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基础医学部生理生化教研室生物化学临床医学专业教学资源库系列课程江苏医药职业学院蛋白质化学01040203目录蛋白质分子组成蛋白质分子结构蛋白质结构与功能关系蛋白质理化性质蛋白质化学蛋白质分子的理化性质两性解离及等电点胶体性质及胶体溶液稳定的因素紫外吸收性质—最大吸收峰值,氨基酸种类蛋白质变性的概念、特点及临床应用蛋白质化学蛋白质分子的理化性质蛋白质呈色反应双缩脲反应—肽键茚三酮反应—游离的α-氨基Folin-酚试剂—酪氨酸残基蛋白质化学蛋白质的理化性质蛋白质的变性蛋白质的变性蛋白质的性质与它们的结构密切相关。某些物理或化学因素,能够破坏蛋白质的结构状态,引起蛋白质理化性质改变并导致其生理活性丧失蛋白质的理化性质蛋白质的变性条件:理化因素破坏:空间结构结果:理化性质改变、生物学活性丧失蛋白质的理化性质蛋白质的变性变性后的特点溶解度下降(蛋白质分子内部的疏水基团暴露于分子表面)黏度增加结晶能力消失生物学活性丧失易被蛋白酶水解蛋白质的理化性质蛋白质的变性疫苗低温制备与保存大豆蛋白加热加盐而变性凝固消毒、杀菌豆腐的制作蛋白质的理化性质蛋白质的变性可以加热或加酸蛋白尿的检测蛋白质的理化性质蛋白质的复性与凝固少数变性蛋白质去除变性因素恢复原有空间结构与生物学活性对象条件结果蛋白质的理化性质蛋白质的复性与凝固复性变性凝固变性后的不可逆结果蛋白质的理化性质蛋白质的两性离解和等电点PH<PIPH=PIPH>PI净电荷+1净电荷0净电荷-1正离子两性离子负离子等电点PI蛋白质的理化性质蛋白质的两性离解和等电点临床应用通过电泳法可以将血清蛋白进行分离,用来帮助疾病的诊断和观察病情。也可以从混合溶液中,提取单一蛋白质蛋白质的理化性质蛋白质的两性离解和等电点正常人尿液中为什么不出现蛋白质?蛋白质的理化性质蛋白质的两性离解和等电点机械屏障电荷屏障蛋白质的理化性质蛋白质的胶体性质分子量很大,在水中能够形成胶体溶液胶体溶液中的蛋白质不能通过半透膜蛋白质分子表面亲水基团比较集中,可以形成水化膜可以应用透析法将非蛋白的小分子杂质除去蛋白质的理化性质蛋白质的胶体性质蛋白质带同种电荷分子表面有水化膜稳定因素蛋白质沉淀血液透析应用蛋白质的理化性质在什么PH条件下蛋白质沉淀最多?蛋白质的胶体性质血液透析的原理?蛋白质的理化性质蛋白质沉淀破坏蛋白质分子的水化作用或者减弱分子间同性相斥作用的因子,使蛋白质在水中的溶解度降低而沉降下来转化为固体的分离方法等电点沉淀盐析有机济剂沉淀蛋白质的理化性质蛋白质沉淀破坏蛋白水化膜,使蛋白凝集有机溶剂PH<pI蛋白带正电,与生物碱结合生物碱PH>pI蛋白带负电荷,与金属离子结合重金属盐高浓度盐破坏水化膜并中和电荷(蛋白不变性)盐析蛋白质的理化性质蛋白质的紫外吸收大部分蛋白质均含有带芳香环的苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸蛋白质的理化性质蛋白质的紫外吸收酪氨酸吸收紫外线峰值为278nm色氨酸吸收紫外线峰值为279nm苯丙氨酸吸收紫外线峰值为259nm含酪氨酸和色氨酸蛋白质在280nm附近有最大吸收值大多数蛋白质在280nm附近显示强的吸收峰蛋白质的理化性质蛋白质的呈色反应蛋白质分子的肽键与碱性硫酸铜作用,生成紫红色的复合物双缩脲反应肽键越多颜色越深(2个或2个以上才可以)受蛋白质特异性影响小蛋白质定量测定;也可以测定蛋白质水解程度蛋白质的理化性质蛋白质的颜色反应蛋白质分子中酪氨酸的酚基与酚试剂的反应(还原反应)福林试剂反应在碱性条件下,蛋白质与硫酸铜发生反应生成蛋白质-铜络合物,将福林试剂还原,产生磷钼蓝和磷钨蓝混合物灵敏度提高100倍蛋白质的理化性质蛋白质的颜色反应游离氨基与茚三酮反应生成蓝紫色化合物茚三酮反应氨基酸也具有此性质2NOOOOOOOHOH+R-CH-COOHNH2+RCHOC

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