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文档简介
1、果蝇唾液腺染色体的观察一、实验目的1)采用解剖果蝇3龄幼虫唾液腺的方法。2)掌握果蝇唾液腺染色体标本的制作技术3)观察果蝇唾液腺染色体的形态特征。二、实验原理1)果蝇3龄幼虫唾液腺细胞处于永久早期,染色体处于延伸状态。在幼虫的发育过程中,细胞核中的DNA复制了许多次,但细胞和细胞核并不分裂。复制后,染色质DNA不分离。这种现象被称为核内有丝分裂,从而形成多线染色体。此外,唾液腺细胞中的同源染色体彼此靠近并呈现突触状态,这使得它们比正常体细胞中的染色体厚1000-2000倍,长100-200倍。2)唾液腺位于幼虫体的前1/3-1/4处。因此,左手握着解剖针,按下幼虫身体的前三分之一以固定幼虫身体
2、。右手握着解剖针,将它插在幼虫头部的口部。用适当的力向右拉唾液腺。数字。3)由于唾液腺细胞中的8条染色体通过着丝粒相互连接,在异染中心和同源染色体之间形成染色盘或假联合,用碱性染料染色后,可以观察到染色更深的染色盘和从染色盘向外辐射的5条染色体臂。在这些染色体的臂上可以看到不同染色深度的水平条纹,称为亮带和暗带。这些水平条纹的位置、宽度和数量具有物种特异性。不同的物种和不同的染色体在不同的部位有固定的形态位置。因此,根据每个臂的条纹特征和每个臂端的条纹特征,可以准确地识别每个染色体。在染色体的臂上,也有一些松散的区域和由染色体展开和扩展形成的巴尔比尼环,它们富含转录的核糖核酸,因此它们没有颜色
3、,是基因活动的区域。在个体发育的不同阶段,染色体上的不同位置会出现松弛区或巴尔比尼环,从而研究基因表达,进行各种染色体变异的研究等。三。器具和生物学实验生物:果蝇的3龄幼虫;仪器:双目解剖器、显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片实验试剂:乙酸品红染料溶液、蒸馏水、lNHCI。四.实验步骤1)准备完全发育和肥大的3龄幼虫(选择发育完全但未化蛹但在低温下非常活跃的幼虫(16C-18C培养);2)剥离唾液腺:在干净的载玻片上滴一滴蒸馏水,选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上的3龄幼虫化蛹,放在载玻片上。每只手握一根解剖针,在解剖镜下操作。由于果蝇的唾液腺位于幼虫体的1/3-1/4处,左手握着解剖针向下按压
4、幼虫体的前三分之一以固定幼虫体,右手握着解剖针以压住幼虫头的口器,用适当的力向右拉出唾液腺。3)解离:在唾液腺组织上滴一滴1盐酸,解离1-2分钟,使组织软化;4)吸收盐酸,用水冲洗2-3次,滴加醋酸品红染料溶液,染色10分钟。染色时间不能太长,否则背景也会着色。然后用干净的覆盖纸和一层滤纸覆盖。将胶片放在实验台上,用拇指按压。(小心不要移动封面);5)显微镜检查:首先用低倍镜观察,找到分散的染色体,然后转移到高倍镜观察;6)整理实验设备,处理废弃物;五:实验现象多线染色体六.实验问题1:实验中我们应该注意什么?答:1)服用果蝇幼虫时,一定要服用稠的;2)必须添加蒸馏水,否则唾液腺将容易干燥,影响其正常形态并进一步影响观察。但是不要加入太多的水,否则幼虫会死亡5)不要使用太多的染色液,否则压片时唾液腺会随染色液一起漂浮。如果染色后染液变干,加入较少的染液,并盖上波形板,以避免产生气泡。6)染色时间不宜过长,否则背景会变色,影响观察效果。7)用吸水纸吸液体时,一定不要吸走唾液腺。2:为什么这个实验没有成功?答:1)没有发现足够的果蝇
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