基因工程(一轮复习)

1、基因工程，最新的试验纲1 .基因工程的诞生()。 2 .基因工程原理和技术(包括PCR技术)。 3 .基因工程的应用()。 4 .蛋白质工程科学()。 5 .实验： DNA的粗提和鉴定。 一基因工程的基本工具和操作过程，1、基因工程的基本工具，(1)限制性核酸内切酶催化剂(限制性酶催化剂)源：主要是从生物中分离纯化. 作用：识别特定部位两个核苷酸之间的并切开。 结果：生成或平整终端。 原核、特定的核苷酸序列、磷酸二酯类化合物结合、粘性末端、下图所示，EcoR限制酶催化剂识别的盐化学基序列说明了切断位点在中间的Sma限制酶催化剂识别的盐化学基序列存在切断位点在中间的限制酶催化剂。 (2)DNA连

2、接酶作用：切断限制性酶催化剂的DNA片段。 类型与DNA分子、大肠菌群、粘性末端、粘性末端和平、末端、磷酸二酯类化合物结合、(3)载体、其他载体：噬菌体诱导体等结合。 运载体的作用：携带外来DNA片段进入接纳体细胞球。 双链环状DNA分子，限制酶催化剂切割，切割部位，标识牌基因，动植物细小病毒，(1)基因工程两种工具酶催化剂的化学本质分别是什么？ 职业生涯的种类是什么？ 提示受限酶催化剂、DNA连接酶的化学本质均为蛋白质。 载体的种类有质粒(常用)、噬菌体诱导体、动植物细小病毒等。 (2)限制酶催化剂为什么不切断自各儿的DNA？ 限制酶催化剂有专一性，即限制酶催化剂只能识别特定的盐化学基序列，

3、限制在特定部位截断的酶催化剂截断自身的DNA，是因为存在于原核生物的该酶催化剂的识别序列和识别序列被改变。 合适的质粒是。 从图中可以看出，质粒没有标识牌基因，与不适合作为运载体的质粒标识牌的基因都有限制核酸内切酶的识别位点，使用该酶催化剂会破坏标识牌基因，所以都不应作为运载体选择。 2 .基因工程的基本操作步骤，(1)目的基因的获得目的基因：主要指向的基因可以是有用的因子。 查询密码蛋白质、金刚特罗尔、基因活拉力赛、mRNA逆转录、DNA音乐合成器、(2)基因表达运载体的基因工程核心目的是：使目的基因表达，使云同步实现目标基因表达并发挥作用。 基因表达运载体的组成在接纳体细胞球中稳定存在，可

4、以遗传，下一代，RNA多聚酶，转录，转录，目的基因，建构过程，(3)将目的基因导入接纳体细胞的受体细胞种类不同，导入方法不同，请对同种限制酶，DNA结合，农杆菌转化法项分别进行说明分析、RNA多聚酶、反转录酶、Taq酶催化剂DNA多聚酶、DNA连接酶、DNA酶催化剂遗传信息的翻译，PCR中DNA解链cdna live拉力赛的构建，基因突变过程中RNA聚合酶、逆转录酶和Taq酶的作用使磷酸二酯键的数目增加， DNA多聚酶和DNA连接酶的同时，DNA酶催化剂的作用使磷酸二酯类化合物键的数目减少，遗传信息的翻译使肽键的数目增加，PCR中DNA链的解链使氢键的数目减少。 两个过程都不影响磷酸二酯类化合

5、物键的数量。 cDNA实时拉力赛的建构需要反转录酶，磷酸二酯类化合物结合的数量增加，2.(教材P4寻根改编)基于你所知的知识，可以分析原核生物存在限制酶催化剂的作用是什么？ 提示原核生物容易受到自然段外来DNA的入侵，而生物在长期进化过程中形成完整的防御反应历程，防止了外来病原体的侵害。 限制酶催化剂是细菌的防御工具，当外来DNA入侵时，利用限制酶催化剂切断外来DNA，确保自身安全。 因此，限制性酶催化剂在原核生物主要是通过切断外源DNA使其失效，达到保护自身的目的。3.(教材P6侧栏思考题解答)请思考。 有什么条件可以作为“分子搬运车”工作？ 提示可进行自我复制、有一个或多个切断部位、有标识

6、牌基因、对接纳体细胞球无害等。 1.(2016年全国课题)一个质粒载体如图所示，如果将外来DNA插入Ampr或Tetr中，对应的基因就失去活性(Ampr表示氨西林抗性基因，Tetr表示抗四环素抗性基因)。 用BamH酶催化剂切断该质粒载体后，与用BamH酶催化剂切断得到的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接感受态大肠菌群，结果发现有些大肠菌群没有性状转换。 所感受态的大肠菌群有包含插入了环状目的基因、质粒载体、目的基因的重组质粒的大肠菌群3种。 (1)质粒载体作为基因工程的工具应该具备的基本条件是回答2点就可以了，作为基因表达运载体，除了满足上述基本条件以外，还需要启

7、动子和终止子。 (2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，上述4种大肠菌群细胞球中，未被感受态的和仅含有环状目的基因的不能区别。 原因是连“什么”和“什么”的细胞球都不能区分。 其原因是，在上述筛选的基础上，筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠菌群的单菌落时，还需要含有的固体培养基。 (3)在基因工程中，某些噬菌体可以被改造为运载体，作为其DNA复制所需的原料，可以自主复制，并需要能够稳定地保存在接纳体细胞球中的特征的重组DNA的识别和选择需要标记基因(2)在含氨苄青霉素的培养基中，只能生长具有Ampr的大肠菌群。 另一方面，由于Ampr位于质粒上，未感受态的仅含有环状目的基因的大肠菌群细

8、胞球没有Ampr，因此不能在培养基中生长，仅含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠菌群由于具有Ampr，因此不能在培养基中生长。 由于目的基因的插入破坏了质粒载体的Tetr，含有插入了目的基因的重组质粒的大肠菌群不能生长在含有抗四环素的平板上，可与只含有质粒载体的大肠菌群区别开来。 (3)噬菌体是一种细小病毒，没有细胞结构，不能自主合成DNA，需要通过宿主细胞球完成DNA复制。 答案(1)可自我复制，标识牌基因(2)两者都不含氨西林抗性基因，该培养基上插入了不含质粒载体的目的基因的重组质粒(或含重组质粒)两者都包含氨西林抗性基因，该培养基上含有抗四环素(3)接纳体细胞，2 (1) 图

9、中的工艺使用的工具酶催化剂的特征是： _ _ _ (2)图中的工艺使用的工具酶催化剂是_ _ _，(3)图中的过程需要用_ _ _ _ _ _ _溶液处理农杆菌使其处于接受状态。 (4)图中的工艺原理是： (5)检查基因工程是否成功。 必须首先检查，这是目的基因能否在真核细胞中稳定地遗传的关键.请参考。 然后，用“_ _ _ _ _ _ _ _法检测目的基因是否转移了对应的mRNA。 最后，该方法检测目的基因是否已被翻译成蛋白质。答案(1)识别特定的脱氧核苷酸序列，在特定部位切开DNA分子(2)DNA连接酶基因表达运载体的建构(3)氯化钙元素(4)植物细胞球的万能性(5)在转基因生物的染色体上

10、插入目的基因抗原抗体杂交或(1)。 解释基因组文库和部分基因(2)解释PCR技术的原理：体外DNA复制的必要条件：铸造模型DNA、引物、4种脱氧核苷酸、热稳定DNA多聚酶(Taq酶催化剂)过程：经DNA热(9095 )修饰、分解为单链并蒸发制冷(5560 )、(3) 基因表达运载体解释如下： (4)农杆菌转化法原理植物受损时伤口分泌物将农杆菌中Ti质粒上的TDNA转化成接纳体细胞球，整合成接纳体细胞球染色体DNA (如果将目的基因插入Ti质粒的TDNA中， 目的基因被一并带入)，试验点二基因工程的应用和为了改善蛋白质工程科学畜产品的品质而使用的转基因动物生产的转基因动物用于脏器移植等。 (2)

11、植物基因工程：利用转基因植物(如抗虫棉)、_转基因植物(如转基因烟草)和培育转基因植物(如耐寒番茄)的转基因改良了植物(如新花色矮牵牛)。 生长速率、药物、供体、抗虫、抗病、抗逆、质量；(3)比较基因治疗与基因诊断：基因表达、正常基因、互补盐化学基对、DNA探针、2 .蛋白质工程科学；(1)概念理解操作：或基因合成。 结果现有蛋白质或制备。 目的：根据人们对蛋白质功能的特定需要，进行分子设置修订。 基因修饰、修饰、新蛋白质、蛋白质结构，(2)操作过程从预期蛋白质中修订预期推测，产生相应(基因)基因表达所需的蛋白质。 其程序流程图表明，功能、蛋白质结构、氨基酸排列顺序、脱氧核苷酸序列、1 .蛋白

12、质工程科学操作计程仪序列的基本思维方法与基因工程不同基因工程遵循中心规律，并由DNAmRNA蛋白折叠生成功能，基本上生产自然界中存在的蛋白质。 蛋白质工程科学以特定蛋白质的功能蛋白质应具备的高度结构蛋白质应具备的折叠日式榻榻米状态，找出氨基酸排列顺序对应的脱氧核苷酸序列的思维方法而推进。 2.(教材P26横栏思考题目解答)你认为改造天然蛋白质，应该直接操作蛋白质分子，还是通过操作基因来实现？从基因的操作提示，确实应该实现天然蛋白质的改造，主要原因如下： (1)哪些天然蛋白质如果直接改造蛋白质，即使改造成功，改造的蛋白质分子也不能遗传。 (2)基因改造比直接改造蛋白质容易操作，难度甚小。 1.(

13、2015全国卷，40 )生物体内已知有由305个氨基酸组成的转波特酒蛋白质(p )。 如果将p分子中的158位丝氨酸转化为亮氨酸，将240位的谷氨酰胺转化为苯丙氨酸，变化的蛋白质(P1 )不仅保持p的功能，而且具有酶催化剂的催化活性。 (1)从上述资料可以看出，要改变鸡蛋清质量的工作能量，可以考虑改造鸡蛋清质量。 (2)根据p基因排列，获得P1基因的途径有修饰基因或合成基因，获得的基因表达遵循中心法则，在中心法则不同的分子之间的遗传信息流动，即：(3)蛋白质工程科学也被称为第二代基因工程，其基本途径是：从预期的蛋白质功能出发，解决(1)氨基酸排列顺序(或结构) (2)PP1DNA和RNA (或

14、遗传物质) DNA、RNADNA、 RNA蛋白(或转录、逆转录、翻译) (3)设定蛋白质的结构推定氨基酸排列顺序功能请回答有关这种抗虫棉培养的问题。 (1)抗虫毒蛋白基因是从芽孢杆菌中获得的，获得该基因所必需的酶催化剂是： _，其酶催化剂所作用的化学键是： _ _ _ _ _ _ (2) 将含有抗虫毒蛋白基因的基因表达运载体导入棉体细胞球的一般方法是：成功接受基因表达运载体将棉体细胞球培育为新株所必需的生物科技。 (3)在抗虫棉研制过程中，利用标记基因可以快速检测出基因表达运载体是否已导入棉花细胞球中，而即使基因表达运载体已导入棉花细胞球中，也不能确定转基因过程成功。 因此，在本项目工程的最后

15、阶段，需要进行一系列的检查。 例如，以放射性同位素标识牌的蛋白质作为探针，在棉花的细胞球中加入特定的纯种棉花细胞球，就能检查棉花细胞球是否能产生抗虫毒蛋白质。 (4)中国西北部分地区年降雨量小，适合种植少数草本植物，但种植转基因抗虫棉受到硬规定，结果导致减产。 这种情况主要违背了生态工程学的_原理。 答案(1)限制性核酸内切酶催化剂(限制性酶催化剂)磷酸二酯类化合物结合(2)农杆菌转化法植物组织培养(3)包含目的基因的DNA片段的目的基因和从目的基因转录的mRNA抗体(4)的协调与平衡、蛋白质工程与基因工程的比较、PCR冷却、(2)PCR反应过程、变性、9 50、盐化学基互补对、延伸、Taq、DNA多聚酶；(3)结果：上述三阶段反应完成后，一个DNA分子变成一个DNA分子，重复次数的PCR反应过程均在中间完成。双、PCR放大器、2.DNA的粗提取与鉴定，(1)实验原理、0.14、NaCl、二苯胺、试剂、(2)操作流动、DNA、蒸馏水、不同浓度的NaCl溶液、蒸馏水为鸡血细胞的低渗透液，水分大量进入血细胞内，使血细胞破裂，而(2)用植物细胞球提取DNA需要加入洗衣粉和食盐，它的作用是什么？ 提示洗衣粉是几种络离子清除剂，可溶解胞质膜，有利于DNA的释放。 食盐的主要成分是NaCl，有利