山东省济宁市邹城市邹城市兖矿第一中学2024-2025学年高二下学期3月月考生物试题（原卷版+解析版）

生物试题注意事项：1.答卷前，考生务必将自己的姓名、考场号、座位号、准考证号填写在答题卡上。2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。3.考试结束后，将答题卡交回。考试时间为90分钟，满分100分一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。1.菊花的组织培养需要进行严格的无菌操作，下列说法不正确的是（）A.培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌B.幼苗要先移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩等环境下生活一段时间C.菊花茎段在洗涤灵稀释液浸泡2min，用流水冲洗干净后，在95%酒精中消毒30s，再用流水冲洗后置于10%次氯酸钠溶液中消毒10min，然后用蒸馏水多次冲洗。D.接种时用镊子夹取菊花茎段，注意茎段的形态学上下端，再插入培养基2.紫花苜蓿（2n=32）是应用较为广泛的豆科牧草，但易造成家畜鼓胀病。百脉根（2n=12）富含单宁，单宁可与植物蛋白质结合，不会引起家畜采食后鼓胀。科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉根为材料培育抗鼓胀病苜蓿新品种。研究流程如图（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的呼吸作用），下列说法错误的是（）A.将两种细胞分别置于略高渗透压环境下，有利于去除细胞壁获得两种植物的原生质体B.②过程需要利用选择培养基筛选出杂种愈伤组织C.③过程需要在有光照、植物激素的作用才能化形成完整植株D.②过程的细胞中染色体数目最多有88条，③过程产生的再生植株是可育的多倍体3.下列关于动物细胞工程的说法，不正确的有几项？（）①通过PEG融合法、电融合法等方法可以诱导两个动物细胞相互识别而融合为一个细胞②动物细胞和癌细胞在培养过程中均会出现细胞贴壁和接触抑制的现象③灭活的病毒失去了其抗原结构，但保留其感染能力，可用于诱导动物细胞融合④现阶段，体细胞核移植技术成功率非常低，而且绝大多数动物存在健康问题⑤小鼠骨髓瘤细胞染色体数为40条，其B淋巴细胞的染色体数为40条，融合后形成的杂交瘤细胞DNA分子数为80个⑥动植物组织经胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理成为单个细胞后才能进行培养⑦动物细胞培养材料大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织或细胞具有更高的全能性A.4项 B.5项 C.6项 D.7项4.下图为我国科研人员利用大鼠、小鼠两个物种创造出异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs）的过程，该细胞具有分化成各种细胞的潜能。下列叙述错误的是（）A.AdESCs具有全能性B.AdESCs的性染色体组成为XX或XYC.生殖细胞发育成囊胚过程中发生了细胞分化D.图示过程中不可使用胰蛋白酶、胶原蛋白酶5.2021年6月，我国首个原创性抗体偶联药物（ADC）获批上市。该药采用人源化抗HER2抗体，通过可切割的接头与高效毒性分子MMAE偶联。ADC被肿瘤细胞内吞后，载荷MMAE被释放到细胞质中后，可抑制细胞中微管蛋白聚合，进而影响纺锤体的形成。下列叙述错误的是（）A.传统鼠源性单抗可能会引起人体产生相应抗体进而影响ADC的效果B.ADC中接头稳定性偏低会导致药物分子脱落而对正常细胞造成损伤C.连接抗体和MMAE的接头可能在肿瘤细胞溶酶体中被蛋白酶破坏D.MMAE可能抑制肿瘤细胞内着丝粒分裂从而使其停滞在分裂中期6.我国科学家首次进行了大熊猫异种克隆的科学研究工作。他们将大熊猫的体细胞核放入兔子的去核卵母细胞之中，并使其成功发育成囊胚，标志着异种核质相容的问题得到解决，异种克隆大熊猫迈过了第一道“坎”；然后至关重要的是选择一种合适的“代孕母体”。下图是该研究的理论流程图。下列说法正确的是（）A.囊胚的内细胞团细胞属于iPS细胞B.步骤甲的供体和步骤乙的受体需要同期发情处理C.诱导超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞D.步骤甲、乙分别是指大熊猫体细胞核移植、胚胎收集7.科学研究发现：用人的体细胞与小鼠体细胞进行融合得到的杂种细胞，在持续分裂过程中鼠的染色体能得以保留而人类染色体则会逐渐丢失，最后只剩一条或几条。如图表示人的缺乏HGPRT酶突变细胞株（HGPRT-）和小鼠的缺乏TK酶细胞株（TK-）融合后并在HAT培养液中培养的过程，已知只有同时具有HGPRT酶和TK酶的融合细胞才可在HAT培养液中长期存活与繁殖。下列相关叙述正确的是（）A.从培养过程看，HAT培养液只是为了筛选杂种细胞B.从图示结果看，可以确定人的TK酶基因位于17号染色体上C.该方法可以对鼠基因定位，小鼠的HGPRT酶基因位于3号染色体上D.过程②中为了防止细菌的污染，所用培养液应该添加一定量的干扰素8.一种双链DNA分子被三种不同的限制酶切割，切割产物通过电泳分离，用大小已知的DNA片段的电泳结果作为分子量标记（下图左边一列）。关于该双链DNA，下列说法错误的是（）A.该DNA分子呈环状结构，质量大小为10kbB.该DNA分子可能含有多个RNA聚合酶识别位点C.该DNA分子中有一个NotI识别位点和两个EcoRI切点D.该双链DNA分子其NotI识别位点与EcoRI识别位点的最短距离为2kb9.基因工程利用某目的基因（图甲）和P1噬菌体载体（图乙）构建重组DNA．限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ下列分析错误的是（）A.构建重组DNA时，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体B.构建重组DNA时，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体C.图乙中的P1噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团D.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA10.如图表示研究人员利用胚胎工程技术繁育优质高产奶羊的过程，下列说法错误的是（）A.通过①~⑤繁育高产奶羊的原理与克隆羊的繁育原理不同B.过程⑤能否成功与供体和受体生理状态的一致性密切相关C.进行胚胎性别鉴定时，要选择囊胚的内细胞团细胞进行DNA分析D.不同生物进行过程⑤的时期不同，但移植的胚胎一般不能晚于囊胚期11.为获得导入R基因的转基因小鼠，科研人员进行了如下图所示的操作过程。相关叙述错误的是（）A.过程①需用促性腺激素处理以获得更多的卵母细胞B.过程②操作中通常需多个表达载体和多个受精卵C.过程③需使用药物抑制雌鼠b对植入胚胎的免疫排斥D.过程④处理的目的是使多只雌鼠b处于受孕准备状态12.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（）A.可选用在液体培养基中培养的大肠杆菌作为实验材料B.向含DNA的滤液中加入2mol/L的NaCl溶液，有利于去除杂质C.将过滤液放入4℃冰箱或加入预冷的酒精都可抑制DNA酶的活性D.鉴定DNA时，将二苯胺试剂加入到含DNA的溶液中即可出现蓝色13.下图分别表示某种质粒和含目基因的DNA片段，利用相关工具酶将二者构建成基因表达载体并导入受体菌。几种可供使用的限制酶识别序列及其切割位点为EcoRⅠ：-G↓AATTC-；BamHⅠ：-G↓GATCC-；BclⅠ：-T↓GATCA-；Sau3AⅠ：-↓GATC-；SmaⅠ：-CCC↓GGG-。注：TetR表示四环素抗性基因；AmpR表示氨苄青霉素抗性基因。下列关于构建基因表达载体时限制酶的选择及其相关叙述，错误的是（）A.若单独使用SmaI，则目的基因表达的产物可能不相同B.若单独使用SmaⅠ，则含有目的基因的受体菌不能在氨苄青霉素培养基中生长C.若选择BamHⅠ和SmaI，能在四环素培养基中生长的受体菌一定含有目的基因D.若用EcoRI和BclⅠ切割质粒，则需用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA14.如图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程，下列相关叙述正确的是（）A.“人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，但环境污染严重B.用胃蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞C.生物反应器内应控制适宜的温度，并充入纯氧保证细胞呼吸D.培养瓶中的肌肉母细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖15.RDX是一种弹药使用后残留的危险污染物。研究人员将两个源于细菌的RDX降解酶基因XplA和XplB插入柳枝稷草染色体中，如图所示，使柳枝稷草获得降解实弹射击场土壤中RDX的能力。若要通过PCR检测所获转基因柳枝稷草中是否含有正确插入的XplA和XplB基因，应选择的引物组合是（）A.引物1+引物3B.引物1+引物4C.引物2+引物3D.引物2+引物4二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。16.脂多糖（LPS）是某些细菌的主要致病毒素。LPS会与相应抗体特异性结合，若多肽链与LPS的结构越相似，则其与LPS竞争抗体结合能力越强。现欲探究多肽A的结构与LPS的相似程度，科研人员进行了以下操作。下列有关推测正确的是（）A.步骤三中与LPS结合的抗体会被洗脱，与多肽A结合的抗体不会被洗脱B.检测板上测出的抗体含量越高，表明多肽A与LPS的结构越相似C.若在步骤二中增加多肽A的数量，则步骤三中检测到的抗体数量可能会减少D.以多肽A为抗原制备出的单克隆抗体一定不能与LPS结合17.研究者用EBV（一种病毒颗粒）感染动物B淋巴细胞，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞，用以解决杂交瘤细胞传代培养中B淋巴细胞染色体丢失的问题。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷（Oua）敏感，骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中存活。下图为该实验操作示意图。相关叙述错误的是（）A.B淋巴细胞可从多次间歇注射抗原的动物脾脏中获得B.HAT培养基的作用主要是为了去除未融合的EBV转化细胞C.未融合的EBV转化细胞和骨髓瘤细胞死亡的原因相同D.筛选后的杂交瘤细胞具有产生抗EBV抗体的能力18.下图为双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，利用细胞工程技术制备的单克隆抗体能增强该过程的有效性，下列相关叙述正确的是（）A.将相关抗原注射到小鼠体内，可从小鼠脾脏中获得所需的单克隆抗体B.固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于两者结构相同C.加入酶标抗体的目的是通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量D.该方法与只使用一种单克隆抗体相比，能增加识别抗原的种类19.科学家将c—Myc、KIf4、Sox2和Oct—3/4这四个关键基因转入高度分化的小鼠成纤维细胞内，细胞在一定条件下转变成iPS细胞。在适当条件诱导下，iPS细胞可以定向分化成各种细胞。下列相关叙述正确的是（）A.iPS细胞有丝分裂后期染色体数目与核DNA分子数目相同B.iPS细胞分化成各种组织细胞过程中DNA序列不变C.iPS细胞的分裂、分化能力比造血干细胞弱D.小鼠成纤维细胞转变成iPS细胞与植物组织培养的脱分化过程类似，T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞20.番茄作为一种常见的水果蔬菜，在日常生活中的需求量日益增大，但是在较低温度下运输或储存的过程中容易出现冻伤的现象，从而影响番茄的口感和品质。科学家利用基因工程技术培育出抗冻的转基因番茄。下图为外源DNA和质粒上标出的酶切位点及相关基因，其中AFPs基因为抗冻基因。下列相关叙述正确的是（）A.基因工程中常用的工具酶有限制酶，DNA连接酶和质粒B.获得的AFPs基因应插入质粒上的启动子与终止子之间C.应用BamHI和HindIII切割目的基因和质粒以避免其自连或反接D.能在含四环素的培养基上生长的受体细胞中一定都含有AFPs基因三、非选择题：本题共5小题，共55分。21.I.供体细胞的分化状态和表观遗传修饰模式是影响体细胞核移植胚胎发育的重要因素。为研究供体细胞RNAmA修饰（即RNA某位点的甲基化）水平对猪核移植胚胎发育的影响，研究者进行系列实验。（1）核移植的受体是____________________细胞，核移植后的重构胚发育至____________________阶段可利用____________________技术转移到代孕母体子宫内以获得子代个体，从早期胚胎中分离获得的具有自我更新和分化潜能的____________________可用于医学研究。（2）RNAm6A修饰可通过提高mRNA结构稳定性来影响早期胚胎发育。猪骨髓间充质干细胞（甲组）属于多能干细胞，猪胎儿成纤维细胞（乙组）则是处于分化终端的体细胞。研究者比较了两细胞内RNAm6A修饰水平及其作为核供体时重构胚的发育效率，结果如图1、2。结果表明，核供体细胞的分化程度越高，___________________越低。II.兰花人工种子由人工种皮、原球茎和人工胚乳构成。原球茎是由胚性细胞组成、形态类似球茎结构，可发育成完整植株，人工胚乳可调控原球茎的休眠，并为原球茎的发育提供营养成分和激素。回答下列问题：（3）从盆兰花获取茎尖，对其进行____________________处理后接种于培养基，茎尖通过_____________________后生长为原球茎。原球茎在发芽培养基上可很快长出幼叶，然后在生根培养基中形成完整植株。（4）将原球茎切成小块，转入增殖培养基进行继续培养，可以得到大量原球茎，实现兰花的快速繁殖。在增殖培养基中添加椰子水，原球茎会长得更饱满。不同成熟度椰子的椰子水对原球茎生长的促进效果不同，推测原因是不同成熟度椰子的椰子水中____________________和____________________的含量存在差异。（5）某实验研究发现，与添加用过滤除菌法处理的椰子水（A组）相比，人工胚乳中添加用湿热灭菌法处理的椰子水（B组）使原球茎的休眠时间变短。研究人员推测B组原球茎休眠时间短的原因是脱落酸被破坏。作出上述推测的依据是：椰子水中有脱落酸；____________________;脱落酸不耐高温。为了验证上述推测，可增加一组实验（C组），C组的处理是：____________________。22.甘蓝型油菜是由白菜和甘蓝杂交后染色体数目加倍形成的异源四倍体，甘蓝型油菜易感染黑胫病菌引起黑胫病，但黑芥能抗黑胫病，两者存在生殖隔离。科研人员采用如图所示的过程获得了抗黑胫病的甘蓝型油菜植株。回答下列问题：（1）图中采用的植物细胞工程技术有_____，为了避免黑芥遗传物质对甘蓝型油菜产生影响，实验中利用X射线破坏黑芥染色体，可能会使染色体数目、结构发生变化。由于突变具有不定向性，参与融合的黑芥原生质体存在的问题有_____（答出1点），因此需要进行筛选。（2）步骤①可用_____处理植物细胞来获得原生质体，处理的时间长短对原生质体的结构几乎没有影响，原因是_____。诱导两种原生质体融合的化学方法有_____（答出2种）。（3）获得的部分具有抗黑胫病的甘蓝型油菜不能产生正常配子，原因是_____。23.科研人员制备某种单克隆抗体的流程如图所示，图中序号表示相应的步骤，SP2/0细胞为小鼠的骨髓瘤细胞。回答下列问题：（1）步骤①中的小鼠必须用特定的抗原进行免疫的目的是__________。（2）在对SP2/0细胞进行培养的过程中，需要创设的气体条件是____________。与培养大多数动物体细胞不同，SP2/0细胞在培养过程中不会出现____________的现象，只要营养等条件适宜即可一直增殖。（3）步骤②常采用灭活的病毒诱导细胞融合，是因为灭活病毒表面含有的________能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，进而实现细胞融合。实验中进行步骤③筛选的原因是_______，从功能上看，这种培养基属于____________。（4）步骤⑤的小鼠注射的是_________，步骤⑥是从小鼠腹水中获得单克隆抗体，列举单克隆抗体的2个用途：__________。24.人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：（1）科学家用PCR方法对htPA基因进行体外扩增，基本过程如下图，请据图回答：①PCR包括三个步骤I___________、Ⅱ___________、Ⅲ___________。②加热至94℃的目的是使DNA样品的___________键断裂，这一过程在生物体细胞内是通过___________酶的作用来完成的。③如果htPA基因的部分序列是：5'-ATGGCT……AGGAAC-3'3'-TACCGA……TCCTTG-5'根据上述序列，应选择引物___________（填字母）进行PCR。A．引物：5'-GTTCCT-3'B．引物：5'-TACCGA-3'C．引物：5'-ATGGCT-3'D．引物：5'-AUGGCU-3'（2）为获得更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其___________。采集的精子需要经过___________，才能具备受精能力。（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是___________，通常用___________等技术检测htPA基因是否插入到早期胚胎的染色体DNA上。25.工程菌是指用基因工程方法，使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系。下图是利用大肠杆菌生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。（1）启动子是____的识别和结合部位。图中胰岛素基因以____链作为模板进行转录。构建基因表达载体时一般至少需要两种限制酶，以防止____和____。（2）为使胰岛素基因能够在大肠杆菌中表达出正确的蛋白质，获取目的基因时通常先____，然后再通过逆转录得到胰岛素基因。（3）PCR扩增胰岛素基因的前提是____，以用于特异性制备PCR扩增需要的引物。PCR扩增过程中，经过4轮循环后，得到的产物中只含一种引物的DNA分子占比为____。为了使目的基因与载体能正确连接，需要在引物的____端添加限制酶____的识别序列；n次循环后，至少消耗引物____个。（4）β—半乳糖苷酶可以分解无色的X-gal产生蓝色物质使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。将转化后的大肠杆菌接种到添加了____的培养基上，若出现____（白色/蓝色）菌落，则该菌落即为含有重组质粒的大肠杆菌菌落。

生物试题注意事项：1.答卷前，考生务必将自己的姓名、考场号、座位号、准考证号填写在答题卡上。2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。3.考试结束后，将答题卡交回。考试时间为90分钟，满分100分一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。1.菊花的组织培养需要进行严格的无菌操作，下列说法不正确的是（）A.培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌B.幼苗要先移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩等环境下生活一段时间C.菊花茎段在洗涤灵稀释液浸泡2min，用流水冲洗干净后，在95%酒精中消毒30s，再用流水冲洗后置于10%次氯酸钠溶液中消毒10min，然后用蒸馏水多次冲洗。D.接种时用镊子夹取菊花茎段，注意茎段的形态学上下端，再插入培养基【答案】C【解析】【分析】植物组织培养是一种将植物体的部分细胞或组织与母体分离，在适当的条件下加以培养，使它们能够生长、发育、分化与增殖的技术。【详解】A、高压蒸汽灭菌法常用于培养基及其他器械的灭菌，A正确；B、幼苗要先移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩等环境下生活一段时间，以逐步适应外界的环境，B正确；C、菊花茎段在洗涤灵稀释液浸泡2min，用流水冲洗干净后，在70%酒精中消毒30s，再用流水冲洗后置于10%次氯酸钠溶液中消毒10min，然后用无菌水多次冲洗，C错误；D、由于生长素的极性运输，接种时用镊子夹取菊花茎段，注意茎段的形态学上下端，再插入培养基，不能倒插，D正确。故选C。2.紫花苜蓿（2n=32）是应用较为广泛的豆科牧草，但易造成家畜鼓胀病。百脉根（2n=12）富含单宁，单宁可与植物蛋白质结合，不会引起家畜采食后鼓胀。科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉根为材料培育抗鼓胀病苜蓿新品种。研究流程如图（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的呼吸作用），下列说法错误的是（）A.将两种细胞分别置于略高渗透压环境下，有利于去除细胞壁获得两种植物的原生质体B.②过程需要利用选择培养基筛选出杂种愈伤组织C.③过程需要在有光照、植物激素的作用才能化形成完整植株D.②过程的细胞中染色体数目最多有88条，③过程产生的再生植株是可育的多倍体【答案】B【解析】【分析】植物体细胞杂交技术：将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。【详解】A、在制备两种植物原生质体时，需用酶解法去除植物细胞的细胞壁，去壁后的原生质体在较高渗透压环境下处于较稳定状态，不易破裂，从而有利于获得两种植物的原生质体，A正确；B、由题意可知，使用IOA和R-6G处理后，原生质体和同源融合体不能再生愈伤组织，故②过程不需要使用选择培养基筛选杂种愈伤组织，B错误；C、③过程分别表示再分化，脱分化所需的生长素/细胞分裂素比值为1，再分化时，提高该比值有利于根的分化，降低该比值有利于芽的分化，再分化过程需要光照，C正确；D、紫花苜蓿染色体数目为32条，百脉染色体数目为12条，融合之后细胞内染色体数目为32+12=44条，②过程表示脱分化，进行的是有丝分裂，此时染色体数目最多有44×2=88条（有丝分裂后期），紫花苜蓿是二倍体，百脉是二倍体，③过程产生的再生植株是可育的多倍体（四倍体），D正确。故选B。3.下列关于动物细胞工程的说法，不正确的有几项？（）①通过PEG融合法、电融合法等方法可以诱导两个动物细胞相互识别而融合为一个细胞②动物细胞和癌细胞在培养过程中均会出现细胞贴壁和接触抑制的现象③灭活的病毒失去了其抗原结构，但保留其感染能力，可用于诱导动物细胞融合④现阶段，体细胞核移植技术成功率非常低，而且绝大多数动物存在健康问题⑤小鼠骨髓瘤细胞染色体数为40条，其B淋巴细胞的染色体数为40条，融合后形成的杂交瘤细胞DNA分子数为80个⑥动植物组织经胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理成为单个细胞后才能进行培养⑦动物细胞培养材料大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织或细胞具有更高的全能性A.4项 B.5项 C.6项 D.7项【答案】C【解析】【分析】诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用诱导因素有PEG、灭活病毒、电激等。灭活病毒诱导细胞融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。【详解】①通过PEG融合法、电融合法等方法可以诱导两个动物细胞融合为一个细胞，但没有涉及相互识别，①错误；②正常体细胞在培养过程中会出现接触抑制和贴壁生长现象，但癌细胞能无限增殖，故在培养过程中不会出现接触抑制的现象，②错误；③灭活是指用物理或化学的手段使病毒失去感染能力，但没有破坏抗原结构，③错误；④现阶段，体细胞核移植技术成功率非常低，而且绝大多数动物存在健康问题，许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大、异常肥胖、发育困难、脏器缺陷和免疫失调等，④正确；⑤小鼠骨髓瘤细胞染色体数为40条，其B淋巴细胞的染色体数为40条，融合后形成的杂交瘤细胞的核DNA分子数为80个，此外在细胞质中还有少量的DNA分子，⑤错误；⑥动物组织经胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理成为单个细胞后才能进行培养，植物组织培养时不需要用酶处理，⑥错误；⑦动物细胞培养材料大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织或细胞的分裂能力强，⑦错误。综上所述，①②③⑤⑥⑦错误，④正确，ABD错误，C正确。故选C。4.下图为我国科研人员利用大鼠、小鼠两个物种创造出异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs）的过程，该细胞具有分化成各种细胞的潜能。下列叙述错误的是（）A.AdESCs具有全能性B.AdESCs的性染色体组成为XX或XYC.生殖细胞发育成囊胚过程中发生了细胞分化D.图示过程中不可使用胰蛋白酶、胶原蛋白酶【答案】D【解析】【分析】分析题图：小鼠的卵细胞体外培养到囊胚时期，取内细胞团细胞培养成孤雌单倍体胚胎干细胞，取大鼠的精子体外培养到囊胚时期，取内细胞团细胞培养成孤雄单倍体胚胎干细胞，两种胚胎融合成异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs）。【详解】A、AdESCs细胞为胚胎干细胞，具有分化成各种细胞的潜能，即有全能性，A正确；B、AdESCs的两条性染色体分别来自大鼠的精子（X或Y）和小鼠的卵细胞（X），故AdESCs的性染色体组成为XX或XY，B正确；C、囊胚期已经分化成滋养层细胞和内细胞团，C正确；D、孤雌单倍体胚胎干细胞和孤雄单倍体胚胎干细胞需通过机械方法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理，分散成单个细胞后才能进行细胞融合，D错误。故选D。5.2021年6月，我国首个原创性抗体偶联药物（ADC）获批上市。该药采用人源化抗HER2抗体，通过可切割的接头与高效毒性分子MMAE偶联。ADC被肿瘤细胞内吞后，载荷MMAE被释放到细胞质中后，可抑制细胞中微管蛋白聚合，进而影响纺锤体的形成。下列叙述错误的是（）A.传统鼠源性单抗可能会引起人体产生相应抗体进而影响ADC的效果B.ADC中接头稳定性偏低会导致药物分子脱落而对正常细胞造成损伤C.连接抗体和MMAE的接头可能在肿瘤细胞溶酶体中被蛋白酶破坏D.MMAE可能抑制肿瘤细胞内着丝粒分裂从而使其停滞在分裂中期【答案】D【解析】【分析】抗体偶联药物(antibody-drugconjugate，ADC)是将单克隆抗体药物的高特异性和小分子细胞毒药物的高活性相结合，用以提高肿瘤药物的靶向性、减少毒副作用。和传统的完全或部分人源化抗体或抗体片段相比，ADC因为能在肿瘤组织内释放高活性的细胞毒素从而理论上疗效更高。【详解】A、传统鼠源性单抗对人体来说是抗原，可能会引起人体产生相应抗体，使得单抗药物疗效减弱，并且引起严重的不良反应，进而影响ADC的效果，而人源化单抗能够克服人抗鼠抗体反应，避免单抗分子被免疫系统当作异源蛋白而被快速清除，提高单抗药物的药效，A正确；B、抗体偶联药物（ADC）是采用人源化抗HER2抗体，通过可切割的接头与高效毒性分子MMAE偶联，因此ADC中接头稳定性偏低会导致药物分子脱落而对正常细胞造成损伤，造成“脱靶毒性”，B正确；C、抗体的化学本质是蛋白质，连接抗体和MMAE的接头是蛋白质，因此可能在肿瘤细胞溶酶体中被蛋白酶破坏，C正确；D、据题意可知，ADC被肿瘤细胞内吞后，可抑制细胞中微管蛋白聚合，进而影响纺锤体的形成，进而影响纺锤丝牵拉染色体移向两极，不影响着丝粒的分裂，D错误。故选D。6.我国科学家首次进行了大熊猫异种克隆的科学研究工作。他们将大熊猫的体细胞核放入兔子的去核卵母细胞之中，并使其成功发育成囊胚，标志着异种核质相容的问题得到解决，异种克隆大熊猫迈过了第一道“坎”；然后至关重要的是选择一种合适的“代孕母体”。下图是该研究的理论流程图。下列说法正确的是（）A.囊胚的内细胞团细胞属于iPS细胞B.步骤甲的供体和步骤乙的受体需要同期发情处理C.诱导超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞D.步骤甲、乙分别是指大熊猫体细胞核移植、胚胎收集【答案】C【解析】【分析】分析题图:步骤甲为核移植，步骤乙为胚胎移植，其中诱导超数排卵用的是促性腺激素。【详解】A、囊胚的内细胞团细胞是早期干细胞的来源之一，全能性高于iPS细胞，故囊胚的内细胞团细胞不属于iPS细胞，A错误；B、步骤乙需要进行同期发情处理，甲不需要，B错误；C、诱导超数排卵所注射的激素是促性腺激素，只能作用于性腺，C正确；D、步骤甲和步骤乙分别是指核移植技术和胚胎移植，D错误。故选C。7.科学研究发现：用人的体细胞与小鼠体细胞进行融合得到的杂种细胞，在持续分裂过程中鼠的染色体能得以保留而人类染色体则会逐渐丢失，最后只剩一条或几条。如图表示人的缺乏HGPRT酶突变细胞株（HGPRT-）和小鼠的缺乏TK酶细胞株（TK-）融合后并在HAT培养液中培养的过程，已知只有同时具有HGPRT酶和TK酶的融合细胞才可在HAT培养液中长期存活与繁殖。下列相关叙述正确的是（）A.从培养过程看，HAT培养液只是为了筛选杂种细胞B.从图示结果看，可以确定人的TK酶基因位于17号染色体上C.该方法可以对鼠基因定位，小鼠的HGPRT酶基因位于3号染色体上D.过程②中为了防止细菌的污染，所用培养液应该添加一定量的干扰素【答案】B【解析】【分析】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。【详解】A、根据题意可知，“只有同时具有HGPRT酶和TK酶的融合细胞才可在HAT培养液中长期存活与繁殖”，因此HAT培养液不仅能提供养料，还起选择（筛选）作用，A错误；B、从培养结果可以看出，培养获得的细胞中均具有鼠的全部染色体，但是只有含人的17号染色体的细胞存活下来，由此可得，人的TK酶基因位于17号染色体，B正确；C、由于鼠的染色体没有缺失，因此不可以对鼠的基因进行定位，C错误；D、过程②中为了防止细菌污染，所用培养液应该添加一定量的抗生素，D错误。故选B。8.一种双链DNA分子被三种不同的限制酶切割，切割产物通过电泳分离，用大小已知的DNA片段的电泳结果作为分子量标记（下图左边一列）。关于该双链DNA，下列说法错误的是（）A.该DNA分子呈环状结构，质量大小为10kbB.该DNA分子可能含有多个RNA聚合酶识别位点C.该DNA分子中有一个NotI识别位点和两个EcoRI切点D.该双链DNA分子其NotI识别位点与EcoRI识别位点的最短距离为2kb【答案】D【解析】【分析】通过与分子量标记比较可知单用EcoRI处理后产生了4kb和6kb两条带；而利用EcoRI和NotI双酶切时产生了6kb、3kb、1kb三条带，即4kb的片段进一步被NotI酶切为3kb和1kb的片段，因此DNA含有一个NotI酶切位点，因为用NotI处理只产生了一个10kb的条带，所以该分子必须是环状的，长度一定是10kb。据此答题。【详解】A、单用EcoRI处理和利用EcoRI和NotI双酶切时产生的结果不同，说明DNA含有NotI酶切位点，因为用NotI处理只产生了一个10kb的条带，所以该分子必须是环状的，且长度一定是10kb，A正确；B、该DNA分子是环状的，有多个基因，可能含有多个RNA聚合酶识别位点，B正确；C、因为用NotI处理只产生了一个10kb的条带，说明该环状DNA上含有一个NotI切割位点，单用EcoRI处理后产生了4kb和6kb两条带，说明该环状DNA上含有2个EcoRI切割位点，C正确：D、用EcoRI处理后产生的4kb的片段，进一步被NotI酶切为3kb和1kb的片段，可以得知NotI切点与EcoRI切点的最短距离为1kb，最大距离为3kb，D错误。故选D。9.基因工程利用某目的基因（图甲）和P1噬菌体载体（图乙）构建重组DNA．限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ下列分析错误的是（）A.构建重组DNA时，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体B.构建重组DNA时，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体C.图乙中的P1噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团D.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA【答案】D【解析】【分析】一种限制酶只能识别一种核苷酸序列且在特定的位点对DNA分子进行切割，切割出的末端有黏性末端和平末端两种，具有相同黏性末端的DNA片段之间可以在DNA连接酶的作用下连接到一起。【详解】A、如果用BglⅡ和Sau3AI切割目的基因，目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用BglⅡ和Sau3AI切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，A正确；B、由于Sau3AI的切割位点在EcoRI的左侧，因此用EcoRI和Sau3AI切割目的基因，目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用EcoRI和Sau3AI切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，B正确；C、P1噬菌体载体为环状DNA，其上只含有一个EcoRI的切点，因此用EcoRI切割后，该环状DNA分子变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团，C正确；D、从图甲看出，用EcoRI切割目的基因后两端各有一切口，与图乙中EcoRI切口对接时，方向可能接反，即可产生两种重组DNA，D错误。故选D。10.如图表示研究人员利用胚胎工程技术繁育优质高产奶羊的过程，下列说法错误的是（）A.通过①~⑤繁育高产奶羊的原理与克隆羊的繁育原理不同B.过程⑤能否成功与供体和受体生理状态的一致性密切相关C.进行胚胎性别鉴定时，要选择囊胚的内细胞团细胞进行DNA分析D.不同生物进行过程⑤的时期不同，但移植的胚胎一般不能晚于囊胚期【答案】C【解析】【分析】①表示受精作用，②表示胚胎培养，③表示胚胎分割，④表示胚胎培养，⑤表示胚胎移植。【详解】A、图示高产奶羊是由体外受精得到的受精卵发育而来的个体，而克隆羊是由细胞核移植得到的重组细胞发育而来的个体，两者繁育原理不同，A正确；B、供体和受体生理状态相同是胚胎移植成功的基础，B正确；C、进行胚胎性别鉴定时，要选择囊胚的滋养层细胞进行DNA分析，C错误；D、不同生物进行过程⑤的时期不同，但移植的胚胎一般不能晚于囊胚期，一般用桑葚胚或囊胚期进行胚胎移植，D正确。故选C。11.为获得导入R基因的转基因小鼠，科研人员进行了如下图所示的操作过程。相关叙述错误的是（）A.过程①需用促性腺激素处理以获得更多的卵母细胞B.过程②操作中通常需多个表达载体和多个受精卵C.过程③需使用药物抑制雌鼠b对植入胚胎的免疫排斥D.过程④处理的目的是使多只雌鼠b处于受孕准备状态【答案】C【解析】【分析】1、动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。2、受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应。这为胚胎在受体的存活提供了可能。【详解】A、为了胚胎移植成功往往需要更多的卵母细胞，所以过程①用促性腺激素对供体进行超数排卵处理，A正确；B、将目的基因导入受体细胞用多个表达载体和多个受精卵可以提高成功率，所以过程②操作中通常需多个表达载体和多个受精卵，B正确；C、受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应，故过程③不需要抑制雌鼠b对植入胚胎的免疫排斥，C错误；D、胚胎移植成功需要受体和供体达到相同的生理状态，所以过程④处理的目的是使多只雌鼠b处于受孕准备状态，D正确；故选C。12.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（）A.可选用在液体培养基中培养的大肠杆菌作为实验材料B.向含DNA的滤液中加入2mol/L的NaCl溶液，有利于去除杂质C.将过滤液放入4℃冰箱或加入预冷的酒精都可抑制DNA酶的活性D.鉴定DNA时，将二苯胺试剂加入到含DNA的溶液中即可出现蓝色【答案】D【解析】【分析】DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；②DNA不溶于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离。【详解】A、大肠杆菌是细菌，含有拟核和质粒，DNA含量也较多，适合提取DNA，故可选用在液体培养基中培养的大肠杆菌作为实验材料，A正确；B、DNA在2mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度较高，搅拌过滤后，DNA存在于滤液中，有利于去除杂质，B正确；C、酶活性的发挥需要适宜的温度等条件，将过滤液放入4℃冰箱或加入预冷的酒精的目的是抑制DNA酶的活性，避免DNA被水解，C正确；D、向DNA溶液中加入二苯胺试剂后还需要沸水浴加热才可出现蓝色，D错误。故选D。13.下图分别表示某种质粒和含目的基因的DNA片段，利用相关工具酶将二者构建成基因表达载体并导入受体菌。几种可供使用的限制酶识别序列及其切割位点为EcoRⅠ：-G↓AATTC-；BamHⅠ：-G↓GATCC-；BclⅠ：-T↓GATCA-；Sau3AⅠ：-↓GATC-；SmaⅠ：-CCC↓GGG-。注：TetR表示四环素抗性基因；AmpR表示氨苄青霉素抗性基因。下列关于构建基因表达载体时限制酶的选择及其相关叙述，错误的是（）A.若单独使用SmaI，则目基因表达的产物可能不相同B.若单独使用SmaⅠ，则含有目的基因的受体菌不能在氨苄青霉素培养基中生长C.若选择BamHⅠ和SmaI，能在四环素培养基中生长的受体菌一定含有目的基因D.若用EcoRI和BclⅠ切割质粒，则需用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA【答案】C【解析】【分析】限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端或平末端。【详解】A、用同一种限制酶切割质粒和含目的基因的DNA片段后，目的基因可能会反向连接到质粒上，因此目的基因表达的产物可能不相同，A正确；B、若单独使用SmaⅠ切割质粒和含目的基因的DNA片段，会破坏质粒上的氨苄青霉素抗性基因，使含有目的基因的受体菌不能在氨苄青霉素培养基中生长，B正确；C、若选择BamHⅠ和SmaⅠ切割质粒和含目的基因的DNA片段，重组质粒上含有正常的四环素抗性基因：能在四环素培养基中生长的受体菌有可能获得了重组质粒，也有可能获得的是普通质粒，C错误；D、含目的基因的DNA片段上没有BclⅠ的识别序列，不能使用BclⅠ切割含目的基因的DNA片段，但Sau3AⅠ切割DNA后产生的黏性末端与BclⅠ相同，故若用EcoRⅠ和BclⅠ切割质粒，则需用EcoRⅠ和Sau3AI切割含目的基因的DNA片段，D正确。故选C。14.如图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程，下列相关叙述正确的是（）A.“人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，但环境污染严重B.用胃蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞C.生物反应器内应控制适宜的温度，并充入纯氧保证细胞呼吸D.培养瓶中的肌肉母细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖【答案】D【解析】【分析】用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上。动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2。“人造牛肉”的培养不仅产量高，并可以减少成本和降低环境污染。【详解】A、理论上来说，仅来自1只动物的干细胞，可制成的肉品数量，比宰杀1头牛还多100万倍，可有利于牛肉的工厂化生产，同时也可减少对土地、饮用水和饲料的需求，且温室气体等其他环境污染物也会减少，A错误；B、胰蛋白酶处理动物组织，可以使组织分散成单个细胞，利于动物细胞培养，B错误；C、动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2，C错误；D、动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上，培养瓶中的肌肉母细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖，D正确。故选D。15.RDX是一种弹药使用后残留的危险污染物。研究人员将两个源于细菌的RDX降解酶基因XplA和XplB插入柳枝稷草染色体中，如图所示，使柳枝稷草获得降解实弹射击场土壤中RDX的能力。若要通过PCR检测所获转基因柳枝稷草中是否含有正确插入的XplA和XplB基因，应选择的引物组合是（）A.引物1+引物3B.引物1+引物4C.引物2+引物3D.引物2+引物4【答案】A【解析】【分析】引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。用于PCR的引物长度通常为20~30个核苷酸，检测所获转基因柳枝稷草中是否含有正确插入的XplA和XplB基因，应该是扩增包括XplA和XplB基因和两侧T-DNA基因片段。【详解】ABCD、根据启动子的位置，若正确插入，模板链应为甲图中下链，则引物1应与下链的3'端结合，引物3可以结合甲图上链的3'端，引物

1+引物3可通过PCR检测所获转基因柳枝稷草中是否含有正确插入的XplA

和

XplB

基因，A正确，BCD错误。故选A。二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。16.脂多糖（LPS）是某些细菌的主要致病毒素。LPS会与相应抗体特异性结合，若多肽链与LPS的结构越相似，则其与LPS竞争抗体结合能力越强。现欲探究多肽A的结构与LPS的相似程度，科研人员进行了以下操作。下列有关推测正确的是（）A.步骤三中与LPS结合的抗体会被洗脱，与多肽A结合的抗体不会被洗脱B.检测板上测出抗体含量越高，表明多肽A与LPS的结构越相似C.若在步骤二中增加多肽A的数量，则步骤三中检测到的抗体数量可能会减少D.以多肽A为抗原制备出的单克隆抗体一定不能与LPS结合【答案】C【解析】【分析】单克隆抗体的制备过程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【详解】A、因LPS固定于检测板上，步骤三中与LPS结合的抗体不会被洗脱，与多肽A结合的抗体会被洗脱，A错误；B、LPS和多肽A竞争性与抗体结合，检测板上测出的抗体含量越高，表明抗体与LPS结合得越紧密，多肽A与LPS的结构差异越大，B错误；C、该过程利用了抗原和抗体的特异性结合的原理，与多肽结合的抗体会被洗脱掉，而未被洗脱的抗体因与LPS结合而残留在检测板上，若在步骤二中增加多肽A的数量，则步骤三中检测到的抗体数量可能会减少，C正确；D、以多肽A为抗原制备出的单克隆抗体可能能与LPS结合，D错误。故选C。17.研究者用EBV（一种病毒颗粒）感染动物B淋巴细胞，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞，用以解决杂交瘤细胞传代培养中B淋巴细胞染色体丢失的问题。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷（Oua）敏感，骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中存活。下图为该实验操作示意图。相关叙述错误的是（）A.B淋巴细胞可从多次间歇注射抗原的动物脾脏中获得B.HAT培养基的作用主要是为了去除未融合的EBV转化细胞C.未融合的EBV转化细胞和骨髓瘤细胞死亡的原因相同D.筛选后的杂交瘤细胞具有产生抗EBV抗体的能力【答案】BCD【解析】【分析】单克隆抗体制备时，首先要给小鼠免疫，产生相应浆细胞，然后将浆细胞与骨髓瘤细胞融合，经过选择培养基两次筛选，最后获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。在单克隆抗体的制备过程中，使用了动物细胞培养和动物细胞融合等动物细胞工程技术。【详解】A、B淋巴细胞在骨髓中发育成熟，可分布于淋巴结和脾脏等处，故B淋巴细胞可来源于抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等处，A正确；B、HAT培养基的作用主要是为让细胞存活，而乌本苷（Oua）起筛选作用，B错误；C、未融合的EBV转化细胞的死亡为Oua的作用，而骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中存活，C错误；D、本实验中EBV的作用是获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞，而不是刺激B细胞分化成浆细胞产生抗体，所以该杂交瘤细胞不能产生抗EBV的抗体，D错误。故选BCD。18.下图为双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，利用细胞工程技术制备的单克隆抗体能增强该过程的有效性，下列相关叙述正确的是（）A.将相关抗原注射到小鼠体内，可从小鼠脾脏中获得所需的单克隆抗体B.固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于两者结构相同C.加入酶标抗体目的是通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量D.该方法与只使用一种单克隆抗体相比，能增加识别抗原的种类【答案】C【解析】【分析】1、据图分析，固相抗体和抗原特异性结合，再与酶标抗体结构，催化特定底物形成检测产物。2、单克隆抗体的制备过程的细节：（1）二次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。（2）细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。（3）杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。【详解】A、将相关抗原注射到小鼠体内，可从小鼠脾脏中获得能产生相应抗体的浆细胞，而单克隆抗体是由杂交瘤细胞产生的，A错误；B、据图可知，固相抗体和酶标抗体分别与抗原的不同部位结合，说明两者的结构不同，B错误；C、加入酶标抗体的目的是通过酶的催化作用，检测底物含量，可通过酶反应产物量来测定待测抗原量，C正确；D、该技术可用于定量检测抗原，据图可知，该方法没有增加识别抗原的种类，D错误。故选C。19.科学家将c—Myc、KIf4、Sox2和Oct—3/4这四个关键基因转入高度分化的小鼠成纤维细胞内，细胞在一定条件下转变成iPS细胞。在适当条件诱导下，iPS细胞可以定向分化成各种细胞。下列相关叙述正确的是（）A.iPS细胞有丝分裂后期染色体数目与核DNA分子数目相同B.iPS细胞分化成各种组织细胞过程中DNA序列不变C.iPS细胞的分裂、分化能力比造血干细胞弱D.小鼠成纤维细胞转变成iPS细胞与植物组织培养的脱分化过程类似，T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞【答案】ABD【解析】【分析】图为将c-Myc、KIf4、Sox2和Oct-3/4这四个关键基因转入高度分化的小鼠成纤维细胞内，细胞在一定条件下转变成iPS细胞，iPS细胞转化为各种细胞的过程，原因是细胞分化，实质是进行了基因的选择性表达。【详解】A、iPS细胞有丝分裂后期由于着丝粒分裂，使得此时染色体数目与核DNA分子数目相同，A正确；B、iPS细胞分化成各种组织细胞的过程中，细胞的形态、结构和生理功能发生改变，细胞分化的实质是基因的选择性表达，使得细胞内信使RNA和蛋白质改变，但DNA不变，B正确；C、iPS细胞的分裂分化能力比造血干细胞强，C错误；D、小鼠成纤维细胞转变成iPS细胞与植物组织培养的脱分化过程类似，T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞，D正确。故选ABD。20.番茄作为一种常见的水果蔬菜，在日常生活中的需求量日益增大，但是在较低温度下运输或储存的过程中容易出现冻伤的现象，从而影响番茄的口感和品质。科学家利用基因工程技术培育出抗冻的转基因番茄。下图为外源DNA和质粒上标出的酶切位点及相关基因，其中AFPs基因为抗冻基因。下列相关叙述正确的是（）A.基因工程中常用的工具酶有限制酶，DNA连接酶和质粒B.获得的AFPs基因应插入质粒上的启动子与终止子之间C.应用BamHI和HindIII切割目的基因和质粒以避免其自连或反接D.能在含四环素的培养基上生长的受体细胞中一定都含有AFPs基因【答案】BC【解析】【分析】根据图示可知，切割目的基因和质粒时需要用BamHI和HindIII共同切割，这样可以保证目的基因和质粒准确相连。若用SmaI基因切割，会破坏目的基因。用BamHI切割后，潮霉素抗性基因将会被破坏。筛选导入了重组DNA的细胞时可以四环素抗性基因作为标记基因。【详解】A、基因工程中常用的工具酶有限制酶，DNA连接酶，而质粒是运载体，不属于工具酶，A错误；B、获得的AFPs基因应插入质粒上的启动子与终止子之间，以保证目的基因能被正常的转录，B正确；C、根据分析可知，应用BamHI和HindIII切割目的基因和质粒以避免其自连或反接，C正确；D、能在含四环素的培养基上生长的受体细胞中可能含有连接AFPs基因的质粒，也可能含没有和目的基因相连的质粒，D错误。故选BC。三、非选择题：本题共5小题，共55分。21.I.供体细胞的分化状态和表观遗传修饰模式是影响体细胞核移植胚胎发育的重要因素。为研究供体细胞RNAmA修饰（即RNA某位点的甲基化）水平对猪核移植胚胎发育的影响，研究者进行系列实验。（1）核移植的受体是____________________细胞，核移植后的重构胚发育至____________________阶段可利用____________________技术转移到代孕母体子宫内以获得子代个体，从早期胚胎中分离获得的具有自我更新和分化潜能的____________________可用于医学研究。（2）RNAm6A修饰可通过提高mRNA结构稳定性来影响早期胚胎发育。猪骨髓间充质干细胞（甲组）属于多能干细胞，猪胎儿成纤维细胞（乙组）则是处于分化终端的体细胞。研究者比较了两细胞内RNAm6A修饰水平及其作为核供体时重构胚的发育效率，结果如图1、2。结果表明，核供体细胞的分化程度越高，___________________越低。II.兰花人工种子由人工种皮、原球茎和人工胚乳构成。原球茎是由胚性细胞组成、形态类似球茎的结构，可发育成完整植株，人工胚乳可调控原球茎的休眠，并为原球茎的发育提供营养成分和激素。回答下列问题：（3）从盆兰花获取茎尖，对其进行____________________处理后接种于培养基，茎尖通过_____________________后生长为原球茎。原球茎在发芽培养基上可很快长出幼叶，然后在生根培养基中形成完整植株。（4）将原球茎切成小块，转入增殖培养基进行继续培养，可以得到大量原球茎，实现兰花的快速繁殖。在增殖培养基中添加椰子水，原球茎会长得更饱满。不同成熟度椰子的椰子水对原球茎生长的促进效果不同，推测原因是不同成熟度椰子的椰子水中____________________和____________________的含量存在差异。（5）某实验研究发现，与添加用过滤除菌法处理的椰子水（A组）相比，人工胚乳中添加用湿热灭菌法处理的椰子水（B组）使原球茎的休眠时间变短。研究人员推测B组原球茎休眠时间短的原因是脱落酸被破坏。作出上述推测的依据是：椰子水中有脱落酸；____________________;脱落酸不耐高温。为了验证上述推测，可增加一组实验（C组），C组的处理是：____________________。【答案】（1）①.去核的卵母②.桑葚胚或囊胚③.胚胎移植④.胚胎干细胞（2）RNA修饰水平和核移植重构胚的发育效率（3）①.消毒②.脱分化（4）①.营养物质②.激素（5）①.脱落酸促进休眠②.人工胚乳中先添加用高压蒸汽灭菌法处理的椰子水后加脱落酸【解析】【分析】植物组织培养：（1）幼嫩的组织脱分化较为容易，如茎尖、根尖、形成层细胞易脱分化，而植物的茎、叶和成熟的组织则较难。（2）对外植体要进行消毒处理，而对各种器械要彻底灭菌。（3）植物组织培养中用到的有机碳源一般为蔗糖，用葡萄糖也可以，但后者的成本高。（4）诱导愈伤组织再分化形成胚状体或丛芽及生根的过程中，要进行换瓶处理，以改变培养基中的激素配比及浓度。【小问1详解】核移植的受体一般是去核的卵母细胞，当胚胎发育到桑葚胚或囊胚时，可以进行胚胎移植。另外，从早期胚胎中分离获得的胚胎干细胞，由于具有自我更新和分化潜能，可用于医学研究。【小问2详解】猪骨髓间充质干细胞（甲组）属于多能干细胞，猪胎儿成纤维细胞（乙组）则是处于分化终端的体细胞，前者分化程度比后者低，由图1和图2分析可知，核供体细胞的分化程度越高，RNA修饰水平和核移植重构胚的发育效率越低。【小问3详解】进行植物组织培养时，需要进行无菌操作，即对外植体进行消毒，对培养基及其他器械进行灭菌等；将消毒后的外植体接种在培养基上，通过控制培养基中各种激素的比例来控制细胞的分裂分化，先诱导茎尖脱分化形成原球茎，再转移至发芽培养基上诱导其发芽，然后转移至生根培养基上诱导其生根。【小问4详解】由于椰子水中含有营养物质和激素，故增殖培养基中添加椰子水，原球茎会长得更饱满，但由于不同成熟度椰子的椰子水中营养物质和激素的含量存在差异，故对原球茎生长的促进效果不同。【小问5详解】脱落酸主要由根冠和萎蔫的叶片合成，作用是抑制细胞分裂、促进气孔关闭、促进叶和果实衰老和脱落、维持种子休眠。高压蒸汽灭菌法处理的椰子水（B

组）使原球茎的休眠时间短于过滤除菌法处理的椰子水（A），由于椰子水中有脱落酸、脱落酸促进休眠、

脱落酸不耐高温，可推测B

组原球茎休眠时间短的原因是脱落酸被破坏。可增加一组实验：人工胚乳中先添加用高压蒸汽灭菌法处理的椰子水后加脱落酸，若原球茎的休眠时间比B组长，即可验证推测。22.甘蓝型油菜是由白菜和甘蓝杂交后染色体数目加倍形成的异源四倍体，甘蓝型油菜易感染黑胫病菌引起黑胫病，但黑芥能抗黑胫病，两者存在生殖隔离。科研人员采用如图所示的过程获得了抗黑胫病的甘蓝型油菜植株。回答下列问题：（1）图中采用的植物细胞工程技术有_____，为了避免黑芥遗传物质对甘蓝型油菜产生影响，实验中利用X射线破坏黑芥染色体，可能会使染色体数目、结构发生变化。由于突变具有不定向性，参与融合的黑芥原生质体存在的问题有_____（答出1点），因此需要进行筛选。（2）步骤①可用_____处理植物细胞来获得原生质体，处理的时间长短对原生质体的结构几乎没有影响，原因是_____。诱导两种原生质体融合的化学方法有_____（答出2种）。（3）获得的部分具有抗黑胫病的甘蓝型油菜不能产生正常配子，原因是_____。【答案】（1）①.植物体细胞杂交、植物组织培养②.不能确定是否还存在抗黑胫病基因（抗黑胫病基因可能已被X射线破坏）（2）①.纤维素酶和果胶酶②.植物细胞膜的成分主要是蛋白质和磷脂，纤维素酶和果胶酶不能水解细胞膜③.聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH融合法（3）这部分抗病植株中来自黑芥的染色体部分被破坏，可能有些来自黑芥的染色体已不存在同源染色体【解析】【分析】1.①.植物体细胞杂交技术、植物组织培养技术②.参与融合的黑芥原生质体中的抗黑胫病的基因可能丢失或发生基因突变2.①.纤维素酶和果胶酶②.由于酶具有专一性，细胞膜和细胞壁的成分不同③.聚乙二醇融合法、高Ca2+-高PH融合法3.①.2##两②.由于X射线处理黑芥破坏细胞中染色体，导致获得的部分具有抗黑胫病的甘蓝型油菜减数分裂时联会紊乱，使其不能产生正常配子。【小问1详解】题图中采用的植物细胞工程技术有植物体细胞杂交和植物组织培养。X射线的处理具有不定向性，不能确定经X射线处理后的原生质体中是否存在抗黑胫病基因，所以需要进行筛选。【小问2详解】步骤①可用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞来获得原生质体，植物细胞膜的成分主要是蛋白质和磷脂，纤维素酶和果胶酶不能水解细胞膜，所以处理的时间长短对原生质体的结构几乎没有影响。诱导两种原生质体融合的化学方法有聚乙二醇融合法、高Ca2+-高PH融合法。【小问3详解】由于X射线处理黑芥破坏细胞中染色体，导致获得的部分具有抗黑胫病的甘蓝型油菜减数分裂时联会紊乱，使其不能产生正常配子。23.科研人员制备某种单克隆抗体的流程如图所示，图中序号表示相应的步骤，SP2/0细胞为小鼠的骨髓瘤细胞。回答下列问题：（1）步骤①中的小鼠必须用特定的抗原进行免疫的目的是__________。（2）在对SP2/0细胞进行培养的过程中，需要创设的气体条件是____________。与培养大多数动物体细胞不同，SP2/0细胞在培养过程中不会出现____________的现象，只要营养等条件适宜即可一直增殖。（3）步骤②常采用灭活的病毒诱导细胞融合，是因为灭活病毒表面含有的________能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，进而实现细胞融合。实验中进行步骤③筛选的原因是_______，从功能上看，这种培养基属于____________。（4）步骤⑤的小鼠注射的是_________，步骤⑥是从小鼠腹水中获得单克隆抗体，列举单克隆抗体的2个用途：__________。【答案】（1）为了获得能产生特定抗体的B淋巴细胞（2）①.95%的空气和5%的CO2②.接触抑制（3）①.糖蛋白和一些酶②.由于细胞融合是随机的，可能会出现同种细胞融合的现象③.选择培养基（4）①.抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞②.诊断试剂；用于治疗疾病和运载药物。【解析】【分析】1、单克隆抗体的制备过程：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。2、单克隆抗体的应用：（1）作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点。（2）用于治疗疾病和运载药物。【小问1详解】为了获得能产生特定抗体的B淋巴细胞，步骤①中的小鼠必须用特定的抗原进行免疫。【小问2详解】培养动物细胞的气体条件是95%的空气和5%的CO2。SP2/0细胞为小鼠的骨髓瘤细胞，具有无限增殖的特点，SP2/0细胞在培养过程中不会出现接触抑制的现象，只要营养等条件适宜即可一直增殖。【小问3详解】步骤②常采用灭活的病毒诱导细胞融合，是因为灭活病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，进而实现细胞融合。由于细胞融合是随机的，可能会出现同种细胞融合的现象，步骤③利用特定的选择培养基，筛选出杂交瘤细胞，从功能上看，这种培养基属于选择培养基。【小问4详解】为了获得大量的单一抗体，步骤⑤的小鼠注射的是抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞，单克隆抗体可作为诊断试剂；用于治疗疾病和运载药物。24.人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：（1）科学家