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学必求其心得,业必贵于专精学必求其心得,业必贵于专精学必求其心得,业必贵于专精分子生物学技术练习1.PCR利用了DNA的哪种特性原理,来控制DNA的解聚与结合?()A.特异性B.稳定性C.热变性D.多样性2.(2011·山东聊城高二检测)在实验室内模拟生物体内的DNA复制,需要哪些条件?()①酶②游离的脱氧核苷酸③ATP④DNA分子⑤引物⑥tRNA⑦适宜的温度⑧适宜的酸碱度A.①②③④⑤⑥B.②③④⑤⑥⑦C.②③④⑤⑦⑧D.①②④⑤⑦⑧3.DNA扩增过程中,DNA片段经若干次扩增,与其数目的理论值变化相符的图是()。4.(2011·安徽宿州高二检测)下列关于PCR操作过程的叙述中,错误的是()。A.PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌B.PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份,并在-20℃储存C.PCR所用的缓冲液和酶从冰箱拿出之后,迅速融化D.在微量离心管中添加反应成分时,每吸取一种试剂后,移液器上的吸液枪头都必须更换5.当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,DNA聚合酶就能开始延伸DNA子链,则延伸的方向是().A.从5′端延伸DNA子链B.DNA的合成方向总是从5′端向3′端延伸C.子链延伸的方向是5′→3′或3′→5′D.DNA的合成方向总是从3′端向5′端延伸6.如下图为DNA变性和复性示意图,下列相关说法正确的是()。A.向右的过程为加热(80~100℃)变性的过程B.向左的过程是DNA双链迅速致冷复性C.变性与在生物体内解旋过程的条件、实质都相同D.图中DNA片段共有4个游离的磷酸基、4个3′端7.在PCR的实验操作中,下列说法正确的是()。①在微量离心管中添加各种试剂时,只需要一个枪头②离心管的盖子一定要盖严③用手指轻弹离心管壁④离心的目的是使反应液集中在离心管的底部A.①②③B.①②④C.②③④D.①③④8.复性温度是影响PCR特异性的较重要因素。变性后温度快速冷却至40~60℃,可使引物和模板发生结合。PCR的结果可不考虑原来解旋开的两个DNA模板链的重新结合,原因不包括()。A.模板DNA比引物复杂得多B.引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞C.加入引物的量足够多而模板链数量少D.模板链加热解旋已经变性不可能再次结合9.(原创)DNA检测技术可应用于亲子鉴定、遗传病检测等领域。DNA检测离不开对样品DNA的PCR扩增。不同的样品DNA的扩增过程或条件不同的是()。A.引物B.DNA聚合酶C.四种脱氧核苷酸D.预变性的温度10.(2011·江苏高考节选)请回答基因工程方面的有关问题。(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。①从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为______。②在第______轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。①第1组:__________________________________________________________________;②第2组:__________________________________________________________________。(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能,这是因为___________________________________________________________。
参考答案1.答案:C2.答案:D解析:在实验室内模拟DNA复制时,需要DNA聚合酶催化合成DNA子链;四种脱氧核苷酸为合成子链的原料;DNA母链为DNA复制的模板;还需要引物、较高的温度、适宜的酸碱度等。3.答案:C解析:PCR反应中DNA的扩增数目和生物体内的DNA复制是类似的,即1个DNA分子复制一次,产生2个DNA分子,复制2次,产生4个DNA分子,呈指数扩增,开始有一个DNA分子为模板,经过n次复制后得到的DNA分子的数量为2n,与曲线C相符合。4.答案:C解析:为了防止外源DNA等因素的污染,PCR反应中所用的微量离心管、枪头、缓冲液及蒸馏水等,在使用前要进行高压灭菌;还要将所用的缓冲液和酶分装成小份;并且使用一次性吸液枪头,则A、B、D项都正确。在使用前,将PCR所需试剂从冰箱内拿出来,放在冰块上缓慢融化,则C项错误。5.答案:B解析:本题考查聚合酶链式反应扩增DNA片段的有关知识,同时考查学生对PCR原理的理解。PCR扩增的过程中子链延伸的方向是由DNA聚合酶决定的,由于DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链,而不能从头开始,因此DNA的合成方向总是从5′端向3′端延伸。6.答案:A7.答案:C解析:在微量离心管中添加反应成分时,每吸取一种试剂后,移液器上的枪头都必须更换,以确保实验的准确性;盖严离心管口的盖子,防止实验中外源DNA污染;用手指轻轻弹击管的侧壁,使反应液混合均匀;离心的目的是使反应液集中在离心管的底部,提高反应效率。8.答案:D9.答案:A解析:不同的样品DNA有不同的核苷酸序列,由于引物能与模板DNA(样品DNA)通过碱基互补配对结合,因此不同样品DNA所需的引物有不同的核苷酸序列。10.答案:解析:(1)①第四轮循环,共得到16个DNA分子,其中只有1个DNA分子不含引物A,所以含引物A的DNA片段占15/16.②分析可看出从第三轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段,长度可为DNA总长度减去引物A,或者为DNA总长度减去引物B.(2)第1组引物Ⅰ和引物Ⅱ会发生碱基互补配对,第2组中引物Ⅰ自身折叠会发生碱基互补配对.(3)DN
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