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文档简介

1、蛋白质传记电泳，蛋白质的结构和性质，蛋白质由一个或多个多肽链根据每个特殊组合形成具有完全生物活性的分子。蛋白质是良性电解质，在等电点pI时蛋白质分子本身的正电为零，通常在偏酸性溶液中带正电，在碱性溶液中带负电。温度、pH、化学因子等容易引起蛋白质变性。分离纯化方法，传记游泳：蛋白质是良性电解质，在一定的pH条件下，蛋白质带有电荷，不同蛋白质的电荷种类和数量不同，因此在电场中运动的速度不同，因此分离蛋白质。聚丙烯酰胺凝胶传记电泳(页):有两种茄子不添加十二烷基磺酸钠(SDS)的改性SDS-页和SDS的非改性页。聚丙烯凝胶，丙烯酰胺(Acr)和交叉剂甲基双丙烯酰胺(Bis)在催化剂N，N，N，N-

2、甲基二胺(TEMED)和过硫酸铵(AP)的作用下聚合的三维网状结构的凝胶。凝胶光圈随着BisAcr比率的增加而变小。比例为1:20牙齿最小，一般实验根据1:29配方，可以分离出差异约3%的蛋白质。特点，透明度，弹性，机械性能，化学性质稳定性，与分离物不同，对pH和温度变化的化学反应不稳定，几乎没有吸附和传记渗透作用，样品用量小，灵敏度高，10-6g凝胶孔径可调节，分辨率高，SDS-page，蛋白质和SDS分子十二烷基硫酸根具有负电荷，SDSSDS还可以用这种方法测量蛋白质的分子量，因为它将蛋白质形态变为长椭圆杆，长度与分子量大小呈正相关。根据凝胶系统、缓冲液的pH值和凝胶孔径的差异，分为连续凝

3、胶系统和不连续凝胶系统连续系统。在传记灵机系统中，缓冲液pH值和凝胶浓度相同，传记粒子在电场作用下很大程度上依赖于电荷和分子筛效果。不连续系统：缓冲液离子成分、pH、凝胶浓度和前卫梯度都不连续，带电粒子在电场中游动具有电荷效应、分子筛效应、富集效果，因此分离带的清晰度和分辨率优于电子，目前应用最广。有效移动率：MCL-m p-mgly-，gly-，p-，cl-，Gly-，p-，cl-，cl-，cl-，cl-。蛋白质带的负电荷越多，从阴极移动到两极的速度就越快，从而分离出其他蛋白质。分子筛效果：聚丙烯腈是网状结构，凝胶浓度越大，网状孔越小；凝胶网状孔大小和蛋白质分子大小是一个阶段的大小，因此蛋白

4、质分子有筛分作用，分子越大，阻力越大，移动速度越慢。(大卫亚设，美国电视电视剧，蛋白质组)，三种茄子物理效果，浓缩效果：浓缩凝胶的凝胶浓度小，孔径大，将更薄的样品添加到浓缩胶中，样品移动速度更快。分离橡胶孔径小，样品移动缓慢。凝胶孔径的不连续性阻止了样品的移动，压缩成窄带，最终样品几乎可以同时进入分离胶并分离。PH6.8的凝胶缓冲系统：先行离子或快速离子：HCl牙齿解体的C1-后行离子或缓慢离子：Gly-(甘氨酸等电点：5.97)蛋白质P-速度介于两者之间，走到传记灵动C1-牙齿的最前面，离子浓度低，形成离子浓度。，进入分离胶时凝胶的pH值(8.8)牙齿显着增加，甘氨酸大量分解，有效迁移率超过蛋白质，在氯离子后面移动，不再形成高压梯度

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