TNAIA 0339-2024 葡萄酒中5-羟甲基糠醛的测定 高效液相色谱-串联质谱法

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T/NAIA团 体 标 准T/NAIA0339—2024葡萄酒中5-羟甲基糠醛的测定高效液相色谱-串联质谱法Determinationof5-HydroxymethylfurfuralinWinebyHPLC-MS/MS2024-11-25发布 2024-12-01实施宁夏化学分析测试协会 发布T/NAIA0339—2024T/NAIA0339—2024II前 言GB/T1.1-20201编写。本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。本文件起草单位：宁夏回族自治区食品检测研究院（国家市场监督管理总局重点实验室（枸杞及葡萄酒质量安全））、吐鲁番市质量与计量检测所、宁夏化学分析测试协会。本文件主要起草人：朱燕燕、马桂娟、汤丽华、李强、张学玲、马利伟、宋钰、刘继辉、刘竞择、王鹏、高永梅、姚晓瑜、吕毅、吴明、张小飞。PAGEPAGE1葡萄酒中5-羟甲基糠醛的测定高效液相色谱-串联质谱法范围本文件规定了葡萄酒中5-羟甲基糠醛的高效液相色谱-串联质谱检测方法。本文件适用于葡萄酒中5-羟甲基糠醛的测定和确证。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。原理试样经甲醇-（10+90，体积比液相色谱-串联质谱仪检测，外标法定量。试剂和材料本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。试剂和材料甲醇：色谱纯。甲酸：色谱纯。甲醇-水溶液（10+90，体积比）：100mL900mL水中，混匀。0.1%1mL1000mL。0.1%1mL1000mL。十八烷基硅烷键合硅胶（C18）：40μm～60μm。微孔滤膜（水相）：13mm×0.22μm，或相当者。标准品5-羟甲基糠醛（纯度：≥99.0%，CAS：67-47-0）。标准溶液配制标准储备液：准确称取5-羟甲基糠醛标准品适量，用甲醇-水溶液（5.1.3）溶解并定容至T/NAIA0339—2024T/NAIA0339—2024PAGEPAGE210.0mL，配制成浓度为1.0mg/mL标准储备溶液，4℃以下避光保存，有效期3个月。1.0μg/mL的标准储备液适量，用阴性葡萄酒基质定容至1.0mL510.0、20.0、50.0、100.0、200.0、400.0、500.0ng/mL，临用现配。仪器和设备液相色谱-串联质谱仪：配备电喷雾离子源。0.1mg0.01g。涡旋混合器。超声波发生器。8000r/min。C18，2.1mm×100mm1.8μm或性能相当。分析步骤样品前处理10g（50mL15mL甲醇-水溶液1min20min，用甲醇-5mL备用液，100mgC18粉末（5.1.6）2min6000r/min5min，吸取上清液过微孔滤膜（5.1.7），待测定。仪器参考条件液相色谱参考条件a）柱温：25℃。b）流动相：A：0.1%甲酸溶液（5.1.4），B：0.1%甲酸甲醇溶液（5.1.5）；梯度洗脱见表1。c）流速：0.3mL/min。d）进样量：5μL。表1 流动相及梯度洗脱条件时间/min流速/（mL/min）流动相A/%流动相B/%0.000.39551.500.39553.000.365355.000.35957.000.35959.000.395510.000.3955质谱参考条件a）离子源：电喷雾离子源（ESI）b）扫描方式：正离子扫描。c）检测方式：多反应监测（MRM）d）鞘气温度：350℃。e）鞘气流速：11.0L/min。f）脱溶剂气温度：300℃。g）脱溶剂气流速：10.0L/min。h）毛细管电压：4000V。i）定性离子对、定量离子对、碎裂电压、碰撞能量等参数参见附录A。定量测定7.2.17.2.2则对其进行确证。5-羟甲基糠醛标准品的多反应监测B，采用基质溶液校准曲线外标法定量。定性测定许偏差之内（2），则可判定样品中存在对应的被测物。表2 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度＞50%＞20%至50%＞10%至20%≤10%允许的相对偏差±20%±25%±30%±50%空白试验除不加试样外，均按上述步骤进行。分析结果的表述试样中5-羟甲基糠醛的含量按式（1）进行计算：X cV 1000式中：

m 1000

(1)X 5-羟甲基糠醛的含量，单位为微克每千克（μg/kg）；c ──由标准曲线计算出的试样溶液浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；V ──试样的最后定容体积，单位为毫升（mL）；m ──试样质量，单位为克（g）。注：测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。精密度在重复性测定条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。其他当称样量为10g50mL时，5-羟甲基糠醛的定量限为0.075mg/kg附录A(资料性5-羟甲基糠醛的质谱参数表A.1 5-羟甲基糠醛的质谱参数被测物名称母离子(m/z)子离子(m/z)碎裂电