2025年湘教版选择性必修3生物下册月考试卷含答案

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A.步骤①的操作不需要在无菌环境中进行B.步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离C.步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理D.步骤④培养过程中不会发生细胞转化2、关于平板划线法和稀释涂布平板法的叙述错误的是（）A.只能用于固体培养基接种B.都可以用于微生物的计数C.接种培养后均可获得单菌落D.接种用具都需进行严格灭菌3、用于核移植的供体细胞一般都选用（）A.受精卵B.10代以内的细胞C.传代10~50代以内的细胞D.处于减数分裂第二次分裂中期的次级卵母细胞4、2002年1月18日至2月11日，山东曹县克隆牛基地连续诞生了14头“中国克隆牛”的牛犊。用于克隆研究的供核细胞来源于两头优质成年牛的耳成纤维细胞，一头为高产黑白花奶牛，另一头为优质盖普威公牛。受体卵母细胞来自鲁西黄牛的卵巢。研究人员在实验室内共培养了980枚重构卵，有261枚发育成克隆囊胚，有230枚植到112头代孕母牛体内，其中12头怀孕成功的代孕母牛共产犊l4头，现存活5头，分别是动动、金金、银银、多多和福福。DNA检测证明，克隆牛犊与代孕母牛没有遗传关系。下列说法中，不合理的一项是（）A.中国克隆牛培育过程中用到的细胞工程技术有细胞核移植、动物细胞培养等B.克隆牛的性别由供核细胞控制，克隆牛是二倍体生物C.多多、福福将来长大以后，一定是高产奶牛D.克隆技术用于动物繁殖具有控制性别、加快繁殖速度、保持优良性状等优点5、日本京都大学山中伸弥领导的实验室在世界著名学术杂志《细胞》上率先报道了评iPS细胞的研究。他们把Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4这四种转录因子引入小鼠胚胎或皮肤纤维母细胞，发现可诱导其发生转化，产生的iPS细胞在形态、基因和蛋白表达、表观遗传修饰状态、细胞倍增能力、分化能力等方面都与胚胎干细胞极为相似。从理论角度而言，下列有关iPS细胞说法不正确的是（）A.iPS细胞在理论上，可以避免免疫排斥B.iPS细胞在功能上具有细胞的全能性，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞C.iPS细胞可以用于治疗人类因细胞坏死或退化引起的疾病D.iPS细胞在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化6、关于微生物的实验室培养和菌种保存的叙述，正确的是（）A.平板划线法和稀释涂布平板法分别用的接种工具是涂布器和接种环B.若液体培养基需震荡培养，其目的是使微生物分布均匀以便涂布C.长期保存的菌种，需放在-20℃的冷冻箱中保存D.斜面培养基中含有大量营养物，可以长期保存菌种7、下列关于基因工程应用及安全性问题的叙述中，错误的是（）A.区别于生殖性克隆，治疗性克隆不需要面临伦理性问题B.利用猪的器官解决人类器官移植也会面临免疫排斥反应难题C.可以通过基因工程技术建立转基因小鼠原发性高血压模型D.可以通过基因工程技术利用乳腺生物反应器生产某些药物8、肿瘤坏死因子（TNF）在体内和体外均能杀死某些肿瘤细胞或抑制肿瘤细胞的增殖，科研人员欲利用乳腺生物反应器大量生产TNF，用于临床上疾病的治疗。已知HindⅢ、BamHI、BglⅡ和PstI为限制性内切核酸酶，识别的序列均不相同。下列关于基因工程中重组质粒构建的说法，正确的是（）

A.可选用PstI，BglⅡ和HindⅢ、BglⅡ两种组合切割质粒和目的基因B.可用DNA连接酶或DNA聚合酶连接TNF基因和切割开的质粒C.启动子指的就是起始密码子，可驱动TNF基因的转录过程D.四环素抗性基因属于标记基因，便于鉴别受体细胞中是否含有目的基因评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)9、利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如图所示；下列叙述正确的是（）

A.过程①需使用逆转录酶B.过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因C.过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备D.过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞10、下列关于基因工程中的基本工具的说法中，正确的是（）A.基因工程中的工具酶有限制性内切核酸酶和DNA连接酶B.DNA连接酶可将任意的DNA片段通过形成磷酸二酯键而连接起来C.质粒上必须有标记基因才可作为载体D.限制性内切核酸酶一般不仅仅能切割外源DNA，也能切割自身的DNA分子11、荧光定量PCR技术可定量检测样本中DNA含量，也可用于RNA病毒的核酸检测。其原理是：先由病毒的RNA逆转录得到cDNA，然后对得到的DNA进行PCR扩增。在PCR反应体系中加入引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探针处会水解探针，使荧光监测系统接受到荧光信号，即每个DNA分子扩增一次，就有一个荧光分子生成（如图）。Ct值（循环阈值）的含义为：每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数。下列说法错误的是（）

A.扩增过程中引物先于探针结合到模板DNA上B.若最初该反应体系中只有逆转录而来的一个DNA分子，经n次循环后，需要消耗荧光探针2n-1个C.C值越大表示被检测样本中病毒数目越多D.若样本被污染，RNA酶将病毒RNA降解，检测结果可能为阴性12、谷氨酸棒状杆菌发酵过程中会生成大量的谷氨酸，经加工后可制成味精。在其发酵过程中，发酵罐中碳氮比（碳元素与氮元素的比值）为4：1时，菌体大量繁殖而产生的谷氨酸少；当碳氮比为3：1时，菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增。下列相关叙述正确的是（）A.谷氨酸棒状杆菌可以从自然界中筛选，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得B.分离、提纯产物是发酵工程的中心环节，有利于获得更多的优质发酵产品C.由题干信息可推知发酵过程中需调整发酵罐内营养成分的比例D.在发酵罐内发酵无需严格控制溶解氧、温度、pH等条件13、为了检测药物X、Y和Z的抗癌效果，在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肺癌细胞使其贴壁生长。实验组分别加入等体积相同浓度的溶于二甲基亚矾（溶剂）的药物X、Y或Z，培养过程及结果如图所示。下列叙述错误的是（）

实验结果见下表：。组别细胞数目（个/孔）对照7．8×106药物X6．7×104药物Y5．3×105药物Z8．0×106

A.对照组中只需加入等体积的二甲基亚矾溶剂即可B.细胞培养液中通常需要加入一定量的抗生素防止病毒污染C.计数时可用胰蛋白酶处理贴壁细胞，使肺癌细胞脱落下来D.根据实验结果，三种药物均具有抗癌效果，但药物X的抗癌效果最好14、下列有关PCR的叙述，正确的有（）A.PCR所需引物和体内DNA复制所需引物不同B.引物长度和复性温度均会影响PCR扩增的特异性C.PCR产物电泳时的迁移速率与DNA分子的大小有关，与凝胶的浓度无关D.PCR预变性的目的是增加大分子模板DNA彻底变性的概率评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)15、生化武器散布途径：将病原体_____或者通过_____、_____等散布到敌方，会对军队和平民造成大规模杀伤后果。16、动物细胞融合的意义：克服了______，成为研究_____、_____、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。17、在筛选纤维素分解菌的过程中，人们发明了___________，这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选。刚果红(CongoRed，简称__________)是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成____________，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红一纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的______________。这样，我们就可以通过是否产生________________来筛选纤维素分解菌。18、现代的腐乳生产是在严格的____________条件下，将优良__________菌种直接接种在豆腐上，这样可以避免__________________的污染，保证产品的质量。19、95%的______________以使DNA析出，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起的丝状物的颜色是____________。获取的丝状物后加入到质量浓度为______________mol/L浓度的NaCL溶液的试管中，使丝状物重新溶解。20、蛋白质工程是指以______作为基础，通过______，对现有蛋白质进行_____，或制造一种______，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产______的蛋白质）

21、基因工程是蛋白质工程的关键技术；蛋白质工程是基因工程的延伸。有人对基因工程和蛋白质工程的关系进行了比较，并归纳为下表。

基因工程与蛋白质工程的比较。比较项目蛋白质工程蛋白质工程原理中心法则中心法则区别过程获取目的基因→构建表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测氨基酸序列→合成DNA→表达出蛋白质实质定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需要的生物类型或生物产品（基因的异体表达）定向改造蛋白质的分子结构以生产人类所需要的蛋白质定向改造蛋白质的分子结构以生产人类所需要的蛋白质结果生产自然界中已有的蛋白质生产自然界中已有的蛋白质生产自然界中已有的蛋白质联系蛋白质工程是第二代基因工程

上表的比较是否正确？如果有不妥之处，尝试进行修改。_________评卷人得分四、实验题(共3题，共24分)22、科研人员以病毒表面S蛋白作为主要的病毒抗原；利用基因工程研制疫苗用于接种预防，简要过程如图所示。回答下列问题：

(1)新冠病毒是一种RNA病毒，一般先通过_____________________得到cDNA，再经PCR技术获取大量S蛋白基因，PCR的中文全称是_____________________。

(2)PCR技术还需用到_____________________酶，该酶能够使脱氧核苷酸从引物的_____________________端开始连接，据下图分析，可选择的引物是_____________________。

(3)为了验证表达的S蛋白与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性；请设计简单的检测方案并预期检测结果。

方案:_________________________________。

结果:_________________________________。23、科学家的发现给人类的生活带来了无限的想象；他们采集了某深海海域的沉积物样品，分离；鉴定得到其中的深海放线菌，以期获得具有前景的抗生素替代品。据此回答下列问题：

(1)研究人员欲筛选出深海放线菌进行研究，取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后取菌液通过_______________法接种到高氏一号（加数滴质量分数为10%的酚）培养基表面以获得单菌落。

(2)通过PCR技术扩增分离得到的放线菌的16SrRNA基因可进行菌株的种属鉴定。PCR技术中起关键作用的酶是_____________。该技术能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR产物一般可通过_________________鉴定。

(3)科学家还将Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中。2~3周后，这些细胞显示出ES细胞的形态、具有活跃的分裂能力，它们就是iPS细胞。在这个实验过程中，逆转录病毒的作用是_______________如何证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用？请写出实验设计思路______________24、黏多糖贮积症是由IDUA基因突变导致的遗传病。科研人员对此病的治疗进行相关研究。

(1)黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因由于碱基对___________造成突变，转录出的mRNA长度不变但提前出现终止密码子，最终导致合成的IDUA酶分子量___________；与正常IDUA酶的空间结构差异显著而失去活性，积累过多的黏多糖无法及时清除，造成人体多系统功能障碍。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构、功能相同，但它的反密码子可以与终止密码子配对。在上述这一类突变基因的翻译过程中，加入sup-tRNA可以发挥的作用是___________；从而诱导通读获得有功能的全长蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以携带不同氨基酸；为比较它们的通读效果，科研人员进行了相关研究，实验结果如图。

注：“-”代表未加入。

据图分析，实验组将___________基因导入受体细胞，并采用___________技术检测导入基因的表达情况。据结果分析，携带酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人员利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠及IDUA基因敲除小鼠进行治疗，检测肝脏细胞IDUA酶活性和组织黏多糖的积累量，与不治疗的小鼠相比较，实验结果为_____________，表明携带酪氨酸的sup-tRNA可以治疗黏多糖贮积症。评卷人得分五、综合题(共4题，共16分)25、甘草酸是中药甘草中的主要活性成分；为了快速检测甘草酸，科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体，其基本操作过程如图1。图2是动物体细胞核移植与克隆动物的基本流程图。回答下列问题：

(1).图1中制备单克隆抗体首先需要对动物进行免疫处理，所用的抗原是______________，因为细胞甲______________，所以细胞甲需要与骨髓瘤细胞融合。细胞丁的特性是______________。

(2).图1中的②过程常用______________作为诱导剂，该剂不能用于植物细胞的融合。③和④过程为两次筛选过程，这两次筛选的目的分别是______________、______________。

(3).图2所示的细胞核移植技术中涉及三个个体：提供细胞核的个体、提供卵母细胞的个体和代孕母体，克隆动物的性状主要与______________相似但又不完全相同，原因是__________________。26、甲是抗寨卡病毒（一种RNA病毒）单克隆抗体制备的过程图；图乙是克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：

（1）图甲和图乙所示的过程中，应该都会用到的动物细胞工程技术是______。

（2）图甲中②过程常需要借助动物细胞融合技术，其过程中动物细胞融合所特有的方法是使用______诱导细胞融合。

（3）利用基因工程生产寨卡病毒的疫苗时，需要将重组DNA导入细菌细胞中，这一步骤常用的方法是__________________。

（4）选用单克隆抗体技术将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，再用______培养基进行筛选，在该培养基上，____________的细胞都会死亡；只有杂交瘤细胞才能生长。

（5）单克隆抗体与常规的血清抗体相比最大的优点是__________________。

（6）核移植时受体应选用______期的卵母细胞。经图乙所得到的克隆羊“多利”的遗传特性与细胞核的供体白面绵羊并不完全相同的原因是__________________。27、Ⅰ；最近哈尔滨因疫情变化管控升级；对境外入哈、国内疫情重点地区入哈人员，一律实行“14天集中隔离医学观察+14天居家隔离医学观察+2次核酸检测+1次血清抗体检测”的管控措施，做到凡进必检、不漏一人、万无一失。

Ⅱ；同时；中国率先开启新冠疫苗二期临床研究！据研究新冠病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在康复病人的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。下图为某机构研制疫苗的部分过程。请回答下列相关问题：

（1）对疫情重点地区输入人员进行核酸检测需要用到_____________________做探针；进行血清抗体检测的方法是______________。

（2）选择性扩增S基因需要的前提条件及原因是___________________________。

（3）研究疫苗的步骤①用到的酶有______________；获得的表达载体除了S基因外，还有____________________________等组成部分。

（4）S基因在培养的动物细胞中稳定遗传的关键是______________。

（5）为了检验步骤③所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用动物细胞中表达的S蛋白与_____________进行抗原—抗体杂交实验，从而得出结论。28、某动物体内含有研究者感兴趣的目的基因，研究者欲将该基因导入大肠杆菌的质粒中保存。该质粒含有氨苄青霉素抗性基因（AmpR）LacZ基因及一些酶切位点；其结构和简单的操作步骤如下图所示。

注：LacZ基因编码产生的β-半乳糖苷酶可以分解X-gal产生蓝色物质；使菌落呈现蓝色；否则菌落为白色。

请根据以上信息回答下列问题。

(1)在第②步中，应怎样选择限制酶？______

(2)在第③步中，为了使质粒DNA与目的基因能连接，还需要在混合物中加入哪种物质？______

(3)选用含有AmpR和Lacz基因的质粒进行实验有哪些优势？______

(4)含有重组质粒的大肠杆菌菌落将呈现什么颜色？______为什么？______参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、C【分析】【分析】

动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞；制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。

【详解】

A；动物细胞培养过程需要无菌操作；故步骤①的操作需要在无菌环境中进行，A错误；

B；动物细胞培养过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织；分散成单个细胞，制成细胞悬液，B错误；

C；传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞；使之分散成单个细胞，再分瓶培养，C正确；

D；步骤④为传代培养过程；该过程中部分细胞可能发生细胞转化，核型改变，D错误。

故选C。2、B【分析】【分析】

微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法；前者是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，后者是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

【详解】

A；将微生物接种到固体培养基中的方法通常为平板划线法和稀释涂布平板法；A正确；

B；稀释涂布平板法接种可以形成均匀分布的单菌落；所以常用来进行微生物的计数，平板划线法常用来筛选分离微生物，B错误；

C；两种接种方法在培养基中都能形成单个菌落；C正确；

D；为防止杂菌污染；接种用具都需进行严格灭菌，D正确。

故选B。3、B【分析】【分析】

1；动物细胞核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

2；原理：动物细胞核的全能性。

【详解】

A；核移植的供体细胞一般为体细胞；A错误；

B；传代10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型；适宜作为核移植的供体细胞，B正确；

C；传代10～50代以内的细胞；绝大多数细胞已死亡，存活的部分细胞的核型发生变化，所以不适宜用于核移植的供体细胞，C错误。

D；处于减数第二次分裂中期的次级卵母细胞是核移植的受体细胞；D错误。

故选B。

【点睛】

本题考查动物体细胞核移植、动物细胞培养等知识，明确核移植的供体细胞是体细胞、受体细胞是去核卵母细胞是解决本题的关键。4、C【分析】【分析】

动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎。在体外将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才成熟，可以通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体，核移植时，对提供细胞核和细胞质的奶牛不需要进行同期发情处理，使用电脉冲等方法可以激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育。

【详解】

A；克隆牛涉及动物细胞核移植；即将牛的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，其中去掉细胞核的卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期，因此中国克隆牛培育过程中用到的细胞工程技术有细胞核移植、动物细胞培养等，A正确；

B；克隆牛的遗传物质主要来自于供核细胞（含2个染色体组）；因此克隆牛的性别由供核细胞控制，克隆牛是二倍体生物，B正确；

C；虽然多多和福福都是克隆而来；基因型相同，多多、福福将来长大以后，不一定是高产奶牛，因为表现型与环境和基因型有关，C错误；

D；克隆技术属于无性繁殖；其遗传物质主要来自于供核细胞，故克隆技术用于动物繁殖具有控制性别、加快繁殖速度、保持优良性状等优点，D正确。

故选C。5、B【分析】【分析】

1；哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞；来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。

2；具有胚胎细胞的特性；在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞．另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。

3；胚胎干细胞可用于治疗人类的某些顽症；如帕金森综合症．还可培育出人造器官，解决目前临床上存在的供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。

【详解】

A；将iPS细胞增殖分化出的不同细胞移植回病人体内；由于来源的相同（相似）性，理论上可以避免免疫排斥反应，A正确；

B；iPS细胞属于诱导多能干细胞；不能分化为成年动物体内任何一种组织的细胞，B错误；

C；iPS细胞可分化为成年动物体内任何一种组织的细胞；因此可能用于治疗人类因细胞坏死或退化而导致的某些顽症，C正确；

D；iPS细胞与胚胎干细胞极为相似；因此其在体外培养条件下，可以维持增殖而不发生分化，D正确。

故选B。6、C【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

菌种保藏的原理：是为了达到长期保持菌种的优良特性；核心问题是必须降低菌种变异率，而菌种的变异主要发生于微生物旺盛生长；繁殖过程，因此必须创造一种环境，使微生物处于新陈代谢最低水平，生长繁殖不活跃状态；常用的方法有临时保存法和甘油管藏法。

【详解】

A；平板划线法的接种工具是接种环；稀释涂布平板法的接种工具是涂布器，A错误；

B；若液体培养基需震荡培养；其目的是增加培养液的溶氧，为微生物呼吸作用提供充足的氧气，B错误；

C；长期保存的菌种；采用甘油管藏的方法，需放在-20℃的冷冻箱中保存，C正确；

D；斜面培养基保存菌种的方式是临时保存的；菌种容易发生突变，所以不能长期保存菌种，D错误。

故选C。

【点睛】7、A【分析】【分析】

机体只要接触来自非自己的细胞；组织、器官等就会发生排斥反应。

【详解】

A；生殖性克隆和治疗性克隆都涉及伦理问题；我国政府不允许进行任何生殖性克隆人实验，也同样重视治疗性克隆所涉及的伦理问题，A错误；

B；只要是非自己的细胞发育而来的器官；都会产生排斥，B正确；

C；原发性高血压属于多基因遗传病；可以通过基因工程技术建立转基因小鼠原发性高血压模型，C正确；

D；可以通过基因工程技术利用乳腺生物反应器生产某些药物；如单克隆抗体，D正确。

故选A。8、D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。

【详解】

A；据图可知；限制酶PstI切割质粒时，会将质粒切成两段，且会破坏标记基因，切掉启动子，因此不能选用PstI．BglⅡ这一组合，A错误；

B；不能使用DNA聚合酶连接目的基因和切割开的质粒；应使用DNA连接酶，B错误；

C；起始密码子位于mRNA上；启动子是一段具有特殊序列结构的DNA片段，是RNA聚合酶识别和结合的位点，可驱动TNF基因的转录过程，C错误；

D；四环素抗性基因属于标记基因；便于鉴别受体细胞中是否含有目的基因，D正确。

故选D。二、多选题(共6题，共12分)9、A:D【分析】【分析】

过程①是以mRNA为模板合成DNA的过程；即逆转录过程；过程②表示利用PCR扩增目的基因；过程③表示将重组质粒导入大肠杆菌；过程④培养并筛选转基因大肠杆菌，级工程菌。

【详解】

A；过程①是以mRNA为模板合成DNA的过程；即逆转录过程，需要逆转录酶的催化，故A正确；

B；过程②表示利用PCR扩增目的基因；在PCR过程中，不需要解旋酶，是通过控制温度来达到解旋的目的，故B错；

C；利用氯化钙处理大肠杆菌；使之成为感受态细胞，故C错；

D；检测目的基因是否成功导入受体细胞的染色体DNA中；可以采用DNA分子杂交技术，故D正确。

故选AD。

【点睛】10、A:C【分析】【分析】

基因工程的工具：

（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。

（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

（3）运载体：常用的运载体：质粒；噬菌体的衍生物、动植物病毒。

【详解】

A；限制性内切核酸酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶；A正确；

B；DNA连接酶只能催化具有互补黏性末端或平末端的DNA片段之间形成磷酸二酯键；B错误；

C；质粒上必须有标记基因才可作为载体；便于筛选含有目的基因的受体细胞，C正确；

D；限制性内切核酸酶的作用是不切割自身DNA分子；只切割外源DNA，以保护自身DNA的安全，D错误。

故选AC。

【点睛】11、A:B:C【分析】【分析】

多聚酶链式反应扩增DNA片段：

1；PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

2；PCR反应过程是：变性→复性→延伸。

【详解】

A；基因扩增过程中需要特定的引物；该引物的作用是定位基因的位置，与模板链结合并为子链的延伸提供起点，扩增过程中引物和探针应同时结合到模板DNA上，A错误；

B、若最初该反应体系中只有逆转录而来的一个DNA分子，每个DNA分子需要1个探针，扩增n次，可得到2n个DNA分子，则共需要消耗2n-1个探针；B错误；

C；由题可知C值越大；该反应管内的荧光信号到达设定阈值经历的循环数越大，即每次循环出现的荧光信号越少。每次循环出现的荧光信号越少，代表被检测样本中的病毒数目越少，C错误；

D；如果样本内的病毒RNA被降解；会导致无法检测出样本内的正确病毒数目，D正确。

故选ABC。12、A:C【分析】【分析】

微生物发酵指的是利用微生物；在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。谷氨酸棒状杆菌为原核生物，为异养需氧型。

【详解】

A；用于发酵的谷氨酸棒状杆菌可以从自然界中筛选；也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，A正确；

B；发酵工程的中心环节是发酵过程；B错误；

C；由题意可知“在其发酵过程中；发酵罐中碳氮比（碳元素与氮元素的比值）为4∶1时，菌体大量繁殖而产生的谷氨酸少；当碳氮比为3∶1时，菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增”，说明在发酵过程中需调整发酵罐内营养成分的比例以保证先获得大量谷氨酸棒状杆菌，在获得大量发酵产物的目的，C正确；

D；谷氨酸棒状杆菌为需氧菌；其发酵过程需要适宜的温度和pH，所以在发酵罐内发酵需严格控制溶解氧、温度、pH等条件，D错误。

故选AC。13、B:D【分析】【分析】

分析题意可知:该实验目的是检测药物X和Y的抗癌活性；自变量是药物X或Y，因变量是检测细胞数量。

【详解】

A；加入等体积的二甲基亚矾溶作为空白对照；排除体积和溶剂等无关因素的影响，A正确;

B；抗生素具有杀菌(不是杀病毒)作用；为防止培养液被污染，可在培养液中加入一定量的抗生素，B错误;

C；要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来；需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，C正确;

D；分析实验结果；加入X的癌细胞个数是6.7×104，加入Y的癌细胞个数是5.3×105，说明药物X的抗癌效果比Y好，加入Z的癌细胞个数是8.0×106，与空白对照相比无抗癌作用，D错误。

故选BD。14、A:B:D【分析】【分析】

PCR原理：在高温作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

【详解】

A；PCR所需引物是一小段DNA；体内DNA复制所需引物是一小段RNA，A正确；

B；由于引物的序列具有特异性；所以PCR扩增的特异性一般是由引物的特异性决定的，当复性温度高时，只有引物与模板碱基匹配程度高，才能结合到模板上，而引物与模板匹配度低的区域则不能结合，所以引物长度和复性温度均会影响PCR扩增的特异性，B正确；

C；PCR产物电泳时的迁移速率与DNA分子的大小有关和凝胶的浓度有关；C错误；

D；在循环之前；常要进行一次预变性，以便增加大分子模板DNA彻底变性的概率，D正确。

故选ABD。三、填空题(共7题，共14分)15、略

【分析】【详解】

生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。【解析】①.直接②.食物③.生活必需品16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】远缘杂交的不亲和性细胞遗传细胞免疫、17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】刚果红染色法CR红色复合物透明圈透明圈18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】无菌毛霉其他菌种19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】冷酒精白色220、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系基因修饰或基因合成改造新的蛋白质自然界已存在21、略

【分析】【详解】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，其结果是生产自然界没有的蛋白质。【解析】蛋白质工程的结果是生产自然界没有的蛋白质四、实验题(共3题，共24分)22、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3'端延伸DNA链。

【详解】

（1）利用RNA得到相应DNA的方法为逆转录；起作用的酶为逆转录酶。在体外将DNA扩增的技术是PCR，中文名称为多聚酶链式反应。

（2）PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；该过程需要热稳定DNA聚合酶（Taq酶），热稳定DNA聚合酶(Taq酶)能够使脱氧核苷酸从引物的3'端开始连接，使子代DNA从5'向3'延伸；进行扩增时，还应选择一对方向相反的引物，且与模板的3'端结合，据图可知，应选择Ⅱ；Ⅲ。

（3）细胞内是否合成了由目的基因控制的蛋白质，使用抗原-抗体杂交法检测，为了检验表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用S蛋白与新冠病毒肺炎康复患者血清进行抗原-抗体杂交实验来进行检测，本实验是验证性实验，实验结果是唯一的，因此本实验结果是出现杂交带。【解析】(1)逆转录多聚酶链式反应。

(2)热稳定DNA聚合酶##Taq酶3'II；Ⅲ

(3)用表达的S蛋白与新冠病毒肺炎康复患者血清进行抗原-抗体杂交实验出现杂交带23、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

【详解】

（1）分析题意可知；研究人员取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后可通过稀释涂布平板法接种到培养基表面以获得单菌落。

（2）PCR技术是一项通过体外控制温度扩增DNA的技术，该技术中由于温度较高，起关键作用的酶是耐高温DNA聚合酶；PCR扩增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析题意，该技术能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是：引物是根据16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列设计合成的；PCR产物一般可通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定：凝胶中的DNA分子通过染色；可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来。

（3）分析题意，科学家将Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中，该过程中逆转录病毒是载体，能将外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纤维细胞；分析题意，实验目的是iPS细胞的产生不是由于培养基的作用，故实验的自变量是外源基因的有无，因变量是IPS细胞的产生情况，实验设计应遵循对照与单一变量原则，故可设计实验如下：将转入外源基因的细胞和没有转入外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中，在相同且适宜的条件下，如果只有转入外源基因的细胞转化成了iPS细胞，则可以证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用。【解析】(1)稀释涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高温DNA聚合酶引物能与16SrRNA基因特异性结合（引物是根据16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列设计合成的）琼脂糖凝胶电泳。

(3)逆转录病毒是载体，能将外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纤维细胞。将转入外源基因的细胞和没有转入外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中，在相同且适宜的条件下，如果只有转入外源基因的细胞转化成了iPS细胞，则可以证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用24、略

【分析】【分析】

基因突变是指DNA分子中发生碱基对的替换；增添和缺失；而引起的基因结构的改变。翻译是指在核糖体上，以mRNA为模板、以氨基酸为原料合成蛋白质的过程，该过程还需要tRNA来运转氨基酸。

密码子由位于mRNA上决定一个氨基酸的三个相邻的碱基组成。终止密码子的作用是终止翻译过程。

基因工程中检测目的基因在受体细胞内是否成功表达可以用抗原-抗体杂交技术。

【详解】

（1）由题干信息可知；黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因突变后，转录出的mRNA长度不变，说明其没有发生碱基对的增添和缺失，因为这两者改变会导致转录出的mRNA长度改变，因此推测其基因突变是由于碱基对替换。由于终止密码子提前出现，导致翻译提前终止，肽链变短，IDUA酶分子量变小，空间结构改变而失活。

（2）由题干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最终诱导核糖体通读mRNA上的遗传信息合成具有功能的全长蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构；功能相同，据此推测该抑制性tRNA可以携带氨基酸至核糖体并与终止密码子碱基配对使翻译过程继续。

（3）本实验目的是比较携带不同氨基酸的sup-tRNA的通读效果；需要保证实验组细胞含有突变IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶对实验结果产生干扰），同时保证在不同的实验组细胞中可以转录出携带不同中氨基酸的sup-tRNA，因此实验组中受体细胞中应该含有导入携带不同氨基酸的sup-tRNA基因和突变IDUA基因。若要判断各个实验组细胞中携带不同氨基酸的sup-tRNA是否成功诱导了具有功能的IDUA酶，可以采用该酶的特异性抗体对其进行检测，即进行抗原-抗体杂交。分析题图可知，与对照组（含正常IDUA基因的组）相比，含携带酪氨酸的sup-tRNA的受体细胞中表达的全长IDUA蛋白量比其他实验组都多，说明其能有效恢复细胞中全长IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上实验可知，携带酪氨酸的sup-tRNA能有效诱导核糖体对突变IDUA基因转录出的mRNA进行通读，进而产生具有正常功能的IDUA酶，因此利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠进行治疗，与不进行治疗的IDUA突变基因纯合小鼠相比，治疗组小鼠的IDUA酶活性高，组织黏多糖积累量少；同时，利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA基因敲除小鼠进行治疗，与不进行治疗的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，则其细胞内都没有相应mRNA，因此携带酪氨酸的sup-tRNA无法发挥作用，最终导致治疗组与不治疗组的IDUA酶活性与组织黏多糖积累量无明显差异。【解析】(1)替换减少。

(2)识别终止密码子并携带氨基酸至核糖体使翻译过程继续。

(3)携带不同氨基酸的suptRNA基因和变IDUA抗原一抗体杂交恢复细胞中全长IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突变基因纯合小鼠IDUA酶活性高，组织黏多糖积累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性与组织黏多糖积累量无明显差异五、综合题(共4题，共16分)25、略

【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【小问1】

结合题意可知；该过程是制备抗甘草酸的单克隆抗体，而抗原与抗体的结合具有特异性，故图1中所用抗原是甘草酸-牛血清白蛋白结合抗原；骨髓瘤细胞可以无限增殖，而细胞甲即效应B细胞无法无限增殖，所以需要两者结合，两者结合后经过筛选获得的细胞丁既能产生抗体又能无限增殖。【小问2】

图1中的②过程为促进细胞融合的过程；常用灭活的病毒（适用于动物细胞融合而不适用于植物细胞融合）作用于细胞膜上的糖蛋白，使细胞互相融合；细胞融合后要进行两次筛选，即图中的③和④过程，第一次筛选把杂交瘤细胞选出来，第二次筛选把能产生所需抗体的杂交瘤细胞选出来。【小问3】

图2所示的细胞核移植技术中涉及三个个体：提供细胞核的个体；提供卵母细胞的个体和代孕母体；而细胞核是遗传信息的中心，生物性状主要取决于细胞核，所以克隆动物的细胞核遗传物质来自提供细胞核的个体，但是细胞质中也有少量的遗传信息，所以与提供细胞核的个体不完全相同。

【点睛】

本题重点考查了单克隆抗体的制备和克隆动物的获取流程，解答此题需要考生能正确辨析图中的相关信息并能合理运用。【解析】【小题1】①.甘草酸—牛血清白蛋白结合抗原②.不能无限增殖③.既能产生抗体又能无限增殖。

【小题2】①.灭活的病毒②.筛选出杂交瘤细胞③.筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。

【小题3】①.提供细胞核的个体②.克隆动物的细胞核遗传物质来自提供细胞核的个体，但细胞质遗传物质来自提供卵母细胞的个体26、略

【分析】【分析】

单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一；特异性强的抗体．具有特异性强、灵敏度高；并可能大量制备的特点；单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞．利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），不需要A、B、AA、BB型细胞．第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞．最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是能无限增殖并能分泌特异性抗体，最后从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体；若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状不是全部像提供细胞核的个体，因为卵细胞细胞质中的线粒体遗传物质也能控制某些性状；卵母细胞的细胞质可使体细胞胞核全能性得到表达，所以选择减数第二次分裂中期的卵母细胞作为核移植的受体细胞．

【详解】

（1）图甲单克隆抗体制备过程；图乙克隆羊培育过程，都必须用到的动物细胞工程技术手段是动物细胞培养；

（2）诱导动物细胞融合最常用的诱导方法是灭活的病毒；

（3）利用基因工程将重组DNA导入细菌细胞中；这一步骤常用的方法是用钙离子处理细菌细胞；

（4）选用单克隆抗体技术将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合；再用选择培养基进行筛选，在该培养基上，未融合的细胞；互相融合的B淋巴细胞和互相融合的骨髓瘤细胞的细胞都会死亡，只有杂交瘤细胞才能生长；

（5）单克隆抗体与常规的血清抗体相比最大的优点是特异性强；灵敏度高、能大量制备；

（6）核移植时受体应选用减数第二次分裂的中期的卵母细胞。经图乙所得到的克隆羊“多利”的遗传特性与细胞核的供体白面绵羊并不完全相同的原因是克隆羊“多利”的细胞质遗传物质来自黑面绵羊的去核卵母细胞。

【点睛】

本题结合图解，考查单克隆抗体的制备过程和动物体细胞核移植技术，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。【解析】①.动物细胞培养技术②.灭活的病毒③.用钙离子处理细菌细胞④.选择⑤.未融合的细胞、互相融合的B淋巴细胞和互相融合的骨髓瘤细胞⑥.特异性强、灵敏度高、能大量制备⑦.MII中（或减数第二次分裂的中期）⑧.克隆羊“多利”的细胞质