微生物培养标本采集与送检ppt课件

1、临床微生物标本采集、转运与处理,孙怀超,1,.,检验科的工作就像法医，法医是为公安提供 证据，而检验科是为临床医生诊断、治疗提 供依据。数据直接影响医生的诊断，所以检 验结果是否准确的重要性不言而喻。,如何看待微生物检验工作,2,.,俗话说“巧妇难为无米之炊”，如果送检的标本本身就有问题，再先进的设备、再高的检测技术，结果可谓“差之毫厘，谬之千里”。由此可见，检验结果的质量控制非常地重要。 质量是检验科之本，质量控制目的就是要有一个质量可靠的检验结果,质量控制,3,.,实验室质量控制环节,分析前,分析中,分析后,4,.,实验室不同阶段误差发生率,5,.,定义:按时间顺序，从临床医生开出检验医嘱

2、开始，到检验分析过程开始时终止的步骤，包括检验要求、患者准备、原始样本采集、运送到实验室并在实验室内部的传输。分析前质量控制是最易出现问题、也是最难控制的环节。 标本采集是分析前质量控制最关键的环节！,何谓分析前程序？,6,.,1.早期采集（使用抗菌药物之前） 2.无菌采集 3.及时送检 4.容器无菌无消毒剂 5.标明来源和检验目的,采集的基本原则,7,.,临床标本的分类,8,.,血液属于天然的无菌体液，血流感染的细菌种类往往比较单一，血培养结果对于明确诊断意义重大。同时，血培养的检测结果受标本采集及运送干扰的影响较小，更容易进行质量控制。 痰液、尿液、粪便等标本属于非无菌标本，有较多的正常菌

3、群生长，且检测结果受采集方法，运送方式等多方面的因素影响，其检测结果对明确诊断的意义相对较小。 无菌体液是最有意义的病原学检测标本,各类标本的区别,9,.,我院标本送检情况,10,.,近两年标本错误率,11,.,1.手卫生（洗手或卫生手消毒） 2.皮肤消毒程序 严格执行以下三步法: （1）用75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上； （2）然后用1%-2%碘酊作用30秒或10%碘伏作用60秒，从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达3cm以上； （3）最后用75%酒精脱碘，待酒精挥发干燥后采血。 新生儿及对碘过敏的患者，只能用75%酒精消毒60s，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。,1.血培养标本

4、采集：,12,.,2.培养瓶消毒程序：70%乙醇擦拭血培养瓶橡皮塞，作用60秒后用无菌棉签清除塞子表面乙醇 3、用注射器无菌穿刺取血后直接注入血培养瓶（切勿换针头）或严格按厂家推荐的方法采血，轻轻颠倒混匀防止血液凝固，立即送检。,13,.,4、成人每套（2瓶）应采血16-20ml，不同部位采集23套，儿童患者因为血液中病原菌浓度较高，血培养量无需等同于成人，对于婴幼儿患者推荐的采血量每瓶不少于2ml,采血量不超过体重的1%，由于婴幼儿患者厌氧菌所致菌血症比较罕见，婴幼儿血培养可以仅用需氧瓶。,14,.,1、严格无菌操作避免污染 2、从两侧上肢静脉采血，“双瓶双侧”采血培养。 至少做到“双侧双瓶

5、”。必要时从下肢静脉采血做 第三套血培养。,采血注意事项：,15,.,3、切忌在静脉点滴处采血，不宜从静脉导管或埋置针中采血 4、采血后先注入厌氧瓶后注入需氧瓶，当采血量不能满足推荐，应先分配需氧瓶再厌氧瓶，因为菌血症中专性需氧菌比专性厌氧菌高。,采血注意事项：,16,.,采血后应该立即送检,如不能立即送检，可室温保存，切勿冷藏。若冷藏有些苛养菌如流感嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟氏菌、淋球菌等遇冷易死亡；若环境温度高于35，瓶内细菌繁殖后浓度过高时，感应细菌生长的底物被耗尽，放入培养仪后因为不再产生生长变化而出现假阴性。,3. 标本运送及保存：,17,.,什么时候采血最好？ 为什么要采集足够的血液？

6、为什么每套标本中应包含厌氧培养？ 为什么要求多次采血？,思考的问题,18,.,尽可能在患者寒战开始时、发热高峰前0.51h内采血 在患者接受抗菌药物治疗前采血 如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血培养,什么时候采血最好？,19,.,为什么要采集足够的血液？,采血量是影响灵敏度最关键因素，在一项研究中，成 人血培养采血量2-30ml，检出率与采血量呈比例增长，而且成人只做1瓶血培养所得结果是很难正确解释的。 但并非越多越好，超过一定数量的采血量会稀释培养瓶的肉汤，所以血液与肉汤的最佳比例为1：51：10,20,.,便于解释血培养结果是污染还是真正感染 保证兼性厌氧菌的生长及厌氧

7、菌的培养 报告时间提前：需氧瓶有9%比厌氧瓶早1天报告结果 ，厌氧瓶有5%比需氧瓶早1天报告结果。因此只做需氧菌不做厌氧菌培养, 有5%的血培养延迟1天报告阳性结果,为什么每套标本中应包含厌氧培养？,21,.,（1）菌血症有“持续性”和“暂时性”之分，多次采血可提高阳性检出率，减少漏检； （2）血流感染有原发性与继发性之分，许多继发性血流感染来源于肺、尿路、肝脏、肠道与创口，血培养阳性有助于循环外感染的诊断。 （3）菌血症患者多数为间歇性，病原菌周期性出现在血液中，在无菌时期不管临床症状严重程度如何，患者血液中的病原菌浓度水平相当低，因此要求多次采血，但24h内一般不超过3次。,为什么要多次采

8、血？,22,.,污染菌和感染菌的确认,23,.,脑脊液,标本采集： 严格的无菌操作进行腰椎穿刺采集，必要时也可从小脑延髓池或侧脑室穿刺采集。采集后收集于3个无菌容器中，第1管用于细菌学检查，第2管用于化学或免疫学检查，第3管用于常规检查。 若仅收集到1管脑脊液，首先送往微生物实验室，之后再做其它检查；,24,.,标本采集后应立即送检，若延误送检，标本应室温保存，但保存时间不应超过24小时，某些细菌具有自溶酶，放置时间过长易自溶死亡。脑脊液标本不可放置冰箱中保存，以防某些细菌死亡（如脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌、嗜血杆菌）,标本运送与保存,25,.,痰 液,1.采集方法： 自然咳痰法：留取前刷牙，用

9、清水漱口3次，以去除口腔内大量杂菌，之后先深呼吸再用力咳出呼吸道深部痰液吐至一次性痰杯内，盖好盖子。如患者痰液较深或者黏稠难以咳出时可诱导排痰。最佳痰液采集量为210ml，最低不少于1ml。,26,.,特殊取痰法：由临床医生采集，主要有：纤支镜抽吸法（采集支气管肺泡灌洗、经支气管镜直接吸引或防污染样本毛刷）,27,.,2.痰标本的运送、保存、验收:,尽快送至实验室内（2小时），运送延误可导致肺炎双球菌、流感嗜血杆菌等苛养菌由于不适应外界环境和自溶现象而死亡。 延迟送检或待处理标本应置于1020室温保存，既可防止苛养菌死亡也能避免杂菌快速生长，保存时间不可超过24小时。,28,.,1、正常人尿液

10、是无菌的，而尿液细菌培养最大的问题是杂菌污染。正常人外尿道有大肠杆菌、葡萄球菌等存在。而这些细菌又是尿路感染中常见的病原菌。因此要作好尿液细菌学检查，首先应注意标本收集问题。,尿液培养相关问题,29,.,2、尿液经尿道排出时会受到尿道内正常菌群的污染,所以需要定量接种、合理评价才能判断培养的细菌是否与尿路感染有关。 3、另外,由于绝大多数的泌尿系感染是由肠杆菌科细菌引起,而此类细菌的硝酸盐还原实验为阳性,故可参考尿常规检查中的硝酸盐还原实验来推断是否有细菌感染。,30,.,中段尿培养简单易行，又无感染的危险。通常取晨起第一次尿送检。尿液在膀胱内停留6-8h以上（给细菌足够的繁殖时间） 尿标本必

11、须用无菌带螺帽的容器采集，容器上标有培养型，而非尿常规尿杯！,中段尿培养,31,.,采集方法：尽量取早晨第一次尿液,取尿前用肥皂水清洗外阴（女性）或尿道口（男性），再用无菌水洗净，用无菌纱布擦拭，然后排尿弃去前段尿，留取中段尿 10-15ml，置于无菌容器内。婴幼儿不少于1ml，尿量不足，培养结果不可靠。,中段尿培养,32,.,标本采集后立即送检，通常标本采集后到接种的 时间不能超过2小时，尤其气温较高的夏季，保存 时间应适当缩短或4冷藏保存，但冷藏时间仍不 得超过8小时。注意：考虑淋病奈瑟菌感染时，采 集的尿液应该立即送检，并且不得冷藏。,标本的运送与保存,33,.,脓肿标本：,标本的采集与

12、送检： 闭合性脓肿：勿用拭子取样。脓肿表面清创，用注射器抽取脓肿内容物；或将脓肿切开引流后，取脓肿壁的一部分进行培养。,34,.,开放性损伤和脓肿：尽量去除表面覆盖物和渗出液，并用拭子用力擦拭损伤基底或边缘取样。取自表浅切口感染的标本不进行厌氧培养。伤口进展边缘处活检标本检测厌氧菌、分枝杆菌和真菌最佳。 采集后立即送检,35,.,采集前清洁、消毒尿道口及外阴，尿道分泌物可将无菌棉拭子伸入尿道捻转拭子采集。 阴道分泌物采集时可用无菌棉拭子自阴道深部或阴道穹隆后部，宫颈23cm处，转动并停留1030s取分泌物。 淋球菌培养需保温及时送检，衣原体、支原体等培养无法及时送检时应4保存。,生殖道标本送检,36,.,用药前自然排便，采集脓血、黏液部分23g。 液体便取絮状物12ml,置无菌容器内送检。 如排便困难或婴幼儿患者，可用直肠拭子法采集标本。 采集后立即送检，若不能及时送检，在4冰箱中保存不超过24小时,粪便标本,