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文档简介
1、现代生物药物分类:重组DNA技术制造的多肽、蛋白质类治疗剂基因药物:基因治疗剂、基因疫苗和反义药物等。天然生物药物:来自动物、植物、微生物和海洋生物的天然产物。合成与部分合成生物药物。生物技术药物的特性:分子结构复杂;具有种属特异性;治疗针对性强、疗效高;稳定性差;基因稳定性;免疫原性;体内的半衰期短;受体效应;多效性和网络效应;检验的特殊性重组蛋白质分离纯化的方法及目的:1、离心/过滤(去除细胞、细胞碎片、颗粒性杂质) 2、阴离子交换层析(去除杂质蛋白、脂质、DNA和病毒等) 3、40nm微孔滤膜过滤(进一步去除病毒) 4、阳离子交换层析(去除牛血清蛋白或转铁蛋白等) 5、超滤(去除沉淀物及
2、病毒) 6、疏水层析(去除残余的杂蛋白) 7、凝胶过滤(与多聚体分离) 8、0.22um微孔滤膜过滤(除菌)宿主细胞的分类:1原核细胞:常用的有大肠杆菌(分泌能力不足,真核蛋白质常形成不溶性的包涵体,不存在翻译后修饰作用,对蛋白质产物不能糖基化。)、枯草芽孢杆菌(分泌能力强,不形成包涵体,不能使蛋白质糖基化。)、链霉菌(重要的工业微生物。分泌能力强,具有糖基化能力。)等;2真核细胞:酵母(表达产物直接分泌到细胞外,分泌能力强,表达产物能糖基化。)、丝状真菌(很强的蛋白质分泌能力,能正确进行翻译后加工,包括肽剪切和糖基化。)、哺乳动物细胞(表达产物可由重组转化的细胞分泌到培养液中,产物是糖基化的
3、,接近或类似于天然产物。)。影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素:(1)外源基因的计量(2)外源基因的表达效率:启动子的强弱、核糖体结合位点的有效性、SD序列和起始密码的间距、密码子组成(3)表达产物的稳定性(4)细胞的代谢负荷(5)工程菌的培养条件真核基因在大肠杆菌中的表达的形式:以融合蛋白的形式表达药物基因、以非融合蛋白的形式表达药物基因、分泌型表达蛋白药物基因影响目的基因在酵母中表达的因素:外源基因的剂量、外源基因的表达效率(启动子、分泌信号、终止子)、外源蛋白的糖基化、宿主菌株的影响基因工程药物生产的过程:获得目的基因、组建重组质粒、构建基因工程菌、产物分离纯化、除菌过滤、半成品检定、成
4、品检定、包装。提高质粒稳定性的方法:选择合适的宿主菌、选择合适的载体、选择压力、分阶段控制培养、控制培养条件、固定化基因工程菌的培养方式:1. 分批培养2. 补料分批培养:将种子接入发酵反应器中进行培养,经过一段时间后,间歇或连续地补加新鲜培养基,使菌体进一步生长的方法。3. 连续培养:将种子接入发酵反应器中,搅拌培养至一定菌体浓度后,开动进料和出料的蠕动泵,以控制一定稀释率进行不间断的培养。4. 透析培养利用膜的半透性原理使代谢产物和培养基分离,通过去除培养液中的代谢产物来解除其对生产菌的不利影响。5. 固定化培养:将固定化技术用于工程菌的培养,质粒稳定性大大提高,特别是对分泌型菌种有利基因
5、工程菌的不稳定性有哪几种?如何对它进行改善1分裂不稳定:指工程菌分裂时出现一定比例不含质粒子代菌的现象。2结构不稳定:指外源基因从质粒上丢失或碱基重排、缺失所致工程菌性能的改变改善1、选择合适的宿主菌2、选择合适的载体3、选择压力4、分阶段控制培养5、控制培养条件6、固定化基因工程药物的分离纯化:细胞破碎、固液分离、浓缩与初步纯化、高度纯化直至得到纯品、成品加工。分离纯化的方法一、根据分子大小不同的纯化方法1.透析和超滤2.密度梯度离心 3.凝胶过滤二、根据电荷不同的纯化方法1.电泳2.聚丙烯酰胺凝胶电泳3.毛细管电泳4.等电聚焦5.层析聚焦6.离子交换层析 三、利用选择性吸附的纯化方法:疏水
6、作用层析 四、利用配体的特异性亲和力的纯化方法:亲和层析包含体表达形式的优点:高密度,易于分离纯化,能简化外源基因表达产物的分离操作;有效地抵御了大肠杆菌中蛋白酶对目的蛋白的降解,在一定程度上保持表达产物的结构稳定;对宿主细胞无毒害。包含体表达形式的缺点:丧失了原有的生物活性,必须通过有效的变性复性操作,才能回收得到具有正确空间构象的目标蛋白;体外复性蛋白质成功率低,不超过30%。动物细胞的生理特点:1、细胞的分裂周期长 2、细胞生长需贴附于基质,并有接触抑制现象 3、正常二倍体细胞的生长寿命是有限的 4、动物细胞对周围环境十分敏感 5、动物细胞对培养基的要求高 6、动物细胞对蛋白质的合成途径
7、和修饰功能与细菌不同动物细胞制药的前景与展望:1、改进表达载体,提高表达水平和产量 2、利用代谢工程,改进培养工艺,降低生产资本 3、抑制细胞凋亡,延长培养周期 4、采用糖基化工程,提高产品质量 5、转基因动物的研究 6、组织工程的研究HAT培养基的原理:它是用次黄嘌呤(H)、氨基碟呤(A)和胸腺嘧啶(T)配制的。其中氨基碟呤能阻断DNA合成的主要途径,瘤-瘤融合细胞和瘤细胞不能合成DNA而死亡。脾-脾融合细胞和瘤细胞在这样的组织培养条件,几天内亦迅速死亡。由于SP2/0等骨髓细胞都是次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)缺乏株,脾细胞内却有这种酶,因此脾-瘤融合的杂交细胞可利用HGPRT
8、,用次黄嘌呤(H)和胸腺嘧啶(T)合成DNA,使杂交瘤细胞得以生长。制备双功能抗体的方法:1、非共价键二聚体 2、共价连接双特异单链抗体 3、应用亮氨酸拉链、螺旋-转角-螺旋灯蛋白质结构域将两单链抗体连接起来抗体融合蛋白的类型:1、配基-配基型融合蛋白 2、配基-Ig型嵌合蛋白 3、配基-Fv型嵌合蛋白 4、受体-Fv型融合蛋白 5、酶-抗体型融合蛋白构建抗体融合蛋白的基本原则:将第一个蛋白的终止密码子删除,再接上带有终止密码子的第二个蛋白基因,即可实现两个基因共表达。在构建过程中关键的问题是两个蛋白间的街头序列连接肽,一般来说35个氨基酸就可满足大部分融合蛋白的正确折叠的要求,加入一段有疏水
9、性和一定伸展性的较长肽链,可缓解两种蛋白相互干扰。噬菌体抗体库技术的基本方法:获取目的基因,抗体库技术的载体,淘筛,表达和检定噬菌体抗体库技术的特点:1、将抗体的基因型与表达型紧密联系 2、模拟天然全套抗体库 3、避开了人工免疫和杂交瘤技术 4、可获得高亲和力的人源化抗体植物培养细胞的生理特性:1、植物细胞较大,有纤维素细胞壁,细胞耐拉不耐扭,抗剪切力差 2、生长速度缓慢,易被污染,需用抗生素 3、细胞生长的中期及对数期,多以非均相集合体的细胞团形式存在,悬浮培养较难 4、培养时需供氧,培养液粘度大,不能耐受强力通风和搅拌 5、具有群体效应,无接触抑制性 6、产物多停留于细胞内,且产量较低 7
10、、细胞重量的增加在对数期,次级代谢产物的累积在稳定期影响植物次级代谢产物累积的因素:1、生物条件(外植体、季节、休眠、分化)2、物理条件(光、温度、PH、通气)3、化学条件(培养基的化学组成、渗出物)4、工业培养条件(两步培养法、搅拌频率、培养容器的影响)植物细胞大规模培养需考察的因素:1、供氧能力及气泡分散程度 2、剪切力大小及对细胞的影响 3、高密度培养时培养液的混合程度 4、温度、PH及营养物浓度的控制能力 5、细胞团大小的控制能力 6、易于放大利用微生物生产酶制剂的优点:(1)能够生产酶的微生物种类繁多,有较大的选择余地。(2)微生物繁殖快、培养周期短、培养方法简便,培养过程容易控制,
11、(3)微生物具有较强的适应性,能够培育出新的高产菌株。固定化细胞的特点:1、无需进行酶的分离纯化 2、细胞保持酶的原始状态,固定化过程中酶的回收率高 3、细胞内酶比固定化酶稳定性高 4、细胞内酶的辅助因子可以自动再生 5、细胞本身含多酶体系,可催化一系列反应 6、抗污染能力强固定化酶的性质:(1)酶活力的变化 (2)酶反应特性的变化 (3)最适PH值 (4)最适温度 (5)米氏常数 (6)最大反应速度固定化酶的特点:(1)固定化酶属于修饰酶,这种酶可以通过化学、生物、分子工程手段加以改良。(2)固定化酶的稳定性很高,可以多次连续使用。(3)反应以后,产物中不含酶,易于纯化。(4)反应条件易于控
12、制,可实现连续化和自动控制。(5)酶的利用率高,酶的实际使用量较少。(6)固定化酶比水溶性酶更适合进行多酶反应。固定化反应器的类型:(1)间歇式搅拌反应罐(BSTR)(2)连续流动搅拌反应罐(CSTR)(3)填充式反应罐(PBR)(4)流化床反应器(FBR)(5)循环反应器(RCR)(6)连续流动搅拌超滤膜反应器(CSTR/UF)(7)其它反应器反应器的选择依据:(1)根据固定化酶的形状来选择。(2)根据底物的物理性质来选择。(3)根据外界环境条件对于酶的稳定性来选择。(4)根据操作要求和固定化酶反应器的投资费用来选择。酶化学修饰的方法1.酶的表面化学修饰(大分子修饰、小分子修饰、交联修饰、固
13、定化修饰)2、酶分子内部的修饰(非催化活性基团的修饰、蛋白主链修饰、催化活性基团的修饰、与辅因子相关的修饰、肽链伸展后的修饰)3.结合位点突变的化学修饰有机相酶反应的优点:1、增加疏水性底物或产物的溶解度 2、热力学平衡向合成方向移动 3、可抑制有水参与的副反应 4、酶不溶于有机介质,易于回收再利用 5、易从低沸点溶剂中分离纯化产物 6、酶的热稳定性提高,pH的适应性扩大 7、无微生物污染 8、能测定某些在水介质中不能测定的常数 9、固定化酶方法简单修饰酶的特性:1、热稳定性提高2、抗各类失活因子能力提高3、抗原性消失4、体内半衰期延长5、最适pH改变6、酶学性质变化7、对组织分布能力改变有机
14、相酶反应的溶剂体系:水水溶性溶剂均相体系、水水不溶性溶剂两相体系、胶束与反相胶束体系、单相有机溶剂体系有机相酶反应的优点:1、增加疏水性底物或产物的溶解度 2、热力学平衡向合成方向移动 3、可抑制有水参与的副反应 4、酶不溶于有机介质,易于回收再利用 5、易从低沸点溶剂中分离纯化产物 6、酶的热稳定性提高,pH的适应性扩大 7、无微生物污染 8、能测定某些在水介质中不能测定的常数 9、固定化酶方法简单抗生素生物合成基因的结构特点:1、高G-C碱基组成 2、属于同一个基因簇 3、抗生素生物合成基因除在染色体上外,有的也定位在质粒上克隆抗生素生物合成基因的方法:1、在准宿主系统中克隆检测单基因产物
15、 2、阻断变株法 3、突变克隆法 4、直接克隆法5、克隆抗生素抗性基因法 6、寡核苷酸探针法 7、同源基因杂交法基因工程抗体概念及其目的: 基因工程抗体:又称重组抗体,是指利用重组DNA和蛋白质工程技术对编码抗体的基因按不同需要进行加工改造和重新装配,经转染适当的受体细胞所表达的抗体分子。目的:降低鼠源性单克隆抗体分子的免疫原性、降低抗体的相对分子质量,以增加组织的透过性基因工程抗体改造实例:免疫原性:人一鼠嵌合抗体 改型抗体 分子量:Fab、Fv、ScFv、单域抗体基因表达研究关注的主要问题:1目的基因的表达产量2表达产物的稳定性3产物的生物学活性4表达产物的分离纯化。影响植物次生代谢积累因
16、素一、生物条件。外植体:培养时期、大小、前处理、细胞密度 。季节 休眠 分化二、物理条件 光:植物光照和激素具有协同作用或对抗作用 温度 ph 通气三、化学条件 培养基的化学组成 渗出物 四、工业培养条件 两步培养法细胞工程:按照一定的设计方案,通过在细胞、亚细胞或组织水平上进行实验操作,获得重构的细胞、组织、器官以及个体,创造优良品种和产品的综合性生物工程。包括的技术:真核细胞的基因重组、导入、扩增和表达的理论和技术;细胞融合的理论和技术;细胞器特别是细胞核移植的理论和技术;染色体改造的理论和技术;转基因动植物的理论和技术;细胞大量培养的理论和技术,以及将有关产物提取纯化的理论和技术 ;论述
17、:基因工程药物生产的过程(论述):基因工程技术就是将所要组建对象的目的基因插入载体、拼接、转入新的宿主细胞,构建成工程菌,实现遗传物质的重新组合,并使目的基因在工程菌内进行复制和表达的技术。基因工程药物制造的主要步骤是:目的基因的克隆,构建DNA重组体,构建工程菌,目的基因的表达,外源基因表达产物的分离纯化,产品的检验等。可分为上游和下游两个阶段。上游阶段:主要是分离目的基因、构建工程菌(细胞)。目的基因获得后,最主要的就是目的基因的表达。选择基因表达系统主要考虑的是保证表达的蛋白质的功能,其次是表达的量和分离纯化的难易。此阶段的工作主要在实验室内完成。下游阶段:从工程菌的大量培养一直到产品的
18、分离纯化和质量控制。此阶段是将实验室的成果产业化、商品化,主要包括:工程菌大规模发酵最佳参数的确立、新型生物反应器的研制、高效分离介质及装置的开发、分离纯化的优化控制、高纯度产品的制备技术、生物传感器等一系列仪器仪表的设计和制造、电子计算机的优化控制等。动物细胞的培养条件,培养方法与培养方式:培养条件(1)器材的清洗和消毒:器材的清洗:浸泡、刷洗、泡酸、冲洗;器材的消毒灭菌:物理消毒、化学消毒(2)水质:电阻值大于18M,去热原。(3)pH:7.27.4(4) 渗透压:290300mOsm/kg(5) 温度:370.5 C(6) 空气:氧的饱和质60%,氧分压40.7kPa培养方法:【1】细胞
19、分离(1)离心分离法。主要用于从含有细胞的体液如血液,羊水,胸腹水中分离细胞,离心速度过高或时间过长,易挤压细胞使之受损伤或死亡。(2)消化分离法。是从生物体取来组织块,将其剪碎,并用消化液将其消化,使组织松散或细胞悬液然后用缓冲液洗涤,离心,去除残留的消化液而获得所需的细胞。【2】细胞计数(1)自动细胞计数器计数。原理:让一定体积的细胞悬液经一小孔,并在两个电极间通过,此时通过的细胞就会对电极产生干扰而使电压发生改变,这样就会在电子计数器上形成一个信号被记录下来(2)血球计数板计数(3)结晶紫染色细胞核计数法(4)MTT染色计数法。该方法的原理是活细胞内的线粒体脱氢酶能将MTT(淡黄色)转变
20、为不可溶性的紫色甲 结晶,它可溶于脱色液,其色泽的深浅与活细胞的数量成正比,通过比色即可从标准曲线求出细胞数。【3】细胞传代。(1)悬浮细胞的传代(2)贴壁细胞的传代【4】细胞冻存和复苏。(1)细胞的冻存。在冻存时,冷冻速度很重要,不能太快也不能太慢(2)细胞的复苏。复苏时总的要求是快融mtt原理:活细胞中线粒体脱氢酶能将四唑盐(淡黄色)还原成不溶干水的紫色产物甲臢(formazan),并沉淀在细胞中,而死细胞没有这种功能。二甲亚砜(DMSO)能溶解沉积在细胞中紫色结晶物,溶液颜色深浅与所含的formazan量成正比。再用酶标仪测定OD值动物细胞大规模培养的方法【1】悬浮培养。让细胞自由地悬浮
21、于培养基内生长增殖【2】贴壁培养。必须让细胞贴附在某种基质上生长繁殖的培养方法【3】贴壁-悬浮培养。(1)微载体培养(2)包埋和微囊培养(3)结团培养操作方式【1】分批式操作【2】半连续式操作【3】灌流式操作大肠杆菌表达系统中表达载体必须具备的条件:(1)载体能够独立的复制;(2)具有灵活的克隆位点和方便的筛选标记,以篮球外源基因的克隆、鉴定和筛选;(3)具有很强的启动子,能为大肠杆菌的RNA聚合酶所识别;(4)具有阻遏子,使启动子受到控制,只有当诱导时才能进行转录;(5)具有很强的终止子,以便使RNA聚合酶集中力量转录克隆的外源基因, 而不转录无关的基因;(6)所产生的mRNA必须具有翻译的
22、起始信号,即起始密码AUG和SD序列, 以便转录后能顺利翻译。基因工程生长代谢菌的特点?菌体的生长通常用比生长速率来表示。控制菌体的生长对提高质粒的稳定性、减少代谢副产物积累、提高外源蛋白产率有重要意义。 工程菌培养可通过选用不同的碳源控制补料和稀释速率等方法来控制菌体的生长。大肠杆菌的蛋白/菌体量的比值是基本恒定的,因而菌体的生长速度反映了蛋白质的合成速度。培养条件的改变,都会改变菌体的能量代谢和小分子前体的供应,影响生物大分子的合成和菌体的生长。对菌体生长的调控主要有两种观点:一种观点认为能量的供应决定了菌体的最大比生长速率;另一种观点认为是小分子前体和催化组分的限制决定了菌体的最大比生长
23、率。一、菌体的生长与能量的关系1、碳源物质是组成培养基的主要成分。碳源物质为细胞提供能量;当菌体生长所需能量大于菌体有氧代谢提供的能量时,菌体会产生代谢副产物乙酸;高浓度的乙酸明显抑制菌体的生长。乙醇的抑制作用与pH有关,适当提高pH,可减少乙酸的抑制作用。培养方式中的措施:分批培养中选择不同的碳源,补料培养中通过控制补料速度,连续培养中控制稀释速度等培养方法,都能一定范围内控制菌体的生长,从而控制乙酸的产生,减少它的抑制作用,以实现工程菌的高密度培养和提高重组产物的表达水平。加入蛋氨酸和酵母提取物都能减少乙酸的产生。实质:控制菌体的糖酵解速度,使之低于三羧酸循环和呼吸链的最大代谢能力,从而避
24、免乙酰辅酶A的积累和乙酸的产生。代价:降低供能速度或前体供应速度来降低蛋白合成和菌体生长速度2、 菌体生长与前体供应的关系:在基础培养基中加入氨基酸(小分子前体)能使菌体比生长率提高,蛋白合成增加。由于菌体中小分子前体量和催化结构是有限的,因而生物大分子的合成处于亚饱和状态,限制了菌体的比生长速率。基因表达在各个水平的竞争又是各个基因互相竞争共同的前体和催化结构的结果。对于基因工程菌来说,由于基因工程菌质粒的复制和外源基因的转录和翻译需要与宿主细胞竞争共同的前体和催化结构,从而加剧了这些成分的不足,因而在同样的培养基中,工程菌的比生长速率往往低于其宿主细胞,特别是工程菌诱导后,由于外源基因的大
25、量表达,引起菌体比生长速率下降,甚至生长停滞。质粒存在对菌体代谢的影响:中等拷贝质粒(56拷贝)的工程菌中与前体合成有关的酶增加,这些酶的基因大多受终产物的反馈调节。高拷贝质粒的工程菌(240拷贝)中,生长速率和菌体总蛋白合成均减少。这与工程菌大量前体被利用引起前体不足,从而产生“严紧反应”有关。“严紧反应”是当氨酰tRNA不足时,核糖体在密码子上停留,并合成被称为魔点的ppGpp的结果。ppGpp是一个重要的调控分子。两种观点:ppGpp的浓度增加会导致在合成mRNA和rRNA时RNA聚合酶在模板上的移动产生停顿,RNA链延长速度减慢,使游离的RNA聚合酶浓度降低,严紧控制的启动子如rrnA
26、等的转录减少;也可能ppGpp是通过干扰RNA聚合酶与PL启动子专一识别反应。固定化酶的优点及如何制备?固定化酶的优点:(1)固定化酶属于修饰酶,这种酶可以通过化学、生物、分子工程手段加以改良。(2)固定化酶的稳定性很高,可以多次连续使用。(3)反应以后,产物中不含酶,易于纯化。(4)反应条件易于控制,可实现连续化和自动控制。(5)酶的利用率高,酶的实际使用量较少。(6)固定化酶比水溶性酶更适合进行多酶反应。酶的固定化,就是通过载体等将酶限制或固定于特定的空间位置,使酶变成不易随水流失即运动受到限制,而又能发挥催化作用的酶制剂。根据酶的应用目的和特性来选择固定化方法。酶固定化的方法:1载体结合
27、法(物理吸附法、离子结合法、共价结合法)载体结合法是将酶结合到不溶性载体上的一种固定化方法,根据结合形式的不同,可以分为物理吸附法、离子结合法和共价结合法等三种;2交联法:用双功能或多功能试剂使酶与酶或微生物的细胞与细胞之间交联的固定化方法;3包埋法(网格型、微囊型)将酶或含酶菌体包埋在各种多孔载体中,使酶固定化的方法。包埋法可分为网格型和微囊型两种。将酶或细胞包埋在高分子凝胶细微网络中的称为网格型,将酶或细胞包埋在高分子半透膜中的称为微囊型;4热处理(细胞)。 以下是附加文档,不需要的朋友下载后删除,谢谢班主任工作总结专题8篇第一篇:班主任工作总结小学班主任特别是一年级的班主任,是一个复合性
28、角色。当孩子们需要关心爱护时,班主任应该是一位慈母,给予他们细心的体贴和温暖;当孩子们有了缺点,班主任又该是一位严师,严肃地指出他的不足,并帮助他改正。于是,我认为班主任工作是一项既艰巨而又辛苦的工作。说其艰巨,是指学生的成长,发展以至能否成为合格人才,班主任起着关键性的作用,说其辛苦,是指每天除了对学生的学习负责以外,还要关心他们的身体、纪律、卫生、安全以及心理健康等情况。尽管这样,下面我就谈几点做法和体会。一、常规习惯,常抓不懈学生良好的行为习惯的养成不是一节课、一两天说说就行的,它必须贯穿在整个管理过程中。于是我制定出详细的班规,要求学生对照执行,使学生做到有规可循,有章可依。由于低年级
29、学生自觉性和自控力都比较差,避免不了会出现这样或那样的错误,因此这就需要班主任做耐心细致的思想工作、不能操之过急。于是,我经常利用班会对学生中出现的问题进行晓之以理、动之以情、导之以行的及时教育,给他们讲明道理及危害性,从而使学生做到自觉遵守纪律。二、细处关爱,亲近学生爱,是教师职业道德的核心,一个班主任要做好本职工作,首先要做到爱学生。“感人心者,莫先乎情。”工作中,我努力做到于细微处见真情,真诚的关心孩子,热心的帮助孩子。我深信,爱是一种传递,当教师真诚的付出爱时,收获的必定是孩子更多的爱!感受孩子们的心灵之语,便是我最快乐的一件事!”三、具体要求,指导到位心理学研究表明,儿童对事物的认知
30、是整体性的,能熟知轮廓,但不注重细节。我认为,首先要蹲下来,以孩子的视角观察事物,用孩子能听懂的话和他们交流。其次,要注重细节教育,把该做的事指导到位,因为他们很想按照老师的要求去做,很想把事情做好。四、示范带头,直观引导大教育家乌申斯基曾有过这样一段话:“教师个人的范例,对于学生的心灵是任何东西都不能代替的最有用的阳光。”低年级的学生对自己的班主任是一个怎样的老师,他们会留心观察班主任的每一个动作、每一个眼神、每一种表情,会细心倾听班主任的每一句话,他们对班主任有着一种特殊的信任和依赖情感。班主任的自身素质,道德修养,班主任的一言一行,一举一动,无形之中会成为全班几十个孩子的榜样。因此,在班
31、级工作中我时刻注意自身形象,事事从我做起,以良好的形象率先垂范,潜移默化的影响着我的学生。凡要求学生做到的,教师首先自己做到,而且做得更好。要求学生讲卫生,不随便乱扔垃圾,自己就做到随手捡拾垃圾。要求学生不迟到,在我的带动下,我们班的大多数学生都能做到讲卫生不迟到,个个讲文明守纪律。五、及时表扬,延迟批评德国美学家黑格尔说:“不应该使孩子们的注意力长久地集中在一些过失上,对此,尽可能委婉地提醒一下就够了。最重要的是要在学生身上激发出对自身力量和自身荣誉的信念。”教过低年级的老师都知道:孩子小,事儿多,一上课就“告状”。当老师的又不能不公平处理,这样耽误的时间太多,而且学生因为受了批评,注意力长
32、时间集中在自己的过失上,情绪受影响,低落的情绪体验使智力活动水平明显下降,课堂吸收效率变低。针对这一情况,我采取延迟批评,这样既培养学生愉快的情绪体验,又给予其改正和返回的机会,之后老师只要加以指导,就能很好的解决问题.本文来自公务员之家,查看正文请使用公务员之家站内搜索查看正文。第二篇:四年级班主任工作总结学生是涌动着无限活力的生命体,是教育的起点和归宿。面对学生,祖国的未来,我们要做一个真正有意义的班主任,素质教育要求我们要面向全体学生,为学生服好务,使学生的思想道德、文化科学、劳动技能、身体心理素质得到全面和谐地发展,我们的班级管理究竟该如何阅读学生个体,提升学生学习生活及生命的质量呢?
33、在过去的一学期里,我们班在学校的统一组织、领导和同学们的共同努力下及任课老师的大力支持和配合下,各项工作顺利开展,安全、学习、工作等方面都取得较突出的成绩,现将我所做的一些工作总结如下:一、做好学生的思想工作,培养学生良好的道德品质,净化学生的心灵,努力培养德智体全面发展的人才做好学生的思想工作从两方面入手,一是重视每周的班会课,开好班会课;二是重视与学生的思想交流,多与学生谈心。重视班会,开好班会,为的是在班中形成正确的舆论导向,形成良好的班风、学风,为学生提供一个好的大环境,重视的是学生的共性。为配合学校各项工作的落实,我们班积极开展了许多有益于学生身心健康发展的活动,让学生在活动中明事理
34、、长见识。学生自尊心也很强,直接的批评换回来的可能是思想的叛逆,利用班会课对学生进行思想教育的好处,就是避免单调重复的批评说教而引起学生的反感,容易为学生接受,能切实帮助学生澄清思想上的模糊认识,提高学生的思想境界。但开班会课不一定都要等到每周二下午第四节,可利用一些零碎的又不影响学科学习的时间开短小精悍的班会也能取得良好的效果。不必长篇大论,班主任把及时发现的不良思想的苗头一针见血地指出来,对事不对人,进行警示性的引导教育,往往能把一些影响班风、学风的不良思想消灭在萌芽阶段。而重视与学生的思想交流,多与学生谈心,注重的是学生的个性和因材施教。我常利用课余时间和学生促膝谈心,及时对学生进行针对
35、性的教育。用个人的魅力征服学生,用自己的热情和朝气感染学生。体现在学习、生活的方方面面。做任何事情,一定要从学生的角度去考虑,为学生利益着想,学生才易于接受。在这个时候,我就是他们的好朋友,尽量为他们排忧解难,也正因如此,我得到了班上大多数学生的喜爱和信任。二、加强班级管理,培养优秀的学风、班风,深入全面地了解学生,努力培养团结、严格、活泼、奋进的班集体四年级的学生思想、心理发展、变化很快。因此,对学生的思想工作显得尤其复杂和重要。在这个学期里,我的班级管理工作主要从三方面实施:一方面,我主要加大了对学生自治自理能力培养的力度,通过各种方式,既注意指导学生进行自我教育,让学生在自我意识的基础上
36、产生进取心,逐渐形成良好的思想行为品质;又注意指导学生如何进行自我管理,培养他们多方面的能力,放手让学生自我设计、自我组织各种教育活动,在活动中把教育和娱乐融入一体;还注意培养学生的自我服务的能力,让学生学会规划、料理、调控自己,使自己在集体中成为班集体的建设者,而不是包袱。在这点上,特别值得一提的是班干部的选用,这是让学生自治的重要途径。班主任的管理代表的是学校的管理,不论班主任如何和颜悦色都带有不容质疑的权威性,也难免有不被理解和接受的时候,通过班干部的协调,往往能够取得意想不到的效果。班干部起的是协助班主任管理班级的作用,他们接受班主任的指导,又及时向班主任反馈班级情况和同学们的思想动态
37、;他们分工管理班级的各项事务,同时又是一个团结合作的整体。选好班干部,不但有利于班级管理,而且有利于全体学生共同发展。培养学生担任班干部,是培养学生能力、提高学生素质的一种很有效的方法,如培养其组织能力、管理能力、社交能力、语言表达能力等,还可以培养其关心集体、关心他人、乐于奉献、积极进取等优良的思想品质。多培养班干部有利于多数学生全面发展.本文来自公务员之家,查看正文请使用公务员之家站内搜索查看正文。第三篇:特教班主任工作总结本学期在校领导的信任和支持下,我继续担任高考班班主任的工作,为了在今后的工作能够取长补短,特总结如下:(一)抓常规管理规范学生的行为习惯早到校、两操、打扫除、校各项活动
38、的参加都认真组织,严格要求,决不马虎,让学生感到做人就要这样严谨、认真、一丝不苟。至今学生以习惯成自然。例如间操时间一到不用老师强调,都主动自觉去做,赢得任课老师的好评。(二)实行班级管理我们班级发展的目标都是由师生共同商讨确立的,并且分工负责。这样,使管理者和被管理者做到和谐统一。师生能以诚相待,共同决策,使学生感觉到班级的事也有他们的一部分。通过分级管理,班干部承担了一些日常事务的管理工作,并有权独立处理相关事务。班主任则激励和指导学生自主性的发挥,化解工作中的矛盾。通过自我管理,既加强了班干部队伍的建设,培养了学生组织管理能力,又提高了全体学生的自觉性,自制力。(三)营造良好的学习环境现
39、在初中学生的学习、生活有绝大部分时间是在学校里度过的。班级即是学生的一个大家庭。营造良好的学习环境,对提高学生的德育素质,起了相当大的作用。首先对学生进行理想教育,学习目的教育,习惯的养成教育,培养其自信心及责任意识,其次,建立一些监督机制,奖惩制度,定期检查,定期反馈,赏罚分明,现在班级风气正,学风浓,凝聚力强。班级真正成为一个和谐向上的集体。(四)个别教育与表扬相结合班级中思想基础和学习都比较差的学生。通常表现为精力旺盛而又学不进去,思想活跃而又任性好动,对班集体正常的学习生活秩序有一定影响。在教育转化这部分学生时,我从建立和培养感情入手,亲近他、关心他、了解他,努力发现他身上的闪光点,如
40、在班级活动中,象打扫卫生、主动抬水,拾到东西主动上缴,积极参加校运会入场式等等,都及时表扬,使这些不管在家里,还是在学校,极少获得表扬,久而久之,已经失去了上进心和自我认同感,缺乏自信心的同学,从拾自信,使他们在班主任充分理解和信任的基础上,使性格和人格回到了正确的轨道上来.本文来自公务员之家,查看正文请使用公务员之家站内搜索查看正文。第四篇:优秀班主任工作总结素质教育要求我们要面向全体学生,使学生的思想道德、文化科学、劳动技能、身体心理素质得到全面和谐地发展,个性特长得到充分的培育。这是一项长期的、具有划时代意义的改革。学校教育是我国主要的教学形式,班级授课制是学校教育的基本形式。因此,作为
41、班集体灵魂的班主任应该充分认识到自己所承担的历史重任。小学班主任面对6、7岁-11、12岁的儿童,工作更加繁重。我相信,任何一位班主任都希望胜任这项工作并把自己从繁重中尽量解脱出来,那么,如何开展小学班主任工作就至关重要。下面我谈谈自己的体会。一、亲近学生,研究学生;展现自我,树立威望。谁爱孩子,孩子就会爱他,只有用爱才能教育孩子。班主任要善于接近孩子,体贴和关心学生,和他们进行亲密的思想交流,让他们真正感受到老师对他的亲近和爱。这是班主任顺利开展一切工作的基础。研究学生是教育取得成功的必要条件,最好的途径是通过活动观察。了解班风、学风,了解全班主要的优缺点并分析其原因所在,了解家长普遍的文化
42、层次,找到亟待纠正的弱点;二要研究学生的个性特征(包括能力、气质、性格、爱好等),了解个人的生活环境,掌握哪些是积极分子,哪些是特别需要注意的学生等等。在亲近与研究学生的过程中,班主任要努力展现自身广博的文化与高尚的道德情操,使学生对你既亲近又崇拜,既认定你是值得信赖的老师,又把你当作好朋友,树立起班主任崇高的威望。那么,你的教育可能取得事半功倍的效果。二、班干部队伍的组建和培养。一个班的集体面貌如何,很大程度上是由小班干部决定的。小班干部对班集体有着以点带面和以面带面的作用,我称他们是班主任的左右手。所以唯有慎重地选拔和培养班干部队伍,班主任工作才能逐渐从繁重走向简单与轻松。当选的班干部应具
43、有较强的号召力和自我管理能力。班干部队伍的组建不能仅仅作为一种形式存在,班主任必须精心培养:其一,要大力表扬班干部优点,宣传他们的先进事迹,帮助小班干部树立威信;其二,在鼓励班干部大胆工作,指点他们工作方法的同时,要更严格要求班干部个人在知识、能力上取得更大进步,在纪律上以身作则,力求从各方面给全班起到模范带头作用,亦即以点带面;其三,培养*部团结协作的精神,要能够通过*部这个小集体建立正确、健全的舆论,带动整个班集体开展批评与自我批评,形成集体的组织性、纪律性和进取心,亦即以面带面。三、以强化常规训练带动教育教学工作。良好的常规是进行正常的学习和生活的保障,一个学生调皮捣蛋、不合常规的举动往
44、往会使一堂好课留下遗憾,使整个集体活动宣告失败,甚至使全班努力争取的荣誉付诸东流,直接影响到班集体的利益。因此,要扎实有效地加强一个学生的常规训练。训练的内容包括小学生守则和小学生日常行为规范要求的常规、课堂常规、集会和出操常规、卫生常规、劳动常规、参观常规以及路队常规等等诸多方面。训练可以通过集体或个人、单项强化或全面优化相结合的方式进行(根据具体情况选择),务必使每个学生具有服从集体,服从命令的思想.本文来自公务员之家,查看正文请使用公务员之家站内搜索查看正文。第五篇:大学班主任工作总结见习期刚满的我,回顾这一年的工作,除了代理团委书记一职外,另外很重要的一部分工作就是担任班主任。我当任的
45、是2000级英教及2001级0103、0104班的班主任。以下我分别将两个专业的班级工作进行总结。2000级英教专业两个班情况比较好。他们已经基本适应大学生活,两个班班委工作认真负责,能起到核心带头作用,与我也保持着密切联系,作好了桥梁工作。因此,两个班取得了不少成绩:2001班在今年被评为优秀班集体。班上有2/3的同学参加了党校学习,并都以优异的成绩结业。其中有一名同学被发展为预备党员。该班学风浓厚,平时坚持早读,在期末考试中无一人重修。在英语剧比赛中,该班也获得了二等奖的好成绩。2002班在去年也被评为了红旗团支部。该班也是积极要求进步。全班33人,有22人向党组织递交了入党申请书,形成一
46、股“一颗红星向着党”的良好精神面貌。团支部认真负责,组织开展了以“揭批”为中心的团支部会议,使同学们对邪教有了清醒地认识。李国宏同学虽然曾经犯过错误,但在班上同学的帮助下,勇于改正,并且一次意外中舍己救人,为外语学院争了光。该班另一特色就是活跃,能全面发展。在冬季长跑中,报名踊跃,最后有7人参加。在“十大歌星”比赛中,有两人获奖。“十大笑星”中,该班节目代表外语学院参赛,获得第一名的好成绩。作为班主任能看到这样的班级成绩感到非常欣慰与骄傲。下学期他们将进入大三,班委要改选,我希望能有跟多的同学得到锻炼。我带的另外两个班与他们形成对比,大一的0103、0104总的情况另我担忧。先谈谈不足吧,总的
47、有以下几点.本文来自公务员之家,查看正文请使用公务员之家站内搜索查看正文。第六篇:差班班主任工作总结担任八所中学初一年级(6)班的班主任一年了,在与孩子们接触打交道的这一年中,有苦有泪,有欢笑也有悲痛,更有些许成功也有些许遗憾!现我对这一年的班主任工作作出如下总结:一班风管理俗话说:一个班的班风犹如这个班的班主任的性格特点。我是一个比较“苛刻”的人,对人对事都极度的讲究“完美”。在管理班级的时候,我是以“军队化”的标准来进行的。一个学生,如果能够约束自己,并能够服从管理、听从指挥,我想,这个学生就达到了自我的升华。1.学生的品德一个班级的优秀与否,表现在每位学生品德的优劣上面。我们班一共有87
48、个人,男生59个,女生28个,其中少数民族生共有6人,从下面乡镇上来的学生占了本班人数的78。无论是从下面乡镇上来的学生还是在市内的学生,几乎每个学生的品德思想多多少少都存在着个体的差异性。概括来讲,从下面乡镇上来的学生普遍会在心理及思想上认为自己是从农村来的,无论是学习还是见识方面都不如城市的孩子,难免会产生自卑的心理;城市的孩子则会认为自己比从农村上来的孩子优秀很多,甚至有瞧不起人的这种不良心态;还有这两类孩子之间会进行物质上的攀比。这些品德思想上的认识多多少少都影响了一个班级的凝聚力,也影响了个人的品德素养!面对这些问题,我主要采用“鼓励限制”的方法。鼓励具有自卑心理的学生向精神方面看齐
49、;鼓励具有攀比之心的学生也向精神方面看齐!同时限制家庭条件好的同学要特别注意学校的规章制度,不能带手机、带MP3和MP4进入教室的,坚决不能让他们带入!当然,在学生们交往接触的过程中,难免也会发生矛盾,主要体现在吵架和打架这两大方面上。对于如何避免这些冲突,我坚持的原则是宽以待人。如果学生之间发生冲突了,我会找他们了解情况,无论是谁对是谁错,都要让他们站在对方的角度去进行思考:换成是我,我能不能这样做?让他们学会宽以待人,避免下次再发生矛盾冲突。2.学生的考勤著名教师魏书生说过一句话:学生能做的事学生自己做!学生的考勤情况,我是这么进行管理的:各个组长负责各组成员的迟到、旷课以及课堂纪律的考勤
50、;纪律委员负责对每个组长的纪律考勤;副班长监督纪律委员的纪律考勤;正班长对副班长的纪律进行考勤。不管是身为普通身份的学生,还是身处“要职”的班干部,如果出现乱子,我都会找该负责人进行对话,及时地进行处理。且在合适的时间,比如说每周周一的班会课上进行点名批评,当然对于做得比较好的学生,也会进行点名表扬.本文来自公务员之家,查看正文请使用公务员之家站内搜索查看正文。第七篇:幼儿园班主任工作总结本学期我班根据纲要精神,以幼儿园工作计划为指导,紧紧围绕学期计划,在班上老师的紧密配合下,有的放矢,循序渐进的开展班级各项工作。现将本学期主要工作总结如下:一、教育工作1、“多元化幼儿艺术教育融化”的尝试根据
51、幼儿园及班工作计划,我班进行了“多元化幼儿艺术教育融化”的尝试,并制订了春雨的色彩、夏天的主题网络。在春雨的色彩的主题网络中,以文学作品为切入点,以“春”为核心,涉及科学、社会、语言、艺术、健康等领域的各项活动。春雨的色彩中还生成了小主题雨,并根据“雨”进行了“雨的形成”、“小雨滴旅行记”、“小雨点”等等的活动。在进行这些活动时,我们注重利用各种资源,合理整合。通过实验、图片、电教设施来启发幼儿了解有关雨的知识;或许是因为幼儿年龄知识水平的因素,或许所选知识涉及过深,在活动进行中,发现效果不理想,没有达到预定目标。因此,在进行第二主题网络夏天时,我们总结经验,反思不足,及时进行调整。从幼儿生活
52、中选材,以南京教材中找凉快为蓝本进行课程整合,而收到了较好的成效。在夏天的主题网络中,从小朋友找凉快动物找凉快到昆虫的夏眠多种多样的乘凉工具我发明的乘凉工具;幼儿参与程度的热情较上一主题高涨。2、环境创设我班幼儿三十九人,性格活泼开朗,但个性鲜明突出。因此,我班在进行环境创设中能依据纲要中的精神,结合本班幼儿实际情况,有针对性的创设各区域:1、对个性霸道、任性的幼儿创设了“谦让是美德”角色扮演区。2、对爱表现、外露的幼儿设置了小舞台。3、壁画的设计及进度紧扣教育主题,充分利用家长资源和幼儿作品.本文来自公务员之家,查看正文请使用公务员之家站内搜索查看正文。第八篇:初中班主任工作总结一个学期很快
53、结束了,在领导和各位老师的关心和帮助下,顺利走过了一学期。现在就把一学期的工作情况总结一下。一、我所做的主要工作初三是整个初中重要的时期,我深知自己肩负的责任重大,不敢有丝毫的怠慢。学生在心理和生理上都发生了很大的变化,对于这一变化,学生的精神上有更多的压力,而大多数的学生在这个转折时期显得无所适从。怎样让学生尽快适应这一变化,顺利度过转折时期,这是摆在我眼前的首要任务。我当班主任力争做到两点:一是尊重每一个学生,满足学生尊重的需要,承认的需要,情感的需要,努力克服固执己见,偏激的思维方式,尊重学生个性发展,为孩子的成长创造一个愉快的心理运动空间;二是善待每一个学生,用真诚的爱心对待每一个孩子
54、。对于优等生,不掩饰他们的缺点,积极引导他们扬长改过,努力使其达到卓越。对于后进生,不歧视他们,善于发现他们身上的闪光点,激励他们一步一步自我完善。我班的王帅同学学习很差,上课不注意听讲,作业经常不交,课上、课下纪律不能保证,是典型的后进生。对于这样的孩子如果只是批评、指责,他的自信心肯定会越来越少,甚至还会自暴自弃。我发现他的足球踢得不错,于是就鼓励他,如果你在学习上能象踢球那么专注,你的学习成绩一定会取得大进步。对于他身上的每一点进步,我都及时发现,并且及时予以鼓励,培养他的自信心。对于后进生,我动员学习好的同学帮助他们,带动他们把学习成绩提高上去,组成一帮一学习互助学习小组。这个班的学生
55、整体给人的感觉就是思维活跃,反应敏捷,但就是组织纪律性差,纪律松散,缺乏自我约束能力。如今的孩子已经今非昔比,他们接触面广,思维活跃,自尊心强,但又有着现代青少年极大的弱点即缺乏勤奋刻苦拼搏的精神,这些都表现在一言一行中。在队列队行训练中表现尤其明显。他们自由散漫,在队列里有说话的、打闹的,无精打采,步伐随便。我向孩子提出要求,从起步到走步,从转体到每一个动作,都给他们提出规范化的要求,亲身示范,身体力行。通过这些训练,使孩子们体会到严格有序管理带来的效果。现在的孩子普遍自私,在小事上斤斤计较,不能宽厚待人。这表现在处理同学关系上,同学之间有了矛盾,出言不逊,动辄大打出手,拳脚相加。针对这一现
56、象,我教育学生怎样正确处理同学关系,并以此开展主题班会,对学生进行教育。在处理闹矛盾的学生时,我让学生多做自我批评,在自己身上找不足,以比来培养学生宽厚待人的精神,学会以宽容和大度之心对待周围的人。劳动更培育学生德育思想品质的机会。现在的孩子一提起劳动就有厌烦心理,这些独生子女平时干活的机会很少,养成了懒惰的习惯。首先必须得教会学生怎样干活,从扫地到拖地,从擦玻璃到擦墙围子,我都示范指导并严格检查,及时表扬做得好的同学,批评做的不认真和逃跑的同学,让孩子们知道老师不仅在意他们的学习更注重他们的人品.大学生实习总结专题8篇第一篇:大学生实习总结一、社会实践目的:认识当代社会对大学生的要求、及从中
57、找出自己的不足之处、在四年中在这方面加强学习。了解一些社会的其他人如何在努力生活,对自己以后毕业找工作有一定的帮助,了解一些就业岗位需要怎么样的技能,怎样的工作、以及我们应该如何去做。最主要的就是锻炼自己,使自己不会再像以前那么那样懒惰,让自己变得坚强不再懦弱、学会忍受忍受一些不公、学会忍受孤独!二、实践内容:在寒假开始时我一回到家就开始给家里帮忙,家里在市场批发蔬菜每天早上6点就要在零下20度的环境下将自己从别的地方运来的蔬菜进行批发、今年已经近20岁了、对家里的帮助也是很少很少,感觉惭愧,只是每天早早的去帮忙送菜,这个实践对自己的专业知识倒是没有什么运用的地方,也许是现在用不上,我是很希望
58、将自己所学的运用到工作使自己所学的不至于一无用处!但现在这种机会是少之又少。以前只要是星期天、假期都会给家里帮忙这只是对自己的小锻炼、在大学校园中也许是舒服贯了变得无所事事、现在早上早起感觉这么的困难这在以前是怎么也不会出现的事情,这个假期这个毛病也有了少许的改变、呵这就是所谓的成绩、我从小就希望自己长大能去做自己喜欢的生意、通过给家里好几年的批发零售我看到也许做生意会很枯燥、乏味、但是能忍受这种孤独、乏味并在其中创造出成绩的我认为这就是成功的,这便是生活的意义所在。三、实践结果:回嘉峪关在家中的这几日虽不比在学校的安逸但是也让自己成长了少许、通过寒假的帮忙的帮忙发现自己的人际交往能力还是很弱,这是以后必须解决的问题、使自己变得无所畏惧。在
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