2025年浙教版选修三生物上册阶段测试试卷

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A.多次进行步骤①的目的是获得更多分泌抗CD47抗体的浆细胞B.步骤②后可筛选出既能产生抗CD47抗体又能大量增殖的细胞C.实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需放入CO2培养箱D.对照组中吞噬细胞的吞噬指数显著高于实验组可验证上述推测7、下列有关哺乳动物精子、卵子的发生及受精作用的叙述，正确的是（）A.精子与卵子相遇后，会发生顶体反应，防止多精入卵B.卵子形成的过程需在卵巢和输卵管内完成C.采集到的精子和卵子相遇即可发生受精作用D.精子触及卵细胞膜的瞬间会产生卵细胞膜反应8、关于“克隆羊”与“试管羊”的叙述，错误的是（）A.克隆羊是无性生殖的产物，试管羊是有性生殖的产物B.培育克隆羊需要进行核移植，培育试管羊需要进行体外受精C.培育克隆羊是细胞水平的技术，培育试管羊是DNA分子水平的技术D.克隆羊的染色体来自提供细胞核的亲本，试管羊的染色体来自双亲评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)9、如图是某同学绘制的我国北方农区的一种“四位一体”的生态家园示意图；其中沼气池；猪舍、厕所和日光温室等保持了合理的结构和比例。下列说法错误的是（）

A.在农村发展沼气有利于保护林草植被B.该工程充分体现了自生原理C.保持生物比例合理遵循了整体原理D.能量可随着沼气的使用而流入生物体内10、下列技术或过程与植物细胞工程密切相关的是（）A.培育玉米单倍体植株B.培育无病毒的康乃馨花卉C.月季营养器官的嫁接与扦插D.培养红豆杉细胞生产紫杉醇11、H—Y抗原存在于雄性个体细胞的表面，决定性腺向雄性方向发育。可在牛早期胚胎培养液中添加H—Y单克隆抗体，筛选胚胎进行移植。下列相关叙述正确的是（）A.培养液中添加H—Y单克隆抗体能促进牛早期胚胎发育成雄性B.该单克隆抗体制备过程中通常将分离出的已免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合C.可选取囊胚期任何部位细胞进行性别鉴定D.用H—Y抗原免疫母牛也可以获得相应抗体12、小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞、制备流程如图所示。下列叙述错误的是（）

A.为获得更多的囊胚，采用激素注射促进雄鼠产生更多的精子B.细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以全能性高低不同C.用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞D.胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养13、下图为科研人员利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合鼠的简要过程；相关叙述正确的是（）

A.嵌合鼠的培育依据的原理是基因重组和细胞全能性B.过程①中需利用相关技术去除早期胚胎外的透明带C.过程②中可利用聚乙二醇诱导卵裂球细胞发生融合D.过程③操作前需对多只代孕母鼠进行同期发情处理14、我国科学家培育“荧光猪”的技术流程如下图所示。图中字母表示有关技术或原理；匹配正确的是。

A.农杆菌转化法B.体外受精C.有丝分裂D.胚胎移植15、下图是我国华北地区某生态农业模式图。相关叙述正确的是（）

A.该生态农业的构建主要遵循了物质循环再生、协调与平衡原理B.该生态系统能够保持相对稳定，不需要外界能量的输入C.该生态农业延长了食物链，提高了营养级之间的能量传递效率D.该生态农业能同时实现降低环境污染、增加农民收入、促进产业发展16、生物圈的稳态是人类社会和经济可持续发展的基础。为了维持生物圈的稳态，下列思路和做法可取的是（）A.落实科学发展观，大力发展生态农业，建设社会主义新农村B.全民开展节能减排，实现能源的清洁生产，努力开发新能源C.建立“原料—产品—废料”的生产模式，实现物质的循环利用D.环境效益比经济效益更为重要，必须把保护环境放在优先地位17、粮桑渔生态农业系统是江浙平原水网地区典型的高效农业系统；下图表示这一农业生态系统的基本模式。试根据图示判断下列说法正确的是（）

A.沼气池的建立既充分发挥资源的生产潜力，又防止了环境污染B.通过巧接食物链使原本流向分解者的能量更多地流向了人，提高了能量的传递效率C.这一生态工程模式主要适用于江浙平原而不适用于我国西北地区，这是因为建立生态工程时还需要遵循协调与平衡原理D.上述生态农业系统通过改善和优化系统的结构，达到改善系统功能的效果评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)18、生物学家利用基因工程技术通过生物反应器生产人的血清蛋白。请根据相关知识回答下列问题：

（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”是_______________________________

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是________

（3）基因工程中最常用的运载体是______

（4）人的基因在牛体内能表达，说明人和牛______19、根据课本知识填空：

（1）神经元的轴突末梢经过多次分支；最后每个小枝末端膨大，呈杯状或球状，叫做________。

（2）抗体可以与病原体结合；从而抑制病原体的繁殖或___________________________。

（3）要检测目的基因是否转录出了mRNA；可以用____________________________做探针。

（4）所谓人工种子就是以植物组织培养得到的________________________（写出2个即可）等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子。

（5）胰岛素能促进组织细胞加速_______________葡萄糖。20、今年年初；爆发了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠状病毒通过其表面的S-蛋白与人细胞膜上的ACE2相互识别，感染人的呼吸道上皮细胞。请分析回答问题：

（1）新型冠状病毒表面的S-蛋白作为_________剌激淋巴细胞，使机体产生_________性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是_________。

（2）感染病毒后，免疫系统对肺细胞强烈攻击引发肺炎，此时可通过适度使用_________对病人进行治疗；使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）科学家采集了感染新型冠状病毒并已康复的甲、乙两人的血液，检测相关抗体的水平，结果如图1。据此分析，应选取_________的B淋巴细胞用以制备单克隆抗体（单抗）。

（4）将制备的多种单抗分别与病毒混合，然后检测病毒对宿主细胞的感染率，结果如图2。据此分析，对病毒抑制效果最好的单抗是__________号。

（5）患者康复后一段时间，若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的__________细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。21、下图表示哺乳动物精子和卵细胞发生和成熟的示意图。请据图回答下列问题：

（1）③过程中精子头部的顶体是由__________发育来的；④过程在__________内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带。为了阻止多精入卵，会发生__________反应和__________反应。

（3）精子的发生开始的时期是__________；雌性动物卵泡的形成的时期是__________。

（4）初级卵母细胞进行Ⅰ过程是在__________时期完成的，Ⅱ过程是在__________过程中完成的。22、请写出基因工程的概念：_________________。请写出胚胎移植的概念：_____________________。请分别写出植物组织培养和动物细胞培养的原理_________。评卷人得分四、判断题(共5题，共10分)23、一般情况下一个卵细胞只能由一个精子发生融合形成受精卵()A.正确B.错误24、精子入卵后形成雄原核；同时卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核()A.正确B.错误25、受精包括受精前的准备阶段和受精阶段，在自然状态下，哺乳动物的受精在子宫内完成。（选择性必修3P56）()A.正确B.错误26、下图表示哺乳动物发育过程的几个阶段；请判断下列题的叙述是否正确？

（_____）（1）从A到C的过程中有机物的含量减少。

（_____）（2）A；B时期胚胎中的细胞都是全能细胞。

（_____）（3）胚胎移植必须使用处于B或C时期的胚胎。

（_____）（4）图示过程细胞通过有丝分裂增殖，遗传物质可能会发生改变。A.正确B.错误27、在生态工程建设中，只能遵循“先污染、破坏、再治理”的发展思路______A.正确B.错误评卷人得分五、非选择题(共4题，共16分)28、2016年10月19日美国新希望生殖医学中心正式宣布；世界首个核移植“三父母”男婴已于2016年4月诞生。为中东一位线粒体携带有亚急性坏死脑病基因的母亲带来了希望。培养过程如下图，据图回答：

（1）获得重组卵母细胞A也会用到体细胞核移植技术；完成①过程需要用微型吸管吸出______________，完成④过程的B细胞需要选择_______________________（时期）的卵母细胞。

（2）卵母细胞的获取过程中；需要对女性进行超数排卵处理，超数排卵的方法是给女性注射____激素。

（3）为了提高已有胚胎的利用率；可采用________________技术。若选用囊胚期的胚胎，操作过程中要特别注意的问题是_______________________________________。

（4）根据___________(填标号)判断，此种繁殖方式是有性生殖。细胞A的培养过程③所需气体主要有O2和CO2，CO2的主要作用是___________________________。

（5）设计试管婴儿技术与解决不孕问题而进行的试管婴儿技术的主要区别是前者需要在植入前对胚胎进行______________________________。29、已知细胞合成DNA有D和S两条途径；其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在培养皿中混合，加促融剂促进细胞融合，获得杂种细胞，并生产单克隆抗体。请回答下列有关问题：

（1）生产单克隆抗体时，一般不直接利用B淋巴细胞，主要原因是____________________________________________________________________。

（2）①过程中，常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是__________。

（3）②过程为________培养，培养液中还需通入气体物质，其中通入CO2的目的是__________________________________________________________________。

（4）④表示杂交瘤细胞的扩大培养，其既可在体外培养，也可注射到小鼠________内培养，体内培养与体外培养相比，其优点是____________________。

（5）为了从培养液中分离出杂交瘤细胞，需要③过程向培养液中加入_____________，理由是杂交瘤细胞可利用__________________途径合成DNA，从而才能在该培养液中增殖。30、下图表示构建转人抗体基因小鼠生产人源性单克隆抗体的流程。请据图回答问题：

(1)图示过程涉及的生物技术有________；________、________。

(2)构建的基因表达载体除含有人抗体基因；标记基因外；还应具有________、________。

(3)向转基因小鼠注射特定的抗原后，从小鼠的________中提取B淋巴细胞；细胞X是________，体外培养细胞X所用的培养液必须添加________等天然成分，培养过程中会产生接触抑制吗？________。31、[生物一选修3:现代生物科技专题]

科研人员把猪卵母细胞进行人为的孤雌激活处理；使其发育成胚胎，将胚胎移植到代孕母猪体内，获得世界上第一批成活的孤雌生殖克隆猪。这种克隆猪不同于核移植获得的克隆猪，现将两种技术进行比较。

（1）图中过程①②③④是获得孤雌生殖克隆猪的技术流程；那么获得核移植克降猪的技术流程是（填序号）____________________________________。

（2）孤雌生殖克降猪仍然是二倍体生物；但由于缺失____________方亲本基因，导致其生长发育中出现多种问题，给研究者提供了很好的材料。

（3）卵母细胞能够发育成早期胚胎；得到克隆猪说明卵母细胞具有________________________。

（4）体细胞核移植技术中也会用到卵母细胞；需要选择____________期的卵母细胞，并用微型吸管吸出____________。

（5）早期胚胎移植时；必需移植到同种，____________的其他雌性动物子宫中，才可能移植成功。

（6）可以从两种不同的克隆猪中提取mRNA进行研究，也可通过____________方法得到多种cDNA，并通过____________________技术扩增产物。评卷人得分六、综合题(共4题，共20分)32、Ⅱ型干扰素是效应T细胞分泌的一种淋巴因子；可用于治疗病毒感染和癌症。科学家将Ⅱ型干扰素基因与大肠杆菌的DNA分子进行了重组，成功地在大肠杆菌中得以表达。

（1）若用PCR技术扩增Ⅱ型干扰素基因，其前提条件是有一段______，以便根据这一序列合成引物。PCR过程需要经过多次循环，每一个循环包括：加热变形→冷却复性→加热延伸，其中冷却复性的目的是______，加热延伸过程中发生最主要的过程是______。

（2）已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—；限制酶Ⅱ的识别序列和切点—↓GATC—，Ⅱ型干扰素基因结构如图中所示。

①在构建基因表达载体的过程中，用限制酶______切割质粒，用限制酶______切割目的基因。

②将得到的大肠杆菌涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，得到如图a所示的结果（圆点表示菌落），该结果说明能够生长的大肠杆菌中已导入了______。将灭菌绒布按到培养基a上，使绒布表面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图b所示的结果（圆圈表示与图a培养基上对照无菌落的位置）。与图b圆圈相对应的图a中的菌落表现型是______，这些大肠杆菌中导入了______。33、湿地是地球上生物生产力最大的生态系统之一。它是天然的蓄水池；并能过滤和分解水中的污染物进而改善水质，被誉为“地球之肾”。湿地类型众多，如红树林；河流湖泊和稻田等。

（1）湿地由于其特殊的水文及地理特征，具有________________等生态功能。

（2）在红树林等湿地生态系统中，碳元素主要通过________被固定在有机物中，并沿着________进行传递。

（3）与生物多样性丰富的湖泊相比，稻田的________稳定性较低。

（4）调查表明，我国相当一部分湖泊已不同程度富营养化，原因是含氮、磷等元素丰富的污染物的排放量超过了湖泊________的限度，使其自动调节能力下降。造成富营养化水体中鱼类大量死亡的原因有________等。

（5）湿地面积的缩小会导致局部气候变劣、________________________等。

（6）湿地生态恢复工程就是采用________和________措施相结合的方法，如废水处理、________污染控制、土地处理工程以及________等，使受干扰的湿地得以恢复。34、如图为某综合发展生态工程示意图。请据图回答：

（1）生态工程所遵循的基本原理有整体性原理、协调与平衡原理、物质循环再生原理、物种多样性、系统学和工程学原理。该工程主要运用了___________、___________和整体性原理。

（2）沼气池中产甲烷杆菌在生态系统中的地位是___________。

（3）一般来说，生态工程的主要任务是对___________进行修复；对造成环境污染和破坏的生产方式进行改善，并提高生态系统的生产力。

（4）在进行林业工程建设时，一方面要号召农民种树，另一方面要考虑当地农民的经济发展等问题。以上做法依据的生态工程原理是___________。单一的人工林比天然混合林的稳定性低，容易遭受害虫危害，这体现了生态工程的的______________原理。

（5）生态工程建设的目的就是遵循自然界物质循环的规律，充分发挥资源的生产潜力，防止环境污染，达到经济效益和______的同步发展。与传统工程相比较，生态工程是一类________工程体系。35、研制有效的单克隆抗体是各国抗击新冠病毒的有效手段。与传统的鼠杂交瘤单克隆抗体技术相比；单个B细胞抗体制备技术是一种体外克隆和表达单个抗原特异性B细胞抗体基因技术，具有基因多样性好；效率高、需要的细胞量少等优势，制作过程如下图示，回答有关问题：

（1）从免疫小鼠体内获取单个B淋巴细胞__________（“是”或“否”）利用胰蛋白酶处理，这是因为____________________。为获取较多的B细胞抗体基因，需要用到__________技术。

（2）构建表达载体的目的是______________________________，表达载体必须有标记基因，是因为标记基因具有________________________________________作用。除了标记基因、目的基因外，表达载体还必须包含____________________。

（3）图示中需要筛选的的过程有___________________抗体亲和力检测的方法是__________。参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、D【分析】【分析】

体细胞核移植过程：

【详解】

A；体细胞在进行体外培养时；会发生贴壁生长和接触抑制的现象，A正确；

B；MⅡ中期的卵母细胞细胞质中含有能促进细胞核全能性表达的物质；B正确；

C；通过电刺激可以使两细胞融合；供体核进入卵母细胞，C正确；

D；胚胎移植时；应先将重组细胞培养成早期胚胎，把早期胚胎移入代孕母牛的子宫，D错误。

故选D。2、D【分析】试管婴儿是采用体外受精、动物细胞培养、胚胎移植等技术形成的，属于有性生殖，会发生基因重组,A、B错误；克隆羊是采用体细胞核移植、胚胎移植等技术后形成的，体现了体细胞细胞核的全能性，C错误；这三者都能实现优良品种的快速大量繁殖，D正确。3、B【分析】试题分析：受精时防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵黄膜的封闭作用；B错误；1.体外受精时,精子与卵子在体外结合前,需要对精子进行获能处理,并将卵母细胞培养成熟至减数第二次分裂中期，A正确；囊胚是开始分化的阶段，分化为滋养层细胞——发育成胎膜和胎盘等结构和内细胞团细胞——发育成胎儿，因而要将“内细胞团”均等分割，以免影响胚胎的发育。而桑椹期的胚胎细胞没有分化，可以直接切割。阶段还可进行胚胎分割，C正确；胚胎移植是胚胎工程中最后一道程序,移植的胚胎必须在原肠胚之前,不能直接移植受精卵，D正确。

考点：本题考查胚胎工程的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点。4、B【分析】【分析】

基因工程按照人们的愿望；进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，由于生物间共用一套遗传密码，基因工程的操作可以在物种间进行，打破了常规育种难以突破的物种之间的界限；植物体细胞杂交技术实现了种间杂交的可能，克服了远缘杂交不亲和的障碍；利用动物细胞融合技术培育的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体，具备特异性强；灵敏度高并可大量制备的特性。

【详解】

A；基因工程是在DNA（基因）分子水平上进行设计和施工；由于生物间共用一套遗传密码，基因工程的操作可以在物种间进行，打破了常规育种难以突破的物种之间的界限，A正确；

B；植物体细胞杂交技术实现了种间杂交的可能；克服了远缘杂交不亲和的障碍，由于基因的选择性表达，并不能实现远缘物种的所有优良性状都集中于杂种植株上，B错误；

C；利用动物细胞融合技术培育的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体；具备特异性强、灵敏度高并可大量制备的特性，C正确；

D；由于胚胎干细胞具有发育的全能性；所以将人的胚胎干细胞进行核移植有可能诱导形成可用于移植的组织器官，D正确。

故选B。5、D【分析】【分析】

单倍体是具有体细胞染色体数为本物种配子染色体数的生物个体。凡是由配子发育而来的个体；均称为单倍体。体细胞中可以含有1个或几个染色体组，花药离体培养得到的是单倍体，雄蜂也是单倍体，仅有一个染色体组的生物是单倍体。

【详解】

A；通常选择完全未开放的花蕾；将花蕾置于70%的酒精浸泡约30s进行消毒，A错误；

B；脱分化过程中不需要光照；B错误；

C；单倍体植株若含有偶数个染色体组；则可育，如四倍体的植株形成的单倍体是可育的，C错误;

D；秋水仙素可以抑制纺锤体的形成；使染色体数目加倍，故用一定浓度的秋水仙素溶液处理单倍体幼苗能获得纯合的二倍体月季，D正确。

故选D。6、D【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

A；多次向免疫动物注射抗原（CD47）的目的是使刺激小鼠特异性免疫；使动物小鼠产生大量的效应B淋巴细胞即浆细胞，A正确；

B；经步骤②将脾脏中的B细胞和骨髓瘤细胞融合；经选择后可以获得既能产生抗CD47抗体又能大量增殖的细胞，B正确；

C；动物细胞培养应放在二氧化碳培养箱；C正确；

D；根据单一变量原则可知应设置不加单克隆抗体的巨噬细胞+肿瘤细胞的共培养体系为对照；抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，没有抗体抑制，CD47对巨噬细胞有抑制作用，对照组中吞噬细胞的吞噬指数显著低于实验组可验证上述推测，D错误。

故选D。7、B【分析】【分析】

受精作用过程：a、顶体反应：精子释放顶体酶溶解卵丘细胞之间的物质，穿越放射冠；b；透明带反应：顶体酶可将透明带溶出孔道；精子穿入，在精子触及卵黄膜的瞬间阻止后来精子进入透明带的生理反应[它是防止多精子入卵受精的第一道屏障]；c、卵黄膜的封闭作用：精子外膜和卵黄膜融合，精子入卵后，卵黄膜会拒绝其他精子再进入卵内的过程[它是防止多精子入卵受精的第二道屏障]；d、精子尾部脱落，原有核膜破裂形成雄原核，同时卵子完成减二分裂，形成雌原核；e、雌、雄原核融合形成合子。

【详解】

A；精子与卵子相遇后；会发生顶体反应，帮助精子穿越放射冠和透明带，防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵黄膜封闭作用，A错误；

B；卵子形成的过程需在卵巢和输卵管内完成；B正确；

C；采集到的精子需获能后才能与成熟的卵子相遇发生受精作用；C错误；

D；当精子触及卵细胞膜的瞬间；会产生透明带反应，以防止多精入卵，D错误。

故选B。8、C【分析】【分析】

克隆羊是经过动物核移植技术得到的；试管羊是经过体外受精，再将胚胎移植后发育得到的。

【详解】

A；克隆羊没有精子核卵细胞结合过程；直接通过核移植技术得到，是无性生殖的产物，试管羊通过体外精子和卵细胞结合形成受精卵发育而来，是有性生殖的产物，A正确；

B；培育克隆羊需要进行核移植；移入去核的卵母细胞发育而来，培育试管羊需要进行体外受精，进行胚胎移植发育而来，B正确；

C；培育克隆羊和培育试管羊都是在细胞水平上操作；都属于细胞水平的技术，C错误；

D；克隆羊经过完整的细胞核移植；染色体来自提供细胞核的亲本，试管羊经过体外受精，染色体来自双亲，D正确。

故选C。二、多选题(共9题，共18分)9、B:C:D【分析】【分析】

利用沼气处理秸秆和粪便；产生沼气和沼液沼渣，然后进行循环利用，这是一种很好的沼气生态产业循环模式。该工程实现能量和物质的多级利用，充分体现了物质循环再生的原理。

【详解】

A；在农村发展沼气可以解决生活燃料问题；有利于保护林草植被，A正确；

B；该工程实现了能量和物质的多级利用；充分体现了循环原理，B错误；

C；保持生物比例合理遵循了协调原理；C错误；

D；沼气可作为生活能源被人类利用；但这部分能量不能流入生物体内，D错误。

故选BCD。10、A:B:D【分析】【分析】

植物细胞工程包括植物组织培养和植物体细胞杂交；原理分别是植物细胞具有全能性，植物细胞具有全能性和植物细胞融合。

【详解】

A；培育玉米单倍体植株涉及花药离体培养；实质是植物组织培养，属于植物细胞工程，A正确；

B；培育无病毒的康乃馨花卉方法；选取植物茎尖分生区进行植物组织培养可以获得获得脱毒苗，属于植物细胞工程，B正确；

C；月季营养器官的嫁接与扦插属于无性繁殖中的营养繁殖；不属于植物细胞工程，C错误；

D；外植体脱分化形成愈伤组织；扩大培养愈伤组织进而生产细胞产物紫杉醇，D正确。

故选ABD。11、B:D【分析】【分析】

题意分析；H-Y抗原存在于雄性个体细胞的表面，决定性腺向雄性方向发育，正常雌性体内不存在H-Y抗原，故可以利用抗体和抗原特异性结合的原理，进行胚胎移植时，用H-Y单克隆抗体来筛选胚胎。

【详解】

A；培养液中添加H-Y单克隆抗体；可以和H-Y抗原特异性结合，起到筛选作用，但不能促进牛早期胚胎发育成雄性，A错误；

B；浆细胞能够分泌抗体；但是不具有增殖能力，而骨髓瘤细胞具有无线增殖的能力，因此利用动物细胞融合技术将已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体，利用该细胞制备单克隆抗体，B正确；

C；囊胚期性别鉴定后获得的雌性胚胎可进行胚胎移植；进行性别鉴定时，可挑选囊胚期的滋养层细胞进行性别鉴定，C错误；

D；抗原是能够引起机体产生特异性免疫反应的物质；用H-Y抗原免疫母牛，使其体内发生体液免疫反应，产生相应的浆细胞，进而获得相应抗体，D正确。

故选BD。12、A:B:C【分析】【分析】

1；胚胎干细胞简称ES或EK细胞；来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）。

2；ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中；能够维持不分化的状态．在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段。

【详解】

A；为了获得更多的囊胚；可以采用激素促进成熟雌性个体超数排卵，然后将卵细胞从母体内取出，在试管内与人工采集的精子进行体外受精，培育成胚胎，A错误；

B、细胞a和细胞b是由同一个受精卵经过有丝分裂形成的；故核基因相同，B错误；

C；运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞；首先必须用胰蛋白酶处理内细胞团，分解细胞间的胶原蛋白等，使之分散成单个细胞，C错误；

D、动物细胞培养时需要在5%CO2的培养箱中进行培养；以维持培养液的pH，D正确。

故选ABC。13、B:D【分析】【分析】

分析题图：图中为科研人员利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合鼠的简要过程；其中①是获取早期胚胎的过程，②是将白鼠和黑鼠的早期胚胎嵌合的过程，③是胚胎移植过程。

【详解】

A；嵌合鼠的培育依据的原理是细胞全能性；并没有进行基因重组，A错误；

B；过程①中需利用相关技术去除早期胚胎外的透明带；B正确；

C；过程②不需要诱导卵裂球细胞发生融合；C错误；

D；过程③操作前需对多只代孕母鼠进行同期发情处理；以保证受体与供体的生殖器官的生理变化是相同的，D正确。

故选BD。

【点睛】14、C:D【分析】试题分析：A常用显微注射法；B表示动物细胞核移植技术，C表示早期胚胎培养，细胞分裂方式是有丝分裂，D表示胚胎移植。故选CD。

考点：本题考查基因工程和胚胎工程，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构。15、A:D【分析】【分析】

生态农业是一个农业生态经济复合系统；将农业生态系统同农业经济系统综合统一起来，以取得最大的生态经济整体效益。它也是农；林、牧、副、渔各业综合起来的大农业，又是农业生产、加工、销售综合起来，适应市场经济发展的现代农业。生态工程的基本原理有物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理和系统学和工程学原理。建立该人工生态系统的目的是实现对能量的多级利用，提高能量的利用率，减少环境污染。

【详解】

A；生态工程所遵循的基本原理有物质循环再生、协调与平衡、整体性、系统学和工程学原理和物种多样性等原理；鸡粪秸秆用于沼气池，最后沼渣用于农作物的生产主要符合物质循环再生原理；图示生态工程的设计利用了还协调与平衡原理，A正确；

B；由于生态系统的能量流动是单向流动、逐级递减的；因此，任何生态系统均需要不断得到来自系统外的能量补充，B错误；

C；该生态农业延长了食物链；提高提高能量利用率，不能提高营养级之间的能量传递效率，C错误；

D；该生态农业能同时实现降低环境污染、增加农民收入、促进产业发展；从而实现了自然、经济和社会的协调发展，D正确。

故选AD。16、A:B:D【分析】【分析】

生态工程建设的目标是使人工控制的生态系统具有强大的自然再生产和社会再生产的能力。在生态效益方面要实现生态再生；使自然再生产过程中的资源更新速度大于或等于利用速度，在经济效益方面要实现经济再生，使社会经济再生产过程中的生产总收入大于或等于资产的总支出，保证系统扩大再生产的经济实力不断增强，在社会效益方面要充分满足社会的要求，使产品供应的数量和质量大于或等于社会的基本要求，通过生态工程的建设与生态工程技术的发展使得三大效益能协调增长，实现高效益持续稳定的发展。

【详解】

A、落实科学发展观，大力发展生态农业，实现物质的循环再生，能量的多级利用，建设社会主义新农村，A正确；

B、全民开展节能减排，实现能源的清洁生产，努力开发新能源，减少二氧化碳的排放，减弱温室效应，B正确；

C、建立原料一产品一原料”的生产模式，建立无废料生产体系，实现物质的循环利用，C错误；

D、要维持生物圈的稳态，达到可持续发展，在发展经济、制定政策上，首先要考虑环境效益，把保护环境放在优先地位上，D正确。

故选ABD。17、A:C:D【分析】【分析】

生态农业中能够调整能量流动的方向；使能量更多的流向对人类有益的方面，提高能量的利用率，但是不能改变营养级之间的能量传递效率。

【详解】

A；沼气池的建立使物质得以充分利用；实现了能量的多级利用，同时减少了环境污染，A正确；

B；该生态农业调整食物链；实现了物质的循环利用，提高了能量利用率，但不能改变能量传递效率，B错误；

C；这一生态工程模式主要适用于江浙平原而不适用于我国西北地区；这是因为在建立生态工程时还需要遵循“整体、协调、循环、再生”的原理，我国西北地区气候比较干旱，并且水资源不足，不适宜这种生态工程模式，C正确；

D；这种生态农业系统调整了能量流动的方向；改善和优化系统的结构，使能量更多的流向对人类有益的方面，进而达到改善系统功能的效果，D正确。

故选ACD。

【点睛】三、填空题(共5题，共10分)18、略

【分析】（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”即切割DNA的是限制核酸内切酶简称限制酶；

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是DNA连接酶；

（3）基因工程中最常用的运载体是质粒；

（4）人的基因在牛体内能表达；说明人和牛共用一套遗传密码。

【考点定位】基因工程的基本工具【解析】限制酶DNA连接酶质粒共用一套遗传密码19、略

【分析】【分析】

1；神经元由细胞体和突起两部分组成；突起又分为树突和轴突，树突短而多，轴突长而少。神经元的轴突末梢经过多次分支，最后每个小枝末端膨大，呈杯状或球状，叫做突触小体。

2；目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

3；人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子，在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗。

【详解】

（1）神经元由细胞体和突起两部分组成；突起又分为树突和轴突，树突短而多，轴突长而少；轴突末端的多次分支后，每个小枝末端膨大的部分称为突触小体。

（2）抗体可以与病原体结合；从而抑制病原体的繁殖或对人体细胞的黏附。

（3）检测目的基因是否转录出mRNA可采用分子杂交技术。

（4）人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体；不定芽、顶芽、腋芽为材料；经过人工包膜包装得到的种子，可以在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗．植物体细胞杂交技术的优点就是克服远缘杂交不亲和的障碍，或者是打破了生殖隔离。

（5）胰岛素能促进组织细胞加速摄取；利用和储存葡萄糖；从而使血糖水平降低。

【点睛】

本题考查教材基础知识，旨在考查考生的理解、记忆能力，要求考生熟记关键语句，并能运用专业术语准确作答。【解析】突触小体对人体细胞的黏附放射性同位素）标记的目的基因胚状体、不定芽、腋芽、顶芽摄取、利用和储存20、略

【分析】【分析】

分析图1：表示多年前感染EV并已康复的甲；乙两人的血液中抗EV-GP抗体的水平。根据曲线图可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组。

分析图2：表示单抗与病毒混合后病毒对宿主细胞的感染率。根据柱形图可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒对宿主细胞的感染率明显低于其他组别。

【详解】

（1）由题意可知；新型冠状病毒表面的S-蛋白作为抗原刺激淋巴细胞，使机体产生特异性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是蛋白质。

（2）免疫系统对被新冠病毒感染后肺细胞强烈攻击引发肺炎；此时可通过适度使用免疫抑制剂对病人进行治疗，使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）由图1可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组，故应选取甲的B细胞用以制备单克隆抗体。

（4）由图2可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ后，病毒对宿主细胞的感染率较低。因此抑制效果最好的单抗是Ⅲ。

（5）患者康复后一段时间；若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的记忆细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。

【点睛】

本题结合图解，考查病毒、单克隆抗体的制备等，要求考生识记病毒的结构，明确病毒没有细胞结构；识记单克隆抗体的制备过程，掌握其优点及相关应用，能结合图中信息准确答题【解析】①.抗原②.特异③.糖蛋白（或蛋白质）④.免疫抑制剂⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.记忆21、略

【分析】【分析】

1；分析题图：①表示染色体复制；②是减数分裂，③是精细胞变形为精子过程，④是受精作用；

2；哺乳动物精子和卵子发生的不同点：（1）精子的减数两次分裂是连续的；场所唯一（MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸）；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不唯一，（MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中）；（2）精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，MⅡ是在受精过程中完成的。

【详解】

（1）精子变形③过程中精子头部的顶体是由高尔基体发育来的；④过程是受精过程，在输卵管内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带，透明带反应和卵细胞膜反应是阻止多精入卵的两道防线。

（3）雄性动物精子产生的时期是初情期；雌性动物卵泡细胞的形成是在胚胎期性别分化以后完成的，这是精子和卵子在发生上的重要区别。

（4）初级卵母细胞进行减数第一次分裂是在排卵前后时期完成的；减数第二次分裂是在受精作用过程中完成的。

【点睛】

本题考查卵细胞的形成过程和受精作用等相关知识，意在考查学生识记相关细节和解决问题的能力。【解析】高尔基体输卵管透明带反应卵细胞膜反应初情期胚胎期性别分化以后排卵前后受精作用22、略

【分析】【分析】

动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。植物组织培养又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织；器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

【详解】

1；基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术；是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。

2；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。

3；动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖，其原理是细胞增殖。

4；植物组织培养又叫离体培养；指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。

【点睛】

本题考查基因工程概念、胚胎移植、动植物细胞培养等相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技术或DNA重组技术②.又称受精卵移植，是指将雌性动物体内的的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状况相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术③.植物细胞全能性、细胞增殖四、判断题(共5题，共10分)23、A【分析】【详解】

由于存在防止多精入卵的两道屏障，故一个卵细胞一般只能同一个精子结合，形成受精卵，这句话是正确的。24、A【分析】【详解】

受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。精子入卵后形成雄原核，同时被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核，雄、雌原核充分发育后，相向移动，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵，故此说法正确。

故正确。25、B【分析】【详解】

受精包括受精前的准备阶段和受精阶段；在自然状态下，哺乳动物的受精在输卵管内完成。

故错误。26、B【分析】【分析】

据图分析；图中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原肠胚。图B中1是滋养层，2是内细胞团，3是透明带，4是囊胚腔；图C中5是外胚层，6是滋养层，7是原肠腔，8是内胚层。

【详解】

（1）从A到C的过程中细胞均需要消耗能量；故胚胎中有机物的含量均减少，（1）正确。

（2）桑椹胚之前所有细胞都具有发育成完整胚胎的潜能；属全能细胞，故A时期胚胎中的细胞都是全能细胞，囊胚期时细胞出现分化，滋养层细胞不是全能细胞，（2）错误。

（3）胚胎移植必须使用处于桑椹胚或囊胚时期的胚胎；处于A或B时期的胚胎，（3）错误。

（4）图示过程细胞通过有丝分裂增殖；有丝分裂过程中可能发生突变，遗传物质可能会发生改变，（4）正确。

故分别为√、×、×、√。27、B【分析】【详解】

生态系统的恢复力稳定性是有一定限度的，导致了生态工程的局限性，使生态工程并不能解决所有的污染、破坏问题，因此不能走“先污染、破坏，后治理”的老路，故错误。五、非选择题(共4题，共16分)28、略

【分析】【分析】

据图分析；图中过程①表示去除捐献者乙的卵母细胞核获得去核卵母细胞的过程；过程②表示核移植技术，A表示重组卵母细胞；过程③表示重组卵母细胞的培养，B表示处于减数第二次分裂中期的卵母细胞；过程④表示体外受精；过程⑤表示早期胚胎培养；过程⑥表示胚胎移植。

【详解】

（1）图示过程①表示去除捐献者乙的卵母细胞核获得去核卵母细胞的过程；该过程常用微型吸管吸出细胞核和第一极体；过程④表示体外受精，该过程应该选择培养到减数第二次分裂中期的卵母细胞。

（2）捐献者在取卵前通常需要注射促性腺激素；促进其超数排卵。

（3）采用胚胎分割技术；可以提高已有胚胎的利用率；选用囊胚期的胚胎进行胚胎分割时，需要对内细胞团进行均等分割。

（4）过程④表示体外受精；说明此种繁殖方式是有性生殖；动物细胞培养过程中，需要一定的气体环境，主要气体有二氧化碳和氧气，其中二氧化碳的主要作用是维持培养液的pH。

（5）与试管婴儿技术相比；设计试管婴儿技术需要在植入前对胚胎进行遗传学诊断。

【点睛】

解答本题的关键是掌握体外受精的一般步骤，判断图中各个数字代表的过程的名称，并能够根据图示信息确定三亲婴儿中遗传物质的来源。【解析】细胞核和第一极体减数第二次分裂中期（或MⅡ中期）促性腺胚胎分割将内细胞团均等分割④维持培养液的pH遗传学诊断（或基因检测或基因诊断）29、略

【分析】【分析】

1；人淋巴细胞、鼠骨髓瘤细胞发生融合后；培养皿中有3中融合细胞（人淋巴细胞与人淋巴细胞融合细胞、鼠骨髓瘤细胞与鼠骨髓瘤细胞融合细胞、杂交瘤细胞）和人淋巴细胞、鼠骨髓瘤细胞。

2；鼠骨髓瘤细胞、鼠骨髓瘤细胞与鼠骨髓瘤细胞融合细胞中只有D途径；杂交瘤细胞中有D和S两条途径。

【详解】

（1）生产单克隆抗体时；一般不直接利用B淋巴细胞，主要原因是B淋巴细胞属于高度分化的细胞，不能无限增殖。

（2）植物细胞常采用电刺激；聚乙二醇等手段进行融合；而动物细胞采用电刺激、聚乙二醇、仙台病毒等手段进行融合。因此，①过程中常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是聚乙二醇。

（3）②过程为细胞培养，培养液中还需通入气体物质，其中通入氧气维持细胞呼吸，通入CO2维持培养液的pH。

（4）杂交瘤细胞既可在体外培养；也可注射到小鼠腹腔内培养。体内培养与体外培养相比，其优点是无需再提供营养物质以及无菌环境，操作简便。

（5）人淋巴细胞；鼠骨髓瘤细胞在培养皿中混合；加聚乙二醇促进细胞融合，培养液中的细胞有以下5种：人淋巴细胞、鼠骨髓瘤细胞、人淋巴细胞与人淋巴细胞融合细胞、鼠骨髓瘤细胞与鼠骨髓瘤细胞融合细胞以及杂交瘤细胞。其中，人淋巴细胞、人淋巴细胞与人淋巴细胞融合细胞不能无限繁殖，不久会衰老、死亡。向培养液中加入氨基嘌呤，氨基嘌呤可阻断D途径，只有D途径的鼠骨髓瘤细胞、鼠骨髓瘤细胞与鼠骨髓瘤细胞融合细胞无法增殖，而杂交瘤细胞可利用S途径合成DNA，继续繁殖，从而分离出杂交瘤细胞。

【点睛】

掌握动物细胞培养的条件和单克隆抗体的流程，分析人淋巴细胞和鼠骨髓瘤细胞发生融合后培养体系中细胞种类及其特点，结合题意进行解答便可。【解析】B淋巴细胞不能无限增殖聚乙二醇细胞维持培养液的pH腹腔无需再提供营养物质以及无菌环境，操作简便氨基嘌呤淋巴细胞中的S30、略

【分析】（1）单克隆抗体的制备过程中涉及到多种生物技术，如转基因技术、动物细胞融合、动物细胞培养；（2）构建的基因表达载体一般含有四个部分：抗体基因、标记基因、启动子、终止子；（3）在向转基因小鼠体内注射特定的抗原后，一般在小鼠的脾脏提取B淋巴细胞；依据图示可知，X细胞是骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合而成的，应为杂交瘤细胞；体外培养细胞X，属于动物细胞的培养，所用的培养液必须添加血浆或血清等天然成分；由于杂交瘤细胞具备瘤细胞无限增殖的特性，为此，在培养的过程中它不会产生接触抑制。【解析】转基因技术动物细胞培养动物细胞融合启动子终止子脾脏杂交瘤细胞血浆或血清不会31、略

【分析】【试题分析】

本题结合题图考查细胞工程和胚胎工程的相关知识；要求考生识记核移植的相关过程；胚胎移植的基本程序及胚胎移植的生理学基础，能结合图中信息准确答题。分析题图可知，图示为孤雌生殖克隆猪和核移植获得的克隆猪技术流程比较，首先将猪卵母细胞进行人为的孤雌激活处理并发育成早期胚胎，再采用胚胎移植技术移植到受体子宫，最后妊娠形成克隆猪，所以孤雌生殖克隆猪流程可用①②③④表示；动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，所以图中⑤⑥③④可表示核移植获得的克隆猪技术流程。

（1）由图可知；图中①②③④是获得孤雌生殖克隆猪的技术流程，而⑤⑥③④是获得核移植克降猪的技术流程。

（2）孤雌生殖克降猪仍然是二倍体生物；但缺失父方亲本基因。

（3）卵母细胞能够发育成早期胚胎；得到克隆猪，说明卵母细胞具有全能性。

（4）体细胞核移植技术中也会用到卵母细胞作为受体细胞；需要通过显微操作去除卵母细胞中的核，由于减数第二次分裂中期卵母细胞核的位置靠近第一极体，所以用微型吸管可一并吸出细胞核和第一极体。

（5）早期胚胎移植时；必需移植到同种；生理状态相同的其他雌性动物子宫中，才可能移植成功。

（6）以mRNA为模板合成cDNA的过程称为反转录；获得DNA后，还可通过PCR技术体外扩增。【解析】⑤⑥③④父全能性减数第二次分裂中期（或MⅡ中期）细胞核和第一极体（缺一不得分）生理状态相同反转录PCR六、综合题(共4题，共20分)32、略

【分析】【分析】

1.获得目的基因的方法：①从基因文库中获取②利用PCR技术扩增③人工合成（化学合成）。PCR技术的原理是DNA双链复制。利用PCR技术扩增目的基因的前提条件是：要有一段已知目的基因的核苷酸序列；以便根据这一序列合成引物。利用PCR扩增目的基因的过程由高温变性(90∼95℃)；低温复性(55∼60℃)、适温延伸(70∼75℃)三个步骤构成一个循环，在扩增过程中离不开Taq酶(热稳定性DNA聚合酶)的催化。

2.将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上；因质粒上有抗氨苄青霉素基因，且重组质粒上的抗氨苄青霉素基因，也没有被破坏，所以如果大肠杆菌B能够生长，说明已导入了含抗氨苄青霉素基因的普通质粒或重组质粒，反之则没有导入。

3.分析题图：图示表示利用基因工程培育工程菌的过程；图中②表示基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶和DNA连接酶；③表示将目的基因导入大肠杆菌的过程，转化后的大肠杆菌经过检测和筛选获得工程菌。

【详解】

（1）根据以上分析可知；用PCR技术扩增Ⅱ型干扰素基因，其前提条件是有一段已知核苷酸序列的目的基因，以便根据这一序列合成引物。PCR过程冷却复性(55∼60℃)的目的是便于引物与互补的DNA链的结合，加热延伸过程中发生最主要的过程是在70∼75℃时，热稳定的DNA聚合酶把单个脱氧核苷酸通过磷酸二酯键连接到引物上，如此逐渐延伸形成互补链，进而使目的基因加倍。

（2）①在构建基因表达载体时；需用限制酶对目的基因和质粒进行切割以形成相同的黏性末端。质粒如果用限制酶Ⅱ来切割的话，将会在质粒在出现两个切口且抗生素抗性基因全被破坏，故质粒只能用限制酶Ⅰ切割（破坏四环素抗性而保留氨苄青霉素抗性，即将来形成的重组质粒能在含氨苄青霉素的培养基中生存，而在含四环素的培养基中不能生存）；目的基因两端都出现黏性末端时才能和质粒发生重组，故目的基因只有用限制酶Ⅱ切割时，才会在两端都出现黏性末端。

②因本题质粒上有2个标记基因，但抗四环素基因被插入的基因破坏掉，因此剩下的是抗氨苄青霉素抗性基因，如果在含氨苄青霉素的培养基上能生长，说明已经导入了重组质粒或普通质粒，因为普通质粒和重组质粒都含有抗氨苄青霉素的基因。与图2中b空圈相对应的图2的a中的菌落表现型是抗氨苄青霉素但不抗四环素；说明这些细菌中导入了重组质粒。

【点睛】

本题考查基因工程的知识点，要求学生掌握基因工程中目的基因的获取方法PCR扩增技术的操作过程，理解PCR扩增的条件和具体步骤，把握基因工程出工具酶限制酶的选择原则和作用结果。能够根据题意掌握