酶联免疫吸附试验

1、酶联免疫吸附试验(ELISA )、目录、一、二、三、四、酶联免疫吸附试验(ELISA )概要、酶联免疫吸附试验(ELISA )应用场面、酶联免疫吸附试验(ELISA )操作步骤、全自动酶联免疫站、一、酶联免疫吸附试验(ELISA 基本概念：抗原：抗原进入人或动物体内后刺激机体免疫系统的免疫应答，使动物产生抗体，形成致敏淋巴细胞，与抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质。 抗体：用抗原刺激动物的免疫系统后，免疫系统分泌的能量和相应的抗原特异性结合而成的免疫球蛋白。 酶结合物：酶与抗体、抗原、半抗原在交联剂的作用下结合而成的物质，不仅能催化抗体抗原特异性免疫反应，还能催化酶反应，显示生物扩增作用。

2、 一、酶免疫吸附试验(ELISA )概述、酶免疫吸附试验，简称ELISA是实验室最常用的测定方法。 酶是一种能催化化学反应的特殊蛋白质，其催化效果超过现在所有的人工催化剂。 ELISA是一种将酶催化剂的扩增作用和特异性抗原抗体反应结合起来的微量分析技术。 酶标记抗原和抗体后，既不影响抗原抗体反应的特异性，也不影响酶自身的活性。 因此PS具有准确性高、检测时间短、廉价、判断结果客观、结果容易记录和保存等优点，适合大量标本的检测，广泛应用于食品安全检测、医疗检测和免疫实验分析等领域。一、酶联免疫吸附试验(ELISA )概要、基本原理：抗原抗体的特异性结合及抗原或抗体的酶标记。 一、酶联免疫吸附试验

3、(ELISA )的概要，酶联物与对应抗原或抗体结合后，可通过添加基质的颜色反应来判定有无免疫反应，并且颜色反应的浓淡与标本中对应抗原或抗体的量成比例，由已知浓度的抗原或抗体的颜色反应的浓淡制作标准曲线，它测定对象：可以是抗原，也可以是抗体。二、酶免疫吸附试验(ELISA )的应用场合，一、食品、饲料：农药残留(有机磷农药、氨基甲酸酯农药)、兽药残留(青霉素、氯霉素、庆大霉素等)、添加剂(三聚氰胺、瘦素、孔雀石绿等)、真菌毒素检测(2、医疗卫生：检查科、肿瘤科、妇科、儿科、疾病管理中心、传染病医院、体检中心、肿瘤医院等(乙肝二半、甲肝抗体、梅毒、艾滋病甲氧西林、性激素六项等)。3、畜产业：猪口蹄

4、疫、猪青耳病、禽流感H5N1抗体、鸡传染性贫血、三、酶免疫吸附试验(ELISA )操作流程、试验流程：样品、标准品及试剂准备、样品、孵化、洗板、显色、比色、结果分析、三、酶免疫吸附试验(e 例如：饲料中黄曲霉毒素B1的检测：样品、标准品及试剂准备、样品(标准品/样品、酶结合物)、孵化、清洗板、基质溶液a、b，加入终止液，吸光度测定、结果分析、粉碎称量提取(振动、离心)样品稀释、等待测定、 黄曲霉毒素B1酶免疫试剂盒：取出冰箱，室温(药品冰箱(28)、孵化、三、酶免疫吸附试验(ELISA )操作流程、天平、粉碎机、电动振荡器、离心分离机、移液管例：饲料中黄曲霉毒素B1的检测、三、酶饲料中黄曲霉毒

5、素B1的检测：样品、标准品和试剂的准备、样品(标准品/样品、酶标准剂)、孵化、清洗板、基质溶液a、b，加入中止液，光密度(OD )测定、三、酶免疫吸附试验(ELISISA )的操作流程、饲料样品、标准品和试剂的准备、样品(标准品/样品、酶标准试剂)、孵化、清洗板、基质溶液a、b，光密度(OD )测定、结果分析、Or、37、孵化、三、酶免疫吸附试验(ELISA )操作流程饲料中黄曲霉毒素B1的标准品及试剂准备、样品(标准品/样品、酶标准试剂)、孵化、清洗板、基质溶液a、b，光密度(OD )测定、结果分析、孵化、三、酶免疫吸附试验(ELISA )操作流程、饲料中黄曲霉毒素B1的检测：样品、标准品及

6、样品，酶标记试剂)、孵化，放入板，放入基质溶液a、b，放入终止液，放入光密度(OD )测定，结果分析，孵化器，三，酶免疫吸附试验(ELISA )操作流程，饲料中黄曲霉毒素B1的检测：样品，标准品及酶标试剂)、培育、放入板、基质溶液a、b， 中止液、光密度(OD )测定、结果分析、孵化、三、酶免疫吸附试验(ELISA )操作流程，饲料中黄曲霉毒素B1的检测：样品、标准品和试剂的准备、样品(标准品/样品、酶标准试剂)、孵化、加入板，加入基质溶液a、b 结果分析、孵化、三、酶联免疫吸附试验(ELISA )操作流程，ELISA的比色测定主要由酶测定仪进行。 在此，强调以下几点： (1)酶测定器不应该放

7、在阳光或强光下，室温为15-30，使用前将预热器预热15-30分钟，测定结果更稳定。 各种酶测定器的性能不同，使用前请仔细阅读说明书。 (2)比色前用清洁的吸水纸擦去附着在板底部的液体，然后将板正确地放入比色器中，以免生锈。 (3)比色测定时，必须注意酶测定器的波长是否适当调整，使用的过滤器是否正确。 三、酶联免疫吸附试验(ELISA )操作流程，单波长或双波长比色选择的问题：单波长比色通常是对发色有最大吸收的波长，例如450nm或492nm进行比色测定，双波长比色是敏感的波长，例如450nm和非敏感的波长，例如633 因此，双波长比色测定具有可以排除微板本身、板孔内标本的非特异性吸收、指纹、伤痕、灰尘等对特异发色的干扰的优点。、四、全自动酶自由站、1、样品模块2、孵化模块3、洗涤模块4、读取模块5、控制模块(软件)全自动-样品、孵化， 从清洗到数据处理的报告都是自动完成的未污染-直接使用原样品试管和原试剂瓶，去除生物污染和试剂污染的高效-一次处理的样品量多，医院、计生站、疾病对策中心，四、