PCR整套SOP文件

1、程序文件的管理和维护制度1 .目的：基因诊断程序文件是指导临床基因扩增检查活动的法规文件，是内部控制文件，不得擅自修改、复制。 保持现在的有效性和持续适应性，通过条件的变化确立修正程序。2 .建立根据：2.1 iso/iec170250-1999 检测和校准实验室能力的通用要求卫生部临床基因扩增检验实验室技术验收表（check list）是基于iso/iec17025设计的2.2卫生部临床基因扩增检验实验室管理暂行办法和临床基因扩增检验实验室工作规范3 .适用范围：临床检查标本4 .内容：程序文件必须包含文件名、编号、页码、总页数示例：标题文件名程序文件的管理和维护。编号日期年月日版本号负责部

2、门页共页页面底部有作者：批准人：生效日期：年月日。5 .编制和职责：程序文件由pcr实验室负责人主持编制、修订、审查，保持现行有效性。 科主任批准实施并公布，负责说明。6 .发行和所有者的责任：程序文件准许课主任发行，发行和回收登记签字，由pcr实验室的负责人保管，全室工作人员认真学习，了解内容，熟悉其各规定，程序文件的执行情况纳入实验室目标管理，进行奖励处罚所有者调动的情况下，必须回收那个程序文件。7 .修订：科工作人员可提交程序文件的修改提案，文件的修改应由有关人员研究。 pcr实验室的负责人根据条件的变化提出是否修改的决定，小的修改可以在修改页进行，修改文件经课主任审批后，填写程序文件的

3、修改页。 文件需要重大修改时，pcr实验室负责人可以改版。 新版程序文件经科主任批准生效，回收销毁旧版，签字发行新版，保证现场唯一最新的使用版本。实验室事务管理和清洁制度1目的：保证实验室日常内务管理和清洁工作顺利进行。2范围：实验室相关人员和医院清扫工人。3内务管理和清洁制度3.1内务管理制度a .实验者抱有强烈的时间观念，按时上班，不迟到、早退。b .进入实验室的工作人员应遵守实验室单一流程的规定，禁止反向走。c .本室以外的工作人员未经许可，不得进入实验室。d .实验室职员必须严格遵守各规章制度和操作规程。f.实验结束后，做实验室的清洁卫生和消毒工作。g .确保实验室的安全。 员工每天工

4、作结束前要认真检查实验室的门窗、水和电，休息日要检查实验室的仪器、设备，指定确保安全的责任。h .实验室是工作学习的地方，与实验无关的不能放在实验室内，实行实验室和生活区分离的原则，不能在室内吸烟和吃零食。i .不得从事在实验室看报纸、看小说等非实验性的工作。j .实验室人员必须有意识地遵守上述规定，违反科室有关规定的，予以处罚。3.2内务清扫制度实验室工作人员：a .实验室地面要平坦清洁，通道有利于通行，没有无用物品的障碍。b .合理规划实验室内的物品，把秩序井然、无用和使用效率低的东西放在仓库里，便于找到常用的东西。c.抽屉、橱柜和文件要做好标记，以便于识别。d .实验结束后，用4%“84

5、”的消毒液清洗柜台，用紫外线灯消毒。e .使用的移液管每天用75%的酒精擦拭，用紫外线灯消毒30分钟。f .实验中发生标本和试剂飞散时，必须立即用4%“84”消毒液滴下，用厕纸30分钟后，用酒精擦拭，再用紫外线灯消毒。g .每天实验前用缓冲器上的开关打开各区的通风系统，各区的实验结束后，打开该区移动紫外线灯消毒实验台，紫外线灯每天打开3060分钟。h .每天工作结束前关闭门，关闭窗户，检查空调和机器是否关闭。医院清洁工：a .每天的实验结束，直到紫外线灯的消毒时间充分为止，依次关闭各区的紫外线灯进行记录。用b.4%84”消毒液依次清洗3区实验台和地面。 各区的清扫消毒器具专用，不可混用。 注意

6、用单向流动的原则进行清扫。c .收集各区的废弃物，集中到医院处理。d .每周一，四人把工作服交给医院洗衣房洗涤消毒，不同实验区的工作服隔离洗涤。4 .参照表：附表18: pcr实验室出入人员登记表实验室的安装和管理1、目的：建立实验室的合理设置和科学管理，防止实验污染，保证检测结果的可靠性。2 .适用范围：有关实验室的管理、设置、设备、工作流程和维护等必须遵守规程。 核心是防止分析前、分析中和分析后的实验污染，实际工作中主要是防止扩增片段(扩增产物)、天然核酸、标本间、试剂和消耗品和不适当的操作方法污染，特别是实验室扩增的pcr产物不污染新检测标本中的pcr系统。3、职责：由临床pcr检查实验

7、室工作人员共同遵守，互相催促。4 .程序：4.1实验室分区设置a .本实验室的布局如图01所示。 实验室采用实时荧光定量pcr技术作为临床基因诊断的主要手段，实验室分为试剂准备区、标本制备区和放大及产物分析区三个独立实验室，在连接部设置缓冲区，更换工作服、鞋套等。 各车间分别配备了专用设备、器械、辅助设施、消耗品、清扫用品、办公用品、专用工作服，有明确的区别表示。 在进入各个工作区进行基因工作扩增时，必须严格遵守第一区的试剂储藏和准备区第二区的标本调制区第三区的扩增区这一单向顺序。b .各车间有专用仪器设备、办公用品、工作服、实验消耗品和清扫用具等，不得混合。c .各区有不同颜色的工作服，一区

8、为蓝色，二区为粉红色，三区为白色。 进入实验室，必须更换本室有颜色标识的工作服，穿上一次性的鞋盖。4.2标本接受区的工作制度a .我的房间每周一、三、五日开展项目，为了避免在标本的调制过程中频繁进入，标本的接收要在标本收集期间进行，收集后要放在保管标本的专用冰箱里。b .每天工作结束前收集标本，检查登记后，将标本送到标本调制区。 出门后那天不准进实验室。c .每天的标本登记记录，必须填写工整的详细情况，使用本室专用的带本室标识的记录书、纸和笔。4.3试剂准备区的作业制度a .实验者进入该区，必须穿该区专用的蓝色工作服。 在实验中必须戴手套、一次性鞋套。b .在缓冲器中打开该区域的通风系统c .

9、记录温度湿度计的读数。d .记录冰箱温度计的读数，绘制冰箱的质量管理图(图02 )。e .根据当天的标本检查登记表，取出当天实验中必须调制使用的试剂，剩下的试剂马上保管在冰箱中。f .每周星期一清点库存试剂，看看是否有过期或接近过期的试剂，或者优先用于废弃处理和排序，避免浪费，记录试剂的详细保存情况。g .把准备好的试剂放入搬运盒。h .每次的实验记录，为了写工整的详细情况，必须使用本室专用的带本室标志的笔记本、纸和笔。i .实验结束后，关闭该区通风系统，打开紫外线灯消毒3060分钟，记录紫外线灯的使用情况。4.4标本调制区的工作制度a .实验者进入该区，必须穿本室专用的粉红色工作服。 实验中

10、使用一次性鞋套，戴手套，手套必须经常更换。b .在缓冲器中打开该区域的通风系统。c .从传动箱中取出试剂，放入冰箱冷冻室的试剂收纳区域暂时保管。d .检查前打开生物安全柜的送风和排气按钮，打开紫外线灯消毒1530分钟。e .记录温度湿度计的读数。f .记录冰箱温度计的读数，绘制冰箱质量控制图。g .核对标本的编号、类型和标本数。h .根据试剂盒的要求，在生物安全柜中进行检体的分解和提取处理，在桌面上采样，采样后，以高速15000rpm离心数秒后，将其放入转移箱中。i .使用本室专用的经灭活无菌处理的取样器和带元件的吸引器。j .使用的离心管、吸引器必须放入装有4%“84”消毒液的废液罐。k .

11、使用本室专用的带本室标志的记事本、纸和笔。l .患者的样品应该有生物传染性危险品。m .标本处理结束后，收拾好柜台，用4%的84消毒液全面擦拭生物安全柜内的柜台，打开紫外线灯消毒30分钟。n .关闭所有设备，记录设备的使用时间和运行状态。o .实验结束后，关闭该区的通风系统，打开紫外线灯消毒3060分钟，记录紫外线灯的使用情况。4.4放大区的工作制度a .实验者要进入该区，必须穿该区专用的白色工作服。 实验中使用一次性鞋套，戴手套，手套必须经常更换。b .在缓冲器中打开该区域的通风系统。c .把从传动箱接收的离心力经常放在反应管上放大。d .放大分析后，记录结果并打印报告。e .在得到当天的室

12、内品质管理结果后，绘制在室内品质管理图(图03 )中。f .关闭放大装置，小心地取出放大的反应管，装入密封的塑料袋中，放入医疗垃圾袋中，记录机器的使用时间和运转状态。g .实验结束后，关闭该区的通风系统，打开紫外线灯消毒3060分钟，记录紫外线灯的使用情况。本文参见sop文档的最后一个附件图表，参见以下图表实验室平面布局图-图01冰箱质量管理图-图02室内质量管理图-图03实验室工作人员的组成和培训程序1、目的：保证实验室有足够数量的合格人员，完成相应工作。2 .适用范围：本程序适用于实验室人员配置、管理、训练和评价。3 .程序：3.1人员要求：3.1.1本实验室工作人员应毕业于医学检查专业或

13、相关专业，具有大专以上学历。3.1.2实验室工作人员必须参加卫生部或省临检中心进行的ps技术训练，并取得合格证。3.1.3对新进入本室的人，未取得pcr技术训练合格证的，应在实验室持有训练合格证的上级技术人员的指导下进行实验工作，实验报告书必须由资格者发行，在最短时间内取得上冈训练合格证。3.2人员配置：3.2.1实验室必须根据工作需要配备足够的工作人员。 目前实验室有副主任技师1人、主管技师1人、初级技师2人、取得训练资格者2人。 应该根据工作量的增加和业务发展的需要，适当地增加工作人员。3.2.2课主任必须在pcr实验室人员配置、监督质量、实验室所有人员条件下批准的情况下，在最短时间内取得

14、上冈训练合格证书。 工作人员在上班前必须掌握pcr实验室的管理文件和要求，由实验室主任检查。 实验室主任具体实施技术训练、评价和管理。3.2.3实验室主任解决实验室管理、技术指导、临床沟通和技术难题。 实验室主任不在车间时，必须指定临时负责人。3.3人员培训和评价：3.3.1实验室负责人(或委托人)每年都参加卫生部pcr室间质评价总结会。3.3.2实验室工作人员每隔12年至少参加一次pcr技术省级或国家级继续教育项目，并参加相关学术交流会议。3.3.3安排没有取得上冈训练合格证的工作人员在适当的时间内参加技术训练。3.3.4实验室工作人员每年至少应提交一篇本专业相关学术论文或综述作为年度业务审

15、查的依据之一。3.4人员管理在实验室，制作了所有员工的技术资料，包括学历、工作资格、发表论文、研究成果、研修等相关资料的复印件。4 .参照表：4. 1实验室工作人员一览表(附表02 )4. 2人员训练计划和训练记录表(附表05 )。设备的申请、购买、安装和管理流程1目的：保证仪器的正常购买、安装、使用，确保实验室仪器设备得到妥善管理。2适用范围：基因扩增检测实验室所有仪器设备。3申请、购买和安装步骤3.1器械的购买申请根据实验室的需要由实验室的工作人员提交，并向实验室的负责人书面报告。3.2实验室负责人填写仪器设备采购表，经科领导小组会议批准后，报医院设备科统一采购。3.3仪器购买到达后，由医

16、院设备科的人员和实验室的人员一起，厂家设置在实验室。3.4设备后，经厂家工程师培训、设备科人员确认后，填写设备设置表后，设备科和实验室备份设备的维护使用文件后，实验室负责人可以签字使用。4管理程序：4.1基因扩增检测实验室的主要仪器设备必须制作文件。 主要仪器有xxxxx放大器、高速离心机、普通低温冰箱、移液管、超洁净台、生物安全盘等。4.2设备文件包括设备名称、制造商名称、型号、序列号、接收日期和有效日期、当前放置场所、接收时的状态、校正和鉴定日期和结果、下次校正的日期、维护和维护计划、故障记录等，需要设备使用说明书和其他技术资料的复印件。4.3仪器发生故障时，应当做好记录和处理意见。 不能

17、正常使用时，填写修理申请书，提交医院设备的修理人员或相关专业的修理机构处理。4.4仪器需要工作状态的标志，正常使用者要贴绿色标签。 处于故障修理保留状态的用户使用黄色标签，用户不应该贴红色标签。 定期进行校正或检定的机器需要校正或检查日和下次校正或检查日的记录。4.5仪器设备报废申请后，由有关人员一并处理。4.6基因扩增检测实验室仪器设备实施分区使用，不得混合。4.7本实验室的所有仪器、设备均不专用出租。本文参考sop文档的最后一个图表来介绍下表。主要机器设备一览表(附表03 )。设备校正记录表(附表08 )。实验室试剂、消耗品购买管理流程1 .目的：规定购买试剂的原则、检查程序和试剂的正确储藏。2 .范围：适用于本实验室购买的诊断试剂盒、实验消耗品。3 .责任：本方案由科主任执行，由室负责人合作。4 .工作程序：4.1试剂的购买和管理4.1.1试剂购买原则：试剂的购买必须按照coner的有关规定“质优价廉”，购买的基因诊断试剂必须有三证(生产许可证、产品登记证、经营许可证)。4.1.2试剂购买程序：试剂制造商的确定：首先由具体项目的操作者提出初步意见，