肿瘤免疫细胞治疗临床应用( 流程)ppt课件

1、肿瘤免疫细胞治疗的临床应用，为什么要进行肿瘤免疫治疗？ 细胞免疫效应细胞毒性t细胞(CTL )肿瘤免疫的主要途径是释放毒性物质，诱发靶细胞上的死亡受体，直接溶解靶细胞，分泌IFN-间接杀伤肿瘤细胞，在机体上发挥免疫监视作用。 是自然杀伤细胞(NK )固有免疫的主要效应细胞之一，是机体防御机制的一部分，不是MHC限制，而是无需调节宿主及其免疫功能。 作用类似于CTL，还可以分泌大量细胞因子调节机体免疫反应。 树突状细胞(DC )等专业抗原可传递给细胞，辅助t、b细胞特异地参与杀伤肿瘤的过程。 免疫逃逸机制，在肿瘤发生时，通过免疫细胞治疗，从根本上提高机体免疫功能，控制肿瘤的发展！ 免疫细胞治疗通

2、过采集成体免疫细胞，达到在体外分离、激活、培养扩增或增加靶向性后回到患者体内，杀死体内肿瘤细胞，打破免疫耐受，激活、增强机体免疫能力的治疗方法。 我们提供的免疫细胞，静脉/灌注：局部注射用0.9%氯化钠注射液稀释的细胞制剂100ml :未稀释的细胞制剂1ml，细胞来源的选择原则，MHC的遗传限制70年代R.M .金纳泽等人在小鼠实验中杀伤t细胞和目标细胞的MHC不一致就没有杀伤作用MHC (主要组织相容性复合体)也被称为HLA基因复合体。 位于动物或人的某对染色体的特定区域，呈高度多态性，只要没有卵和双胞胎，就很难存在MHC完全一致的个体。 在不同细胞表面表达，参与抗原呈递，制约细胞之间的相互

3、识别和免疫应答的诱导。 所有有核细胞表面表达MHC-系分子，MHC-系分子主要表达在APC表面。 DC、CTL细胞优先选择体外外周血来源的免疫细胞，NK的KIR-配体不匹配患者自身的NK由于功能不全，不能识别杀伤肿瘤细胞，影响临床疗效。 kir配体失配，异体NK细胞被活化、扩增。 由于非肿瘤组织缺乏激活NK细胞所需的配体，或者这些激活的配体在肿瘤和非肿瘤组织的表达上有差异，异基因反应性NK细胞可以有效杀伤肿瘤，不损伤正常组织。 脐血来源的优势免疫原性低。 与患者的自体细胞相比，患者自身的免疫功能不影响体外分离和扩增效果细胞的数量。 (DC不能体外扩增) CIK的主要效应细胞是CD3 CD56，

4、具有NK非MHC限制性特征。 DC、CIK细胞可根据患者情况，选择脐带血来源的免疫细胞。 NK细胞优先来自体外外周血的免疫细胞。 免疫细胞治疗原则、免疫细胞治疗筛选标准、适应证：应用常规治疗部分缓解患者治疗后肿瘤完全消失，但有复发、转移风险的传统治疗治疗无效患者。 生物治疗的效果与残留病灶的大小成反比，残留病灶越小，效果越禁忌症： t淋巴细胞病变引起的肿瘤(NK细胞除外)。 由于晚期/肿瘤负荷大的患者恶性病质严重的免疫抑制，疫苗不能诱导有效的抗肿瘤免疫者。 靶向性CTL适应症通过免疫组织化等方法检查活检或手术得到的肿瘤组织，MHC-系分子为阳性的患者。 如果患者不能获得肿瘤组织，患者还没有达到

5、晚期或恶性，可能会接受治疗。 建议进行MHC-系的分子检查。 停止化学疗法和放射线治疗后，末梢血白血球恢复到正常值或者接近正常值(使用白血球上升药的正常值除外)。 靶向性CTL筛选肿瘤抗原治疗CEA、CK19、PSA、AFP、PAP、SCC的血清检测值异常：患者不需要相应的肿瘤抗原免疫组织化检测结果，可以直接接受靶向性CTL细胞治疗。如果上述肿瘤标志物血清检测值正常，患者就必须提供肿瘤组织免疫组织化检测结果，并提供目标抗原靶。 免疫细胞的临床应用预处理、肿瘤患者的免疫耐受状态对肿瘤特异性和非特异性细胞治疗的临床效果有很大影响。 预处理宿主可以纠正免疫抑制的微环境，提高细胞的免疫活性，延长细胞内

6、的生存时间，最终达到最佳临床治疗效果。 淋巴细胞的减少可诱导机体自我稳定增殖，新生的早期t细胞迅速分泌IFN，具有杀伤活性，以排斥肿瘤为媒介。 自我稳定增殖恢复无力的CD8 T细胞的响应能力。 预处理后，可去除生物抑制性细胞，减少内源性淋巴细胞的各种调节性细胞因子，如IL-2、IL-7、IL-15、IL-21等竞争消耗，同时降低输血免疫效果细胞的增殖激活阈值，提高杀伤活性。 目前备受关注的抑制细胞亚群CD4 CD25的调节性t细胞(Tregs )髓系异质细胞(MDSCs )的预处理方案是非清髓性放射治疗、化疗研究吉西他滨降低MDSScs舒尼尼尼尼(索恩)能有效地转移性肾癌患者体内的MDSCs数

7、、免疫细胞的临床应用方案、单细胞治疗方案CIK细胞疗程： 11010/程，即10个细胞疗程：静脉注射治疗方案： 2份、4份、1/隔NK细胞疗程： 5109/疗程，即10个细胞疗程：静脉注射疗程： 2份、4份、1/隔日作为机体自然免疫的主要效果细胞，这里也用于识别、杀伤MHC-系分子显示阴性的肿瘤细胞，控制感染靶向性CTL细胞(不推荐单独应用)疗程： 2108/疗程，即5个细胞疗程：静脉注射治疗方案：选择一次回或两次回，主要可以杀伤、识别对MHC-系分子表达阳性的肿瘤细胞。 靶向性细胞治疗疗程内细胞数相对较少，患者进行常规治疗后，要在机体免疫功能相对稳定的前提下开展，以最大限度地发挥疗效。 DC

8、细胞(不推荐单独应用)疗程：48106/疗程，即48个细胞疗程：肿瘤内注射治疗方案：12 106/次、1/周、4周对体表转移性肿瘤患者，激活自身/供体t淋巴细胞，发挥抗肿瘤效果联合治疗方案(推荐) DC CIK CIK的效果细胞主要有CD3 CD8和CD3 CD56两种，发挥主要功能的是CD3 CD56，该细胞仅占2030%。 为了提高CIK的功能，激活需要抗原呈递的CD3 CD8细胞。 可以选择直流联合应用程序。 PS的应用必须放在PS之前。 NK靶向性CTL利用靶向性CTL识别杀伤MHC-系分子阳性的靶向细胞。 应用NK的非MHC限制性特征，识别杀伤生物mhci系分子阴性细胞。 局部全身治

9、疗路径有体表转移瘤的患者建议DC局部注射其他细胞的静脉回输应用。 向有胸、腹腔恶性液体积存患者的DC局部注入其他细胞的静脉回送应用CIK、NK、CTL可以进行治疗程序量以上的局部腔内灌注静脉回送。 建议在IL-2联合应用细胞治疗的同时治疗IL-2，调整患者的免疫功能，延长细胞体内活性，提高杀伤肿瘤细胞的效率。 可以选择静脉注射的途径，或直接将IL-2注入细胞悬浊液中，与细胞同时输血。 首次应用时，为了观察患者对IL-2的耐受性，推荐剂量为50万单位。如果患者没有明显的副作用和过敏反应，在第二次细胞治疗中，每次输入细胞的同时，可以输入100200万单位的IL-2。 建议疗程的间隔至少进行4个疗程

10、以上的细胞治疗。 期、期患者，建议以六个月为一周期治疗。 期以后的患者，建议以3个月为一个周期进行治疗。 处于病情进展期的患者，建议24周可以进行下一个周期的治疗。 临床治疗时机的选择，有利于手术患者术后、切口愈合后患者的肿瘤负荷显着降低，发挥免疫治疗效果。 去除体内残留的微小残留病灶，预防复发、转移。 迅速提高机体免疫功能，为患者争取下一阶段放射化疗治疗的最佳时期。 建议对CIK细胞进行广泛治疗，然后根据患者情况与其他细胞结合治疗。 可以在放疗患者放疗结束后或放疗期间的放疗后破坏肿瘤基质，有利于免疫细胞到达肿瘤部位。 放疗可促进肿瘤细胞MHC-系分子的表达，有利于DC细胞抗原的识别、加工和提

11、示。 清除循环肿瘤细胞和放疗中脱出的肿瘤细胞，预防复发、转移。 化疗患者可以在化疗间隙进行细胞治疗，例如化疗后57天的骨髓抑制期，细胞治疗后约57天可以进行下一周期的化疗。 化疗后，打破机体免疫耐受，降低Tregs等负面控制因子，有助于发挥免疫治疗效果。 可以去除残留的微小病灶，预防复发、转移。 可以减轻化疗的副作用。 对于不能或害怕化疗的患者，可以单独进行细胞治疗。 去除肿瘤细胞，抑制病情发展。 改善机体免疫功能后，可根据患者情况，尝试化疗治疗。 失去手术、放射治疗、化疗治疗机会的晚期患者可以单独进行细胞治疗。 提高机体的免疫功能。 提高患者的生活质量。 清除肿瘤细胞，控制病情发展，评价疗效

12、，主要评价指标：完全缓解(CR )、部分缓解(PR )、稳定(SD )、进展(PD )总生存期(OS )、无进展生存期(PFS )、治疗失败时间(TTF )的次要评价指标： KPS，QOL肿瘤相关抗原检测： ce CK19等细胞免疫功能检测： t细胞亚群： CD3、CD4、CD8 Treg:CD4 CD25 high、cd4cd25 highfoxp 3c ik:cd3c d56 NK:cd3-cd56细胞因子检测：如TNF-、IFN-，在细胞治疗上治疗前轻轻摇动细胞制剂，避免剧烈振动。 因为细胞有抱团的特性，所以有可能形成微小的絮凝物(成块的细胞)，可以用微弹和其他方法将其分开。 静脉治疗需

13、要输血器。 治疗前后需要冲洗0.9%氯化钠注射液。 点滴时，先以20-30滴/分钟的滴速慢慢地点滴10-15分钟，观察到患者没有不舒服感后，可以以80-90滴/分钟的滴速治疗，建议每个细胞在30分钟内结束点滴。 细胞袋治疗后必须低温保存24小时，如果出现不良反应，应该立即将保存的细胞袋送到实验室进行检查。 末梢血采集的注意事项，通知了实验室的人采血袋/肝素钠抗凝固管的准备。 采血前4h内不应该吃富含高蛋白质和脂肪的食物，要喝糖水，或吃点小饭，以免血液中含有过敏物质。 采集时不输液。 患者外周血白细胞数4109/L。 采集的外周血标本保存在28，避免振动，12小时内由实验室负责人运送。 采集量：

14、 CIK，DC:80100ml NK:50ml靶向性CTL:80150ml，临床典型例，右肺门占位并腰椎转移，右肺无张。 胸闷、心悸、咳嗽、咳痰，痰中有血、腰痛，长时间不能一动不动。 没有进行放疗、化疗治疗，病情恶化。 CIK细胞治疗后：胸部压迫感、腰痛比前逐渐减轻，座位时间比前延长，治疗后25天复查CT。 肺癌晚期(静脉注射)，肺癌骨转移(静脉注射)，病情介绍：患者男，77岁。左肺腺癌经化疗后病情较稳定，无明显临床不舒服症状。 调查了CEA 11.8ng/ml，稍高一点，然后给与“伊利亚特奥沙利铂”两个周期的化疗，再研究了CEA。 治疗：给脐带血CIK细胞3个疗程。 治疗后：探讨CEA 5.

15、9ng/ml，较前明显下降，接近正常范围。 左肺鳞状细胞癌(静脉注射)，病情介绍：“咳嗽，咳痰4月馀”入院，胸部CT提示：左肺门占位； 病例学诊断：腺癌。 前后给予全身化疗3个疗程，治疗前患者一般情况良好，无明显不适，但影像学检查未见明显变化。 治疗：给脐血CIK细胞1个疗程。 治疗后：治疗后两周复查胸部CT显示病情较前好转，结合主管医生的意见认为与CIK细胞治疗有关。 治疗前、治疗后原发性肝癌(静脉注射)，病情介绍：患者男，61岁，慢性乙型肝炎20馀年，因“食欲不振、无力”入院。 住院时腹部CT和MRT均显示肝内多发结节影，分散分布于全肝，AFP持续上升，肝功能A/G一直保持在0.5，给予阿

16、德福韦和护肝治疗，AFP没有明显降低，A/G没有改善。 治疗：治疗脐带血CIK细胞2个疗程。 治疗后：各指标明显好转，3月后恢复正常，但MRT复查，肝内占据比以前明显缩小，AFP恢复正常。 治疗前后比较，卵巢癌肝转移(静脉注射)，病情介绍：患者女性，48岁。 诊断为卵巢癌和肝内多发转移。 CA125 1132U/。 给予“紫杉醇铂”化疗5个周期，化疗后的再检CT显示肝内病灶比以前缩小，无明显变化。 CA125 2223.7U/ml比以前明显上升，临床症状反复。 患者拒绝继续进行化疗。 治疗：给脐带血CIK细胞1个疗程。 治疗后：患者腹痛、乏力感较前明显减轻，饭量较前增加。 已检查CA125 2

17、3.4U/ml并已正常。 转移性恶性黑色素瘤(静脉局部)，病情介绍：患者女，84岁。 因“食道癌胃癌术后7月馀”入院。 前后给予3个疗程的单剂化疗，效果差，病情进展性恶化，相继出现饮食困难、多发转移、食道气管瘀，为解决饮食问题，给予胃瘀术。 之后，由于患者体质差，经不起化疗，所以给“替吉奥”口服化疗，与脐带血来源的CIK细胞治疗合作控制病情。 住院时患者病情稳定，一般情况尚可，KPS评分70分，体检：左颈部4.2x2.5cm淋巴结，质硬，无压痛，活动差。 入院后对左颈部肿瘤进行射频消融术，效果差，肿瘤较前增大。 食管癌多发转移(静脉局部)，治疗：给CIK细胞治疗1个疗程的DC细胞静脉注射1次，在DC细胞颈部肿瘤内注射3次。 治疗后：患者左颈部肿瘤比前缩小约1cm左右。 该患者前后给予CIK细胞治疗9个疗程，每次治疗后生活质量比以前提高，精神状态比以前明显好转。 肺癌和胸腔积液(静脉灌注)，治疗前，患