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文档简介
2.2单克隆抗体的制备
素养目标1.运用所学生物学基础知识和相关资料,探索单克隆抗体制备过程中两次筛选的原理;尝试通过小组合作的方式,提高合作学习、探究式学习的能力。2.通过构建单克隆抗体制备的流程图,培养归纳与概括能力及构建模型并运用模型分析问题的能力。1.传统抗体制备方法及缺陷向动物体内反复注射某种抗原从动物血清中分离所需抗体产量低、纯度低、特异性差(2)缺点:(1)方法:2.单克隆抗体制备思路:思考:一个B淋巴细胞能产生几种特异抗体?B淋巴细胞不能无限增殖困难:如何解决这个问题呢?单克隆抗体的制备克隆B淋巴细胞细胞群单克隆抗体米尔斯坦科勒B淋巴细胞骨髓瘤细胞(能产生抗体)(能大量增殖)杂交瘤细胞(既能产生抗体,又能大量增殖)一个极富创造力的方案:观察课本图2-16的制备单克隆抗体示意图探究一单克隆抗体的制备随机融合后培养基中细胞的类型有哪些?小组合作利用画图的形式模拟细胞融合的过程(只考虑两个细胞融合)
筛选杂交瘤细胞资料
哺乳动物细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被
氨基喋呤阻断;淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但不能无限增
殖;骨髓瘤细胞中只有D途径,没有S途径,但能不断分裂增殖。思考:若在基础培养基中加入氨基喋呤,能否筛选出杂交瘤细胞,说出理由。B淋巴细胞及同型融合细胞:不能无限增殖,死亡骨髓瘤细胞及同型融合细胞:无S途径,D途径被阻断,不能增殖杂交瘤细胞:有淋巴细胞的S途径和骨髓瘤细胞不断增殖特性»»
单克隆抗体的制备
第一次筛选探究二
筛选分泌所需抗体的杂交瘤细胞提示实验室中筛选能分泌所需抗体的杂交瘤细胞用到的方法和器具分别有:稀释法、96孔板(每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞)、抗体检测板等思考:根据课本内容及图2-15,尝试说出筛选的过程。»»
单克隆抗体的制备
第二次筛选探究三96孔板抗体检测板
抗原和抗体特异性结合!有限稀释法每一个孔中尽量只接
种一个杂交瘤细胞!
侧面模拟图!
取上清液进行抗体检测
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单克隆抗体的制备
第二次筛选
!克隆化培养一段时间呈阳性1、总结:两次筛选的目的和方法2、如何培养?检测原理:小组合作:下面让我们追寻科学家的足迹,根据课本图2-16,利用所给的材料,构建单克隆抗体制备流程图。要求:以文字和箭头的形式构建,文字部分用提供的材料贴在白纸上,用笔画出箭头(注:筛选的词条贴在箭头右侧)思考单克隆抗体制备过程中用到了哪些技术?»»
单克隆抗体的制备模型构建当堂训练科学家以SARS病毒的核衣壳蛋白为抗原,制备出了单克隆抗体。下列相关叙述正确的是(
)A.利用该单克隆抗体可以诊断是否感染SARS病毒B.体外培养单个B淋巴细胞可以获得SARS病毒的单克隆抗体C.将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合,经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞D.将纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内,从小鼠血清中分离出的抗体为单克隆抗体A【课堂小结】【课下巩固练习】1
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