭菌和干热灭菌，都应根据法律法规的要求进行验证。灭菌和

12、过滤过程作为一种比热灭菌法风险高得多的工艺过程，其必要性和重要性不言而喻。我国新的GMP在这方面与国际标准接轨，提出了更严格的要求，这显然是非常正确的。液体灭菌过滤器的验证通常分为三个阶段：核心验证、连续验证和过程验证。核心验证核心验证是指液体灭菌过滤器的制造商和制药企业的供应商在完成某一类型过滤器的开发后，投入商业销售前应进行的一系列确认和验证工作，主要包括：用标准实验方法进行的细菌截留实验，以确认过滤器是否具有灭菌等级；在此阶段，通过实验建立完整性极限与细菌截留效率之间的关系；水和有机溶剂用于研究溶解情况，以评估过滤器对实际应用中可能与之接触的产品的潜在影响；湿热灭菌条件下过滤器的坚固性；

13、构成过滤器的结构材料是否符合特定国家标准的要求，如美国药典88法中弹性部件、塑料和聚合材料的体内生物安全试验。在完成本阶段的工作后，供应商应总结数据并形成文件，该文件将在将来提供给使用这种过滤器的制药企业。制药企业在选择过滤器和审核供应商时，需要在这一阶段获得并审查工作和文件。持续验证持续验证是指供应商在工业大规模生产过程中为确保每批过滤产品符合设计要求和工厂标准而开展的工作，主要包括：每批样品进行的细菌截留试验，以确认完整性和细菌截留效率之间的相关性持续有效；取样检测过滤滤液的理化指标，如总有机碳、颗粒物、酸碱度、内毒素和电导率；蒸汽灭菌条件下取样过滤器的坚固性；完成对该批号中每个过滤器完整

14、性的检查。同样，在此阶段的工作完成后，供应商应将结果汇总成文件并发布。该文件应与售出的成品过滤器一起到达最终用户处，它是该批产品的质量证明文件。过程验证过程验证是指研究过滤过程在特定的过程条件下能否达到预期的使用目的，且不会对药物造成不良影响，并形成书面证据的过程。与前两个阶段不同，负责这部分工作的人是过滤器的用户，即制药企业。工艺验证主要包括：真实产品和工艺条件下的细菌截留实验；过滤器与真实产品的兼容性；模拟产品条件下的溶解物质研究；以产品为润湿液的完整性测试(可选)；过滤器对产品吸附的研究(可选)；对滤液进行理化指标测试，项目与上述“连续验证”中所列项目相同；使用用户灭菌设备和/或循环测试

15、灭菌过滤器的坚固性。除最后两项外，上述验证研究可能需要特殊设备、经验丰富的人员和数学模型等。正如美国食品和药物管理局的无菌制药行业指南所说：“如果复杂的过滤器验证超出了用户的能力，测试通常由外部实验室或过滤器制造商完成。”在制药生产中使用灭菌过滤器时，虽然上面已经描述了直接相关的过程验证，但是制药企业仍然需要注意与过滤器相关的过程验证的普遍性相关的一些其他要求。相关项目如下：确定灭菌和过滤工艺条件的验证工作与选择其他生产设备和确定生产工艺相同。灭菌过滤器的选择和过滤工艺参数的确定，如过滤一定量的料液所需的时间和第二侧的压力，也需要通过验证研究来确定。与灭菌相关的验证：一、过滤器灭菌效果的验证。过滤器由聚合物材料制成，是不良导体，滤芯为通孔结构，由于传热和置换饱和蒸汽和空气的影响，可能会影响杀菌效果。因此，用户需要验证用户开发的过滤器的灭菌周期，以确认灭菌效果。Ii .使用特征重复使用的验证。虽然液体灭菌过滤器设计为一次性使用，且国内外法律法规不推荐重复使用液体灭菌过滤器，但液体灭菌过滤器的重复使用在我国还是很普遍的。在某些情况下，如果重复使用是合理的，则需要进行