




版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
22法DetectionofconventionalexperimentalcatStaphylococcusaureusPCRmethod2024-12-31发布DB22/T3678—2024I本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构请注意本文件中的某些内容可能涉及专利。本文件的DB22/T3678—20241普通级实验用猫金黄色葡萄球菌检测PCR法本文件描述了普通级实验用猫金黄色葡萄球菌的PCR检测方法,给出了试验原理、材料、样品、试NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范a)高速离心机,离心速度:1000r/min~20000r/min;a)阳性对照品:金黄色葡萄球菌标准菌株(ATCC259232j)70%乙醇溶液(用无RNase去离子水配制);k)核苷酸混合物(dNTPs)。7.1.1.2用灭菌接种环挑取适量7.1.1.1样品,加入4mL7.5%氯化钠营养肉汤,均质后置于(36℃±1℃)培养箱中培养18h~24h,取上清液,注明编号后备用。7.1.2.1采集中段粪便,干粪便加入7.5%氯化钠营养肉汤均质后进行接种,稀便直接接种培养。置于培养箱中36℃培养18h~24h,取上清液,注明编号后备用。7.1.2.2无菌采集分泌物或浓汁接种在7.5%氯化钠营养肉汤中,置于培养箱中36℃培养18h~采集或处理的样品在2℃~8℃条件下保存应不超过24h;如需长期保存,应放置在-80℃冰箱中。按照NY/T541的规定操作。DB22/T3678—20243用量/µLDNA模板(20ng/µL~50ng1123451注:可使用其他等效PCR检测试剂盒进与适合的DNA标准标志物做对比;电压60V~100V进行电泳,当溴酚蓝移动到距离胶板下缘1cm处时,停止电泳。将琼脂糖凝胶置于凝胶成像系统中,观察P8.3.1阴性对照和空白对照未出现目的条带,阳性对照出现423bp特异性目的条带,试验成立;否8.3.2检测样品未观察到423bp处有扩增条带,样品检测结果为阴性;检测样品观察到423bp处有扩增条带,样品检测结果为阳性,应符合图DB22/T3678—20244A.17.5%氯化钠营养肉汤室温冷却至50℃~55℃时,向其中加入DNA染料,轻轻晃动混匀,避免产生气泡,将电泳梳子置入制胶板中,然后将琼脂糖溶液倒入制胶板,凝胶适宜厚度为3mm~5mm,需确认在梳齿下或梳齿间没称取1g水溶性钠型溴酚蓝放入烧杯中,再向烧杯中加入100mL双蒸水,搅拌加入800mL双蒸水,充分搅拌均匀;加入55DB22/T3678—2024GCTTGCTATGATTGTGGTAGCCATCATTATTGTAGGTGTATTAGCATTTCAATTTATGAATCATACGGGTCCACAAATCATGAAACTGTACAAGATTTAAATGGTAAAGATAAAGTACATGTTCAAAGAGTTGTGGATGGTGATACATTTATAAATGGTAAAGAAATTAAAGTTAGGCTTATAGGGGTTGATACGCCAGAAACGGTGAAACCGAATACGCCTGTACAACCATAAGCATCAAATTATAGTAAGAAGACATTAACAAATCAAGATGTTTATTTAGAATATGATAAAGAAAAGCAAGACCGCTATGTTGGCGTATGTAT
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 2025店铺绿色环保装修补贴及环保产品采购合同范本
- 2025年度智能门窗系统开发与施工合同
- 二零二五年度国际艺术品买卖合同
- 二零二五版事业单位职工住房保障合同
- 2025版个人商业贷款担保合同协议
- 2025版文化演艺项目连带责任担保协议
- 江苏省扬州教育院附属中学2026届中考语文模拟试题含解析
- 监控项目施工合同范本2025年
- 2026届泰州市海陵区重点中学中考语文考前最后一卷含解析
- 合作经营广告装饰公司合同2025年
- SJ/T 11926-2024 产品碳足迹 产品种类规则 光伏组件(正式版)
- 2022信息系统安全运维报告模板
- 骨肉瘤知识讲座
- 关节置换术后的感染预防与管理
- 普洱茶简介演示
- 中国石化加油站视觉形象(VI)标准手册-课件
- 绝对干货!国有企业总经理办公会决策事项及总经理职责清单
- 飞行器总体设计课件
- 国有控股企业管理制度
- 2024届高考语文复习《登泰山记》复习课件
- 地下通道保洁维护服务投标方案
评论
0/150
提交评论