2025年沪科版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案

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A.ES细胞具有发育的全能性，能分化为成年个体的各种组织细胞B.步骤①中，应选择培养至MII中期的卵母细胞作为受体细胞C.步骤③中，需要构建含有干扰素基因的基因表达载体D.可以用DNA分子杂交技术来检测目的基因是否转录出了mRNA4、如图为基因表达载体的模式图，下列叙述错误的是（）

A.构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶B.终止子位于基因的下游，使翻译在所需要的地方停止下来C.构建成功后可使目的基因在受体细胞中稳定存在，并遗传给下一代D.抗生素抗性基因作为标记基因5、检测转基因生物是否转录出mRNA，应通过何种分子杂交方法实现？A.DNA—DNA杂交B.DNA—RNA杂交C.RNA—蛋白质杂交D.蛋白质—蛋白质杂交评卷人得分二、多选题(共5题，共10分)6、下列有关生殖细胞的发生和受精过程的叙述正确的是（）A.雄原核形成的同时，卵子完成减数第二次分裂B.透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障C.精子与卵细胞膜相互融合，精子入卵D.卵子是从动物的初情期开始，经过MⅠ和MⅡ两次连续分裂形成的7、为提高一株石油降解菌的净化能力，将菌涂布于石油为唯一碳源的固体培养基上，以致死率为90%的辐照剂量诱变处理，下列叙述不合理的是（）A.将培养基分装于培养皿中后灭菌，可降低培养基污染的概率B.涂布用的菌浓度应控制在30~300个/mLC.需通过预实验考察辐射时间对存活率的影响，以确定最佳诱变时间D.挑取培养基上长出的较大单菌落，给纯化后进行降解效率分析8、为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞（如下图所示）。下列操作与实验目的相符的是（）

A.用限制酶BsaBⅠ和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因B.用KpnⅠ和XhoⅠ两种酶处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确C.将棉花细胞接种在含氨苄青霉素的培养基上可筛选出转基因细胞D.用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中9、刚果红是一种染料，可以与纤维素形成红色复合物，当红色复合物中的纤维素被分解后红色消失。表中是筛选纤维素分解菌的培养基，利用此培养基可从土壤中筛选纤维素分解菌，结果如图。下列说法正确的是（）。培养基的成分：纤维素15gFeSO40．5gKH2PO41gZnSO40．5gK2HPO41gCaCl20．5g尿素0．5g刚果红适量MgSO40．5g琼脂20g定容1L

A.培养基中纤维素和尿素分别提供碳源和氮源B.KH2PO4和K2HPO4在提供无机盐的同时还能维持培养基的pHC.将土壤稀释液接种在平板上的方法为稀释涂布平板法D.平板上5个菌落都有透明圈，说明5个菌落都能分解纤维素10、下图是快速RT-PCR过程示意图；①和②为逆转录酶催化的逆转录过程，③是PCR过程。据图分析下列说法错误的是（）

A.逆转录酶具有DNA聚合酶能力B.③PCR过程只需要引物bC.RT-PCR不能检测基因表达水平D.RT-PCR可检测新冠病毒等RNA病毒评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)11、酶是细胞合成的生物催化剂。随着生物科学技术的发展；酶已经走出实验室，走进人们的生产和生活。请回答下面有关酶的问题：

（1）在腐乳制作的过程中；利用毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成________，____________将脂肪水解为甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制剂中，应用最广泛；效果最明显的是____________。

（2）果胶酶包括_____________________________；生产中如果要固定果胶酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分离原理：需要用__________法去除相对分子质量大的杂质蛋白，以纯化酶；利用_________________________法对酶进行纯度鉴定。12、来源：主要是从______中分离纯化出来的。13、基因工程取得了突飞猛进的发展。_____、_____等技术的应用不仅使生命科学的研究发生了前所未有的变化，而且在实际应用领域，如____、_____、_____、______等方面也展示出美好的应用前景。抗虫棉中的抗虫基因来自_____，抗虫基因作物的使用，不仅减少了_____，降低了____，而且还减少了_____。14、动物基因工程：______。15、DNA的粗提取实验中，如果实验材料是非哺乳动物如鸡血细胞，需要在鸡血细胞中加入一定量的____________，如果实验材料是植物细胞，需要先使用_______________溶解细胞膜。16、细胞产物的工厂化生产。

组织培养技术除了在农业上的应用外，还广泛应用于另一个重要的领域，即______。17、请写出基因工程的概念：_________________。请写出胚胎移植的概念：_____________________。请分别写出植物组织培养和动物细胞培养的原理_________。18、科学家采用定点诱变的方法构建T4溶菌酶的新蛋白质，发现其中一种新蛋白质的第9和第164位氨基酸残基被转换为半胱氨酸残基，并形成一个二硫键。这种新蛋白质的热稳定性会有什么变化？这项技术的要点是什么？_________评卷人得分四、判断题(共4题，共20分)19、胚胎发育早期，细胞的数量不断增加，胚胎的总体积也增加。()A.正确B.错误20、我国对转基因技术的方针是研究上要大胆，坚持自主创新；推广上要慎重，做到确保安全；管理上要严格，坚持依法监管。（选择性必修3P104）()A.正确B.错误21、转入油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传入环境中。()A.正确B.错误22、中国政府禁止生殖性克隆，但不反对治疗性克隆。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题，共9分)23、厨余垃圾废液中的淀粉；蛋白质、脂肪等微溶性物质可以被微生物分解并利用；但由于初期有益微生物数量相对较少，存在发酵周期长、效率低等缺点，极易对环境造成污染。

（1）为探究圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某厨余垃圾废液的最佳接种量比；用于制备微生物菌剂，研究者做了如下实验：

①将两种菌液进行不同配比分组处理；如下表所示：

。编号R0R1R2R3圆褐固氮菌∶巨大芽孢杆菌1∶00∶11∶12∶1将等量上表菌液分别接种于100mL_____中进行震荡培养。本实验中对照组的处理应为_____。

②培养3天后测定活菌数。取各组菌液采用_____法接种于基本培养基中，培养一段时间后选取菌落数在_____范围内的平板进行计数；并依据菌落的形态特征对两种菌进行区分，实验结果见图。

由实验结果可知，两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种，从代谢产物角度分析，原因可能是______________。接种量比例为_____________时；废液中两菌的有效活菌数最多。

（2）为进一步探究菌种比例对该厨余垃圾废液中蛋白质；脂肪等有机物的降解效果；测得15天内废液中蛋白质、脂肪的含量变化如下图所示：

由实验结果可知，对该厨余垃圾废液中蛋白质、脂肪的降解效果最好的两种菌接种比分别为_____、_____。

（3）固态厨余垃圾因富含粗纤维、蛋白质、淀粉等物质，可以通过蒸发、碾磨、干燥等方式进行加工，使加工后的产物在微生物的作用下形成有机复合肥等肥料；收集微生物处理后的厨余垃圾残渣，经晾晒干后制成蛋白饲料；通过以上处理可实现_____（选填选项前的符号）。

A．物质循环再生B．能量多级利用C．提高能量传递效率24、碰碰香叶片中的挥发油具有广泛的食用；药用等价值。为验证碰碰香挥发油对细菌的抑菌活性，进行了如下实验：

步骤一：配置LB培养基（胰蛋白胨10g；酵母浸膏5g；氯化钠10g、琼脂粉l5g、蒸馏水960mL），灭菌后倒平板，静置备用；

步骤二：制备大小相同的滤纸片；灭菌后烘干；

步骤三：将滤纸片分别浸于l0mL碰碰香挥发油提取液中处理；晾干后备用；

步骤四：用移液枪取20μL的大肠杆菌悬液加入LB培养基表面；用涂布器将其均匀涂布；

步骤五：取步骤三浸泡处理过的3个滤纸片；置于LB培养基表面，并保持相互间隔一定距离，37℃倒置培养，每天观察并记录实验结果。

请回答下列问题：

(1)可利用水蒸气蒸馏法从碰碰香叶片中提取挥发油．该方法的原理是_____________________。

(2)LB培养基中，可以为微生物提供氮源的是_________________，从物理性质分析，该培养基属于_________________培养基，对该培养基灭菌应采用_________________________法。

(3)步骤五需增设对照组，对照组的处理应把滤纸片置于_____________________中浸泡。

(4)实验结果：经碰碰香挥发油浸泡过的3个滤纸片周围都出现了抑菌圈（透明圈），其中一个抑菌圈如图所示，请分析其形成原因：________________________________。

25、黏多糖贮积症是由IDUA基因突变导致的遗传病。科研人员对此病的治疗进行相关研究。

(1)黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因由于碱基对___________造成突变，转录出的mRNA长度不变但提前出现终止密码子，最终导致合成的IDUA酶分子量___________；与正常IDUA酶的空间结构差异显著而失去活性，积累过多的黏多糖无法及时清除，造成人体多系统功能障碍。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构、功能相同，但它的反密码子可以与终止密码子配对。在上述这一类突变基因的翻译过程中，加入sup-tRNA可以发挥的作用是___________；从而诱导通读获得有功能的全长蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以携带不同氨基酸；为比较它们的通读效果，科研人员进行了相关研究，实验结果如图。

注：“-”代表未加入。

据图分析，实验组将___________基因导入受体细胞，并采用___________技术检测导入基因的表达情况。据结果分析，携带酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人员利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠及IDUA基因敲除小鼠进行治疗，检测肝脏细胞IDUA酶活性和组织黏多糖的积累量，与不治疗的小鼠相比较，实验结果为_____________，表明携带酪氨酸的sup-tRNA可以治疗黏多糖贮积症。评卷人得分六、综合题(共3题，共12分)26、CRISPRCas9基因编辑技术荣获2020年度诺贝尔化学奖；其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列，可人为选择DNA上的目标位点进行切割（如图所示）。请回答下列问题：

（1）Cas9蛋白借助向导RNA对目标DNA分子进行精准定位，依赖于_______________；对目标位点进行准确切割，依赖于__________________。在使用Cas9蛋白对不同目标DNA进行编辑时，应使用Cas9蛋白和_____（填“相同”或“不同”）的向导RNA进行基因编辑。将切下的基因片段与另一段DNA进行拼接时，需要用到_________酶。

（2）在设计向导RNA识别序列时，若目标DNA的a链切点附近序列为TCCAGAATC则向导RNA上识别序列为________________，向导RNA双链区和识别序列的杂合区，二者相同的碱基配对方式有_____，后者特有的碱基配对方式有______。

（3）CRISPR/Cas9基因编辑技术具有广泛的应用，如_____（答出1点即可）。27、通过转入特定基因可将体细胞诱导形成多能干细胞（iPS细胞）。iPS细胞与胚胎干细胞相似；可以产生各种类型的体细胞。下图是应用iPS细胞治疗镰刀型细胞贫血症的技术流程，请回答：

（1）通过转入特定基因将体细胞诱导形成iPS细胞可称为_____。过程①是体外培养由患者身体分离的体细胞，需要在培养液中加入一定量的_____；以防止培养过程遭受细菌微生物等的污染。

（2）过程②中，科研人员首先要利用__________技术，把c-Myc等四种目的基因扩增，然后将目的基因与逆转录病毒结合，然后将其导入人体的体细胞，诱导形成iPS细胞，该过程的核心是_____。

（3）用限制酶EcoRV单独切割该普通质粒，可产生14kB（1kB即1000个碱基对）的长链，而同时用限制酶EcoRV、Mbol联合切割同一种质粒；得到三种长度的DNA片段，见下图，其中*表示EcoRV限制酶切割的粘性末端。

若Mbol限制酶独立切割该普通质粒，则可以产生的长度为_____、_____的DNA片段。

（4）科研人员在iPS细胞中，用健康的基因取代了镰刀型细胞贫血症的致病基因，并使其定向分化成_____，移植入患者体内，使患者能够产生正常的红细胞。与异体移植相比，该技术的优点是_____。28、Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗；其技术流程如图（图中数字序号表示的是相关过程）。请回答：

（1）过程①将进行培养的上皮细胞注入去核的卵母细胞中，接受细胞核的卵母细胞应处于_______________时期，去除卵母细胞细胞核的目的是____________。

（2）过程②利用的技术是_____，当重组胚胎培养到囊胚期时，可从其_____分离出ES细胞，ES细胞在功能上具有_________的特点。

（3）过程③中获取的目的基因是_________________，若要将目的基因导入受体细胞，需要构建_____，构建之前可以根据______设计引物，利用PCR技术对目的基因进行扩增。将基因导入ES细胞的方法通常是_________法，为了检测ES细胞的DNA上是否插入了目的基因，可采用_____技术。

（4）按此方法和图示技术流程，完成Rag2基因缺失小鼠的基因治疗涉及的酶有_____和耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）等。检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用_____进行杂交实验。参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、A【分析】【分析】

胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加;（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎，之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔。囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。细胞分化在胚胎期达到最大限度。

【详解】

A；桑椹胚细胞属于全能细胞；将细胞分开，每一个细胞都像受精卵一样，能够独立地发育成一个新的生物体，A正确；

B；囊胚时期的细胞已经开始分化；将细胞分开，每一个细胞不能都像受精卵一样，能够独立地发育成一个新的生物体，B错误；

C；幼体的干细胞属于多能干细胞或但能干细胞；将细胞分开，每一个细胞不能都像受精卵一样，能够独立地发育成一个新的生物体，C错误；

D；原肠胚时期细胞已经分化；将细胞分开，每一个细胞不能都像受精卵一样，能够独立地发育成一个新的生物体，D错误。

故选A。2、A【分析】【分析】

病毒是一种个体微小；结构简单，只含一种核酸（DNA或RNA），必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞型生物。病毒是一种非细胞生命形态，它由一个核酸长链和蛋白质外壳构成，病毒没有自己的代谢机构，没有酶系统。因此病毒离开了宿主细胞，就成了没有任何生命活动；也不能独立自我繁殖的化学物质。一旦进入宿主细胞后，它就可以利用细胞中的物质和能量以及复制、转录和转译的能力，按照它自己的核酸所包含的遗传信息产生和它一样的新一代病毒。

【详解】

A；类病毒是一类裸露的共价环状的单链RNA分子；没有蛋白质外壳，A错误；

B；由“在天然状态下；类病毒RNA以高度碱基配对的棒状结构形式存在”可知类病毒RNA具有一定的空间结构，其结构中存在氢键，B正确；

C；某些类病毒能进行自我剪切；说明类病毒RNA可能具有催化功能，可降低化学反应所需的活化能，C正确；

D；类病毒RNA是由核糖核苷酸连激活接形成的；核苷酸之间为磷酸二酯键，因此自我剪切过程中会破坏磷酸二酯键，D正确。

故选A。3、D【分析】分析图：①表示核移植过程；②表示早期胚胎培养过程；③表示将目的基因导入ES细胞。

【详解】

A；胚胎干细胞具有发育的全能性；能分化为成年动物体内任何一种组织细胞，A正确；

B；由于卵母细胞含有易于细胞核表达的物质；步骤①中，应选择培养至减数第二次分裂中期的卵母细胞作为受体细胞，B正确；

C；将目的基因导入受体细胞前；需要构建含有目的基因（干扰素基因）的表达载体，C正确；

D；从转基因生物中提取的是mRNA；同样用标记的基因作为探针，与mRNA杂交，若显示出了杂交带，则表明目的基因已经转录出mRNA，此项技术称为分子杂交技术，检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，采用DNA分子杂交技术，D错误。

故选D。4、B【分析】【分析】

基因表达载体的构建〈即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步；也是基因工程的核心。其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。

【详解】

A；首先用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体；再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组DNA分子，A正确；

B；终止子位于基因的下游；作用是使转录在相应的地方停止，不是使翻译在所需要的地方停止下来，B错误；

C；基因表达载体的构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在；并且可以遗传给下一代，C正确；

D；抗生素抗性基因作为标记基因；标记基因便于目的基因的鉴定和筛选，可检测受体细胞中是否导入了目的基因，D正确。

故选B。5、B【分析】目的基因分子水平的鉴定方法有：DNA分子杂交技术；分子杂交技术和抗原—抗体杂交技术。

【详解】

A；DNA—DNA杂交是检测目的基因的方法；A错误；

B；DNA—RNA杂交是检测转基因生物是否转录出mRNA的分子杂交方法；B正确；

C；RNA—蛋白质杂交方法是不存在的；C错误；

D；抗原—抗体杂交技术是检测蛋白质的方法；D错误。

故选B。

【点睛】二、多选题(共5题，共10分)6、A:B:C【分析】【分析】

在受精作用过程中；精子头部的顶体首先释放顶体酶，发生顶体反应；然后精子穿越放射冠和透明带，此时透明带发生透明带反应，这是防止多精入卵的第一道屏障；接着精子进入卵黄膜，此时会发生卵黄膜封闭作用；此时卵细胞才真正完成减数分裂，并释放第二极体；精子的细胞核和卵细胞的细胞核分别形成雄原核和雌原核，即雌；雄原核的形成；最后核膜消失，雌、雄原核融合，标志着受精作用的完成。

【详解】

A；雄原核形成与卵子完成减数第二次分裂是同时进行的；A正确；

B；精子触及卵黄膜的瞬间；发生透明带反应，阻止其他精子进入，是防止多精入卵受精的第一道屏障，B正确；

C；精子的细胞膜与卵黄膜融合后；精子入卵，C正确；

D；卵子的发生开始于胎儿期性别分化之后；减数第一次分裂和减数第二次分裂是不连续的，D错误。

故选ABC。

【点睛】7、A:B【分析】【分析】

培养基的配制：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。微生物的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法。预实验可以为正式实验进一步的摸索条件；可以检验实验设计的科学性和可行性，避免人力；物力和财力的浪费。

【详解】

A；培养基应先灭菌再分装于培养皿中；A符合题意；

B、涂布用的菌浓度应控制在106倍；以避免菌种重叠而不能得到单菌落，B符合题意；

C；辐射剂量和诱变时间都是正式实验的无关变量；可通过预实验确定，C不符合题意；

D；石油降解菌能分解石油获得碳源；形成菌落，挑取培养基上长出的较大单菌落，给纯化后进行降解效率分析，以获得能高效降解石油的菌种，D不符合题意。

故选AB。8、A:D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是Ca2+处理法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因；②检测目的基因是否转录出了mRNA；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；两个基因中都有限制酶BsaBⅠ的一个识别位点；用该限制酶切割后再用DNA连接酶可拼接成GNA-ACA融合基因，A正确；

B；GNA-ACA融合基因的两端有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位点；而质粒上也有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位点，但方向不一致，用两酶切割，正好是反向连接目的基因和运载体，B错误；

C；运载体上带有卡那霉素的抗性基因；没有氨苄青霉素的抗性基因，转基因细胞在含有氨苄青霉素的培养基上不能存活，C错误；

D；用PCR技术扩增GNA和ACA基因后；再通过分子杂交或电泳的方式，可检测是否导入棉花细胞中，D正确。

故选AD。9、A:B:C【分析】【分析】

本题知识点为刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理、培养基中各物质的作用。刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。纤维素为纤维素分解菌提供碳源，尿素为纤维素分解菌提供氮源，KH2PO4和K2HPO4具有缓冲作用；在提供无机盐的同时还能维持培养基的pH。获取单个菌落的方法可通过稀释涂布平板或平板划线等技术完成。

【详解】

A；在此培养基中；纤维素为纤维素分解菌提供碳源，尿素为纤维素分解菌提供氮源，A正确；

B、KH2PO4和K2HPO4具有缓冲作用；在提供无机盐的同时还能维持培养基的pH，B正确；

C；从平板上纤维素分解菌的菌落分布可以看出（菌落较均匀）；接种方法为稀释涂布平板法，C正确；

D；菌落周围有透明圈不一定是细胞分解了纤维素；还有可能是分解了刚果红染料，D错误；

故选ABC。10、B:C【分析】【分析】

据图可知，逆转录酶可以催化以RNA为模板合成cDNA，还可催化以cDNA为模板合成其互补DNA；RT-PCR过程中需要a、b两种引物。

【详解】

A；逆转录酶催化合成DNA；所以具有DNA聚合酶的能力，A正确；

B、③PCR过程需要引物a、b；因为后续的模板链序列既有与靶RNA一致的，也有与cDNA一致的，B错误；

C；RT-PCR可检测基因的转录情况从而推知基因的表达水平；C错误；

D；通过设计RNA的特异性引物进行RT-PCR检测新冠病毒等RNA病毒；D正确。

故选BC。三、填空题(共8题，共16分)11、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作过程中多种微生物参与了发酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生蛋白酶能将豆腐中的蛋白质转化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪转化成甘油和脂肪酸。

2；果胶酶能够分解果胶；瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。

【详解】

（1）在腐乳制作的过程中；利用毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制剂中，应用最广泛；效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

（2）果胶酶并不特指某一种酶；而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶；果胶分解酶和果胶酯酶；在果汁生产过程中如果要固定果胶酶，最好采用化学结合和物理吸附法固定化，这是因为酶分子小，体积小的酶容易从包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分离原理：需要用凝胶色谱法去除相对分子质量大的杂质蛋白；以纯化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法对酶进行纯度鉴定。

【点睛】

本题考查腐乳制作和酶提取等知识，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验步骤、实验采用的试剂及试剂的作用等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。【解析】小分子肽和氨基酸脂肪酶碱性蛋白酶和碱性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶化学结合法和物理吸附凝胶色谱（分配色谱）聚丙烯酰胺凝胶电泳12、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】原核生物13、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】基因转移基因扩增医药卫生农牧业、食品工业环境保护苏云金杆菌农药的用量生产成本农药对环境的污染。14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蒸馏水洗涤剂和食盐16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】细胞产物的工厂化生产。17、略

【分析】【分析】

动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。植物组织培养又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织；器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

【详解】

1；基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术；是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。

2；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。

3；动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖，其原理是细胞增殖。

4；植物组织培养又叫离体培养；指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。

【点睛】

本题考查基因工程概念、胚胎移植、动植物细胞培养等相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技术或DNA重组技术②.又称受精卵移植，是指将雌性动物体内的的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状况相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术③.植物细胞全能性、细胞增殖18、略

【分析】【详解】

蛋白质形成二硫键，使蛋白质的结构更加稳定，因此T4溶菌酶的热稳定性会提高。这项技术属于蛋白质工程技术，其步骤为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。【解析】会提高T4溶菌酶的耐热性。这项技术属于蛋白质工程技术，该技术的要点是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。四、判断题(共4题，共20分)19、B【分析】【详解】

胚胎发育早期；细胞数量不断增加，但胚胎总体积不变或略有缩小。

故错误。20、A【分析】【详解】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）；对待转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。我国对转基因技术的方针是一贯的、明确的，就是研究上要大胆，坚持自主创新；推广上要慎重，做到确保安全；管理上要严格，坚持依法监管。

该说法正确。21、A【分析】【详解】

转入到油菜的抗除草剂基因，则可能通过减数分裂进入到花粉细胞中，进而传入环境中的其他生物体内。本说法正确。22、A【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植。生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的；即用于产生人类个体。中国政府：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人。

【详解】

据分析可知；中国政府禁止生殖性克隆，但不反对治疗性克隆。

故正确。五、实验题(共3题，共9分)23、略

【分析】【分析】

常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。在统计菌落数目时；为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数。

【详解】

（1）①要探究圆褐固氨菌和巨大芽孢杆菌处理某餐厨垃圾废液的最佳接种量比；故需要将不同配比的菌液接种在100mL某餐厨垃圾废液中，为了保证氧气供应及目的菌与培养液充分接触，需要进行振荡培养。另外为了减小误差，还需要设置对照组，接种等量无菌水，在相同的条件下培养。

②测定活菌数；需要利用稀释涂布平板法，接种时故需要取一定量菌液进行梯度稀释，然后分别取0.1mL的菌液采用涂布法接种于基本培养基中培养。可以根据菌落的形态区分两种菌，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，根据实验数据可知，两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种，从代谢产物角度分析，原因可能是两种菌可以相互利用对方的代谢产物作为营养物质。当两菌种接种量比例为1：1时，废液中两种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化。

（2）由实验数据可知，R3接种组随着时间的延长，蛋白质的含量下降最明显；R1接种组随着处理时间的延长；脂肪的含量下降最明显，即脂肪的降解效果最好。

（3）固态厨余垃圾因富含粗纤维；蛋白质、淀粉等物质；可加工形成有机复合肥、蛋白饲料等，利用了物质循环再生、能量多级利用的生态工程的原理，AB正确。故选AB。

【点睛】

本题结合图形和表格，主要考查微生物的分离和培养的相关知识，要求考生掌握稀释涂布平板法的操作流程，识记微生物计数的方法，能结合所学知识和图形信息准确答题。【解析】某厨余垃圾废液加入等量无菌水稀释涂布平板法30~300两种菌可以相互利用对方的代谢产物作为营养物质（一种菌的代谢产物是另一种菌的营养物质）1:1R3（或2:1）R1（或0:1）AB24、略

【分析】【分析】

根据物理性质可将培养基分成固体培养基；半固体培养基和液体培养基。

(1)

水蒸气蒸馏法的原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来；形成油水混合物，冷却后又会重新分出油层和水层。

(2)

胰蛋白胨和酵母浸膏都可以为微生物提供氮源；培养基中加入了琼脂；因此是固体培养基；对培养基的灭菌应采取高压蒸汽灭菌法。

(3)

为了避免微生物的干扰；根据单一变量原则，对照组应该设置为把滤纸片置于等量无菌水中浸泡。

(4)

该实验为验证类实验；实验结果是已知的，实验组的3个滤纸片上含有抑菌作用的挥发油，其纸片外围大肠杆菌不能繁殖，因而出现抑菌圈（透明圈），而对照组的不会出现。

【点睛】

本题考察获取目的菌种的相关知识，需要考生熟练掌握培养基的制备、培养基的类型以及实验的原理等内容。【解析】(1)利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来；形成油水混合物，冷却后又会重新分出油层和水层。

(2)胰蛋白胨和酵母浸膏固体高压蒸汽灭菌。

(3)等量无菌水。

(4)实验组的3个滤纸片上含有抑菌作用的挥发油，其纸片外围大肠杆菌不能繁殖，因而出现抑菌圈（透明圈）25、略

【分析】【分析】

基因突变是指DNA分子中发生碱基对的替换；增添和缺失；而引起的基因结构的改变。翻译是指在核糖体上，以mRNA为模板、以氨基酸为原料合成蛋白质的过程，该过程还需要tRNA来运转氨基酸。

密码子由位于mRNA上决定一个氨基酸的三个相邻的碱基组成。终止密码子的作用是终止翻译过程。

基因工程中检测目的基因在受体细胞内是否成功表达可以用抗原-抗体杂交技术。

【详解】

（1）由题干信息可知；黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因突变后，转录出的mRNA长度不变，说明其没有发生碱基对的增添和缺失，因为这两者改变会导致转录出的mRNA长度改变，因此推测其基因突变是由于碱基对替换。由于终止密码子提前出现，导致翻译提前终止，肽链变短，IDUA酶分子量变小，空间结构改变而失活。

（2）由题干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最终诱导核糖体通读mRNA上的遗传信息合成具有功能的全长蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构；功能相同，据此推测该抑制性tRNA可以携带氨基酸至核糖体并与终止密码子碱基配对使翻译过程继续。

（3）本实验目的是比较携带不同氨基酸的sup-tRNA的通读效果；需要保证实验组细胞含有突变IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶对实验结果产生干扰），同时保证在不同的实验组细胞中可以转录出携带不同中氨基酸的sup-tRNA，因此实验组中受体细胞中应该含有导入携带不同氨基酸的sup-tRNA基因和突变IDUA基因。若要判断各个实验组细胞中携带不同氨基酸的sup-tRNA是否成功诱导了具有功能的IDUA酶，可以采用该酶的特异性抗体对其进行检测，即进行抗原-抗体杂交。分析题图可知，与对照组（含正常IDUA基因的组）相比，含携带酪氨酸的sup-tRNA的受体细胞中表达的全长IDUA蛋白量比其他实验组都多，说明其能有效恢复细胞中全长IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上实验可知，携带酪氨酸的sup-tRNA能有效诱导核糖体对突变IDUA基因转录出的mRNA进行通读，进而产生具有正常功能的IDUA酶，因此利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠进行治疗，与不进行治疗的IDUA突变基因纯合小鼠相比，治疗组小鼠的IDUA酶活性高，组织黏多糖积累量少；同时，利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA基因敲除小鼠进行治疗，与不进行治疗的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，则其细胞内都没有相应mRNA，因此携带酪氨酸的sup-tRNA无法发挥作用，最终导致治疗组与不治疗组的IDUA酶活性与组织黏多糖积累量无明显差异。【解析】(1)替换减少。

(2)识别终止密码子并携带氨基酸至核糖体使翻译过程继续。

(3)携带不同氨基酸的suptRNA基因和变IDUA抗原一抗体杂交恢复细胞中全长IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突变基因纯合小鼠IDUA酶活性高，组织黏多糖积累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性与组织黏多糖积累量无明显差异六、综合题(共3题，共12分)26、略

【分析】【分析】

基因编辑又称基因组编辑或基因组工程；是一种新兴的比较精确的能对生物体基因组特定目标基因进行修饰的一种基因工程技术或过程；早期的基因工程技术只能将外源或内源遗传物质随机插入宿主基因组，基因编辑则能定点编辑想要编辑的基因；基因编辑依赖于经过基因工程改造的核酸酶，也称“分子剪刀”，在基因组中特定位置产生位点特异性双链断裂（DSB），诱导生物体通过非同源末端连接（NHEJ）或同源重组（HR）来修复DSB，因为这个修复过程容易出错，从而导致靶向突变，这种靶向突变就是基因编辑；基因编辑以其能够高效率地进行定点基因组编辑，在基因研究；基因治疗和遗传改良等方面展示出了巨大的潜力。

【详解】

（1）依图示信息可知；Cas9蛋白对目标DNA分子进行精准定位，原因在于向导RNA碱基序列与目标DNA碱基序列可以通过碱基互补配对原则，实现向导RNA与目标DNA特定序列的识别，进行定位；对目标位点进行准确切割，依赖于核酸内切酶Cas9具有专一性，可以剪切特定的碱基序列。一般来说，在使用Cas9蛋白对不同目标DNA进行编辑时，由于向导RNA能识别并结合特定的DNA序列，所以应使用Cas9蛋白和不同向导RNA进行基因编辑。DNA连接酶可以连接DNA片段，因此将切下的基因片段与另一段DNA进行拼接时，需要用到DNA连接酶。

（2）目标DNA的α链与其互补链碱基互补；α链的互补链又与识别序列碱基互补，故识别序列碱基与目标DNA的α链碱基序列相同，只是U代替了T，则向导的RNA上识别序列为UCCAGAAUC；向导RNA双链区的碱基配对方式为A与U；G与C，识别序列与目标DNA之间杂合区的碱基配对方式为A与U、T与A、G与C，二者相同的碱基配对方式有A与U、C与G，不同的配对方式是A与T。

（3）基因编辑能够高效率地进行定点基因组编辑；CRISPR/Cas9基因编辑技术在遗传病的治疗；癌症的