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文档简介
白细胞类型及计数徐文鑫省级精品在线开放课程《临床检验技术》第一节
白细胞检查血液不断的流动于循环系统、与全身各个组织器官密切联系,参与各项生理活动,维持机体正常的新陈代谢。在病理情况下,除造血系统外,全身其它系统和组织发生病变也可直接或间接引起血液成分的变化。第一节
白细胞检查血细胞分析仪报告单(五分群)第一节
白细胞检查全自动三分类URIT-3300第一节
白细胞检查全自动五分类迈瑞BC5380第一节
白细胞检查外周血常见白细胞的种类与功能(一)外周血常见白细胞的种类1.白细胞的形态:无色有核,球形,直径7μm~25μm。2.白细胞的种类(形态分类):三类五种白细胞粒细胞中性粒细胞(N)嗜酸粒细胞(E)嗜碱粒细胞(B)淋巴细胞(L)单核细胞(M)一、白细胞各类白细胞的发育过程白细胞的功能中性粒细胞:具有较强的运动能力和吞噬活性。胞内酶有复杂的杀菌系统。嗜酸粒细胞:可作变形运动,吞噬抗原抗体复合物,灭活组织胺减轻过敏反应及对蠕虫的免疫反应。嗜碱粒细胞:与IgE具有较强的结合力,脱粒释放组胺导致速发性变态反应。淋巴细胞:参与体液免疫和细胞免疫。单核细胞:有强大的吞噬功能,传递抗原信息。白细胞的寿命粒细胞:10~15天淋巴细胞:数天~20余年单核细胞:数月白细胞的归宿衰老的粒细胞被单核-吞噬细胞系统清除,也有一部分从口腔、气管、消化道和泌尿生殖道排出。B淋巴细胞经抗原刺激后分化为浆细胞,产生特异性抗体,参与体液免疫。T淋巴细胞经抗原致敏后,可产生多种免疫活性物质,参与细胞免疫。粒-单核系祖细胞在骨髓经分化成原始单核细胞后发育为成熟单核细胞,释放入血液。白细胞的归宿中性杆状核粒细胞中性分叶核粒细胞胞体—圆形细胞核—深紫红色染色质—致密成块,粗糙不均细胞质—丰富,粉红色,含有较多细小均匀的淡粉红色中性颗粒。区别:细胞核最窄处小于最宽处1/3即为分叶胞体—圆形细胞核—两叶、偶见3-4叶染色质—粗糙染紫红色细胞质—充満粗大、整齐、均匀、紧密排列且折光性强的桔红色嗜酸性颗粒注意:嗜酸性粒细胞易破碎,颗粒可分散于细胞周围嗜酸性粒细胞白细胞的归宿白细胞的归宿胞体—圆形细胞核—分叶不明显,形态不规则胞质—含有少量粗大但大小不一、分布不均的紫黑色嗜碱性颗粒注意:颗粒常盖于核上,致使
核的轮廓与结构不清嗜碱性粒细胞白细胞的归宿淋巴细胞胞体—圆开或椭圆形细胞核—圆形或椭圆形,偶见凹陷染色质—粗糙致密,排列均匀无空隙,隐约成块,染深紫红色细胞质—很少,仅在核一侧见到少量淡蓝色胞质,有时似裸核白细胞的归宿单核细胞胞体—圆形或不规则形细胞核—肾形、马蹄形或不规则分叶,淡紫红色,常折叠扭曲细胞质—丰富,染淡灰蓝色或淡粉红色,含有大量细小、弥散分布的灰尘样淡紫红色嗜天青颗粒染色质—细致,疏松如网状五种白细胞鉴别要点五种白细胞鉴别要点五种白细胞鉴别要点白细胞百分率(%)绝对值(×109/L)中性杆状核粒细胞1—50.04—0.5中性分叶核粒细胞50—702—7嗜酸性粒细胞0.5—50.02—0.5嗜碱性粒细胞0—10—0.1淋巴细胞20—400.8—4单核细胞3—80.12—0.8白细胞总数(4-10×109/L)白细胞计数显微镜计数【原理】用白细胞计数稀释液,将血液稀释一定倍数并破坏红细胞后,混匀充入计数池中,在显微镜下计数一定容积内的白细胞数,经换算即可求得每升血液中白细胞的总数。【器材】1.显微镜(目镜10×;物镜10×)2.微量吸管(Hb吸管)传统的Hb吸管玻璃上有10µl和20µl(误差<±1%)两个刻度。使用前应经严格校正。橡胶乳头提供负压3.计数池各池刻划有9mm2面积的刻度,分为9个大方格,每格长、宽各1mm,面积1mm2,体积为0.1mm3,容量0.1μl。白细胞计数计数白细胞的四个大方格白细胞计数
四个角的大方格都用单线划分为16个中方格,为计数密度小的(白)细胞用。容量:0.1μl/大方格计数红细胞的五个中方格
中央的一个大方格,用双线划分为25个中方格,每个中方格又被单线划分为16个小方格,共有400个小方格,供计数密度大的(红)细胞用。容量:0.1μl/大方格
0.004μl/中方格白细胞计数4.盖玻片
特制的计数池专用盖片,要求玻璃表面平整光滑,有一定重量,不被细胞悬液所抬浮,厚度应为0.4mm~0.7mm。盖玻片两面的平整度是:0.002mm以内,大小:24mm×20mm×0.6mm。白细胞计数白细胞计数显微镜计数法【试剂】
白细胞稀释液
冰乙酸2.0ml
10g/L亚甲蓝(或结晶紫)数滴
蒸馏水加至100ml稀释液中各组分的作用蒸馏水——低渗溶解红细胞,乙酸——可加速红细胞溶解,同时乙酸能固定核蛋白,使白细胞核显现,便于辨认。染料——使核略着色,且易与红细胞稀释液区别。白细胞计数【操作】1.取小试管1支,加入白细胞稀释液0.38ml。
2.用微量吸管准确吸取外周血20ul。
3.擦去管尖外部余血,立即将吸管插入盛有稀释液的试管底部,轻轻将血放出,并吸取上清液漱洗吸管2次~3次,注意每次不能冲浑稀释液,最后用手振摇试管混匀。白细胞计数白细胞计数4.充液将计数板和盖玻片擦净,盖片盖在计数池上,用毛细滴管或玻璃棒取已混匀的细胞悬液1滴,充入计数池与盖玻片间的缝隙中,静置2min~3min,待白细胞下沉。白细胞计数镜下白细胞形态
似成熟蚕卵,中央核深染,胞质色淡。
白细胞计数5.计数方法
用低倍镜依次计数四角的四个大格内的白细胞数。对于压线的白细胞,应采取数上不数下;数左不数右(左、上计入,右、下弃去)的原则,保证计数域的一致性,使计数准确。白细胞计数【计算】四个大格白细胞数
白细胞数/L=————————×10×20×1064式中:÷4得每个大格(即0.1µl)内白细胞平均数
×10因一大格容积为0.1µl,换算为1µl
×20血液稀释倍数。
×106将1µl换算为1L。白细胞计数稀释倍数的确认稀释倍数=(溶质+溶剂)/溶质注意:体积单位需一致后方能运算。白细胞计数白细胞计数计数误差1.技术误差:由于操作不正确和仪器不精确造成的误差。
2.固有误差:因每次白细胞分布不可能完全相同所造成的偏差属固有误差,也称计数域误差。白细胞计数常见技术误差
血液凝固稀释倍数不准充液不当识别错误器材不符合要求白细胞计数固有误差(计数域误差)
根据统计学研究,白细胞在计数池内的随机分布符合泊森分布。从计算公式中可以看出计数范围越大,计数的细胞越多,计数域误差越小。白细胞计数注意事项
1、稀释液要过滤使用,试管、计数板等均须清洁。
2、计数池内细胞分布要均匀。总数在参考范围内,每个大方格间白细胞数不得相差8个以上,两次重
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