试剂标准操作规程（SOP）-RBP

文件号：AA第1版页数PAGE3共4页试剂标准操作规程项目视黄醇结合蛋白（RBP）方法免疫比浊法仪器H7600系列编写人日期审核人日期批准人日期文件分发部门和/或个人本规程自年月日起实施 目录检测原理标本采集与处理2.1受检者的准备2.2静脉采血2.3抗凝剂2.4标本处理3．试剂3.1试剂3.2校准血清3.3试剂与校准血清的稳定性4．仪器5．操作6．计算7．操作性能7.1精密度7.2准确度7.3灵敏度7.4可报告范围7.5特异性7.6干扰8．参考值9．临床意义附录A:参数1.检测原理RBP免疫比浊法测定试剂盒采用免疫比浊的测定原理，即采用抗原（RBP）和特异性抗体（羊抗人RBP抗血清）相结合，形成不溶性免疫复合物，使反应液产生浑浊，其浊度高低反映血清样品中RBP的浓度，可由校准品所作的浓度-吸光度相应曲线算出。标本采集与处理2.1受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。2.2静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。2.3抗凝剂：不使用抗凝剂。2.4标本处理：血清在-20C可保存2周。3．试剂3.1试剂：本科使用上海华臣生物技术有限公司RBP试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：试剂包装规格见试剂说明书。试剂1（R1）：磷酸盐缓冲液10mmol/L聚乙二醇600040g/LNaCl150mmol/L试剂2（R2）：羊抗人RBP抗血清适量Nacl150mmol/L3.2：校准血清使用上海华臣生物技术有限公司提供的RBP校准液。校准频次：全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。3.3试剂与校准血清的稳定性：原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存20天。试剂储存在18-22℃稳定15天，试剂应避免污染。试剂R1颜色为无色，试剂R2颜色为乳白色，当试剂变色，按照试剂失效处理。RBP校准液储存在2-8℃至标签所示失效日期。复溶后，在-20℃下将瓶盖拧紧保存，标准品可以储存长达1个月的时间。4．仪器H7600系列型号仪器。5．操作样品为血清，两点终点法。参数见后附，附录A。试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。6．计算定标：采用多点定标方式，用各浓度水平标准品吸光度值与对应的浓度做标准曲线。计算：对于自动生化仪，曲线拟合方式选择SPLINE或log-logit4P法。样本含量由样本吸光度值△A在标准曲线上对应计算得到。7．操作性能7.1精密度：批内CV<7%，批间CV<9%。7.2准确度：测量结果在上海华臣生物质控血清靶值±2SD范围内。不同方法学试剂的质控结果之间会存在差异，使用时请确保质控选择与试剂的方法学保持一致。7.3灵敏度：RBP浓度为100mg/L时，吸光度A600nm约为0.4000-0.4500。7.4可报告范围：血清与试剂用量之比为3:240:60时，测定范围为0～126mg/L。7.5特异性：测量值在给定值的90%-110％范围内。7.6干扰：内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。8．参考值25～70mg/L9．临床意义血浆中视黄醇结合蛋白与甲状腺素结合前白蛋白结合形成复合物，并担负维生素A运载系统功能。RBP最终由尿排出。同TBPA结合RBP其半寿期仅3.5h。该复合物能稳定特异地与视黄醇结合并进行细胞运转。而RBP仅仅是血浆中视黄醇的携带者。多余的RBP由肾小球滤过，而被近曲小管吸收。故尿液中RBP增高具有早期诊断意义，是一种评价肾