药典微生物限度检查法增修订省公开课一等奖全国示范课微课金奖课件

药典微生物程度检验法第1页目录一、版药典微生物学检验体系发展二、年版微生物学检验中重大修订及意义三、版程度标准特点及展望四、药典纯化水标准公告内容五、药典注射用水标准公告内容第2页一、药典微生物学检验体系发展中美中、美药典微生物学检验体系收载情况比较版药典微生物学拟收载情况药典纯化水微生物程度公告内容

药典注射用水微生物程度公告内容

非无菌药品微生物程度标准整合、修订3第3页版药典微生物学拟收载情况检验法

①无菌检验法②非无菌药品微生物计数法③非无菌药品控制菌检验法④抑菌剂效力检验法⑤灭菌法⑥生物指示剂抗性检验法⑦中药饮片微生物程度检验法标准

非无菌药品微生物程度标准指导标准

非无菌药品微生物程度检验指导标准制剂通则中制剂通则中相关制剂项下无菌和微生物程度检验要求修订4第4页制剂通则中相关制剂项下[无菌]和[微生物程度]检验要求修订

(1)为确保用药安全，眼用液体、半固体制剂仍应符合无菌检验法要求(2)为确保用药安全，对用于手术、创伤、烧伤外用制剂如鼻用制剂、软膏剂、乳膏剂、喷雾剂、气雾剂、凝胶剂、散剂、涂剂、滴耳剂等仍应符合无菌检验要求。但在其通则无菌检验项下增加：“除另有要求外”。给予有不按无菌检验原因(3)在搽剂和酊剂通则项下微生物程度检验项下增加：“除另有要求外”。给予有可能需要按无菌检验原因第5页五、品种正文中无菌或微生物程度检验及其标准要求1、受热不稳定、制剂不能进行最终灭菌无菌工艺产品如：抗生素原料药、抗生素粉针剂正文中无菌检验要求2、经验证后各论化品种检验项下：无菌…..或微生物程度……(有详细检验要求)3、药用敷料无菌或微生物程度要求及标准4、纯化水、注射用水微生物程度要求及标准年版药典纯化水、注射用水[微生物程度]价差方法在参考欧、美药典只要用水微生物检验要求基础上，由浙江所立课题考查、比对，在所用培养基和方法上将有较大修订第6页与USP35版、EP7.0版、JP16版比较，年版中国药典微生物学检验体系规划收载项目和内容已基本趋向一致，将使我国药典微生物学检验成为一个比较完备标准体系，其意义在于：1、全方面与国际药典标准接轨；2.、从对终产品检验向过程控制转变。第7页二、年版微生物学检验中重大修订及意义

1、试验环境重大修订

①无菌检验环境洁净度要求

②微生物程度检验环境洁净度要求2、培养系统重大修订

①无菌检验中培养基德修订

②微生物计数法中培养基修订

③控制菌检验法中培养基修订

④控制菌检验法中培养基修订

⑤抑菌效力测定法中培养基修订3、对一、二、三部微生物学附录整合、修订第8页与USP35版、EP7.0版、JP16版比较，年版中国药典微生物学检验体系规划收载项目和内容已基本趋向一致，将使我国药典微生物学检验成为一个比较完备标准体系，其意义在于：1全方面与国际药典标准接轨；2.从对终产品检验向过程控制转变。第9页1、试验环境重大修订GMP年版对洁净度要求及确认标准洁净度级别悬浮粒子最大允许数/立方米浮游菌cfu/m3沉降菌（）cfu/4小时(2)表面微生物静态动态接触（）cfu/碟5指手套cfu/手套≥0.5μm≥5.0μm(2)≥0.5μm≥5.0μmA级352020352020

1111B级35202935290010555C级352900350290001005025－D级35029000不作要求不作要求20010050－第10页按试验性质修订微生物学检验环境洁净度无菌检验：应在洁净度10000级背景下局部100级单向流空气区域内或隔离系统中进行。无菌检验：应在洁净度B级背景下局部A级单向流空气区域内或隔离系统中进行。微生物程度检验：应在洁净度10000级背景下局部100级单向流空气区域内进行。微生物程度检验：应在受控洁净环境下（不低于D级）局部不低于B级单向流空气区域内进行。第11页2、培养基系统重大修订修订依据：经过科研课题建立及大量试验，以国际品牌培养基为对照，考查了中国药典微生物程度检验法、无菌检验法中所用国产培养基与USP/BP/JP中所要求培养基粗军生长能力比较，得出大量试验数据，并经过可靠统计分析名为整体微生物检验培养基修订提供了有利技术支持。修订意义：(1)纠正了我国在微生物检验系统中长久存在对微生物分了培养概念，提升污染微生物检验可能。（2）与先进国家药典所用培养基一致，为实现结果夫人打下主要基础。第12页3、对一、二、三部微生物学附录整合、修订需进行整合、修订微生物学检验统计：①无菌检验法②微生物检验法③指导标准

微生物程度检验法应用指导标准药品微生物试验室规范指导标准第13页中国药典年版微生物程度检验法增、修订

1、微生物程度检验法收载形式增、修订2、试验环境增、修订3、微生物计数法中增、修订4、控制菌检验法中增、修订5、非无菌药品微生物程度标准整合、修订第14页中国药典》年版微生物程度检验法修订后将分为三个附录：1、非无菌药品微生物程度检验：微生物计数法2、非无菌药品微生物程度检验：控制菌检验法3、非无菌药品微生物程度标准。修订后微生物程度检验法暂不收载于《中国药典》年版第二增补本而将直接收载《中国药典》年版，在正式实施前公告期内将深入完善以确保方法适应性和可操作性。第15页非无菌药品微生物程度标准整合、修订

1、药典委员会微生物专业委员会修订思绪2、修订后程度标准总体结构3、修订后程度标准各项详细要求第16页药典委员会微生物专业委员会修订思绪修订思绪(1)版中国药典一、二、三部微生物程度本中项目标对比、整合（2）与美、欧、日药典比较，修订中国药典微生物程度标准整合：采取一部项目作为合并后程度标准基础1、参考欧、美、日药典一致表示形式，采取较清楚直观表格形式列出各类药品和原敷料微生物程度标准2、菌数计数结果以10n表示；3、以“需氧菌总数”取代“细菌数”，以“耐胆盐革兰阴性菌”取代“大肠菌群”第17页2、修订后程度标准总体结构（共9项、4个表）

1、制剂通则、品种项下要求无菌制剂及标示无菌制剂和原辅料应符合无菌检验法要求2、用于手术、烧伤或严重创伤局部给药制剂应符合无菌检验法要求3、非无菌化学药品及生物制品制剂微生物程度标准4、非无菌不含药材原粉中药制剂微生物程度标准5、非无菌含药材原粉中药制剂微生物程度标准6、非无菌药用原料及辅料微生物程度标准7、中药提取物及中药饮片微生物程度标准8、有兼用路径制剂应符合各给药路径标准9、霉变、长螨者以不合格论第18页三、版微生物程度标准特点及展望特点：1、很好地分析、汇总了现一、二、三部程度标准项目能考虑和前向性地制订符合我国传统中药特点微生物程度标准2、化学药、生物制品程度标准（菌数及控制菌）已与美、欧、日药典程度标准一致或更严格3、新设置中药提取物和中药饮片微生物程度标准（仅要求了控制菌），菌数计数程度等候调研数据展望：1、结合GMP管理步伐，深入合理制订含药材原粉中药制剂微生物程度标准2、在开展课题积累数据、区分使用方法基数上完善中药提取物、中药饮片、草药微生物程度标准第19页年版药典抑菌剂效力检验法 抑菌剂效力检验法指导标准

抑菌剂效力检验法将在年版药典附录I制剂通则项中相关制剂项下“生产与贮藏期间应符合以下要求”中，增加：“加入抑菌剂（防腐剂）制剂，应符合抑菌剂（防腐剂）效力检验法相关要求”（一）体例按《中国药典》中抑菌剂效力检验法指导标准修订。1、在概述部分增加抑菌剂定义2、产品分类及判断标准按EP进行修订，依据给药路径分为四类。（二）检验方法所用菌种名称、菌液制备、培养基均参见微生物程度检验法（三）培养基适用性检验、方法适用性试验中各试验菌回收率按70%要求（四）结果判断中初始值定位所加菌数值第20页年版药典非无菌药品微生物程度检验指导标准主要增修订——1、整合原一、二部知道内容，为统一指导标准：将一部10点指导和二部10点指导整合为共11点指导主要增修订——2、增加微生物程度检验环境修订说明：“非无菌药品微生物程度检验中“受控洁净环境是指不低于GMP现行版要求D级洁净环境。”主要增修订——3、依据修订微生物程度标准，除相关说明：“含动物类原药材粉口服中药材要求不得检出沙门菌。其中动物类原药材粉是指除蜜蜂、王浆、动物角、阿胶外全部动物类原药材粉，如牡蛎、珍珠等贝类，海蜇、冬虫夏草、人工牛黄等”第21页年版药典药品微生物试验室指导标准

药品微生物试验室规范指导标准药品微生物试验室指导标准（一）参考WHO“药品微生物试验室规范指导标准”内容进行修订（二）本指导标准框架及内容修订为：“人员、环境、设备、试剂和培养基、菌株、样品、方法、污染废弃物处理、结果及质量、文件、试验统计、汇报。”十二个部分第22页四、药典纯化水标准公告内容[修订]【检验】微生物程度取本品不少于1ml，按薄膜过滤法处理后，采取R2A琼脂培养基，30～35℃培养不少于5天，依法检验（通则1105），每1ml供试品中需氧菌总数不得过100cfu。R2A琼脂培养基处方及制备：酵母浸出粉0.5g

蛋白胨0.5g

酪蛋白水解物0.5g

葡萄糖0.5g可溶性淀粉0.5g

磷酸二氢钾0.3g

无水硫酸镁0.024g

丙酮酸钠0.3g琼脂15g

纯化水1000ml除葡萄糖、琼脂外，取上述成份，混合，微温溶解，调整pH值使加热后在25℃pH值为7.2±0.2，加入琼脂，加热溶化后，再加入葡萄糖，摇匀，分装，灭菌。R2A琼脂培养基适用性检验试验照通则1105中“计数培养基适用性检验”胰酪大豆胨琼脂培养基适用性检验方法进行，试验菌株为铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌。应符合要求。

起草所：浙江院

复核所：天津所、陕西所第23页五、药典注射用水标准公告内容注射用水[修订]【检验】微生物程度取本品不少于100ml，按薄膜过滤法处理后，采取R2A琼脂培养基，30～35℃培养不少于5天，依法检验（通则1105），每100