液相培训-用户使用

Agilent

1200Infinity系列

维护培训

虞明阳售后服务工程师安捷伦，中国，北区March12,2025Version1.0GPCSECPreparativeLC&LC/MSNanoflowHPLC-ChipMSIsocraticLCNanoLC&CapLCAnalyticalSFCBio-inertHPLCMulti-methodandMethodDevelopmentHigh-throughputLC&LC/MS议程1200Infinity介绍1260泵1260自动进样器1260柱温箱+切换阀1260检测器1220InfinityLabAdvisorAgilent常见问题Agilent优化Agilent维护时间表March12,2025Version1.0新！Agilent1200Infinity系列有哪些新功能？March12,2025Version1.01220InfinityInfinitelymoreaffordable1260InfinityInfinitelymoreconfident1290InfinityInfinitelymorepowerful新！Agilent1200Infinity系列提高HPLC标准–适应不同的应用和预算更加简易的维护March12,2025Version1.0新！Agilent1200Infinity系列March12,2025Version1.0关机(未通电)就绪(已开机)未就绪正在运行出现故障固件升级出现严重故障灯熄灭灯熄灭黄灯绿灯红灯黄灯闪烁红灯闪烁1260Infinity系列

泵1200Infinity介绍1260泵1260自动进样器1260柱温箱+切换阀1260检测器1220InfinityLabAdvisorAgilent常见问题Agilent优化Agilent维护时间表March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列泵

-溶剂瓶March12,2025Version1.0溶剂：棕色玻璃瓶会避免藻类的生长

经常过滤溶剂以免其中微粒永久性阻塞毛细管避免使用下述可腐蚀钢铁的溶剂：

碱金属卤化物及其酸溶液(如：碘化锂、氯化钾等)

高浓度无机酸，如硝酸、硫酸

可能含有过氧化物的色谱醇醚(如THF、二氧六环、二丙基乙醚)这些在使用前必须用干燥氧化铝过滤除去过氧化物

含强络合剂的溶液(如EDTA，乙二胺四乙酸)

四氯化碳与2-异丙醇或四氢呋喃的混合液Agilent1200Infinity系列泵

-脱气机G1322AMarch12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列泵

-脱气机G1322A应用于二/单元泵12ml/channelRID防止折光变化防止溶解氧影响FLD防止荧光淬灭甲醇溶液高流速时建议配置

March12,2025Version1.0 1290二元泵

1260二元泵

1260四元泵

1260生物惰性四元泵

1260单元泵

Agilent1200Infinity系列泵

-不同的类型120bar0600bar400barMarch12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列泵-压力/流速March12,2025Version1.002004006008001000120002468101290InfinityLC1260InfinityQuat./IsoLC1220InfinityLC压力(bar)流速(ml/min)1260InfinityBinaryLCAgilent1200Infinity系列泵

-附件HPLC启动工具箱HPLC工具箱LabAdvisor(诊断工具)溶剂选择阀(SSV-二元泵)主动柱塞杆清洗(ASW)被动阀(PIV)/主动阀(AIV)March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列泵

-四元泵内置四通道脱气机(1.5ml/channel)泵头阻尼器被动阀(PIV)March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列泵

-四元泵脱气机从前端拆卸脱气机压力可以通过LabAdvisor显示March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列泵

-二元泵溶剂选择阀(SSV)March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列泵

-球阀(OV/PV)出口球阀(OV)排空阀(PV)

1260PV1220PVMarch12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列泵

-泵头组件新的柱塞杆设计用于安装和取出密封sapphirePTFEMarch12,2025Version1.0ASWAgilent1200Infinity系列泵

-单泵头组件March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列泵

-二元泵Pressure-SensorPurgeValveMixing-TDamper400µlMixerBA600barDamper400µlMixerPressureSensorPurgeValveMarch12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列泵

-四/二泵头组件比较四元泵二元泵March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列泵

-被动阀技术(PIV)结构简单更换成本更低

March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列泵

-柱塞杆清洗(ASW)单元泵/四元泵/二元泵定期使用溶剂清洗柱塞杆使用软件控制(CDS)在使用高浓度缓冲盐溶液时推荐使用ASW，例如浓度大于0.01molar使用10%IPA冲洗

March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列泵

-溶剂选择阀(SSV)二元泵从四种溶剂中选择其中的两种组成流动相或者选择不同的溶剂冲洗色谱柱可以在序列中使用不同的方法调用不同的流动相

March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列泵

-应用-单/四/二元泵特点：压力/流速-

600/400bar@

5mL/min200bar@

>5~10mL/min流速范围

-0.5to10mL/min使用3.0,4.6甚至10mmID的色谱柱用于常规分析和半制备

内置真空脱气机(四元泵)可升级

-可以升级为ASW(四元泵)/SSV(二元泵)优秀的梯度精确度-高压混合(二元泵)极低的延迟体积-120µL(二元泵)March12,2025Version1.01260Infinity系列

进样器March12,2025Version1.01200Infinity介绍1260泵1260自动进样器1260柱温箱+切换阀1260检测器1220InfinityLabAdvisorAgilent常见问题Agilent优化Agilent维护时间表Agilent1200Infinity系列自动进样器

-手动进样器March12,2025Version1.0G1328B–1200Infinity系列400barG1328C–1260Infinity系列600barG1329B

1260标准自动进样器G1367E

1260高性能自动进样器#020extendedinj.volume#021multidrawkit#021multidrawkit#04040µLInjectionKitforfastestanalysison2.1mmIDColumns(140μLdelay)

600barG1330BG4226A

1290Infinity自动进样器00bar21G1330B600barG1330BAgilent1200Infinity系列自动进样器

-自动进样器March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列自动进样器

-自动进样器G1329/G1313漏液盘针座针组件机械臂组件计量泵毛细定量环March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列自动进样器

-自动进样器G1367漏液盘针座针组件针臂组件机械臂组件针座毛细定量环March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列自动进样器

-自动进样器G1367易于维修的设计定量环设计为一个整体易于更换进样针也非常易于更换March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列自动进样器

-自动进样器进样步骤-1March12,2025Version1.0流路旁路自动进样器进样臂吸液或者抓取进样瓶Agilent1200Infinity系列自动进样器

-自动进样器进样步骤-2March12,2025Version1.0清洗针外壁以降低残留Agilent1200Infinity系列自动进样器

-自动进样器进样步骤-3March12,2025Version1.0移动到针座进样流路主路Agilent1200Infinity系列自动进样器

-自动进样器进样步骤-4March12,2025Version1.0进样Agilent1200Infinity系列自动进样器

-自动进样器制冷模块G1330A/B

自动进样器控温从4°C到

40°CMarch12,2025Version1.01260Infinity系列

柱温箱+阀March12,2025Version1.01200Infinity介绍1260泵1260自动进样器1260柱温箱+切换阀1260检测器1220InfinityLabAdvisorAgilent常见问题Agilent优化Agilent维护时间表Agilent1200Infinity系列柱温箱+阀

-柱温箱March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列柱温箱+阀

-柱温箱80°C/100°C主板电源风扇风扇色谱柱选择阀漏液传感器(可关闭)热交换组件左侧3µl漏液盘热交换组件右侧6µlMarch12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列柱温箱+阀

-更换阀March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列柱温箱+阀

-阀可以选择6根色谱柱进样保护壳阀驱动阀盖板March12,2025Version1.01260Infinity系列

检测器March12,2025Version1.01200Infinity介绍1260泵1260自动进样器1260柱温箱+切换阀1260检测器1220InfinityLabAdvisorAgilent常见问题Agilent优化Agilent维护时间表Agilent1200Infinity系列检测器-可变波长紫外检测器(VWD)-G1314Lambert-Beer‘sLaw:March12,2025Version1.0A: Absorptionα: Extinctioncoeffizientc: Concentrationl: PathlengthAgilent1200Infinity系列检测器-可变波长紫外检测器(VWD)-G1314March12,2025Version1.0清洗流动池如果流动池被污染可先用以下方法处理:在不连接色谱柱的情况下先用高纯水冲洗20分钟，然后用5％硝酸冲洗2小时，最后再用高纯水冲洗至流出液中性即可。如上述方法不行，就需更换流动池的检测窗。上述处理方法也适用于DAD的流动池Agilent1200Infinity系列检测器-可变波长紫外检测器(VWD)-G1314March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列检测器-二极管阵列检测器(DAD)-G1315March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列检测器-二极管阵列检测器(DAD)-G13153DMarch12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列检测器-二极管阵列检测器(DAD)-G1315March12,2025Version1.0WavelengthTimeAAgilent1200Infinity系列检测器-二极管阵列检测器(DAD)-G1315bandwidthMarch12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列检测器-二极管阵列检测器(DAD)-G4212A/B氘灯可编程狭缝1024单元二极管阵列光栅反光镜1260InfinityDADMarch12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列检测器-二极管阵列检测器(DAD)-G4212A/B60/10/3.7mmpathlength

4µLσVdispersionvolumeMarch12,2025Version1.010mmpathlength

smallgeom.cellvolume(13µL)highlighttransmissionAgilent1200Infinity系列检测器-二极管阵列检测器(DAD)-G4212A/B60mm光程3.7mm光程Computingthesignalsfrom60mm光程用于低浓度检测

3.7mm光程用于高浓度检测当前

1200DAD高动态紫外吸收范围(HDR-DAD)检测信号

[AU/cm]Conc

[µg/mL]March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列检测器-荧光检测器(FLD)-G1321A/B与紫外检测器相比较荧光检测器能够为化合物及极低含量甚至是痕量杂质定量和定性提供更高的灵敏度和选择性电路板光学透镜以及氙灯流通池E-Pac保护March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列检测器-荧光检测器(FLD)-G1321A/BXenonFlashLamp20WSourceLensRotating

Excitation

GratingMirrorRotating

Emission

Grating8ulFlowCellReference

DiodeEmissionLensPhoto

MultiplierPMTslitEMslitEXslitMarch12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列检测器-荧光检测器(FLD)-G1321A/B影响荧光检测器检测的因素有：未溶解的氧或者其他杂质由于其他大分子或者其他会产生散射光的物质引起的散射光噪音增大Lamp有正常模式和节能模式Gain增益越大噪音也越大由于水性流动相长时间留在流动池会有藻类生长，而藻类会产生荧光，所以可添加有机溶剂如5％的乙腈或甲醇如怀疑流动池被污染可用以下步骤清洗之：用双蒸水冲洗30分钟以上用注射器注射65％硝酸入流动池并使其留在流动池约1小时。(注意，为了防止过压，请缓慢注射)用双蒸水冲洗干净March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列检测器-示差检测器(RID)-G1362A原理：当一束光从一种介质穿过另一种介质时光速和方向都会发生变化折光系数可以表示为：n=c/V其中c为光在真空中的速度

V为光在另一种介质中的速度March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列检测器-示差检测器(RID)-G1362A影响因素：环境温度使用机器内置恒温一般高于室温5℃流动相变化使用预混好流动相流动相中是否含有气体某些特定流动相和色谱柱会产生噪音缺点：不能够运行梯度洗脱的样品March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列检测器-示差检测器(RID)-G1362A1Flowin2Heater3Heatexchanger4Samplecell5Purgevalve6Recyclevalve7Wastecontainer8Referencecell9SolventbottleALampBCondenserlensCCollimatorlensDCellEMirrorFZeroglassGDiodesABCDEFGMarch12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列检测器-示差检测器(RID)-G1362AMarch12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列检测器-示差检测器(RID)-G1362A排空和循环关闭状态March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列检测器-示差检测器(RID)-G1362A排空和循环打开状态March12,2025Version1.01220Infinity系列March12,2025Version1.01200Infinity介绍1260泵1260自动进样器1260柱温箱+切换阀1260检测器1220InfinityLabAdvisorAgilent常见问题Agilent优化Agilent维护时间表Agilent1200Infinity系列1220-1220March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列1220-1220脱气机及泵脱气机Samepartasin1290阻尼器Samepartasin1260两通道比例阀风扇组件Samepartasin1260泵Samepartasin1200所有的泵内组件需要将上盖打开后方可拆开March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列1220-1220自动进样器同G1329B自动进样器组件相同March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列1220-1220自动进样器需要将TCC和ALS漏液盘下固定螺丝拆除后才能抽出March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列1220-1220柱温箱5ml/min流速可以升到60˚C6µl管路体积可容纳25cm长色谱柱March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列1220-1220紫外检测器同G1314E/F可以通用但是不可以使用带RFID的流通池和灯March12,2025Version1.0Agilent1200Infinity系列1220-1220扩展设备FLD(G1321B)RID(G1362A)DAD(G4212B)TCCG1316A6210March12,2025Version1.0March12,2025Version1.0LabADVISOR1200Infinity介绍1260泵1260自动进样器1260柱温箱+切换阀1260检测器1220InfinityLabAdvisorAgilent常见问题Agilent优化Agilent维护时间表AgilentLabAdvisor-实验室仪器管理及维护诊断软件March12,2025Version1.0LabAdvisorAdvancedAsdefaultoptiontopumpAdditionallicensesavailableLabAdvisorBasicFree-of-chargewithpump液相和毛细管电泳更易于理解的维修、诊断及校正工具数据可以导出或者导入保存筛选功能提供了更强大易用的用于仪器早起诊断维护反馈及追踪功能使用者行为可以被加入时间戳增强了数据追踪可靠性AgilentLabAdvisor-基本版March12,2025Version1.0测试校正工具固件升级日志及结果快速链接系统概览状态报告AgilentLabAdvisor-高级版March12,2025Version1.0测试校正工具固件升级日志及结果快速链接系统概览状态报告高级EMF数据共享追踪功能实时仪器控制客户端查看AgilentLabAdvisor-服务和诊断March12,2025Version1.0服务和诊断功能界面提供检测、工具和校正功能选择仪器模块以及需要进行的测试检测检测通过与预设指标进行对比够提供通过/失败结果报告校正内置校正的仪器模块需要确准时进行此项检查工具工具提供没有特定结果的功能AgilentLabAdvisor-实时仪器控制March12,2025Version1.0用于仪器实际状态检测控制方法参数调整特殊命令AgilentLabAdvisor-追踪功能March12,2025Version1.0AgilentLabAdvisor-高级EMFMarch12,2025Version1.0LabAdvisor基本版提供EMF数据技术功能以及数值重置LabAdvisor高级版提供图形化百分比显示以及可以自定义数值设置功能AgilentLabAdvisor-数据共享March12,2025Version1.0AgilentLabAdvisor-数据共享March12,2025Version1.0AgilentLabAdvisor-数据共享March12,2025Version1.0数据共享671253428筛选、分析数据报告用户系统2:泵435比较:-结果-EMF计数值.......12674351267比较:-结果-EMF计数值.......用户系统2:检测器AgilentLabAdvisor-应用LabAdvisor进行故障分析March12,2025Version1.0逐步诊断功能可以快速有效的针对部件级进行维修诊断例如自动进样器:

漏液检查测试密封程度

-六通进样阀

-计量泵头

以及针和针座March12,2025Version1.0Agilent常见问题1200Infinity介绍1260泵1260自动进样器1260柱温箱+切换阀1260检测器1220InfinityLabAdvisorAgilent常见问题Agilent优化Agilent维护时间表Agilent常见问题-液相基线噪音March12,2025Version1.0其它要考虑的问题：是否改变了流动相的组成？是否改变了检测波长？在你的仪器上使用的最后的流动相是什么？流动相是否相溶？流动相是否干净？Agilent常见问题-液相压力波动March12,2025Version1.0可能的原因：溶剂进口过滤芯堵塞溶剂未脱气泵的密封垫老化出口单向阀失效主动阀失效最常见的原因是：泵内有气泡Agilent常见问题-液相压力过低March12,2025Version1.0可能的原因：溶剂进口过滤芯堵塞连接管路泄漏或其它备件(泵头密封垫)溶剂或流速改变主/被动阀失灵四元比例阀失灵单向出口阀失灵色谱柱失效(固定相流失)Agilent常见问题-液相压力过高March12,2025Version1.0可能的原因：柱子进口过滤芯被污染PURGE阀过滤芯被污染色谱柱被污染连接管路，尤其是针座毛细管堵塞进样器旋转密封阀被堵塞进样针或针座被阻塞Agilent常见问题-自动进样器污染March12,2025Version1.0定期检查各传动杆是否足够润滑，必要时先用酒精棉球擦拭干净后再给这些杆涂抹少量液体润滑油，脏的传动杆使阻力增大从而造成自动进样器在取样过程中由于马达过热导致出错。检查取样爪子的绿色胶套时否损坏，如果是请更换之，否则会使样品放置位置不正确而导致如针，针座等损坏。用酒精棉签擦拭针座防止灰尘污染堵塞针与针座。若场地确实灰尘较多，建议购买自动进样器门，棕色门还可以帮助防止见光敏感的样品更换转子密封圈更换针及针座注意保持样品牌后凸出识别点清洁防止其被有机试剂溶解March12,2025Version1.0Agilent优化1200Infinity介绍1260泵1260自动进样器1260柱温箱+切换阀1260检测器1220InfinityLabAdvisorAgilent常见问题Agilent优化Agilent维护时间表Agilent优化-溶剂过滤器March12,2025Version1.0检查溶剂过滤器－拧开脱气机出口或比例阀入口管线，并使液面高于出口30cm此时溶剂会因为重力流出，脱气机或溶剂过滤头堵塞时，溶剂会流出不畅或不流出－查看过滤器是否变色．－临时取下过滤器，检查柱前压力是否正常．清洁溶剂过滤器－将堵塞的溶剂过滤器从瓶头组件中拿下先用水冲洗残留之溶剂然后将过滤器放在装有浓硝酸(35％)的烧杯里浸一小时－用二次蒸馏水彻底冲洗过滤器建议不使用超声波清洗机清洗－将过滤器重新装好－建议定期清洗溶剂过滤器及溶剂瓶，每三个月至少清洗一次注意：不要使用没有安装溶剂过滤器的系统．可能会严重堵塞系统Agilent优化-泵的使用March12,2025Version1.0将装有溶剂瓶的溶剂箱放在泵上面(或较高处)当在四元泵上使用盐溶液或有机溶剂时，建议将盐溶液接在底部得梯度阀口上，将有机溶剂接在上面得梯度阀口上有机通道最好在盐溶液通道得上面建议用水定期冲洗所有MCGV通道除去可能在阀口析出得盐结晶操作泵之前，用至少两个体积(标准脱气机30ml，对微脱气机10ml)冲洗真空脱气机

，特别是当泵关闭了一段时间后(例如，过夜)，以及在通道中使用挥发性混合溶剂时防止溶剂过滤器堵塞及长菌，当过滤器表面有黑色或黄色污染层说明滤器发生了堵塞，请立即清洗或更换之定期检查排液阀的滤芯检查方法：拧开排液阀，以水作流动相，流速5ml/min，若压力大于10bar，则须立即更换当使用低流速时(不高于0.2

ml/min)检查所有1/16英寸接头有无渗漏(用压力测试或漏液测试)每当更换泵密封垫时排液阀滤芯也应更换更换活塞密封垫时检查活塞杆上是否有划痕有划痕的活塞将导致轻度渗漏，并降低密封垫的使用寿命应尽早更换有划痕的活塞使用缓冲溶液时，关泵前先用水冲洗系统当需要长时间使用0.1摩尔或更高浓度得缓冲液时，最好选用密封垫清洗附件，以减少对密封垫及活塞杆的磨损更换活塞密封垫后应按照密封垫安装步骤对其进行磨合，但磨合不适用于正相密封垫Agilent优化-密封垫磨合操作March12,2025Version1.0以异丙醇作为溶剂并将其管道直接连接到主动阀(四元泵需一接头，部件号0100－1847)连接阻尼管(部件号5022－2159)于排液阀的出口，阻尼管的另一端置于废液瓶中打开排液阀，并用异丙醇以2ml/min的流速冲洗系统10分钟关闭排液阀，设置流速使压力达到350bar，并使系统在此压力下保持15分钟关闭泵，缓慢打开排液阀释放压力，重新连接管路，然后冲洗系统中的异丙醇注意，只有反相密封垫(5063－6589)才需此操作，而正相密封垫(0905－1420)因其最高只耐受200bar,所以此操作会损害它Agilent优化-更换溶剂March12,2025Version1.0Agilent优化-自动进样器-减少交叉污染和残留March12,2025Version1.0使用自动洗针功能自动洗针功能可以把程序设置为“带有洗针的进样”,或将自动洗针功能包含在进样器程序中。当使用自动洗针功能时，进样针在取样后会转移到洗针步骤。造成携留效应的主要原因是残留在进样针外的少量样品。通过进样后的洗针功能可以立即洗去针外表面上残留的样品。当进样阀转回到主流路时，定量管和针内所有的样品都被冲洗到色谱柱中。这种结合洗针和冲洗管路的设计可以把携留效应减低到最小的程度去掉洗涤瓶盖为了获得最佳的分析结果，装有溶剂的洗涤瓶是不加盖的，而且洗涤瓶中的溶剂对样品组分有较好的溶解作用。如果洗涤瓶有盖将会有少量样品留在密封垫上，这样会把残留的样品带到下一个样品中带有洗针的进样程序进样程序中包括了NEEDLEWASH(洗针)命令，当这一命令设置在进样程序中时，则在进样前会进入指定的洗涤瓶中洗针Agilent优化-自动进样器-提高进样精度March12,2025Version1.0进样体积小于2

μL当进样阀切换到BYPASS(旁路)位置时，在定量管内的流动相压力降低。当进样针抽取样品时，流动相进一步降低压力。如果流动相没有充分脱气，在进样时定量管内就会产生小气泡。在进样体积小于

2

μL时这些小气泡就会影响到进样体积的精密度。为了使进样体积小于

2

μL时有最佳的进样精密度，建议使用Agilent

1100系列真空脱气机，确保流动相充分脱气。也可以在进样间隙自动洗针，从而进一步提高进样体积的精密度抽样速度对粘稠的样品，计量部件从样品瓶抽取样品的速度会影响取样体积的精密度。如取样速度太快，在样品塞中会带有气泡，