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文档简介
造血
hematopoiesis造血一.血细胞的起源造血(一)胚胎期造血器官中胚叶造血期肝脏造血期骨髓造血期造血出生前的造血部位
卵黄囊骨髓
肝脏
脾淋巴结
12345678910月造血(二)出生后的造血器官髓外造血骨髓造血的变化造血二.血细胞分化和成熟分化的定义血细胞的分化细胞的增殖分裂细胞形态演变的一般规律造血造血干细胞stemcell全能干细胞多能干细胞集落形成单位colonyformingunit脾集落形成单位CFU-S细胞集落形成单位CFU-C造血祖细胞hematopieticprogenitorcell原始细胞幼稚细胞造血血细胞分化过程全能干细胞
多能干细胞阶段
祖细胞阶段
阶段
1.BFU-E
髓系
2.CFU-GM全能干细胞
3.CFU-EO
4.CFU-Meg
CFU-TL
淋巴系
CFU-BL造血
造血干细胞骨髓干细胞淋巴干细胞原红原粒原单原巨原淋早幼红早幼粒幼单幼巨幼淋中幼红中幼粒颗粒巨
晚幼红晚幼粒单核细胞淋巴细胞网织红细胞杆状核产板巨红细胞分叶核血小板返回造血血细胞分裂增殖造血分裂象返回造血血细胞形态演变的一般规律(原始-幼稚-成熟)细胞体积大小(早幼粒大于原粒,巨核细胞由小到大)细胞核大小核形圆凹陷分叶核浆比大小核染色质结构细致、疏松粗糙、紧密核仁有无胞浆少多(淋巴除外)胞浆颜色蓝淡蓝、红胞浆颗粒无有造血粒细胞发育
原粒早幼粒中幼粒
晚幼粒杆状核分叶核血液组织造血三.造血的调控造血微环境的调控1.造血微环境2.调控造血细胞生长因子1.红细胞生成素erythropoietin,Epo2.集落刺激因子colonystimulatingfactor,CSF3.巨核细胞集落刺激因子白细胞介素的作用造血造血细胞生长因子和白介素的调空____________________________________SCEMegNEoBAMBLTLIL-1+(+)(+)(+)(+)-(+)++IL-2-------+++IL-3++++++++--IL-4-(+)(+)(+)(+)++-++IL-5----++--+++-IL-6全髓增殖因子IL-11全髓增殖因子GM-CSF++++++-+--G-CSF(+)(+)(+)++--+--M-CSF++--EPO-++-------TPO巨核系________________________________________________________造血骨髓检查Bone–marrowexamining
造血一.骨髓的基本结构肉眼观察红髓黄髓造血二.骨髓检查的意义诊断疾病协助诊断疾病提供诊断线索造血三.检查方法骨髓的涂片检查标本处理涂片观察计算各系各阶段细胞数造血骨髓增生程度增生极度活跃:有核细胞数>100/HP增生明显活跃:有核细胞数>50/HP增生活跃:有核细胞数10~30/HP增生减低:有核细胞数5~10/HP增生极度减低:有核细胞数1/HP造血造血四.正常骨髓象的特征粒/红比例为2~4:1骨髓增生活跃各系各阶段有核细胞的比例大致在正常范围内各系各阶段细胞形态上无明显异常无特殊病理细胞及血液寄生虫造血组织细胞造血纤维母细胞造血巨噬细胞造血脂肪细胞造血网状细胞造血成骨细胞造血破骨细胞造血骨髓涂片中所见寄生虫造血五.骨髓涂片的报告造血七.骨髓活检的方法
和临床应用造血八.骨髓象和血象分析
的重要性造血
细胞化学染色造血过氧化物酶染色(POX)粒细胞及分化较好的单核细胞胞浆内的POX能分解H2O2,产生新生态氧使联苯胺氧化,与亚硝基铁青化钠结合成兰色颗粒,再进一步氧化成棕黑色的颗粒,定位于酶活性的胞浆内。造血过氧化物酶造血正常情况下:粒系:原粒——早幼粒—中幼粒—成熟粒细胞多数(-)(+)阳性程度逐渐增强嗜酸(+);嗜碱(-)单核系:原单——幼单——成熟单核细胞(-)(弱+)阳性颗粒细少而分散其他细胞:(-)有时吞噬细胞可呈阳性反应造血疾病:急粒(AGL)——阳性(颗粒较粗大,呈局灶分布)分化好的原粒呈(+),急早幼粒(APL)呈强阳性反应(++~+++)急单(AML)——弱阳性(颗粒细小、稀少、散在分布),原单(+),分化差的原始单核细胞也可阴性急淋(ALL)——阴性。各阶段淋巴细胞POX均呈(-)反应,ALL骨髓中残留的原粒细胞POX可为(+),但比例小于3%。造血应用:对急淋和急非淋做出判断,阳性率大于5%诊断为髓系(尤其是急粒),小于3%不能排除淋巴系。区别小型原始粒细胞和原淋鉴别APL和急单鉴别急单(阳性~弱阳性)和异常组织细胞(阴性)各种疾病成熟中性粒细胞浆中POX酶活性改变
增加:再障、细菌感染、急淋、慢淋减低:急粒、急单、慢粒、MDS、放射病及退化性中性粒细胞
*注意:单个细胞POX阳性、阴性无鉴别髓系的意义造血苏丹黑染色SB是一种脂溶性染料,可溶解于细胞质中的含脂的结构中,使胞质的脂类物质呈棕黑色或深黑色颗粒。造血临床意义
SB染色法不常用,临床意义同POX,敏感性好于POX,但稳定性和特异性不如POX,因为有颗粒的细胞均含有脂类,除了红系都可着色。急淋阳性率可以大于5%,仅是SB阳性不能区别急淋和急非淋。
造血糖原染色过碘酸是一种氧化剂,能使细胞内含有乙二醇的糖类氧化产生双醛基,醛基与schiff试剂中的品红结合,形成紫红色化合物,定位于含有多糖成分的部位。造血正常情况下1.粒系:原粒——早幼粒——成熟粒细胞(-)(+)随细胞成熟,阳性程度逐渐增强嗜酸(-);嗜碱(+)2.单核系:原单——幼单——成熟单核(-)(+)(+~++)
3.红系:幼红——成熟红细胞(-)1~2%(+)
4.淋巴系:TL——小部分(+)BL——多数呈(+)
5.巨核细胞和血小板:(+)呈块状造血
疾病:
白细胞系统
*有助于急性白血病类型的鉴别急淋——50%出现阳性急粒——阳性急单——阳性率较高急粒单——有急粒和急单的特点
*毛细胞性白血病——强(+)*浆细胞性白血病及多发性骨髓瘤——(-),偶见(+)*慢淋——(+)造血红细胞系统
*红系病态造血:幼红细胞可呈(+)反应,百分比增加,阳性程度增加,有时红细胞也呈阳性,而其他类型急性和慢性白血病红系细胞大多呈阴性。
*各类贫血的鉴别:缺铁贫、地贫、MDS——幼红可呈(+)AA、溶贫、巨幼贫——(-)
急单造血其他:
鉴别*不典型巨核细胞——强阳性淋巴瘤RS细胞——阴性
*戈谢细胞——强阳性尼曼皮克细胞——弱阳性~阴性
*白血病细胞腺癌骨髓转移的癌细胞——强阳性红色细颗粒、粗颗粒或块状造血铁染色
铁颗粒与酸性亚铁氰化钾发生普鲁氏蓝反应,产生兰色亚铁氰化铁沉淀,定位于含铁部位。造血细胞内铁:中、晚幼红细胞胞浆中有蓝绿色颗粒铁粒幼细胞:胞质内有蓝绿色颗粒的幼红细胞环铁粒幼红细胞:胞质内有蓝绿色颗粒在6个以上,并围绕于核周排列成环形者,超过2/3区域铁粒红细胞:含有蓝绿色颗粒的红细胞正常情况下25%~50%细胞外铁:网状细胞铁,正常骨髓以含铁血黄素形式储存的铁,主要存在骨髓小粒的巨噬细胞的胞质内或外。正常情况下+~++造血细胞外铁反应强度的判断标准:显微镜检查肉眼观察————————————————着色程度形态大小分布情况
————————————————阳性显色不明显淡染小稀疏(+~++)(绿~蓝)(颗粒~小珠)(星状排列)强阳性显色明显深染大密集(+++~++++)(蓝~黑)(小珠~成堆)(片状分布)
————————————————
造血疾病:缺铁贫:外铁明显下降,甚至消失;内铁下降。经铁剂治疗后,外铁增加AA:内、外铁明显增加铁粒幼细胞贫血:内、外铁增加,且出现环铁粒幼红细胞大于等于15%,有时还可见铁粒红细胞。MDS:外铁增加,铁粒幼细胞百分比增加,出现环铁粒幼细胞感染、肝硬化、慢性肾炎、尿毒症、血色病及多次输血后:外铁增加。造血碱性磷酸酶染色
成熟中性粒细胞内的AKP在PH9.4~9.6缓冲液中能水解基质液中的α-磷酸柰酚,产生α-奈酚,其与重氮盐偶联,形成不溶性灰黑色偶氮染料沉淀,定位于酶活性处。造血碱性磷酸酶造血阳性程度:
-——胞浆中无紫黑色颗粒+——胞浆中有一层棕黑色不透明或局限地方有紫黑色颗粒++——胞浆中颗粒占胞浆1/2或遍布整个胞浆,但较疏松+++——胞浆中颗粒占3/4,颗粒染色浓++++——仅见核影,其余均是黑色造血AKP积分的计算积分:-——0分举例:细胞数积分+——1分55*0——0++——2分55*1——5+++——3分1010*2——20++++——4分2020*3——606060*4——240
——————————计算阳性细胞的阳性率和总积分100个细胞AKP积分总分为325参考范围:0~100分造血生理变化:
AKP活性和年龄有关,新生儿、婴幼儿高于成年人,老年人略低,女性大于男性,应激状态下增加。病理变化:*感染时增加
*血液病
造血鉴别:
*细菌感染——NAP积分增加病毒性感染——无明显变化(感染症状相似)
*慢粒——积分明显下降可至0分
*中性粒细胞类白血病——积分可大于200
*急非淋——积分下降或正常下限急淋——明显增加(慢淋增加)
*PNH、MDS——积分下降AA——明显增加
*真性红细胞增多症——积分明显增加继发性红细胞增多症——正常或降低造血酸性磷酸酶染色
血细胞中ACP在酸性条件下,将基质液中磷酸奈酚AS-BI水解后,释放出奈酚AS-BI,后者与重氮盐偶联,形成不溶性红色沉淀,定位于胞浆中。抗酒石酸反应:在基质中加入L-酒石酸耐酒石酸——(+)不耐酒石酸——(-)造血酸性磷酸酶造血酸性磷酸酶酒石酸抑制造血正常情况下:单核巨噬系阳性率最高,组织细胞阳性;淋巴细胞内T细胞活性高,B细胞低应用:*诊断多毛细胞白血病*辅助鉴别
TL——ACP(+);BL——(-)戈谢病——(+);尼曼皮克病——(-)*恶性单核、吞噬细胞系:
从(+)到(+-)到(-)造血氯乙酸AS-D奈酚酯酶染色血细胞(粒细胞)中ASDCE将基质液中氯乙酸奈酚水解,产生奈酚AS-D,后者与中氮盐(坚牢紫酱GBC)偶联,形成不溶性红色沉淀,定位于胞质中酯酶所在的部位。造血ASDCE正常情况下:
粒系原粒——(-)或(+);早幼粒~成熟粒细胞;嗜酸——(-)或弱(+);嗜碱——(+);少数肥大细胞可(+)其他细胞单核(-)个别弱(+)反应;淋、浆、红(-)造血ASDCE疾病情况下:有助于急性白血病的分类:急粒——阳性,原粒多呈阳性,急性早幼粒为强阳性急单——阴性,原单、幼、单多呈阴性急淋——阴性,原淋、幼阴性急粒-单——部分白血病细胞呈阳性预后:在粒细胞白血病中如果ASDCE持续阳性增加,提示预后不良造血醋酸AS-D奈酚酯酶和氟化钠抑制试验血细胞中ASDAE将基质液中的醋酸AS-D奈酚水解,产生AS-D奈酚,后者与重氮盐(坚牢蓝BB)偶联,形成不溶性兰色沉淀,定位于胞质内。
氟化钠抑制:在基质液中加入氟化钠造血结果判断:
油镜计数100个细胞,分别计算出阳性率和阳性积分以及抑制率抑制前阳性率-抑制后阳性率或阳性积分或阳性积分抑制率%=————————————%抑制前阳性率或阳性积分造血ASDAE正常情况下:粒系——原粒(-)或(+);早幼粒~成熟粒细胞阳性,一般+~++,不被NaF抑制单核系——原单(-)或(+),幼单~单核阳性,一般++~+++,被抑制弥散分布胞浆各处淋巴系——弱阳性,不被抑制阳性呈单个孤立,符点状,定位在核周红系——早期幼红可阳性,随细胞成熟阳性下降,不被抑制巨核、血小板——阳性造血疾病情况下——————————————————————————急粒急早幼粒急粒单急淋ASDAE原粒可呈白血病早幼粒细胞白血病细胞原淋和幼淋(+)反应(+)较原粒细胞强呈(+)细胞呈阳性或弱阳性NaF抑制不被抑制不被抑制属单核不被抑制被抑制属粒系不被抑制—————————————————————————造血α-丁酸奈酚酯酶染色α-NBE血细胞中α-NBE在碱性条件下,基质液中的α-丁酸奈酚水解,产生α-奈酚,后者与坚牢酱紫GBC偶联,形成不溶性红色沉淀,定位于胞质内。造血α-NBE正常情况下:*粒系——各期(-)*单核系——强(+);原单(+)或(-),幼单~成熟单核(+),可被NaF抑制*淋巴系——TC呈致密的局限性点符状阳性反应,不管TC正常或异常均为阳性反应BC阴性,非T非B也可出现散在颗粒状阳性反应。
*巨核和浆细胞——阴性或弱阳性
*血小板——可阳性
*组织细胞——可阳性,不被抑制造血α-NBE疾病情况下:急性白血病鉴别
急粒——原粒阴性急单——幼单~成熟单核阳性急粒单——部分阳性,部分阴性鉴别
急单——阳性,被NaF抑制;组织细胞白血病——阳性,但不被抑制造血
双酯酶染色
造血缺铁性贫血
Irondeficiencyanemia,IDA
造血血涂片检查:成熟红细胞体积减低,中央淡染区扩大,典型的呈环形,小细胞低色素。
造血IDA血象:造血骨髓涂片检查和铁染色:
骨髓涂片:增生活跃或明显活跃,尤其红系增生明显活跃(30%以上),以中、晚、幼红为主,各阶段红细胞体积较小,胞浆量少,可见核浆发育不平衡(老核幼浆),幼红细胞虽多,但比较小型,且缺乏细胞质,看上去象收缩了一样,可能是缺铁贫。粒系、巨核系正常。
铁染色:缺铁贫外铁减少或消失,内铁下降
铁粒幼
内铁增加,外铁存在造血造血1:中幼红细胞
2:晚幼红细胞
造血增生性贫血的骨髓象
骨髓有核细胞增生明显活跃,
以红细胞系增生为主,粒红比值减少,甚至倒置,以中、晚幼红细胞增生为主,原红、早幼红细胞也相应增加。幼红细胞形态正常,胞体也可偏大,但无巨幼红细胞样改变。嗜多色性红细胞增多。
粒细胞系相对减少,形态正常。
巨核细胞正常或增多。造血白血病的分类
一、按白血病细胞分化程度分类1.
急性白血病
2.
慢性白血病
二、按白血病细胞形态分类
三、临床
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