生物技术制药第2版 第5章 疫苗及其制备技术

1、。第五章疫苗及其制备技术。疫苗，传统概念：由病原微生物(细菌、病毒、真菌等)制成的预防传染病的免疫制剂。)及其代谢物通过人工衰减、灭活或基因工程。世界卫生组织儿童免疫规划表，成人，现代疫苗：治疗性疫苗，非传染性疾病疫苗，学习本章要求，掌握疫苗、基因工程疫苗、联合疫苗的概念和常用疫苗的制备技术；熟悉疫苗的原理、类型、特点和主要用途；了解疫苗发展的历史和趋势，疫苗行业的特点和应用，本章概述了疫苗的组成、作用原理、类型和特点、疫苗的制备方法、疫苗生产的质量控制、疫苗行业的特点和应用。第一节总结，1。疫苗生产“在12世纪，中国开始用人痘接种天花疫苗”，第6版，疫苗可预防疾病的流行病学与预防学，由美国疾

2、病预防控制中心出版)2000。1。疫苗生产中，天花是由天花病毒引起的一种严重传染病：它呈砖状，能抵抗干燥和低温，可用于结痂皮肤、灰尘和衣物。传播途径：吸入或直接接触飞沫。特点：发展迅速，未感染者在感染后15-20天内死亡率高达30%。生产疫苗，预防和治疗天花宋真宗时期，中国(998- 1023):人痘法，吸入天花病人的痂粉预防天花。明代隆庆时期(1567-1572年)，出现了多种接种方法，如涂痘法、痘膏法、干痘法和水苗法。清朝时，顺治死于天花，但康熙继承了天花，有时导致严重的天花。第一，疫苗的生产，1721年欧洲预防和治疗天花，天花的接种方法于1796年传入英国，英国医生詹纳于1798年使用牛

3、痘来预防天花。医学界正式承认“疫苗接种确实是一种有效的免疫方法”。痘苗病毒是通过细胞培养获得的。1。疫苗生产，法国免疫学家路易巴斯德鸡霍乱弧菌减毒株(第一种减毒活疫苗)，1。疫苗生产、巴斯德和狂犬病疫苗异基因传代方法：将狂犬病病毒连续通过家兔获得减毒株。巴斯德在疫苗领域的杰出贡献减毒株的细菌分离培养技术连续传代培养法、高温培养法和异基因传代培养法巴斯德减毒疫苗的发明：为实验免疫学奠定了基础、二、疫苗及其技术发展简史，(1)减毒活疫苗技术，第一次疫苗革命；(2)基因重组疫苗技术，第二次疫苗革命；(3)反向疫苗技术，第三次疫苗革命；(2)疫苗及其技术发展简史。(1)减毒活疫苗技术33，354细胞水

4、平的人工处理使病原微生物失去毒性或降低毒性。例如：卡介苗、卡介苗、炭疽疫苗、狂犬病疫苗等。第二，疫苗及其技术发展简史。药物毒理学：结核分枝杆菌是一种胞内寄生真菌，首次在细胞免疫中被无毒的卡介苗(结核分枝杆菌)感染。经巨噬细胞处理后，其抗原信息被传递给免疫活性细胞，从而使T细胞分化增殖并形成致敏淋巴细胞。当有机体再次遭遇结核分枝杆菌感染时，巨噬细胞和致敏淋巴细胞被迅速激活以发挥免疫功能并引起特异性免疫反应。疫苗及其技术发展简史；(2)分子水平的基因重组技术研究相关基因和蛋白质产品例如：乙型肝炎疫苗(乙型肝炎表面抗原)；(2)疫苗及其技术发展简史；血源性乙型肝炎疫苗：从无症状乙型肝炎表面抗原携带者

5、血浆中提取的乙型肝炎表面抗原经纯化、灭活后加入佐剂。基因重组(转基因)乙肝疫苗：利用转基因技术，构建含有乙肝病毒乙肝表面抗原基因的重组质粒，将其转入酵母(或重组CHO细胞)中表达乙肝表面抗原，在繁殖过程中产生非糖基化乙肝表面抗原多肽，破碎酵母，释放颗粒状非糖基化乙肝表面抗原多肽，纯化，灭活，添加佐剂。疫苗及其技术发展简史，基因工程技术在疫苗领域构建无毒或减毒疫苗的应用，毒素基因突变构建载体活疫苗，将靶基因克隆到临床常用活疫苗中，疫苗及其技术发展简史，(3)反向疫苗技术蛋白水平筛选具有全基因水平保护性免疫应答的候选抗原具体步骤：1。基因组信息分析结合基因芯片筛选候选疫苗成分2。高通量基因重组表达

6、候选疫苗蛋白组分3。免疫保护试验，2。疫苗及其技术发展简史，例如：脑膜炎球菌B首先通过计算机分析脑膜炎球菌B的基因组，找到600个潜在的候选疫苗，在大肠杆菌中表达其中的350个，然后纯化这些蛋白免疫小鼠，其中29个蛋白可以诱导小鼠产生抗体，从而达到预防免疫的效果。第二节疫苗的组成、作用原理、类型和特点。疫苗组合物抗原佐剂防腐剂稳定剂灭活剂缓冲液，盐和其他非活性成分，1。疫苗组合物，1。抗原(ag)疫苗最重要活性成分的免疫原性：刺激特异性免疫细胞的活化、增殖和分化，并产生免疫效应物免疫反应：与免疫效应物的特异性结合产生免疫反应。1.疫苗成分。常用抗原包括：灭活病毒或细菌、活病毒或细菌(减毒株)、

7、病毒或菌体提取物、有效蛋白成分、类毒素、细菌多糖、合成肽核酸、2。佐剂，其非特异性地增强抗原免疫反应或改变免疫反应类型。要求：非冷冻条件下安全、无毒、稳定的机制：改变抗原的物理形状，延长抗原在体内的滞留时间，刺激单核巨噬细胞呈递抗原的能力，刺激淋巴细胞分化，增加扩大免疫反应的能力。首先，疫苗成分，一、疫苗组合物、常用佐剂：用于人体：铝佐剂/MF59(水包油乳剂)动物试验：弗氏完全佐剂/弗氏不完全佐剂。3.防腐剂大多数灭活疫苗使用防腐剂目的：防止外来微生物污染常用：0.01% 0.02%硫柳汞2-苯氧乙醇氯仿副作用：接触性皮炎，过敏性结膜炎，耳毒性，1。疫苗成分。4。稳定剂目的：确保病毒或其他微

8、生物作为抗原存活，并保留免疫原性冻干疫苗中常用的乳糖和明胶。通过灭活剂灭活病毒或细菌抗原的方法：物理方法(如加热、紫外线照射等)。)化学方法(丙酮、苯酚、甲醛等。)对人体有一定的毒性作用，因此灭活抗原后，必须及时将其从疫苗中取出并严格检查，以确保疫苗的安全性。1.疫苗组合物。6。缓冲液和盐缓冲液的类型以及盐的含量会影响疫苗的功效、纯度和安全性，因此它们都有严格的质量标准。1.疫苗组合物。2。疫苗作用原理。当通过口服或注射给身体接种疫苗时，抗原分子刺激身体的免疫系统产生具有高效力和特异性的免疫保护物质。根据免疫记忆，免疫系统迅速产生保护性物质来阻止病原菌的入侵，从而使机体获得针对病原体的特异性免

9、疫并保护它们免受入侵。疫苗的类型和特性(1)减毒活疫苗(2)灭活疫苗(3)亚单位疫苗(4)联合疫苗(5)核酸疫苗(6)治疗性疫苗(3)疫苗的类型和特性(1)减毒活疫苗是在病原体的致病性通过某些方法减弱或丧失后，由完全微生物组成的疫苗产品。特点：可引起无临床症状的感染，但其免疫原性可触发机体的免疫反应，刺激机体产生特异性记忆B细胞和记忆T细胞，实现长期或终身保护。疫苗种类及特点，优点：接种次数少，反应少，免疫效果好(体液免疫、细胞免疫、粘膜免疫)，成本低缺点：稳定性差，毒性逆转现象，环境污染，免疫缺陷患者不能接种、疫苗种类及特点：丧失病原体的传染性，但保留较强的免疫原性和较好的安全性。3。疫苗的

10、类型和特点，优点：稳定性好，反应小，免疫功能低下的人接种疫苗。缺点：需要多次接种，免疫效果差(体液免疫)，需求量大。分类：纯化亚单位疫苗：由单一蛋白或寡糖组成，佐剂合成肽亚单位疫苗：针对病毒/肿瘤/细菌和寄生虫感染的基因工程亚单位疫苗、3、疫苗的类型和特性，基因工程亚单位疫苗，在分离病原体特异性抗原编码基因的基础上，将外源基因转入非致病微生物表达产物，然后通过分离纯化获得特异性蛋白。原核细胞(大肠杆菌)、真核细胞(酵母)活载体疫苗(细菌、病毒)、转基因植物疫苗。3。疫苗的类型和特性。3。疫苗的类型和特点，(4)联合疫苗。通过物理混合两种或多种抗原制成的疫苗制剂。多组合疫苗：用于预防由不同病原微

11、生物引起的感染性疾病的多价疫苗(如DTP):预防由同一病原微生物的不同亚型引起的感染性疾病(如23价肺炎多糖疫苗)。3。疫苗的类型和特性。3。疫苗的类型和特点，(5)核酸疫苗也称基因疫苗，包括DNA疫苗和RNA疫苗。它由抗原编码基因和载体组成，导入生物体细胞后，通过宿主精子细胞的转录系统表达蛋白抗原，诱导宿主产生细胞和体液免疫应答。疫苗的类型和特征DNA疫苗将编码外源抗原的基因插入含有真核表达系统的质粒中，并将其导入宿主细胞以表达抗原蛋白，从而诱导免疫反应。特点：免疫效果好，制备方便，可重复使用，可用于免疫治疗和联合免疫。3。疫苗的类型和特点。3。疫苗的类型和特点。(6)治疗性疫苗是能够通过在

12、感染病原微生物或患有某些疾病的生物体中诱导特异性免疫反应来治疗或预防疾病恶化的疫苗产品。最早的治疗性疫苗：狂犬病疫苗。疫苗的类型和特点，1。基于组分和性质的分类(1)通过蛋白质重组重建的治疗性疫苗改变靶抗原的结构或组合，使其与传统疫苗相似但不同，从而引起患者的功能性免疫反应，破坏和逆转患者的免疫耐受。修饰方法：蛋白质修饰、结构/构型修饰、蛋白质复合物/多肽偶联。三。疫苗的类型和特点，(2)脱氧核糖核酸疫苗：埃博拉疫苗、乙型肝炎疫苗、丙型肝炎疫苗、人类免疫缺陷病毒疫苗等。核糖核酸修饰的树突状细胞(脱氧核糖核酸疫苗)(3)多水平基因修饰细胞疫苗：肿瘤细胞/DC细胞疫苗的制备过程：疫苗的类型和特点，

13、2。根据治疗疾病进行分类，(1)感染性疾病治疗性疫苗，(2)肿瘤治疗性疫苗，(3)自身免疫性疾病治疗性疫苗，(4)移植治疗性疫苗，(5)疫苗的种类和特性第三部分，疫苗的制备方法，灭活全病毒疫苗灭活全病毒流感疫苗，减毒活疫苗皮内注射卡介苗疫苗，基因工程重组亚单位疫苗3354重组乙肝疫苗，生化提取亚单位成分疫苗吸附破伤风疫苗，治疗性疫苗3354前列腺癌疫苗，一般工艺流程灭活的全病毒疫苗流感全病毒疫苗，它是用世界卫生组织(who)推荐的并经国家食品药品监督管理局批准的流感病毒株接种鸡胚，培养，收获病毒液，灭活，浓缩和纯化病毒而制备的。用于预防这种病毒引起的流感。1。灭活流感全病毒疫苗流感疫苗是一种每年接种一次的疫苗，使用特定年份的疫苗来预防高度变异的流感病毒。每种季节性流感疫苗包含代表三种(三价疫苗)或四种(四价疫苗)流感病毒株的抗原：两种甲型流感病毒株，以及一种或两种乙型流感病毒株。嘿。甲型流感病毒最容易变异(抗原转化和抗原漂移)。一场全球性的流感大流行：甲型流感病毒