《玉米纹枯病抗性鉴定技术规程》

1DB36/XXXXX—XXXX玉米纹枯病抗性鉴定技术规程本标准规定了玉米纹枯病（Rhizoctoniasolani）抗性鉴定技术的术语和定义、鉴定方法、病情调查、品种抗病性评价等。本标准适用于江西省玉米品种对纹枯病的抗性鉴定与评价。2规范性引用文件NY/T1248.9玉米抗病虫性鉴定技术规范，第9部分：纹枯病。3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1自然诱发naturalinduction在适宜病害发生的环境和病原菌存在的条件下，病原菌借自然因素或间接传播到寄主植物或器官，使其发病。3.2人工接种artificialinoculation采用人工方法将病原菌直接或间接接种到寄主植物的种子或根部，使其发病，并依据相关的抗性评价标准，来区分品种的抗病性。4鉴定方法4.1自然病圃鉴定4.1.1病圃设定在玉米纹枯病常发区，选择地势平坦、土壤肥沃、肥力均匀、上年度玉米纹枯病发生严重的田块设置病4.1.2播种2DB36/XXXXX—XXXX播种时间为每年的4月上旬~4月中旬。开沟做畦（垄），按畦面的宽度方向穴播。依据参鉴品种生育期，分期播种。各品种每小区播3行。每10个鉴定材料设1组已知抗病和感病对照材料（参见附录B）。重复3次。每小区行长15m，行株距30cm~35cm×50cm。4.1.3病圃管理6片可见叶定苗，单穴单株。苗期追施适量复合肥，拔节期追施适量尿素。使用杀虫剂及时防虫。整个鉴定期间禁止使用杀菌剂。其余按大田常规生产管理。4.2人工接种鉴定4.2.1病圃设定在玉米纹枯病常发区，选择地势平坦、土壤肥沃、肥力均匀的田块设置病圃。4.2.2播种播种时间为每年的4月上旬~4月中旬。开沟做畦（垄按畦面的宽度方向条播。依据参鉴品种生育期，分期播种。各品种每小区播3行。每10个鉴定材料设1组已知抗病和感病对照材料（参见附录B）。重复3次。每小区行长10m，行株距30cm~35cm×50cm。4.2.3病圃管理6片可见叶定苗，单穴单株。苗期追施适量复合肥，拔节期追施适量尿素。使用杀虫剂及时防虫。整个鉴定期间禁止使用杀菌剂。其余按大田常规生产管理。4.2.4病原菌接种体制备将保存的玉米纹枯病菌接种于PDA斜面，25℃下活化培养3d左右。挑取菌苔接入麦粒培养基，25℃黑暗条件下扩大繁殖5d左右（参见附录B），至菌丝布满麦粒备用。4.2.5接种时期玉米大喇叭口期进行人工接种。4.2.6接种方法将长满菌丝的麦粒接种于玉米倒数第三叶叶鞘内侧，每株接种麦粒2粒。接种后注意及时浇灌，保持土壤相对湿度不低于25%。5病情调查3DB36/XXXXX—XXXX鲜食玉米于鲜果穗采收期即吐丝后21d~25d（甜玉米吐丝后21d~23d，糯玉米吐丝后23d~25d籽粒玉米于乳熟末期（吐丝后40d左右采用全小区调查法进行。病情分级标准见附录A。6品种抗病性评价6.1评价标准品种抗感性根据田间自然病圃和人工接种的结果进行综合评价；以田间自然病圃单一方式鉴定品种的抗性，应有不少于2次或不同年份的田间鉴定结果。以感病对照品种群体病情指数不低于55.57，作为评判田间自然病圃和人工接种鉴定结果有效性的标准。6.2病情调查划分标准病情调查分级如下：表1玉米纹枯病病情分级标准严重度分级病症特征描述0级：全株无病症最下方果穗下第4叶鞘及其以下叶鞘发病最下方果穗下第3叶鞘及其以下叶鞘发病最下方果穗下第2叶鞘及其以下叶鞘发病最下方果穗下第1叶鞘及其以下叶鞘发病最下方果穗及其以上叶鞘发病6.3品种抗性分级标准根据以下公式计算单株病情指数和群体病情指数：单株病情指数（DI）=[∑(病级值×该病级的病株数)×100]/(病级最高值×调查总株数)，群体病情指数=∑所有单株病情指数/调查总株数。依据各品种的群体病情指数，按照表1评价标准，确定品种的抗感性。表2玉米纹枯病抗性评价标准抗性表型分级标准高抗（HR）群体病情指数为0抗（R）0＜群体病情指数≤11.11中抗（MR）11.11＜群体病情指数≤33.33中感（MS）33.33＜群体病情指数≤55.56感（S）55.56＜群体病情指数≤77.78高感（HS）群体病情指数＞77.784DB36/XXXXX—XXXX（资料性附录）玉米纹枯病菌培养基A.1马铃薯葡萄糖琼胶培养基（PDA）制备去皮马铃薯200g，葡萄糖或蔗糖10g，琼胶17g~20g，蒸馏水1000mL。马铃薯切碎，加水适量煮沸30min，纱布过滤并加水定容至1000mL后，加入糖和琼胶。加热熔化后分装，121℃下高压灭菌20min。A.2麦粒培养基制备麦粒浸泡至籽粒略涨，装入三角瓶，于121℃下高压灭菌1h。5DB36/XXXXX—XXXX（资料性附录）玉米纹枯病抗性鉴定对照材料B.1抗病对照材料昌7-2，选自昌单七号杂交种并改良，中抗玉米纹枯病。在江西抗性表现稳定。B.2感病对照材料南60-1，为CML204改良自交系，高感玉米纹枯病。在江西感病性表现稳定