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文档简介
抗原构造复杂鞭毛抗原(H):为鞭毛抗原,是鞭毛中的蛋白质。不耐热,60℃30分钟被破坏。K或Vi抗原:为多糖类物质,位于O抗原外围,与毒力有关。重要的K抗原有伤寒沙门菌的Vi抗原、大肠埃希菌的K抗原等。菌体抗原(O):为菌体抗原,是细胞壁的脂多糖成分,耐热,100℃数小时不被破坏。原理将已知的伤寒杆菌“O”抗原、“H”抗原和甲型、乙型副伤寒杆菌“H”抗原与病人血清混合作试管定量凝集试验,以检测病人血清中的相应抗体,临床上作为诊断伤寒和副伤寒的参考依据。材料与仪器待检血清诊断菌液蒸馏水试管试管架微量移液器吸管水浴箱1.将大小一致的小试管放置试管架,4排,每排8支,作好标记。2.在所有32支试管中分别加入生理盐水0.5ml。3.另取1支试管,加生理盐水1.8ml和病人血清0.2ml,充分混匀,得到1:10稀释血清。在每排第1管中分别加入该1:10稀释血清0.5ml,充分混匀,即得1:20稀释血清。4.倍比稀释病人血清:分别从每排第1管中取0.5ml血清加入本排第2管,混匀,再从第2管吸取0.5ml血清加入第3管,混匀。依次类推,直至每排第7管中加入稀释血清0.5ml,混匀后从每排第7管中吸取0.5ml丢弃。从而每排1~7管得到1:20、1:40、1:80、1:160、1:320、1:640、1:1280的对倍稀释血清。第8管不加血清,只加生理盐水作阴性对照。试验步骤5.加入菌液:各排从第8管开始,由后往前每管加入诊断菌液0.5ml。第1排各管加入伤寒杆菌“H”菌液。
第2排各管加入伤寒杆菌“O”菌液。
第3排各管加入甲型副伤寒杆菌“H”菌液。
第4排各管加入乙型副伤寒杆菌“H”菌液。根据凝集反应的强弱,分别用“++++”、“+++”、“++”、“+”和“-”表示。
1.++++:完全凝集,上层液体清澈透亮,细菌完全凝集沉淀于管底。
2.+++:大部分凝集,上层液体基本透明,细菌大部分(75%)凝集沉淀于管底。
3.++:中度凝集,上层液体半透明,管底有明显凝集沉淀物。
4.+:
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