2024年兽医微生物学复习

解释概念菌落：在固体培养基上，有單個细菌繁殖形成的肉眼可見的子细菌群体荚膜：某些细菌在其生活中可在细胞壁的外周形成一层包围整個菌体、边界清晰地粘液样物质黏液层：有些细菌分泌一层很疏松、与周围边界不明显、易与菌体脱离的黏液样物质，称為黏液层鞭毛：多数弧菌、螺菌、許多杆菌、個别球菌的菌体表面長有一至数拾根弯曲的丝状物，称為鞭毛培养基：是人工配制的基质，具有细菌生長繁殖必需的营养物质杀菌作用：是指某些物质或原因具有在一定条件下杀死微生物的作用。抑菌作用:是指某些物质或原因具有克制微生物生長、繁殖的作用。抗菌作用:某些药物具有的克制或杀灭微生物的作用，统称為抗菌作用灭菌：消灭物体上所有微生物的措施，包括杀灭细菌芽胞、霉菌孢子在的所有病原微生物和非病原微生物消毒：杀灭物体上病原微生物的措施仅规定到达消除传染性的目的，而對非病原微生物及其芽胞、孢子并不严格规定所有杀死防腐：制止或克制物品上微生物生長繁殖的措施，微生物不一定死亡無菌操作：采用防止或杜绝任何微生物進入動物机体或其他物体的措施的進行的操作称為無菌操作抗生素：某些微生物在代過程中产生的一类能克制或杀死另某些微生物的物质称為抗生素植物杀菌素：某些植物中存在有杀菌物质，這种杀菌物质一般称為植物杀菌素细菌素：是某些细菌产生的一种具有杀菌作用的蛋白质，只能作用于与它同种不一样菌种的细菌以及与它亲缘关系相近的细菌噬菌体：噬菌体是寄生于细菌、真菌、螺旋体、放线菌等的一类病毒，也称细菌病毒感染：是指病原微生物在宿主体持续存在或增殖病原菌：是指那些导致机体发病的细菌，是一群高度特化了的微生物，為了自身的生存，已适应并且必须在宿主生物体持续存在或增殖，有時可导致宿主发病半数致死量：是指能使接种的试验動物在感染後一定期限死亡二分之一所需的微生物量或毒素量半数感染量：某些病原微生物只能感染试验動物、鸡胚或细胞，但不引致死亡。是指能使接种的试验動物在感染後一定期限感染二分之一所需的微生物量或毒素量侵袭力：病原菌在机体定殖，突破机体的防御屏障，化作用，繁殖和扩散，這种能力称為侵袭力细菌的遗传：是指亲代细菌与子代细菌的相似性，它使细菌的性状保持相對稳定，是细菌存在的根据质粒：质粒是细菌染色体外的遗传物质，多為环状双螺旋DNA分子。转化：供体菌裂解游离的DNA片段被受体直接摄取，使受体菌获得新的遗传性状的過程称為转化转导：以温和噬菌体為媒介把供体菌的DNA小片段携带到受体菌過互换与整合使受体菌获得供体菌部分遗传性状称為转导接合：是两個完整的细菌细胞通過性菌毛直接接触，由供体细菌将质粒DNA转移給受体细菌的過程病毒（粒）子：一种形态和构造上完整的病毒颗粒称為病毒(粒)子核衣壳：由核酸构成的芯髓被衣壳包裹，衣壳与芯髓在一起构成核衣壳原代细胞：動物组织經胰蛋白酶等消化、分散，获得單個细胞，再生長于培养皿中。二倍体细胞株：将長成的原代细胞消化分散成單個细胞，继续培养传代，其细胞染色体数与原代细胞同样，仍為二倍体。传代细胞系：与原代细胞与二倍体细胞株不一样，此类细胞在体外可無限制分裂，亦可無限制传代。细胞病变：细菌感染导致的细胞损伤称之為细胞病变空斑：病毒样本接种吸附于單层细胞，經一段時间培养，進行染色，原先感染病毒的细胞及病毒扩散的周围细胞會形成一种近似圆形的斑點，类似固体培养基上的菌落形态，称之為空斑。包涵体：是某些病毒感染细胞产生的特性性的形态变化，可通過固定染色而後在光學显微镜下检测。隐蔽期：在病毒感染细胞之後的一种短時间，病毒完全消失，甚至在细胞也找不到传染性的病毒颗粒，直至感染数小時後子代病毒出現為止，這阶段称為隐蔽期。血凝作用：某些病毒能凝集紅细胞，称為病毒的血凝作用。血凝克制作用：病毒的特异抗体可克制其血凝作用，称為血凝克制作用。螺旋体：是一类菌体细長，柔软、弯曲呈螺旋状、能活泼运動的原核單细胞微生物钩端螺旋体：菌体纤细、螺旋致密，一端或两端弯曲呈钩状的螺旋体支原体：支原体是一类無细胞壁的微生物，具多形性，可通過细菌滤器立克次氏体：立克次氏体是一类专性细胞寄生的小型革兰阴性原核單细胞微生物衣原体：是一类形态相似，能通過滤器、营严格细胞寄生，有独特生活周期的革兰氏阴性的原核生物真菌：真菌是一大类真核微生物，不含叶绿素，無根、茎、叶、营腐生或寄生生活；仅少数类群為單细胞，其他為多细胞；大多数呈分支或部分支的死状体；能進行有性和無性繁殖。菌丝：是單条管状细丝，為大多数真菌的构造單位孢子：孢子是生物所产生的一种有繁殖或休眠作用的细胞，能直接发育成新個体细菌素：某种细菌在生長繁殖過程中产生的一种具有杀菌作用的蛋白质，只能作用于与他同种不一样菌株的细菌以及与他亲缘关系相近的细菌毒性噬菌体：能使宿主细胞迅速裂解引起溶菌反应的噬菌体温和噬菌体：有些噬菌体侵入宿主细胞後，将其基因整合与细菌的基因组中，与细菌DNA一道复制，并随细菌的复制传递給後裔，不形成病毒粒子，不裂解细菌空斑形成單位（PFU）：将噬菌体按一定倍数稀释，通過噬菌体计数，可测的每毫升容积的空斑形成單位数。致病性：一定种类的病原菌在一定的条件下，能在宿主体引起感染的能力毒力：病原菌致病力的强弱程度，是菌株的特性化作用：某些细菌粘附于细胞表面後，能進入吞噬细胞或非吞噬细胞部的過程毒力岛：指病原菌的某個或某些毒力基因群，分子构造和功能有别于细菌染色体，但位与细菌染色体之变态反应：動物患某些慢性传染病時，可對病原体或其产物的再次進入产生强烈的反应串珠反应：在含青霉素0.5U/ml的培养基中，幼龄炭疽杆菌因细胞壁的肽聚糖合成受到克制，形成原生质体互相连接成串Ascoli沉淀反应：用加热抽提待检炭疽菌体多糖抗原与已知抗体進行的沉淀试验1.试述脂多糖和外膜蛋白的构成和功能。答：脂多糖：為革兰阴性细菌所特有，位于外膜的最表面，厚8-10nm，由类脂A，关键多糖和侧链多糖三部分构成。具有控制细胞的透性，提高Mg2+浓度，决定细胞壁抗原多样性等作用，因而可用于传染病的诊断和病原的地理定位，其中的类脂A更是G-病原致病物质毒素的物质基础。外膜蛋白：微孔蛋白分子筛作用，与细菌的粘附和特定物质摄取有关；脂蛋白使肽聚糖与外膜层牢固，噬菌体吸附的受体，参与营养物质转运。2.试述细菌特殊构造的概念和功能。仅在部分细菌中才有的或在特殊环境条件下才行成的构造称為特殊构造。重要是荚膜，S层，鞭毛，菌毛，性菌毛和芽孢等。荚膜某些细菌在其细胞壁外包绕一层粘液性物质，用理化反应消除後并不影响细胞的生命活動1）抗吞噬作用2）抗有害物质的损害作用3）营养物质的贮存場所与废物排出之地。S层某些细菌的一种特殊的表层构造，完整包裹菌体，由單一的蛋白质亚單位构成，排列规则呈晶格样构造1）分子筛和离子通道2）屏障作用3）粘附宿主细胞4）重要的表面抗原。鞭毛由鞭毛丝，鞭毛钩基体构成①鉴定价值，鞭毛是细菌的运動器官，细菌能否运動可用于鉴定。②致病作用：鞭毛运動能增强细菌對宿主的侵害，因运動往往有化學趋向性，可避開有害环境或向高浓度环境的方向移動。③抗原性：鞭毛具有特殊H抗原，可用于血清學检查。菌毛一般菌毛是细菌的粘附器官，细菌藉菌毛的粘附作用使细菌牢固粘附在细胞上，并在细胞表面定居，导致感染性菌毛具有向雌性菌株传递遗传物质的作用，有的還是RNA噬菌体的特异性吸附受体。芽孢某些细菌在一定的环境条件下，能在菌体部形成一种圆形或卵圆形小体，是细菌的休眠方式。所有产生芽孢都是革兰阳性菌。其特點是：①芽胞的抵御力很强；②代停止，处在休眠状态，但保持潜在的萌发力；③不是繁殖器官，一种芽孢只产生一种营养状态得细胞研究芽胞的意义：1）芽孢的抵御力强，是重要的传染源2）芽孢可作為可靠的灭菌指標。3.试述革兰氏染色的意义和原理。其重要的临床意义在于：1.鉴别细菌2.选择药物3.与致病性有关：革兰氏阳性菌能产生外毒素，革兰氏阴性菌能产生毒素，两者的致病作用不一样。原理如下：通過結晶紫初染和碘液媒染後，在细胞壁形成了不溶于水的結晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理時，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不會出現缝隙，，因此能把結晶紫与碘复合物牢牢留在壁，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂後，以类脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡結晶紫与碘复合物的溶出，因此通過乙醇脱色後仍呈無色，再經沙黄等紅色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈紅色。4.细菌新代的特點是什么？1.细菌生長和繁殖地速度极快、超過動物细胞的10~100倍；2.细菌运用多种化合物作為能源的能力遠遠强于動物细胞3.细菌對营养的需求比動物细胞更為多种多样，由于他們有多种代旁路4.细菌可运用超常流水线式生产地方式生成大分子物质5.细菌能产生诸如肽聚糖磷壁酸等特殊物质5.物质摄取的方式有哪几种？各有何特點？答：單纯扩散：靠浓度差转运；不需要能量；不需要载体；速度慢增進扩散：靠浓度差转运；不需要能量；有特异性载体蛋白参与；速度快积极运送：需要特异性的载体蛋白；逆浓度梯度；需要能量基因转位：需要载体蛋白；需要能量；在转运過程中物质发生了化學变化；重要存在厌氧菌和兼性厌氧菌中细菌群体生長分期和各個期的特點是什么？答：缓慢期：菌体增大，代活跃，合成并积累所需酶系统。對数期：细菌此時生長迅速，以恒定速度進行分裂繁殖，活菌数以几何级数增長，到达顶峰，生長曲线靠近一条斜的直线。稳定期：此時营养的消耗、代产物的蓄积等，细菌繁殖速度下降，死亡数逐渐上升，新繁殖的活菌数与死菌数大体平衡。衰亡期：细菌開好似大量死忙，死菌数超過活菌数。6.按功能细菌培养基分几类？答：鉴别培养基：用于培养和辨别不一样种类细菌的培养基，如：伊紅—美兰和麦康凯琼脂。选择培养基：在培养基中加入某种化學物质，如：SS平板。厌氧培养基：是為培养厌氧菌而设计的，措施是在培养基中加入還原剂如巯基乙酸钠等7.试述重要的细菌生化反应及用途。答：氧化酶试验：在有分子氧或细胞色素存在時，可氧化對二苯二胺出現紫色反应。试验用于检查细胞与否有氧化酶的存在。触酶试验：触酶又名接触酶或過氧化氢酶，滴加過氧化氢能立即出現气泡，因過氧化氢被催化分解為水和氧气。乳杆菌等許多厌氧菌為阴性氧化发酵试验（O/F试验）：不一样细菌對不一样糖的分解能力及代产物不一样，有的能产酸并产气，有的则不能。并且這种分解能力因与否有氧的存在而异，在有氧条件下称為氧化，無氧条件下称為发酵。试验時往往将同一细菌接种相似的糖培养基一式两管，一管用液体石蜡等封口，進行发酵，另一管置有氧条件下。培养後观测产酸产气状况。O/F试验一般多用葡萄糖進行VP试验：大肠杆菌和产气肠杆菌均能发酵葡萄糖，产酸产气，两者不能区别。但产气肠杆菌能使丙酮酸脱羧，生成中性的乙酰甲基甲醇，後者在碱性溶液中被空气中的分子氧所氧化，生成二乙酰与培养基中含胍基的化合物发生反应，生成紅色化合物，是為阳性。大肠杆菌不能生成乙酰甲基甲醇，故為阴性甲基紅试验:在VP试验中，产气肠杆菌分解葡萄糖，产生2分子酸性的丙酮酸转变為1分子中性的乙酰甲基甲醇，故最终的酸类较少，培养基PH>5.4，以甲基紅作為指示剂時，溶液呈橘黄色，是為阴性。大肠杆菌分解葡萄糖時，丙酮酸不转变為乙酰甲基甲醇，故培养液酸性较强，PH≤4.5,甲基紅指示剂呈紅色，则為阳性8.什么是火焰灭菌法、热空气灭菌法、煮沸灭菌、巴氏消毒法、间歇灭菌法、高压蒸汽灭菌法、滤過除菌？论述各措施的应用。答：火焰灭菌法：火焰直接灼烧，如接种环热空气灭菌法：指运用干热灭菌器，以干热空气進行灭菌的措施。合用于高温下不损壞、不变质、不蒸发的物品。在干热状况下，由于热空气的穿透力较低，需在160°C维持2h，才能到达杀死所有微生物及其芽孢、孢子的目的。煮沸灭菌：用于饮水一般器械如刀剑的消毒巴氏消毒法：是以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物，而又不致严重损害其营养成分和風味的消毒措施。目前重要用于葡萄酒，啤酒，果酒及牛乳等食品的消毒。详细措施分三类：低温维持巴氏消毒法，高温瞬時巴氏消毒法，超高温巴氏消毒法。间歇灭菌法;用于某些不耐高温的培养基，如血清培养基高压蒸汽灭菌法：即用高压蒸汽灭菌器進行灭菌的措施，是应用最广泛的、最有效的灭菌措施。但凡耐高温、不怕潮湿的物品，如多种培养基、溶液、玻璃器皿、金属器械、敷料、橡皮手套、工作服和小動物尸体等均可用這种措施灭菌滤過灭菌：通過机械阻留作用将液体或空气中的细菌等微生物除去的措施，重要用于不耐高温的营养液，血清，抗生素，空气等除菌9.论述紫外线杀菌法及其应用。答：波長200-300nm的紫外线（包括曰光中的紫外线）具有杀菌作用。紫外线波長：136-400nm，以250-300nm很强，265-266nm最强。但其穿透力弱，紫外线的部分波長与DNA的吸取光谱围一致，作用于DNA使同一条DNA链上的相邻的两個胸腺嘧啶共价結合而形成二聚体，干扰DNA复制与转录時的正常碱基配對，导致细菌致病性突变而死亡。此外紫外线還可使空气中的分子氧变為臭氧，释放氧化能力强的原子氧，具有杀菌作用。用于微生物试验室、無菌室、手术室、传染病房、种蛋室等的空气消毒，或用于不能用高温或化學药物消毒物品的表面消毒10.试述细菌具有致病性的重要根据（柯赫法则）。答：第一，特殊的病原菌应在同一疾病中查見，在健康者不存在。第二，此病原菌能被分离培养而得到纯种。第三，此纯培养物接种易感動物，能导致同样病症。第四，自试验感染的動物体能重新获得该病原菌的纯培养。11.怎样從分子水平上解释柯赫法则？答：第一，应在致病菌株中检出某些基因或其产物，而無毒力菌株中没有；第二，如有毒力菌株的某個基因被损壞，则菌株的毒力应減弱或消除。或者将此基因克隆到無毒菌株，後者成為有毒力菌株；第三，将细菌接种動物時，這個基因应在感染的過程中体現；第四，在接种動物检测到這個基因产物的抗体，或产生免疫保护。12.什么是细菌外毒素？其基本特性是什么？细菌外毒素在生長過程中由细胞分泌到细胞外的毒性物质。能产生外毒素的细菌大多数是革兰氏阳性菌，少数是革兰氏阴性菌。将产生外毒素的细菌的液体培养物用滤菌器過滤除菌，即能获得外毒素。其特點是：（1）化學成分是蛋白质，分子量為27000～900000道尔顿；（2）不稳定，易被热、酸及酶所灭活；（3）可經甲醛（0.3～0.4％）处理，脱毒成為类毒素；（4）抗原性强，可刺激机体产生高效价的抗毒素；（5）具亲组织性，但作用于组织有选择性。一般不引起宿主发热，但常可克制宿主蛋白质的合成，對宿主有细胞毒及神經毒性；（6）毒性极强，极微量就可使试验動物死亡。13.什么是细菌毒素？其基本特性是什么？毒素特指革兰氏阴性菌外膜中的脂多糖(LPS)成分，细菌在死亡後破裂或人工裂解後释放。革兰氏阳性菌细胞壁中的脂磷酸(LTA)具LPS活性，不致热。特性：毒素耐热：100℃，1h不破壞；不能被甲醛脱毒成类毒素；抗原性弱，抗体無中和毒素作用。14.什么细菌的遗传和变异？答：所谓遗传，系指亲子代细菌与子代细菌的相似性，它使细菌的性状保持相對稳定，是细菌存在的根据。所谓变异，系指亲代与子代细菌之间的不相似性，它使细菌得以進化。质粒有哪些重要特性？可赋予宿主菌那些重要特性？答：质粒是细菌出染色体外的遗传物质，编码细菌的多种重要的遗传生物學性状。特點：可以自身复制；编码多种重要的生物學性状；可自行丢失或經人工措施消除；不仅可以发生在同种属之间，還可以发生在不一样种属之间；具有相容性和不相容性16.论述细菌的遗传与变异的实际应用意义。答：微生物學诊断；疾病治疗和防止细菌基因转移和重组的方式有哪些？答：转化：供体菌游离的DNA片段直接進入受体菌，使受体菌获得新的性状转导：以温和噬菌体為媒介，把供体菌的DNA小片段携带到受体菌中，功過互换和整合，使受体菌获得供体菌的部分遗传性状。普遍性传到：被装入的DNA片段可以是供菌体染色体上的任何部分。局限性传导：為噬菌体所介导的供体染色体ishang個别特定基因的转导。

18.螺旋体，霉形体、立克次体、衣原体的重要生物學特性答：螺旋体1.形态：螺旋状，有些可通過细菌滤器或滤膜。2.构造：原生质柱、轴鞭毛、外鞘。3.运動性：运動活性4.繁殖方式：以二分裂法繁殖5：核酸：核酸兼有RNA和DNA。6.染色：革兰氏阴性，但大多数不易著色。7.培养特性：多数需厌氧培养，营养规定较高，有些不能用人工培养基培养。霉形体1.無细胞壁，细胞柔软，多形性，能通過细菌滤器2.在人工培养基中生長繁殖，形成“煎荷包蛋状”菌落3.具有DNA和RNA4.以二分裂或芽生方式繁殖5.對青霉素有抵御力立克次体1.多形性，重要是球状杆2.大小介于细菌和病毒之间，多数不能通過细菌滤器3革兰氏阴性，有细胞壁4.专性细胞寄生5.以二分裂方式繁殖6.對理化原因抵御力不强，犹對热敏感7.重要寄生于节肢動物中，通過叮咬感染人和動物衣原体：革兰氏阴性，圆形或椭圆形2.含DNA和RNA两种核酸3.有由黏肽构成的细胞壁4.细胞寄生5.独特地发育周期，并以二分裂方式繁殖6.對某些抗生素敏感病毒總论1.病毒的核衣壳對称型有那些？各自的特點是什么？答：病毒的核衣壳重要有螺旋状對称和20面体對称两种對称类型，少数為复合對称。各自的特點為：（一）螺旋状對称病毒衣壳呈螺旋状的空心圆筒，衣壳單体直接与螺旋状的核酸相连接，并不汇集成壳粒。衣壳的直径因病毒的种类不一样而差异。有的盘曲，有的不易弯曲。（二）20面体對称由20個等边三角形构成，有20個面、12個角、30条边。但凡20面体的衣壳必然是2：3：5對称。在衣壳上排列的圆形颗粒，称為壳粒子。它是衣壳的形态單位，每一壳粒基本上由5個或6個單体构成，前者称為五邻体，後者称為6邻体。复合對称其壳粒排列既有螺旋對称又有立体對称的型式，如痘病毒、噬菌体。2.病毒的概念及特點答：形体微小，构造简朴，仅具有一种核酸DNA或RNA，具有超级寄生性，且必须在電子显微镜下才能观测到的一类非细胞形态的微生物。特點：1.形体微小，缺乏细胞构造2.只具有一种核酸，DNA或RNA；3.以自身的核算為模版進行复制；4.缺乏完整地酶和能量系统；5.严格的细胞寄生3.病毒的化學构成答：一.核酸：决定病毒的遗传和变异。1.病毒只具有一种核酸，构成病毒的芯髓。2.核酸类型多样化3.病毒基因组核算复制多样化4.基因组构造简朴，所含基因组数目多。5.病毒核酸更易受宿主细胞的影响而发生基因突变和重组6.有些病毒清除囊膜和衣壳，裸露的DNA或RNA也能感染细胞，這样的核酸成為感染性核酸。具有条件：病毒核酸能作為mRNA或者能运用宿主细胞的RNA聚合酶转录病毒的mRNA病毒核酸不分节段。蛋白质：1.非构造蛋白：指由病毒基因组编码的，在病毒复制或基因体現调控過程中具有一定功能，但不結合于病毒颗粒中的蛋白质2.构造蛋白：是指构成一种形态成熟的有感染性的病毒颗粒所必须的蛋白质。是构成病毒衣壳的所有成分和囊膜的重要成分。

4.病毒的复制和复制周期

答：病毒在活细胞，以其基由于模板，在酶的作用下，分别合成病毒基因及蛋白质，在组装成完整的病毒颗粒，這种方式成為复制。從病毒進入宿主细胞開始，通過基因组复制給病毒蛋白合成，至释放出子代细胞的全過程，成為一种复制周期。

5.试述双股DNA病毒，單链正股RNA病毒、單股负股RNA病毒和逆转录病毒的增殖過程。

6.病毒的基本特性是什么？答：1、病毒只具有一种核酸，DNA或RNA，而其他微生物有两种核酸同步存在。2、病毒是严格的胞寄生微生物，它没有完整的代酶系统，也無進行独立生長、增殖的其他构造。3、病毒没有核糖体和tRNA，也無合成蛋白质所必需的酶。在其mRNA進行转录時，完全利宿主细胞的物质。4、病毒不通過繁殖，而是通過其核酸通過复杂的生物合成，获得大量不一样组分，進行装配增殖。5、病毒對抗生素和作用于微生物代途径的药物不敏感。绝大多数病毒對干扰素敏感。6、有些病毒的核酸能整合到宿主细胞的DNA中去，從而诱发潜伏性感染。7、简要论述病毒的增殖過程。答：吸附期，病毒要進入细胞，首先要吸附在易感细胞表面。（2）進入期病毒通過吞饮方式或直接進入方式進入细胞。（3）

脱壳期，病毒進入细胞後，脱去衣壳，才開始复制（4）生物合成期，病毒進行基本复制和子代蛋白质的合成。（5）病毒的装配和释放，病毒在细胞装配成完整的病毒子，然後通過不一样方式释放到细胞外8、列举出動物病毒转录mRNA的基本模式。P3049、有囊膜的病毒怎样成熟与释放？答：有囊膜的病毒以出芽的方式成熟，有细胞膜出芽及胞吐两种形式10、病毒病的微生物學检查程序。答：(一)、样品采集和递送及处理(二)、镜检1、光學显微显镜检查包涵体：基氏小体；细胞的病变特性：非化脓性脑炎。2、電子显微镜检查：重要有：形态、大小、构造；目前尚难培养的病毒；免疫電镜等。長处是：迅速、肯定、無需培养，可以检查到混合感染；缺陷是：不敏感（106／ml）、鉴别困难、效率低。成本昂贵。常用的技术：负染法、超薄切片法和免疫電镜法等。(三)、病毒分离培养鉴定

分离培养：動物接种——原動物/试验動物鸡胚接种——尿囊腔、卵黄囊、尿囊膜、羊膜腔等细胞培养——原代细胞；二倍体细胞；技术克隆/扩增；传代细胞组织块培养——肠管、气管环等鉴定：生物學特性鉴定；血清學鉴定（對病毒）；病毒特性：如血凝性；分子生物學技术等(四)、血清學检查：双份血清法（检抗体）HA、HI、补反、放射元素\荧光\酶標识中和试验

(五)、分子生物學技术核酸酶切图谱核酸探针PCR技术等其他病原微生物7、支原体的一般特性是什么？答：支原体属是一类能营独立生活的最小、最简朴的原核生物。特性是生長時需要外源脂肪酸和甾醇。支原体细胞柔软，高度多形性，基本形态為球形和丝状。支原体無细胞壁。由细胞膜、细胞质、核糖体和原核细胞核构成。革兰氏染色阴性，但不易著色，姬姆萨染色呈淡紫色。支原体可在人工培养基上繁殖，营养规定较高。生長合适PH7.6～8.0。5%CO2可增進其生長。固体培养基上生長缓慢,2-6天長出微小“荷包蛋”样菌落。支原体也可在鸡胚绒毛尿囊膜和细胞培养中生長。在動物血清和鸡蛋黄培养基上生長後，形成“薄膜”及“斑點”。“薄膜”在菌落表面，含胆固醇和磷脂；“斑點”位于菌落下方或周围，由钙镁等盐类构成。支原体广泛分布于污水、土壤、植物、動物和人体中，腐生、共生、寄生，常污染试验室的细胞培养及生物制品，有30多种對人或畜禽有致病性。阳性：金黄色葡萄球菌（無不）链菌属（無不）氏杆菌（無运）丹毒丝菌属（無不）炭疽芽胞杆菌（有不）梭菌（产气（有不），破風（有运））分支杆菌（無不）阴性;大肠杆菌（不）沙门杆菌（运）弧菌属嗜水气單胞菌巴氏杆菌裏氏杆菌（無不）嗜血杆菌（無不）布氏杆菌（無不）革兰阳性球菌葡萄球菌属一、致病性和毒力因子毒力因子重要包括酶和毒素，可引起侵袭性疾病：重要引起化脓性炎症。通過多种途径侵入机体，导致皮肤或器官的多种感染，甚至败血症。毒素性疾病：与葡萄球菌产生的外毒素引起。α毒素损伤细胞膜的毒素，對多种哺乳動物紅细胞有溶血作用肠毒素，按抗原性不一样，分為A、B、C1、C2、C3、D和E7個血清型均可引起急性肠胃炎即呕吐為重要症状的食物中毒凝固酶能使具有抗凝剂的血浆发生凝集的酶类物质，分為游离凝固酶：是液体纤维蛋白原变成固体纤维蛋白。結合凝固酶：是纤维蛋白原与菌体交联而使菌体凝聚。作用：有助于致病菌株抵御吞噬细胞和杀菌物质。耐热核酸酶，纤维蛋白溶酶，透明质酸酶等有助于细菌扩散二、微生物學诊断1.標本的采集；2.直接涂片检查；3.分离培养；4.鉴定：纯培养物1致病性葡萄球菌的鉴定：（1）产生凝固酶和耐热核酸酶（2）产生金黄色色素，有溶血性（3）发酵甘露醇2葡萄球菌肠毒素的检查：做细菌分离鉴定的同步，接种至肉汤培养基，培养後取滤液注射至6-8周的幼猫链球菌属一、兰氏分群法兰氏用温热的稀盐酸浸出C抗原，与特异性血清作沉淀反应，将链球菌分為20個血清群（A-V，缺I和J）。同群链球菌间，因表面蛋白质抗原不一样，又分為不一样型。二、根据溶血現象分类（1）α型：菌落周围又不透明溶血环β型：完全透明無色的溶血环，致病力强γ型：不产生溶血素，無溶血环三、微生物學诊断1.標本的采集；2.直接涂片检查；3.分离培养接种血平板，观测菌落形态和溶血状况；4.鉴定：菌落形态、溶血特性、生化特性、细菌形态。如定群定型，则需要做血清學试验肠杆菌科埃希菌属一、培养特性1.一般培养基上生長良好，光滑湿润、半透明、灰白色菌落；2.麦康凯琼脂上形成紅色菌落，伊紅美藍琼脂上产生黑色带金属光泽菌落3.致病菌株在绵羊血平板上呈β型溶血；4.生化特性：糖发酵试验；IMVIC试验（++——）；H2S阴性。周毛菌，最常見的大肠埃希菌俗称大肠杆菌二、微生物學诊断1.標本的采集；2.检查措施分离培养：选择培养基；生化试验：糖发酵、IMVIC试验（++——）、H2S阴性血清學试验：玻片凝集试验鉴定血清型沙门氏菌属一、培养及生化特性在选择培养基上因不发酵乳糖而呈無色菌落。IMVIC试验：—+—+；多数菌株H2S阳性二、微生物學诊断1.標本的采集；2.检查措施分离培养：选择培养基；生化试验：糖发酵、IMVIC试验（—+—+）、H2S阳性血清學试验：玻片凝集试验鉴定血清型弧菌属一、形态和培养特性：G-血平板生長有溶血性。嗜盐，大多数副溶血弧菌菌株對弧菌克制剂0/129不敏感，而鳗弧菌极為敏感。二、微生物學诊断：1.细菌分离培养2.生化试验3.0/129敏感试验或血清學试验嗜水气單胞菌一、培养特性1.血平板可产生β溶血圈2.麦康凯培养基上生長良好3.對弧菌克制剂0/129不敏感，多数不发酵乳糖二、微生物學诊断1.细菌分离培养2.生化试验3.鉴定致病性，则需检测胞外蛋白酶等毒力因子巴氏杆菌科及有关属巴氏杆菌属一.形态及染色两端钝圆，中央微凸的短杆菌，單個存在，有時成双排列，病料涂片用瑞氏染色或美藍染色時，可見經典的两级著色，培养物所做的涂片，两级著色不明显。二、培养特性對营养规定比较严格。在一般培养基上生長贫瘠，不溶血，麦康凯上培养不生長。三、微生物诊断1.涂片或触片镜检，染色，两级著色2.分离培养麦康凯琼脂不生長，血平板不溶血3.動物试验病料悬液或培养物接种小白鼠，引起小白鼠迅速死亡裏氏杆菌属一.培养及生化特性：生化试验大多阴性，不发酵葡萄糖和蔗糖，与多杀性巴氏杆菌相区别。二.微生物诊断1.涂片镜检：两级著色2.分离培养：巧克力培养基3.生化试验：不发酵葡萄糖和蔗糖嗜血杆菌属嗜血杆菌是一群酶系统不完全的革兰氏阴性菌，生長需要血液中的生長因子，尤其是X因子和V因子一.培养特性：初次分离培养時供应5%~10%CO2可增進生長。本菌属生長需提供X因子和V因子，在巧克力平板上生長较佳。毒力因子包括荚膜、菌毛、毒素等。二、微生物诊断1.显微镜检查：两级著色2.分离培养：血平板，巧克力平板3卫星現象4.生化试验5.血清學试验革兰氏阴性需氧杆菌布氏杆菌属一.形态及特性特性：不形成荚膜和芽孢，無鞭毛不运動，科兹洛夫染色法染成紅色，其他菌呈绿色二.种类及致病性：1分类六個种馬耳他，流产，猪绵羊，沙林鼠，犬2.致病性侵袭力强，可通過完整的皮肤、粘膜進入体。孕期動物對布氏杆菌最敏感，感染後常引起流产三.微生物學诊断1细菌學检查：意义不大2.血清學试验：用已知的布氏杆菌检查動物的血清抗体1）凝集试验感染初期检查2）补体結合试验慢性布氏杆菌诊断3.变态反应检测：不适宜做初期诊断。布氏杆菌水解素注射，观测紅肿反应。1-2CM為弱+，2-3CM為+4-6CM為强+氏杆菌属一.微生物學诊断1.镜检：G+小杆菌2.分离培养：藍绿色光泽的菌落，β溶血3.纯培养：溶血检查、运動性检查、生化特性鉴定4.動物试验：小鼠腹腔注射，剖检肝脏壞死，分离细菌5.血清學检查：凝集反应丹毒丝菌属一.微生物诊断1.镜检：G+小杆菌2.分离培养：血平板3细菌鉴定：培养特性和生化特性4.血清學诊断：凝集试验革兰氏阳性产芽孢杆菌炭疽芽胞杆菌一.培养特性1.需氧菌或兼性厌氧，营养规定不高2.在血琼脂上一般不溶血，但個别菌株也可轻微溶血3.液体培养基中呈絮状沉淀生長4.明胶穿刺培养，呈倒松树状，表面液化呈漏斗状5.在含青霉素的培养基中，可形成串珠反应二.微生物學诊断1.细菌學检查（1）镜检：大杆菌，两端平截，竹节状（2）分离培养：用一般琼脂或血琼脂（3）纯培养：镜检、串珠试验、生化试验（4）動物试验：将检查材料制成悬浮液或纯培养物給小鼠注射，24~36h,小鼠死于败血症。2.血清學试验（1)Ascoli沉淀反应（2）间接血凝试验（3）协同凝集试验（4）串珠荧光抗体检查（5）琼脂扩散试验产气荚膜梭菌一.生化特性：本菌最突出的生化特性是對牛乳培养基的“爆裂发酵”二.致病性：A型：人气性壞疽和食物中毒B型：羔羊痢疾C型：绵羊猝狙D型：牛毒血肠症E型：犊牛、羔羊肠毒血症三.微生物學诊断：1.直接涂