注射剂灭菌工艺

1、谈论注射灭菌过程的验证，主讲人：李新成杭州天行空气质量检测有限公司，1。灭菌过程验证的必要性，以及与灭菌安全相关的药物伤害。美国：1971年3月，7个州的8家医院发生了405例败血症。中国：2006年8月，“克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液”事件涉及十几个省市的160余起严重不良反应。八人死亡。注意：所有导致药品损坏的产品都通过了无菌检查。灭菌过程验证的必要性。无菌检查的局限性1:无菌的定义理论上：无菌没有任何活的微生物。事实上，不可能证明产品中没有活的微生物。不可能对整批产品进行100%的检验。结果只是基于“可能性”的判断。无菌检查用培养基有其局限性。只检测细菌和真菌。对结果的判断是基于它是否在培

2、养基中生长。培养条件(如温度和时间)是有限的，我们的工作环境和操作都处于相对无菌的状态，因此有必要对灭菌过程进行验证，无菌测试的限制2:产品污染率。 无菌试验的取样量和无菌试验的“通过”率可用以下数学公式表示：P=(1-q)n q:产品污染率P:无菌试验的通过率n:无菌试验的取样量根据药典规定的瓶取样量，假设该批产品的污染率为，那么该批产品“通过”无菌试验的概率就是灭菌过程验证的必要性。 让我们来看看，当固定污染率为0.1%，抽样20瓶时，无菌检查合格率为：(1-0.001)20=98.0%，检出感染菌的概率为2.0%，当抽样1000瓶时，无菌检查合格率为：(1-0.001)1000=36.7

3、%，检出感染菌的概率为63.3%，当抽样3000瓶时，无菌检查合格率为：(1-0.001) 共识：如果产品是无菌的，就不能说无菌产品的无菌保证不能依赖于最终产品的无菌检查，而是依赖于在生产过程中采用合格的灭菌技术、严格的GMP管理和良好的无菌保证体系。 灭菌技术的验证是保证无菌的必要条件，验证后灭菌技术才能正式用于生产。无菌灌装产品批次的开始、结束、重大故障和调整后，美国药典每天最多24小时应对灌装产品进行无菌检查。最终灭菌产品的样品应取自灭菌柜中最冷的点。不同灭菌柜灭菌的产品应进行灭菌检验。灭菌过程验证中的几个常用术语，3.1。无菌保证值：中国药典、美国药典和欧洲药典均规定最终灭菌产品的无菌

4、保证水平不得超过微生物污染概率的百万分之一；对于采用无菌生产工艺的产品，微生物污染的概率小于1/1000，数值4、2和D是在一定温度下杀死90%微生物(或残留率为10%)所需的灭菌时间。3.z值：降低lgD值所需的升高的温度，也就是说，将灭菌时间降低到原来的1/10所需的升高的温度，或者在相同的灭菌时间内杀死99%的微生物所需的升高的温度。4.f值：给定Z值在一定灭菌温度(t)下产生的灭菌效果与给定Z值在参考温度(T0)下产生的灭菌效果相同的等效时间。f的值以分钟为单位。注：参考温度在121时为F0，在170时为FH。灭菌过程验证中常用的几个术语。过杀法F012微生物残留概率10-6 6，残留

5、概率法8 F0 12微生物残留概率10-6 7，无菌生产过程的无菌保证一般只达到10-3级，灭菌过程验证中常用的几个术语，8灭菌率是指在一定温度t()下对lmin进行灭菌所获得的标准灭菌时间L LF0/FTD121/DT10(T121)/Z 9，也就是给定的等效灭菌时间F0 F0=ft10 (t121)/z=T10 (t121)/10，51999年8月，欧盟正式开始实施灭菌方法选择决策树，用于在考虑各种复杂因素的情况下，辅助选择最佳的灭菌方法。6.决策树用于灭菌方法选择溶液剂量的产品，产品是否能在121分钟内灭菌15分钟，产品是否能在121分钟内灭菌，F08分钟，达到SAL 10-6，使用高压

6、釜12115分钟，是，否，处方是否能通过微生物滞留过滤器过滤，无菌灌装和灌装，通过湿热灭菌F08分钟，结合灭菌过滤和无菌工艺，是，否，是，否，7。非溶液剂型、半固体或干粉产品的灭菌方法选择决策树，产品是否可以在160干热灭菌120分钟，产品是否可以在另一个时间和温度下在160干热灭菌120分钟，产品是否可以用其他非干热方法灭菌，如电离辐射，吸收最小剂量25KGY，采用另一个替代时间和温度，标准循环干热灭菌可达SAL 10-6。产品是否可以用经过验证的稍低辐射剂量进行灭菌(见ISO11137)，最小辐射吸收剂量为25KGY。是，否，处方是否可通过微生物滞留过滤器进行过滤，并使用经过验证的辐射剂量

7、进行灭菌，是，否，无菌配药和灌装，灭菌和过滤与无菌工艺相结合。风险越大，需要提供的证据就越多。10.灭菌过程验证要求，验证内容：空载热分布、满载热分布、热渗透试验、微生物挑战试验(剩余概率法)、灭菌前微生物污染水平-数量和耐热性-过程控制，找出冷点，在室内均匀/重点分布多个温度探头，重复运行有代表性的灭菌程序，记录各点的温度变化曲线。通过比较各点温度与平均温度的差值，计算各点的温差，确定冷点；11.空载热分布试验，根据空载试验结果，找出加载方式下的冷点更接近实际情况；12.满载热分布试验、热渗透试验，根据热分布(空载、满载)试验结果测量产品的实际温度和F0值。进一步确定实际样品(或模拟样品)的

8、冰点。重要标准的平均冷点F0为F02分钟，13，14，用于热渗透试验。注意：检查同一品种不同包装规格中不同浓度对热渗透的影响，测试最大和最小包装规格，测试不同灭菌温度下的最小和最大负荷，测试最高温度15。 实践证明，具有一定污染量和D值的微生物可以通过该工艺进行杀灭-生物指示剂-根据D值计算接种量-孢子植入产品放置在冷点-含孢子产品在运行灭菌程序后应通过无菌检查和微生物挑战试验，上述试验一般应连续进行三次。 空载和满载热分布试验检查灭菌设备的特性和条件。热渗透和微生物挑战测试检查执行特定灭菌过程时灭菌设备给予产品的F0值，以及微生物孢子。灭菌前对产品进行微生物控制和监测的原因是国际规范的要求：

9、世界卫生组织992版标准第17.50条规定了微生物的控制标准注射液灭菌后的无菌保证值与灭菌前产品的微生物污染程度和被污染细菌的耐热性有关。在灭菌前检查和控制微生物污染是评价产品无菌性的先决条件。灭菌前控制微生物污染是控制产品热原污染的重要手段。灭菌前产品的微生物控制和监测标准目前，欧洲一些大容量注射剂生产企业采用的标准如下：每100毫升药液中不超过100个污染菌。在设定的灭菌程序下，被污染细菌的耐热性(即D值)不会导致灭菌产品被微生物污染的概率大于106。灭菌前产品的微生物控制和监测方法(1)取样在正常生产过程中，从每批产品的开始、中间和结尾各取一瓶胶囊产品，在灭菌前进行微生物监测和检验。样品

10、应该从预先消毒和标记的瓶子中取出。(2)检测方法：检查污染程度：首先用灭菌的吐温5充分润湿0.45米滤膜，然后定量过滤药液，将滤膜转移到营养琼脂平板上，3035培养37天，计数。耐热性试验：使用另一个0.45米滤膜，用灭菌的吐温5充分润湿后，过滤剩余的药液样品。将滤膜转移到装有待监测无菌产品的试管中，在沸水浴中煮沸30分钟，然后在3035的巯基乙酸盐肉汤中培养，观察是否有耐热细菌生长。灭菌前对产品进行微生物控制，当污染水平超过标准时，识别被污染的细菌，调查被污染细菌的来源并采取相应的纠正措施。当耐热试验发现药液被耐热菌污染时，应通过时间煮沸法测定被污染菌的D值或与已知生物指标的D值进行比较，然

11、后根据灭菌后的F0值和被污染菌的耐热性评价产品的无菌性。如果样品受热后的测试结果为无细菌，则意味着产品中没有耐热孢子，美国药典1211年版24中规定了灭菌器的温度均匀性标准，当干热灭菌器在不低于250的温度下空载运行时，室内各点的允许温差范围为15。根据USP 24，当在121下灭菌时，温度测量点之间的温差允许在1。JB200012003规定，在大容量和小容量注射消毒器的热量分配试验中，冷点温度与腔室平均温度之差为1；在热渗透试验中，冷点F0和室内平均F0之差为2分钟。干热灭菌和热原去除标准(BP1993版)规定，以灭菌为最终目标的干热灭菌系统的最低FH值必须大于17060分钟。从干热中去除热

12、原时，实际暴露温度和时间必须等于25030分钟。注：25030分钟热原去除效果FH900中国药典2005年版规定：160170120分钟；170180 60分钟；250 45分钟(可去除热原):250 45分钟可去除热原效果FH1365。隧道灭菌干燥机热原去除标准。口服液瓶灌装联动线隧道灭菌干燥机JB20007.32004规定，口服液瓶和抗生素瓶应在隧道高温区存放至少5分钟。消除热原效应FH1276；4根据安瓿隧道灭菌干燥机JB20002.32004，安瓿应在隧道高温区保存至少4分钟。消除热原效应FH1021；表面冷却隧道干燥机的标准：FH1365(根据药典)表明，在过去，许多人将循环蒸汽灭菌

13、误认为终端灭菌。事实上，循环蒸汽灭菌方法应基于无菌生产过程(灭菌和过滤，严格控制与药液接触的设备、仪器和环境的微生物污染水平等)。)，而循环蒸汽加热只是无菌生产过程的补充手段，灭菌器检定过程中遇到的几个问题。隧道式加热炉炉膛温度分布差异很大，大部分加热管损坏；进气和回风的调整。这个问题是在宁波的一家制药厂遇到的。国内企业灭菌过程验证中普遍存在的缺陷，如没有包装规格和装载方法，没有验证每种产品、每种包装规格和每种装载方法，使用点温度计监测温度，没有温度探头校准记录，验证后的灭菌过程与实际过程不一致，没有验证最差的灭菌条件，仅针对生产线，未经产品验证的验证合格标准集达不到无菌保证水平(SAL)10

14、-6。 国内企业灭菌过程验证普遍存在缺陷，生物指标使用不规范，缺乏生产无菌药品所需的检测仪器。 企业微生物实验室能力薄弱，专业人员缺乏菌种分离和鉴定的条件和能力。无菌生产过程中没有进行培养基灌装和微生物截止试验。注塑生产中常见问题的问答。1.问：清洗、烘干、灌装联动线正常运行时，玻璃瓶是经过隧道烘箱灭菌后灌装的。然而，当灌装机出现故障或处于持续维护状态时，由于联动线的限制，隧道式烘箱中的一些玻璃瓶将处于高温区。如果瓶子停留很长时间，会影响瓶子本身吗？答：如果你想看材料，可以做验证，烘烤后做耐酸碱性测试。2.问：当热空气使烤箱温度循环时，会出现失控现象。如何解决？答：您可以检查温度传感器是否有故

15、障，电磁阀是否工作正常：1。更换温度传感器和2。更换温度控制器。注塑生产中常见问题的问答。3.问：隧道式烘箱中玻璃瓶冷爆的原因与风速有关吗？玻璃瓶因温差或外力而爆裂。这个问题是由温差引起的，温差可能是由风速引起的，也就是说，它冷却不均匀，或者在移动过程中接触到低温物体，特别是热传导快的金属物体。此外，所用玻璃瓶的质量不是很好，所以建议选择正规的制造商。4.在验证湿热灭菌器的热量分布和热量渗透时，如果在三次验证中发现柜内的冷点不同，应做什么？答：一般来说，空载热分布的冷点应在确定的位置附近，否则可能是设备、压力、空气置换不完全、蒸汽品质等原因造成的。对于加载热穿透，大容量注射的冷点(LVP，10

16、0毫升)位于产品的几何中心和产品的底部，但需要验证和确认。冷点的位置在小体积注射中并不典型，因为溶液的加热速率几乎与灭菌器的加热速率相同。此外，容器的方向也将影响冷点的位置，并且当容器旋转或翻转时可能没有可辨别的冷点。如果负荷不变，容量相同，蒸汽渗透没有障碍，等等。冷点仍然不能重现，应检查设备、工艺、压力和蒸汽质量中可能存在的不确定性。注塑生产中常见问题的问答。5.热渗透试验中的模拟样品是指实验室中的小批量样品，它的概念是什么？答：热穿透试验中的模拟样品是指热穿透性能与真实样品一致的样品，而不是实验室的小批量样品。注塑生产中常见问题的问答。6.灭菌前如何检测微生物污染水平和耐热性？答：微生物污染的程度通常通过膜过滤来拦截，然后将膜转移到固体培养基的表面，进行培养和计数。应注意过滤的体积和捕获的微生物数量，以确保足够的检测率(足够的过滤量)和可计数性(太多的捕获微生物无法计数)。耐热性将带有截留微生物的滤膜放入含有相同产品药液的试管中，在水浴中煮沸15分钟或更长时间，并检查药液的无菌性。如果是阴性，则通过，为阳性，表明污染菌是耐热菌，因此有必要进一步测量D值。超过99%的样本