《基因工程》复习题（填空和选择）

《基因工程》复习题（填空和选择）（15页）

基因工程复习题（填空和选择）

复习题1

二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两

者用〃；〃隔开。

1.基因操作（Genemanipulation）的核心部分是基因克隆

（genecloning）,genecloning的基本要点

有，和。

2.是遗传物质的基本单位，也是作为遗传物质的核酸分子上的一段

片段。它可以是连续

的，也可以是；可以是，也可以是RNA;可以存在于染色体上，

也可以

3.基因操作并不是一个法律概念，除了包括基因克隆外，还包括

基因的、、

和等与基因研究相关的内容。

4.启动子（Promotor）是指。通常一个Gene是否

表达，是关键的一步，是起决定作用的。在转录过程中，

Promoter还是的结合位点。

5.原核生物的RNApolymerase主要由两部分组成：和，其中o-

因子并

不参与RNA的合成，它的作用主要是。

6.从到的这一段距离称为一个转录单位，或者一个转录产物，其

中可包

括一个或者多个Gene。

7.转录终止子主要有两种，一种是，另一种是。

8.重叠基因（Overl叩pinggene）是指，间隔基因

（Interruptedgene）是指

复习题2

二、填空题：

l.Ecok的一般分子组成为R2M2S,在这些亚基中，R亚基具有

的作用，M亚

基具有的作用，S亚基具有的作用。

2.限制性内切核酸酶(Restrictionendonuclease)的命名是按属

名和种名相结合的原则的,通常第一个大

写字母取自，第二、三个字母取自，第四个字母则用表示。

3.n型限制酶识别回文对称序列，在回文序列或切割DNA,产生

带(3’

-0H)和(5'-P基团)的DNA的产物，需(Mg2+)的存在

才能发挥活性，相应的修饰酶只需SAM。

4.识别相同序列的限制酶称

5有些限制酶只切割双链DNA中的一条链，产生单链缺口，即

6.个体间DNA限制性片段长度的差异叫

7.DNA载体经Hindm切割后产生粘性末端，能发生载体自连，影

响载体与外源DNA的连接效率,

常用的防止载体自连的方法有、。

8.完全的回文序列应具备两个特点即和。

9.DcmMethylase(Dem甲基化酶)的识别序列为和，该酶的作

用位点

为。

10.大肠杆菌中至少有三种依赖于甲基化的限制系统、、。

它们识别的序列各不相同，但只识别经过甲基化的序列，都限制

CpG甲基化酶作用的DNA。11.分别写出以下限制性内切核酸酶

(Restrictionendonuclease)的识别序列EcoRI、Sau3A

I、Hindm。

12.限制性内切核酸酶(Restrictionendonuclease)通常保存在

(50%)浓度的甘油溶液中。

13.载体和外源DNA经酶切，在进行下一步操作前,需消除限制

性内切核酸酶(Restrictionendonuclease)

的影响。常用的方法有、、、。参考答案：EDTA法；加热法;苯

酚抽提法；试剂盒除酶法

14.反转录酶来自AMV或M。-MLV,即依赖于RNA的DNA聚

合酶，它有活性，但

无活性。

15.末端转移酶来源于，是存在于前淋巴细胞及分化早期的类淋巴

样细胞内的一种不寻常的

DNA聚合酶,在存在下,末端转移酶催化dNTP加于DNA分子

的31羟基端。

参考答案：小牛胸腺;Mg2+

16.T4DNA连接酶的分子量为68kDa,它可以催化DNA5,磷酸

基与3,羟基之间形成磷酸二酯键。

反应底物为粘端、切口、平端的RNA或DNA。低浓度和可以提

高平端连接效率。参考答案：聚乙二醇PEG;单价阳离子

三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。

1.限制性内切酶一般保存在（）浓度的甘油溶液中。

A.10%

B.20%

C.50%

D.60%

2.限制性图谱与限制性片段长度多态性（RFLP）图谱的最显著区

别在于（）

A.前者是物理图谱后者是连锁图

B.前者是连锁图后者是物理图谱

C.前者是遗传图谱后者是物理图谱

D.前者是物理图谱后者是遗传图谱

3.迄今为止所发现的限制性内切核酸酶可以作用于（）

A.既可以作用于双链DNA,又可以作用于单链DNA

B.只能作用于单链DNA

C.只能作用于双链DNA

D.只能作用于RNA

4.已知某一内切酶在一个环状DNA上有4个切点，当用此酶切割

该环状DNA,可以得到（）个

片段

A.3

B.4

C.5

D.6

5.甘油会使许多限制性内切核酸酶的特异性发生改变，是导致一

些酶星星活性的主要原因之一，防止的

办法是在酶切反应体系中，将甘油的浓度控制在（）以下

A.5%

B.10%

C.20%

D.30%

6.在下列进行DNA部分酶切的条件中，控制哪一项最好（）

A..反应体积

B.酶反应温度

C.反应时间

D.酶量

7.DNA被某种酶切割后，电泳得到的电泳带有些扩散,下列原因

中，哪一项不太可能（）

A.蛋白质（如BSA）同DNA结合

B.有外切核酸酶污染

C.酶失活

D.酶切条件不适合

8.nick与gap的区别在于（）

A.前者是断开了一个磷酸二酯键，后者是指DNA的单链中有较小

的缺失

B.前者是是指DNA的单链中有较小的缺失，后者是指断开了一个

磷酸二酯键

C.二者无本质区别

D.前者无法回复，后者可以回复

9.限制酶的命名遵循一定的原则，涉及来源（宿主），菌株或生

物型。命名时（）

A.属名第一字母，种名头两个字母，菌株号，然后再加上序号

（罗马字）

B.种名第一字母，属名头两个字母，菌株号，然后再加上序号

（罗马字）

C.属名第一字母，亚种名头两个字母，菌株号，然后再加上序号

（罗马字）

D.种名第一字母，亚种名头两个字母，菌株号，然后再加上序号

（罗马字）

10.以下对同裂酶的描述中/那一项是正确的（）

A.识别相同序列的限制酶称同裂酶

B.可以产生相同的粘性突出末端的限制酶称同裂酶

C.同裂酶的切割位点一定相同

D.同裂酶的切割位点不相同

11.下列哪一种酶作用时需要弓I物（）

A.末端转移酶

B.反转录酶

C.DNA连接酶

D.限制酶

12.关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下述描述中只有（）不

恰当

A.由作用于同一DNA序列的两种酶构成

B.这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰

C.不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统

D.这一系统的核酸酶都是II类限制性内切核酸酶

13.限制性内切核酸酶可以特异性地识别（）

A.特定的三联密码

B.双链DNA的特定碱基对

C.双链DNA的特定碱基序列

D.单链DNA的特定碱基序列

14.在大肠杆菌中,大多数都有三个位点特异性的DNA甲基化酶,

以下选项中哪一种酶不包括在内（）

A.dam

B.dem

C.EcoKI

D.SssI

15.在大肠杆菌中，至少有3种依赖于甲基化的限制系统，以下选

项中不属于这3种的为（）

A.mcrA

B.mcrBC

C.merD

D.mrr

16.下面有关限制酶的叙述哪个是错误的（）

A..限制酶是外切酶而不是内切酶

B.同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的

C.一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双链DNA,产生

粘末端

D.一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA,产生平末

炳

17.DNA连接酶在体内的主要作用是在DNA复制、修复中封闭缺

口，下列对DNA连接酶的描述中，

哪项是正确的（）

A.将双链DNA分子中的51磷酸基团同3--0H末端重新形成磷

酸二酯键

B.作用时不消耗能量

C.需要Mn2+等二价辅助离子

D.也可以连接RNA分子

复习题3

二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两

者用〃「隔开。

1.载体（Vehicle）的类型有，，，等。

2.Genecloning是指，

基因文库（Genelibrary）是指。

3.Plasmid的定义是，Plasmid能进行自我复制，大多数为链

状DNA分子,大小一般为kb。

4.即为质粒的拷贝数，按照质粒拷贝数的多少，质粒可以分为

和，质粒多数是一些具有转移能力的大质粒；质粒多数是一些不

具有转移能力的小质粒。

5.松弛型质粒和严谨型质粒融合以后，杂合质粒一般优先使用的

复制子。

6.称之为质粒的不相容性。如果两个质粒不能稳定地共存于同一

个寄主细胞

中，则它们属于（填相同或不同）的不相容群。

7.质粒具有转移性，它是指，它需要（移动基因mob）,（转移

基因tra）和（转移起

始位点）

8根据质粒的转移性可以将质粒分为和，一般大质粒都是，

一般都是小质粒，其上没有

9.按其用途可将标记基因分为选择标记和筛选标记，选择标记一

般用于，筛选标记一般用

于

H.pBR322质粒是基因工程最重要的人工质粒之一，它的大小约

为kb,用于其组建的三个亲

本质粒是,，和。此质粒具有一个colEl松弛型质粒复制子，两个筛

选标记氨茉青霉素抗性基因和四环素抗性基因，其中colEl松弛型质

粒复制子来源于，氨莘青霉素抗性基因来源于，四环素抗性基因来源

12.pUC系列的质粒载体是由和两种质粒构建而来的，其中氨采青

霉素抗性

基因来自于，多克隆位点MCS来自于。pUC系列的质粒载体一

般是成对存在的如pUC18和pUC19,其主要区别是。

14.A噬菌体Genome的长度约为kb,其DNA分子为(填单或

双)链。它

的DNA分子既可以以状存在也可以以环状存在，而且可以自然成

环，其原因是在入度菌体的线性分子的两端各有一个长度为个碱基的

天然粘性末端，这种粘性末端可以自然成环，成环后的粘性末端就叫

做。

15.A噬菌体在感染大肠杆菌以后,可以进入Lyticgrowth也可以

进入如果其基因组

Lysogenicstateo

DNA通过专一性重组整合到宿主染色体中，则其进入；它也可以

选择进入，大量复制并组装子代噬菌体颗粒。

16.在人噬菌体载体中，常用的选择标记有，cI基因失活，和等。

17.改造后的人噬菌体才可用作载体，按照改造方式的不同可将其

分为两种类型，即插入型载体

(insertionvectors)和替代型载体(replacementvectors)°

其中Insertionvectors是指;

Replacementvectors是指

18.AgtlO是一个由入噬菌体衍生而来的insertionvectors,主要

用于。它缺失了含有溶

源整合的；入gtll载体也是一种insertionvectors，该载体的最

大特点是在最左侧可替代区置换了一段基因，可编码B-半乳糖苗酶，

在IPTG/X-gal平板上可形成色噬菌斑。参考答案：克隆小的cDNA;

b257;lacZ;蓝

19.A噬菌体由于受到包装的限制，插入外源DNA片段后，其总

的DNA长度应该在噬菌体genome

的范围内。

20.Cosmid实际上是由和构成的杂合载体，也可以说是带有序

列的质粒。

22.Cosmid的组成包括三个部分：，和，其中复制子来源

于，cos序列来源于。

23.A噬菌体的最大克隆片段是kb,Cosmid的最大克隆片段可达

到kb。

24利用人噬菌体载体构建的genelibrary中，文库是以的形式存

在的；用质粒载体构建

的genelibrary是以的形式存在的；粘粒载体构建的gene

library是以的形式存在的。

25.M13噬菌体颗粒是状的,其基因组为（填单或双）链DNA。

它只感染

性大肠杆菌，感染宿主以后，其噬菌体颗粒的释放不像人噬菌体

那样要裂解宿主菌，而是。

28.M13K07辅助噬菌体是的衍生株，它带有一个来自的复制起点,

还带有一

个来自的卡那霉素抗性基因，用作选择标记；基因n带有一个的

突变，导致基因蛋白质第40位氨基酸由甲疏氨酸变为异亮氨酸。

29.YAC载体基本组成元件有，，，

和。

30.表达载体（Expressvector）是在常规载体的基础上衍生而来

的，其构建的原理主要是增加一

个，以及有利于表达产物的分泌、分离或纯化的元件；穿梭载体

（Shuttlevector）是指

三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。

1.氨莘青霉素的工作原理为（）

A.可以抑制细胞壁肽聚糖的合成

B.可以抑制核糖体的转位

C.可以与核糖体50S亚基结合并抑

制蛋白质合成D.可以与核糖体30S亚基结合并抑制蛋白质合成

3.载休所具备的特点中，以下描述不恰当的是（）

A.必须具备复制起点，能够自主复制

B.必须具备合适的酶切位点，供外源DNA片段插入

C.有一定的筛选标记，用于筛选

D.必须具有较高的拷贝数，便于制备

4复制子由三部分组成，以下不属于的为（）

A.复制起点

B.复制区

C.复制终点

D.启动子

5.pBluescriptM13载体在多克隆位点的两侧引入了T7和T3两

个噬菌体的启动子，这样增加了该载

体的功能，以下4种功能哪一种是不正确的（）

A.可以对插入到多克隆位点的外源片段进行转录分析

B.利用这两个启动子的通用引物进行PCR扩增

C.利用通用引物进行序列分析

D.利用这两个启动子进行定点突变

6.以粘粒为载体转染受体菌后，平板上生长的菌落会出现大小不

一、牛长速度不一的现象，其原因是（）

A.营养成分不足

B.重组后的质粒复制不稳定

C.重组后的粘粒整合到宿主染色体上

D.重组体中插入片段的大小不同

7.噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的,其中来自质粒的主

要结构是（），而来自噬菌体的主要

结构是（）

A.复制区;

B.IG区IG区；

C.复制区多克隆位点；

D.IG区IG区；多克隆位点

9.M13单链噬菌体的复制分为三个阶段，以下哪一项不属于此（）

A.SS—RF

B.RF-RF

C.RF-SS

D.SS-SS

10.A噬菌体DNA和M13单链噬菌体DNA在成熟前的DNA复

制类型为（）

A.滚环复制模型

B.0复制模型

C.前者为滚环复制模型，后者为6复制模型

D.前者为0复制模型，后者为滚环复制模型

12以下对粘粒为载体的重组体的描述正确的是（）

A.各重组体在平板上生长的速度不同，但是转化子中插入片段的

扩增量是相同的

B.各重组体在平板上生长的速度不同，转化子中插入片段的扩增

量也是不同的

C.各重组体在平板上生长的速度相同，而且转化子中插入片段的

扩增量也是相同的

D.各重组体在平板上牛长的速度不同，但是转化子中插入片段的

扩增量是相同的

13.下列哪种克隆载体对外源DNA的装载量最大（）

A.粘粒

B.酵母人工染色体（YAC）

C.质粒

D.A噬菌体

14.同一种质粒DNA,以三种不同的形式存在，电泳时，它们的

迁移速率是（）

A.LDNA>OCDNA>SCDNA

B.SCDNA>LDNA>OCDNA

C.SCDNA>OCDNA>LDNA

D.OCDNA>SCDNA>LDNA

15.关于穿梭质粒载体，下面哪一种说法最正确（）

A.在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点

B.在不同的宿主中具有不同的复制机制

C.在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶

D.在不同的宿主细胞中具有不同的复制速率

16.反向重复序列：（）

A.参与转座子的转座

B.可以是某些蛋白的结合位点

C.可以回折形成发夹结构

D.以上说法都不对

17.A噬菌体线性DNA分子的两端各有一个（）个碱基组成的天

然黏性末端

A.10

B.12

C.14

D.16

18.下列关于细菌人工染色体（BAC）的特点描述，除（）以外都

是TF确的

A.BAC载体在细菌中以环状超螺旋状态存在，使分离操作比YAC

容易

B.BAC载体在大肠杆菌中为高拷贝

C.用电击法将大质粒转化大肠杆菌比酵母的转化率提高了10~

100倍

D.克隆在载体上的外源片段可以直接进行末端测序

19粘粒（cosmid）是一种人工建造的载体，下列对它的描述中

哪一项是不正确的（）

A.它具有cos位点,因而可以进行体外包装

B.它具有质粒DNA的复制特性

C.进入受体细胞后，可引起裂解反应

D.进入受体细胞后，可引起溶源化反应

20.松弛型质粒：（）

A.在寄主细胞中拷贝数较多

B.采用0型复制方式

C.一定具有抗性标记

D.以上均正确

21.关于质粒的不相容性，下列哪一种说法正确（）

A.相同相容群的质粒能够共存于同一个细胞

B.质粒可以分成若干个相容群，但不能分为若干个不相容群

C.如果两个质粒不相容，说明它们的复制机制相同属

D.于同一个不相容群中的质粒，不仅复制机制相同，而且拷贝数

和分子量也相同

22.一般情况下，质粒的存在情况以下描述正确的是（）

A.独立存在

B.整合在染色体上

C.既可以整合在染色体上，也可以独立存在

D.不能独立存在

24.下列哪一项不是质粒载体必备的基本特征（）

A.可以独立复制

B.有选择标记

C.有多克隆位点

D.含lacZ

28.下面关于松弛型质粒的性质描述中，（）是不正确的

A.通常带有抗性标记

B.可以使用氯霉素作用增加拷贝数

C.同严谨型质粒融合后,杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子

D.质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，而不受染色体复制机

制的制约，因而有较多的拷贝数

30.以下不是表达载体所必须的条件是（）

A.必须具备很强的启动子

B.必须具备很强的终止子

C.启动子不需要受控制

D.所产生的mRNA必须具有翻译的起始信号

复习题4

二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两

者用〃；〃隔开。

1.抽提含PBR322系列质粒的细菌前，需在培养基中加入一定浓

度的氯霉素，此氯霉素的作用

是。

2.在用SDS分离DNA时，要注意SDS的浓度，0.1%和1%SDS

的效果是不同的，前者，

后者

3.在Southernhybridization中，DNA经琼脂糖凝胶电泳后，通

常须经NaOH处理,其原因

是。

4.复性是指，杂交是指。

5.DNA或RNA在杂交前，需将其转移到膜上，常用的膜有和。

三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。

1.用SDS-酚抽提DNA时，SDS浓度十分重要，0.1%和1%的

SDS的作用分别为（）

A.前者能将DNA和RNA一起分离出来；后者只能将RNA分离

出来

B.前者只能将RNA分离出来；后者能将DNA和RNA一起分离

出来

C.二者均只能将DNA分离出来

D.二者均能将DNA和RNA一起分离出来

2.从细胞或组织中分离DNA时常用蔗糖的作用（）

A.抑制核酸酶的活性

B.加速蛋白质的变性

C.保护DNA,防止断裂

D.有利于细胞破碎

3.以下保存DNA的温度中，哪一种是最好的（）

A.室温

B.4-5℃

C.-20℃

D.-70℃

4.在分离DNA过程造成DNA分子断裂的因素很多，下列说法中

哪一项是不正确的（）

A.核酸酶的降解

B.化学降解

C.保存液中未加一滴氯仿

D.物理剪切

5.关于cDNA的最正确的说法是（）

A.以mRNA为模板合成的双链DNA

B.同mRNA互补的单链DNA

C.同mRNA互补的双链DNA

D.以上都正确

6.一个典型的哺乳动物细胞中,大部分的RNA为（）

A.tRNA

B.mRNA

C.rRNA

D.核内小分子RNA

7.Agarose-EB电泳法分离纯化cccDNA的原理是（）

A.EB可以较多的插入到cccDNA中，因而迁移速度快

B.EB不容易插入到cccDNA中,因而迁移速度快

C.EB不容易插入到线性DNA中,因而迁移速度快

D.EB不容易插入到线性DNA中，因而迁移速度慢

8.下列哪一项不是Southernblotting的步骤（）

A.用限制酶消化DNA

B.DNA与载体的连接

C.凝胶电泳分离DNA片段

D.DNA片段转移到硝酸纤维膜上

9.Southernblotting的DNA探针()杂交

A.只与完全相同的片段

B.可与用某些限制性内切酶切成的DNA片段

C.可与任何含有相同序列的DNA片段

D.可与任何含有互补序列的DNA片段

10以下()方法才能说明外源基因进行了表达

A.原位菌落杂交

B.Southernblotting

C.Northernblotting

D.Westernblotting

11.斑点杂交的缺点在于()

A.杂交速度较Southernblotting要快

B.一次比Southernblotting可以分析多个样品

C.可分析混合的DNA样品中是否存在能与特定探针杂交的序列

D.假阳性较高

12.菌落杂交筛选重组体时,()

A.需要外源基因的表达

B.不需要外源基因的表达

C.不需要对菌体进行处理

D.以上说法都正确

13.Southernblotting与Northernblotting的区别在于()

A.印记的对象不同，前者是对DNA,后者是对RNA

B.印记对象不同,前者是对DNA,后者是对蛋白质

C.电泳条件不同，前者是变性条件，后者是非变性条件

D.电泳条件相同，均为非变性条件

14.以下不属于核酸探针的是()

A.RNA探针

B.基因组探针

C.cDNA探针

D.抗体

复习题5

二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两

者用〃；"隔开。

1.PCR是的简称。PCR反应体系的基本要素

有，，，等。

2.PCR反应过程分为三个步骤，即，和。

3.在PCR反应体系中，Taqpolymerase的合成速率取决于，，

dNTP的

浓度，，等。

4.PCR反应体系中往往要加入适量的矿物油，其作用是。

5.PCR反应过程的最适温度仅与有关，其定义是指。

6.一般常规的PCR仅能扩增kb以下的DNA片段。

的标准缓冲液含

7.PCRmmol/LKCIzmmol/LTirs.HCIz

mmol/L

MgCI2e

8.A/Tcloning是利用。

9.随机引物（Randomprimer）是指

10在简并引物的设计中，常常要用到di（次黄瞟岭），其原因是。

三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。

1.聚合酶链反应可表示为（）

A.PEC

B.PER

C.PDR

D.PCR

2.催化聚合酶链反应的酶是（）

A.DNA连接酶

B.反转录酶

C.末端转移酶

D.TaqDNA聚合酶

3.以下各项中不是PCR反应所必须的是（）

A.模板和引物

B.dNTP

C.Taq酶和buffer

D.甘油

4.关于PCR技术的叙述，下列哪项是错误的？（）。

A.以DNA复制为基础而建立起来的技术

B.利用PCR技术可完全无误地扩增基因

C.反应体系需模板、一对引物、4种dNTP、耐热DNA聚合酶和

缓冲溶液

D.以变性-退火-延伸为一周期

5.有关PCR的描述下列哪项不正确：（）

A.是一种酶促反应

B.引物决定了扩增的特异性

C.扩增的对象是氨基酸序列

D.扩增的对象是DNA序列

6.以下关于简并引物的描述中，正确的是（）

A.简并弓I物是根据已知DNA序列设计的引物群

B.简并引物是根据已知蛋白质的氨基酸序列设计的引物群

C.设计简并引物不需要考虑密码子的偏爰性

D.简并引物与普通的PCR引物是相同的

7.PCR扩增有时会出现弥散的条带，以下原因阐述不正确的是（）

A.退火温度过低

B,退火温度过高

C.dNTP浓度过高

D.循环次数过多

9.设计聚合酶链反应的引物时，应考虑引物与模板的（）

A.5,端特定序列互补

B.5,端任意序列互补

C.31端特定序列互补

D.3,端任意序列互补

复习题6

二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两

者用〃；"隔开。

1.年，创立了测定DNA序列双脱氧终止法;同年，Maxam和

Gilbert发展了。

3.在开始测序前，必须根据待测序列区的长度，所要求的测序精

确度以及现有的设施来制定测序总策略。

根据测序的目的，通常可将测序分为和。

4.常用的双脱氧终止法测定DNA序列，其长度一般不会超过1Kb,

因此进行大分子DNA测序时，

需，常用的方法有、和。

三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。

1.有两种确定核酸中核昔酸序列的方法：化学序列分析法

(Maxam-GIbert)和酶学序列分析法(Sanger)。

酶学测序法的基本原理/优点是()

A.碱基与特殊燃料间不同的相互作用

B.限制性位点与DNA末端标记的相关性

(：.一个合成引物的延伸和DNA修复合成的可靠终止

D.可同时对DNA双螺旋的两条链进行测序

2.有关DNA序列自动化测定的不正确叙述是()

A.用荧光代替了同位素标记

B.激光扫描分析代替人工读序

C.基本原理与手工测序相同

D.不再需要引物

复习题7

二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两

者用〃；〃隔开。

1.基因突变(Genemutation)的类型有，，等。

.利用技术介导的定点诱变(

3PCRSite-directedmutagenesis)o

较常用的方法一般有三种

即，和。

复习题8

二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两

者用〃；〃隔开。

1.构建Genelibrary时，应根据所要分离的外源基因的大小选择

合适的载体，这些载体通常包含有人噬

菌体、YAC以及、和等。

2构建cDNAlibrary时,cDNA的第二链合成的方法主要有、

和。

3.构建低丰度mRNA的cDNAlibrary,需进行富集处理,常用

的富集方法有、

和。

4.常规用于构建cDNAlibrary的两种X噬菌体载体是AgtlO和，

AgtlO用于构建只

用核酸探针筛选的文库，而后者用于

6.Genecloning的目的是，常用的方法有、和等。

7.噬菌斑形成选择法有两种判断标准，一是，二是。

8.基因克隆的本质是，重点是。

三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。

1.构建基因组DNA文库时，首先要分离细胞的（）

A.染色体DNA

B.线粒体DNA

C.总mRNA

D.tRNA

2.基因组代表一个细胞或生物体的（）

A.部分遗传信息

B.整套遗传信息

C.可转录基因

D.非转录基因

4.关于DNA接头在基因工程中的作用，下列说法中哪一项不正确

()

A.给外源DNA添加适当的切点

B.人工构建载体

C.调整外源基因的可读框

D.增加调控元件

5.根据构建方法的不同，基因文库分为基因组文库、cDNA文库

等。在下列文库中，()属于cDNA

文库

A.YAC文库

B.MAC文库

C.扣减文库

D.BAC文库

复习题9

二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两

者用〃；〃隔开。

1.转化(Transformation)是在1928年由格里菲思在对菌进行研

究时发现的。转导

(Transduction)是1952年由莱德伯格在研究菌的遗传重组时

发现的。

2.重组DNA导入宿主的一般方法有，，，和

等。

称为感受态细胞(

3.Competentcell)o

4.有关感受态出现的机制，目前主要有两种假说：和。

5.外源DNA可以通过转化(transformation)的方法导入到宿主

菌中，transformation是指的

过程。常用的transformation的方法有,和。

6.转染(Transfection)是指的过程;感染(Infection)是

指。

7.细菌结合(Conjugation)是指的过程。

8.转导（Transduction）是指,它可分为两种:和。

9.局限性转导中,人噬菌体不正确切离，通常以10-6比率产生和。

10.普遍性转导可分为两类,即和。

11.感染复数的定义：。

三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。

1.在分子生物学领域，重组DNA又称（）

A.酶工程

B.DNA工程

C.细胞工程

D.基因工程

2.在重组DNA技术中，不常用到的酶是（）

A.限制性核酸内切酶

B.DNA聚合酶

C.DNA连接酶

D.DNA解链酶

3.以质粒为载体，将外源基因导人受体菌的过程称（）

A.转化

B.转染

C.感染

D.转导

4.用于鉴定转化子细胞是否含重组DNA的最常用方法是（）

A.抗性标记选择

B.分于杂交选择

C.RNA反转录

D.免疫学方法

复习1参考答案

二、填空题

参考答案：克隆基因的类型；受体的选择；载体的选择

参考答案：基因；连续；DNA;存在于染色体之外（如质粒，噬

菌体等）

参考答案：表达；调控；检测；改造

参考答案：基因转录过程中控制起始的部位；转录起始；RNA聚

合酶

参考答案：核心酶；。因子；识别要转录的起始位点

参考答案：启动区；终止区

参考答案：依赖p因子；不依赖p因子

参考答案：一个基因的序列中，单个DNA序列可编码一个以上的

蛋白质；在编码序列中间插入的一段无编码作用的碱基序列

复习2参考答案

二、填空题

参考答案：限制酶;甲基化；识别DNA序列；

参考答案：属名的第一个字母；种名的前两个字母；菌株名

参考答案：内部；附近；（3'-0H）和（5'-P基团）；Mg2+

参考答案：同裂酶

参考答案：切口酶

参考答案：限制性片段长度多态性（RFLP）

参考答案：去磷酸化；部分补平

参考答案：能够在中间划一个对称轴，两侧的序列两两对称互补

配对；两条互补链的5'・-3'的序列组成相同,即将一条链旋转180。，

则两条链重叠

参考答案：CCTGG;CCAGG;第二个胞口密咤C的C5位置

参考答案：mcrA;mcrBC;mrr

参考答案：GAATTC;GATC;AAGCTT

参考答案：50%

参考答案：EDTA法；加热法；苯酚抽提法；试剂盒除酶法

参考答案：5'-3'合成DNA的;3'-5'的外切

参考答案：小牛胸腺;Mg2+

参考答案：聚乙二醇PEG;单价阳离子

三、选择题

参考答案：C50%

点评：合适浓度的甘油和二甲基亚飒可以作为冰冻保护剂，保护

生物大分子的活性。

参考答案：A前者是物理图谱后者是连锁图

点评：详细理解两者的概念

参考答案：C只能作用于双链DNA

点评：限制性内切核酸酶的识别和切割序列有很强的特异性，特

别是第口型的限制性内切酶。

参考答案：B4

点评：注意DNA分子的形状，其它条件相同的时候，线状比环状

产生的片段要多一个。

参考答案：A5%

点评：低温下保存生物大分子时，甘油可以作为冰冻保护剂，但

反应体系中甘油浓度过高会导致星星活性。参考答案：D酶量

点评：各种酶都有适合自己的反应温度；同时根据酶反应动力学,

酶切反应一定时间后酶的活性就会减弱或丧失，所以控制酶量是最合

适的

参考答案：C酶失活

点评：理解限制性内切酶酶切本质和DNA电泳实验原理。

参考答案：A前者是断开了一个磷酸二酯键，后者是指DNA的单

链中有较小的缺失

点评：注意理解专业词汇。

参考答案：A属名第一字母，种名头两个字母，菌株号，然后再

加上序号（罗马字）

点评：限制酶的命名遵循一定的原则，涉及来源（宿主），菌株

或生物型。命名时，依次取属名第一字母,种名头两个字母，菌株号，

然后再加上序号（罗马字）

参考答案：A识别相同序列的限制酶称同裂酶

点评：识别相同序列的限制酶称同裂酶，但它们的切割位点可能

不同。具体可分为：同裂同切酶、同序异切酶、〃同功多位〃等

参考答案：B反转录酶

点评：其它三种酶均只需要DNA链即可

参考答案：C双链DNA的特定碱基序列

点评：了解限制性内切酶的识别序列。

参考答案：DSssI

点评：SssI甲基化酶来自原核生物Spiroplasma

参考答案：CmcrD

点评：无mcrD

参考答案：A限制酶是外切酶而不是内切酶

点评：了解限制性内切酶的特性。

参考答案：A将双链DNA分子中的5,磷酸基团同3'-0H末端

重新形成磷酸二酯键

点评：了解DNA连接酶的特性。

复习题3参考答案

二、填空题

参考答案：质粒载体；噬菌体载体；粘粒载体；噬菌粒载体

参考答案：利用重组DNA技术分离目的基因；由大量的含有基因

DNA（即某一生物的全部DNA顺序）的不同DNA片段的克隆所构成

的群体

参考答案：染色体外的遗传因子；双；闭环；1~200

参考答案：单个细胞中所含有的质粒DNA分子数目；严谨型；松

弛型；严谨型；松抽型

参考答案：松弛型

参考答案：两个质粒在同一宿主中不能共存的现象；相同

参考答案：在自然条件下，很多质粒可以通过称为细菌接合的作

用转移到新宿主内；移动基因mob;转移基因tra;转移起始位点

参考答案：接合型质粒；非接合型质粒；接合型质粒；非接合型

质粒；编码其DNA转移的基因

参考答案：鉴别目的DNA（载体）的存在；将特殊表型的重组子

挑选出来

参考答案：4.3;pM131;pSClOl;pSF2124;pM131;

pSF2124;pSClOl

参考答案：pBR322;M13mpl8/19;pBR322;M13mpl8/19;

MCS方向不同

参考答案：50;双；线；12;cos位点

参考答案：Lysogenicstate;Lyticgrowth

参考答案：LacZ;spi筛选

参考答案：通过特定的酶切位点允许外源DNA片断插入的载体；

允许外源DNA片断替换载体的非必须DNA片断的载体

参考答案：克隆小的cDNA;b257;lacZ;蓝

参考答案：78%〜105%

参考答案：cos位点；质粒；cos

参考答案：质粒复制起点；cos位点；抗性标记；质粒；噬菌体

参考答案：23;45

参考答案：噬菌斑；菌落；菌落

参考答案：丝；单；雄；从感染的细胞中分泌出噬菌体颗粒

参考答案：M13phage;pl5A;Tn903;G-T

参考答案：复制起点；着丝粒；端粒；MCS;筛选标记

三、选择题

参考答案：A可以抑制细胞壁肽聚糖的合成

点评：B、D为四环素的工作原理；C为氯霉素的工作原理

参考答案：B二者的多克隆位点方向相反

点评：系列载体的区别一般不大，主要是克隆方向或读码框等方

面的差别。

参考答案：D必须具有较高的拷贝数，便于制备

点评：对于那些有剂量限制的基因克隆需要使用低拷贝的质粒载

体

参考答案：D启动子

点评：了解质粒的生物学性质。

参考答案：D利用这两个启动子进行定点突变

点评：了解pBluescriptM13载体的工作原理及特性。

参考答案：D重组体中插入片段的大小不同

点评：插入片段本身的复制以及插入片段在宿主菌中的表达产物

都会影响宿主的生长。

参考答案：A,A重组体中插入片段的大小不同

点评：了解噬菌粒的生物学特性。

参考答案：DSS-SS

点评：RFDNA特指M13单链噬菌体复制型双链DNA

参考答案：A滚环复制模型

点评：入噬菌体DNA和M13单链噬菌体侵染宿主后，都是先0

复制模型，后转为滚环复制模型。参考答案：B各重组体在平板上生

长的速度不同，转化子中插入片段的扩增量也是不同的

点评：理解粘粒载体的工作原理。

参考答案：B酵母人工染色体（YAC

点评：人工染色体包括YAC、BAC、PAC等，其特点是可以装载

大的（lOOkb以上）外源DNA片段。参考答案：BSCDNA>L

DNA>OCDNA

点评：DNA分子结构越紧凑,泳动时受到的阻力越小，迁移速率

越大。

参考答案：A在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点

点评：能够在两类不同的宿主中复制、增殖和选择的载体称为穿

梭载体。

参考答案：C可以回折形成发夹结构

点评：理解什么是反向重复序列。

参考答案：B12

点评：入噬菌体线性DNA分子的两端各有一个12个碱基组成的

天然粘性末端，称为cos位点。

参考答案：BBAC载体在大肠杆菌中为高拷贝

点评：细菌人工染色体。是基于大肠杆菌的F质粒构建的高通量

低拷贝质粒载体。包括严谨型控制的复制区oriS、启动DNA复制的

由ATP驱动的解旋酶（RepE）,以及三个确保低拷贝并使质粒精确

分配至子代细胞的基因座（parA,parB和parC）等元件。

参考答案：D进入受体细胞后，可引起溶源化反应

点评：粘粒指带有将DNA包装到噬菌体颗粒中所需的cos序列的

质粒。包括质粒复制起点，可以像质粒一样转化并增殖；包括cos位

点，可以像噬菌体颗粒一样包装、侵染。

参考答案：A在寄主细胞中拷贝数较多

点评：理解松光型质粒的概念。

参考答案：C如果两个质粒不相容，说明它们的复制机制相同

点评：利用同一复制系统的两个质粒在同一宿主中不能共存的现

象称质粒的不相容性，它是指在第二个质粒导入后，在不涉及DNA限

制系统时出现的现象。

参考答案：A独立存在

点评：质粒指细菌或某些低等生物里面存在的独立于染色体外的

双链闭合环状DNA分子（现在也发现有线状的），它经常携带一些不

必需的遗传信息。

参考答案：D含lacZ

点评：lacZ是一种筛选标记，能够使载体使用的更加方便，但不

是载体的必需元件。

参考答案：A通常带有抗性标记

点评：氯霉素可以增加质粒的复制，而不影响染色体的复制。

参考答案：C启动子不需要受控制

您的答案：

点评：表达载体与克隆载体相比就是多了表达所必须的各种遗传

元件。

复习题4参考答案

二、填空题

参考答案：提高质粒拷贝数

参考答案：只将RNA分离出来；可将DNA和RNA一起分离出

参考答案：使DNA变性，形成单链

参考答案：互补单链重新配对恢复成双链；同源单链重新配对恢

复成双链。

参考答案：硝酸纤维素滤膜；尼龙膜

三、选择题

参考答案：B前者只能将RNA分离出来；后者能将DNA和RNA

一起分离出来

点评：SDS是一种表面活性剂。

参考答案：C保护DNA,防止断裂

点评：蔗糖增加溶液的粘滞性，减小机械剪切，保护DNA,防止

断裂。

参考答案：D・70℃

点评：了解DNA及其它一些生物大分子的特性。

参考答案：（：保存液中未加一滴氯仿

点评：保存液中加一滴氯仿的作用是防止真菌污染。

参考答案：A以mRNA为模板合成的双链DNA

点评：正确理解cDNA的概念。

参考答案：CrRNA

点评：一个典型的哺乳动物细胞约含10-5|jgRNA，其中80〜

85%为rRNA,15~25%主要由各种类型的低分子量RNA组成（如

tRNA，核内小分子RNA等），1〜5%为mRNA。

参考答案：BEB不容易插入到cccDNA中，因而迁移速度快

点评：了解cccDNA的性质和EB的工作原理。

参考答案：BDNA与载体的连接

点评：Southernblotting的步骤有：酶切、电泳、转膜、杂交、

检测。

参考答案：D可与任何含有互补序列的DNA片段

点评：理解Southernblotting的工作原理。

点评：T4多核甘酸激酶的活性催化ATP的丫・磷酸基转移至DNA

或RNA的5,末端。

参考答案：DWesternblotting

点评：检测到mRNA只能说基因转录，检测到蛋白才能证明基因

表达。Westernblotting是通过抗原抗体反应检测目标蛋白的方法。

参考答案：D假阳性较高

点评：斑点杂交指直接将DNA或RNA分子以斑点的形式固定在

滤膜上，然后进行的分子杂交。杂交信号特别强，容易产生假阳性。

参考答案：B不需要外源基因的表达

点评：因为菌落杂交是一种DNA杂交，所以不需要外源基因的表

达。

参考答案：A印记的对象不同，前者是对DNA,后者是对RNA

点评:Southernblotting是针对DNA的检测手段。Northern

blotting是针对RNA的检测手段，Westernblotting是针对蛋白质

的检测手段。

参考答案：D抗体

点评：抗体为蛋白质探针，用于Westernblottingo

复习题5参考答案

二、填空题

参考答案：polymerasechainreaction;模板；弓|物；dNTP;

DNA聚合酶

参考答案：变性；复性；延伸

参考答案：温度；Mg2+浓度；去污剂；模板的二级结构

参考答案：防止反应液挥发

参考答案：模板Tm值；使DNA双链离解一半时温度称为解链温

度（Tm）

参考答案：lkb

参考答案:1.5;10~50;1.5

参考答案：Taq酶扩增的产物一般要在3,末端加一个核甘酸且通

常为A的性质

参考答案：即随机DNA六聚体，该六聚体能够结合在单链DNA

上，并在合适的酶作用下，作为互补链合成的引物。

参考答案：次黄噂吟可以和任］可碱基配对

三、选择题

参考答案：DPCR

点评：聚合酶链反应，英