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PAGEPAGE3土壤中分解尿素的细菌的分别与计数一、选择题1.下列能选择出分解尿素的细菌的培育基是(A)A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H4O、葡萄糖、尿素、琼脂、水B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H4O、葡萄糖、琼脂、水C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H4O、尿素、琼脂、水D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H4O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水[解析]依据题意可知,该培育基中必需要有尿素,故可解除B、D;而培育基中必需含有有机物作为碳源,又可解除C,故只有A符合题意。2.某同学在101、102、103倍稀释液的平均菌落数为2760、295和46,则菌落总数(个/mL)为(C)A.2.76×104 B.2.95×104C.3.775×104 D.4.6×104[解析]由于稀释倍数不同,计算时不能简洁相加,应乘上相应稀释倍数再取平均值。某同学在101、102、103倍稀释的平均菌落数为2760、295和46,由于101稀释倍数太小,获得的数据不精确,故应取后两者的平均值,则每毫升菌落总数为(295×102+46×103)÷2=3.775×104个/mL。3.在做分别分解尿素的细菌试验时,A同学从对应106培育基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生缘由可能有(A)①由于土样不同②由于培育基污染③由于操作失误④没有设置比照A.①②③ B.②③④C.①③④ D.①②③④[解析]A同学比其他同学的试验结果数据大很多,可能是由于选取的土样不同、培育基灭菌不彻底或操作过程中被杂菌污染,也可能操作失误,如配制培育基时混入其他含氮物质、稀释度不够精确等。4.请选出下列正确的步骤(D)①土壤取样②称取10g土壤放入盛有90g无菌水的锥形瓶中③吸取0.1mL进行平板涂布④依次稀释101、102、103、104、105、106、107稀释度A.①→②→③→④ B.①→③→②→④C.①→④→②→③ D.①→②→④→③[解析]分别分解尿素的细菌的过程是:①土壤取样→②称取10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中→④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度→③吸取0.1mL进行平板涂布,C正确。5.能够测定样品活菌数的方法是(A)A.稀释涂布平板法 B.干脆计数法C.重量法 D.比浊法[解析]干脆计数法是利用特定的细菌计数板,在显微镜下计算确定容积里样品中微生物的数量,不能区分死菌与活菌。重量法是用于微生物测定的一种方法,有湿重和干重,测蛋白质和DNA含量反映细胞的物质量。比浊法是在确定范围内,菌的悬液中细胞浓度与浑浊度成正比,即与光密度成正比,菌越多,光密度越大。活菌在相宜培育基和良好生长条件下通过生长形成菌落,此法又称活菌计数法。二、非选择题6.自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在探讨微生物时一般要将他们分别提纯,然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的试验,请回答有关问题。步骤如下:A.制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液B.为了得到更加精确的结果,你选用__稀释混合平板法__(稀释混合平板法、稀释涂布平板法)接种样品C.相宜温度下培育结果分析:(1)测定的大肠杆菌数,再对应稀释倍数的106的培育基,得到以下几种统计结果,正确可信的是(D)A.一个平板,统计的菌落数是23B.两个平板,统计的菌落数是22和26,取平均值24C.三个平板,统计的菌落数是21、5和52,取平均值26D.四个平板,统计的菌落数是21、30、24和25,取平均值25(2)一同学在稀释倍数的106的培育基中测得平板上菌落数的平均值为23.4,那么每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL)__1.17×108__。(3)用这种方法测定密度,实际活菌数量比测得的数量__多__,因为__当两个或多个细胞连在一起时,平板上视察到的是一个菌落。__。(4)某同学在测定大肠杆菌的密度时发觉,在培育基上还有其他杂菌的菌落,能否确定该大肠杆菌的品系被污染了?为什么?__不能;因为不能解除杂菌来自培育基或来自培育过程。__[解析]稀释涂布平板法是将土壤悬液对号放入平皿,然后再倒入溶化后冷却45℃左右的培育基,边倒入边摇匀,使样品中的微生物与培育基混合匀称,待冷凝成平板后,分别培育后,再挑取单个菌落,干脆获得纯培育,故稀释涂布平板法结果更精确;结果分析:(1)D中设有多个重复组,且试验结果相差不大,故D结果最可信;(2)由于菌落数的平均值为23.4,稀释倍数是105,所取稀释液的体积为0.2mL,故每毫升样品中的菌落数是23.4÷
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