微生物-实验二-细菌的生理分布消毒灭菌

细菌生理、分布、消毒与灭菌一、细菌人工培养

二、细菌分布空气中细菌检测咽拭培养三、消毒与灭菌第1页细菌人工培养一、惯用培养基制备标准1、培养基制备标准：①适当营养成份。②适当酸碱度。③配制后经灭菌后方可使用。2、培养基配制基本程序按一定配方称了各种物质→溶解→测定及调整PH→滤过→分装→灭菌、备用。第2页惯用培养基种类1按用途可分为

（1）基础培养基：

（2）营养培养基：

（3）判别培养基：

（4）选择培养基：

（5）厌氧培养基：

第3页惯用培养基种类2按物理性状可分为：

1）液体培养基

2）固体培养基，在液体培养基中加入2~3%琼脂，固体培养基倾倒平皿上即成“平板”倾入试管内即可制成“斜面培养基3）半固体培养基：当液体培养基内加入0.2~0.5%琼脂时即成之。第4页二、细菌人工培养接种方法：

（一）细菌分离培养接种法——平板划线分离培养法

目标：使混杂在一起细菌分散生长。

第5页平板区划线法培养后菌落散布情况

第6页一个细菌在固体培养基上，经过一定时间生长繁殖之后，所形成肉眼可见细菌集团，称为菌落。

很多菌落连在一起，融成一片，称为菌苔。

第7页第8页描述菌落：①大小：以直径（mm）表示之，1mm左右为小菌落，2——3mm为中等大菌落，3mm以上为大菌落。②形成：圆形、卵圆形及不规则形。③边缘：整齐或不整齐、锯齿状、毛发状等。④表面：光滑、湿润、皱纹、干燥等。⑤隆起度：扁平、凸起、中心凹陷等。⑥透明度：透明、半透明、不透明。⑦颜色：无色、白色、黄色等。⑧溶血性：在血平板上产生溶血毒素细菌，能够使培养基中红细胞破坏溶解，可分为完全溶血、草绿色溶血及不溶血第9页第10页

（二）细菌纯培养接种法

目标：测试其生物学性状、保种等。

方法：斜面培养基接种液体培养基接种穿刺接种法第11页斜面培养基接种法第12页斜面上生长状态观察：可见有均匀一致菌苔，如有不一样菌落出现，则表明污染了杂菌。

第13页

液体培养基接种法第14页液体培养基中生长状态观察：示培养前液体培养基多为清彻透明。接种细菌后，因为细菌种类不一样，可有以下三种生长形式。①混浊：液体变为混浊。②菌膜：液体澄清，表面有一薄膜。③沉淀：管底有沉淀物。

第15页半固体培养基接种方法第16页半固体中生长状态观察：无鞭毛（无运动）细菌，经培养后仅沿穿刺线生长，培养基清亮。有运动细菌，沿穿刺线向外扩散，穿刺线摸糊不清，培养基混浊。

第17页空气中细菌检测一、试验目标与原理二、试验材料三、试验方法第18页咽拭培养试验一、试验目标与原理二、试验材料血平板、棉签三、试验方法第19页第20页紫外线杀菌作用

一、试验目标与原理了解紫外线对不一样种细菌杀菌作用及紫外线穿透力。

紫外线杀菌波长范围为240—280nm，265~266nm作用最强。其主要是使DNA上相邻嘧啶经过共价键结合形成二聚体，影响DNA正常硷基配对。

紫外线穿透力很弱，其杀菌只限于表面照射。第21页二、试验材料

1、菌种：2、培养基：琼脂平板3、纸片、镊子及紫外线灯等三、试验方法1、涂平板。2、打开皿盖，盖纸片。3、紫外线照射30分钟。4、取掉纸片，盖好皿盖，37℃孵育二十四小时，观察生长情况。

第22页皮肤消毒前后细菌学检验

一、试验目标与原理观察消毒剂消毒效果二、试验材料1、2%碘酒，75%酒精2、琼脂平板三、试验方法第23页细菌反抗生素敏感性测定一、试验目标与原理了解药品敏感性试验方法及实践中主要意义

二、试验材料1、菌种：金黄色葡萄球菌6—8小时肉汤培养物。2、培养基：普遍琼脂平板。3、抗生素：含各种抗生素干燥滤纸片、小镊子、米尺等。三、试验方法第24页

细菌反抗生素敏感试验（纸片法）四、试验结果

第25页抑菌圈第26页细菌对药品敏感时，在该药纸片周围无细菌生