妊娠的生物化学检验hCG测定对早期妊娠诊断有重要意义对与妊娠相关疾病滋养细胞肿瘤等疾病的诊断鉴

妊娠的生物化学检验1.hCG测定对早期妊娠诊断有重要意义，对与妊娠相关疾病、滋养细胞肿瘤等疾病的诊断、鉴别和病程观察等有一定价值。【测定方法】（1）hCG

定性试验目前应用最广泛的hCG定性试验方法是胶体金免疫层析测定法（GICA）即金标抗体法。具有快速、敏感和操作简便的特点，可作为家庭监测受孕应用，目前作为尿液hCG的首选检测方法。但缺点是容易出现假阳性和假阴性结果，不易开展质量控制（2）hCG定量检测

主要有RIA、ELISA、ECLIA、、FIA等。RIA和ELISA有很高的灵敏度和准确度，重复性较好，是hCG测定比较理想的方法。缺点是需要较昂贵的仪器设备。ELISA的酶促反应受温度、时间、PH值、底物浓度、酶浓度及质量等因素的影响

ECLIA法灵敏、特异、快速和准确地测定血液中各种激素的浓度，无核素污染，可用于自动分析仪进行批量测定，是理想的测定方法【临床意义】

1.妊娠诊断

定量测定血液或尿中的hCG是诊断妊娠的最重要标志。非孕妇女﹤25U/L，当妊娠1～2.5周时，血清和尿中的hCG水平即可迅速升高，在妊娠8～10周达到高峰，至孕期第4个月始降至中等水平，并一直维持到妊娠末期。妊娠后35～50天hCG可升至大于2500U/L。60～70天可达80000U/L，多胎妊娠者尿hCG常高于一胎妊娠。异位妊娠时hCG水平较低，只有60％的异位妊娠者尿妊娠实验为阳性，因此，尿液妊娠实验阴性并不能排除异位妊娠的可能性。如HCG在2500U/L以下，并逐渐下降，则有流产的或死胎的可能，当降至600U/L则难免流产。

在保胎治疗中，如hCG仍继续下降说明保胎无效，如hCG不断上升，说明保胎成功。

不完全流产者如子宫内尚有胎盘组织残存，hCG检查仍可呈阳性；完全流产或死胎时hCG由阳性转阴性，可作为吸宫治疗参考。2.异位妊娠与流产①葡萄胎、恶性葡萄胎、绒毛膜上皮癌及睾丸畸胎瘤等患者尿中hCG显著升高，可达10万到数百万U/L，可用稀释试验诊断。如妊娠12周以前1：500稀释尿液呈阳性，妊娠12周以后1：250稀释尿液呈阳性，对葡萄胎诊断有价值。1：100～1：500稀释尿液呈阳性对绒毛膜癌也有诊断价值如男性尿中hCG升高，要考虑睾丸肿瘤如精原细胞癌、畸形及异位HCG瘤等②滋养层细胞肿瘤患者术后3周后尿hCG应﹤50U/L，8～12周呈阴性；如hCG不下降或不转阴，提示可能有残留病变3.滋养细胞肿瘤诊断与治疗监测（二）血清胎盘催乳素测定HPL来源于胎盘合体细胞，母体血中的HPL水平与胎盘发育密切相关，因此在产前诊断时，测定孕妇血中的HPL可用于判断胎盘的功能和胎儿官内发育迟缓也有一定诊断价值

【测定方法】主要有RIA、ELISA和ECLIA

未妊娠妇女：﹤0.5mg/L【临床意义】1.诊断滋养叶细胞疾病葡萄胎患者血中hPL值较正常妊娠值低，但hCG值反而增高。所以hCG/hPL比值比正常妊娠时高100倍2.早孕监测连续测定hPL可预测先兆流产，此时hPL值偏低或呈下降趋势3.高危妊娠的监护妊娠35周后孕妇血浆hPL值低于4.0mg/L提示有先兆子痫、胎盘功能不良或胎儿宫内窒息等情况（三）雌激素的测定由于雌激素产生具有昼夜节律的变化，因此在动态观察时要求每天均在同一时间采样为增加唐氏筛查实验的灵敏度，目前，一般在中期妊娠（15～20周）进行母体血清三联筛查，包括母体血清AFP、hCG、游离雌三醇（uE3）水平的测定uE3是妊娠期间主要的性激素，由胎儿产生。在唐氏妊娠时，母体血清AFP及uE3水平较低，而hCG水平则较高。母体血清三联筛查的诊断准确性为60％，假阳性率为5％（四）孕酮的测定妊娠期孕酮主要来源于胎盘，血浆孕酮水平监测可用来观察胎盘功能，评价妊娠状况孕酮下降可见于异位妊娠时孕酮水平较低，如孕酮＞78nmol/L时，基本可排除异位妊娠；先兆流产、胎儿发育迟缓、死胎、严重的妊娠高血压综合征等患者血中孕酮水平降低，单次血清孕酮水平≤15.6nmol/L，提示死胎，先兆流产时，孕酮持续下降常提示有流产可能

孕酮增高可见于轻度的妊娠高血压综合征、糖尿病孕妇、多胎妊娠、葡萄胎等孕酮的检测通常采用RIA和CLIA法（五）羊水胆红素测定通过间断性测定羊水胆红素来监测胎儿是否发生溶血性疾病。在450nm波长下测定羊水的吸光度，吸光度的增加幅度与孕周及溶血性疾病的程度具有较好的相关性。吸光度的增加幅度升高后，若持续下降表明预后良好，即胎儿可幸存；若继续升高或不变提示可能存在严重的胎儿成熟红细胞增多症。

母体高胆红素血症或镰状细胞疾病也可导致羊水胆红素升高。（六）羊水AFP测定

检验羊水中AFP可用于发现胎儿先天性缺陷。当AFP高于正常时预示胎儿神经管缺损(NTDs)发生的风险性增加，可能存在脊柱裂、无脑儿、脑膨出、腹裂、脐膨出等，羊水与母体血清AFP已被认为是产前诊断的指标。当AFP降低时预示唐氏综合征的风险较高。（七）胎儿纤维连接蛋白胎儿纤维连接蛋白(tetalfibronectin,fPN)，是子宫绒毛膜细胞外的基质成分，存在于绒毛膜与蜕膜之间，主要由滋养层细胞产生，是一种对绒毛膜和蜕膜起连接和黏附作用的糖蛋白。在孕24-35周，宫颈阴道分泌物中fPN的水平可反映羊膜的完整性，与是否发生早产有很大的相关性。（八）胎儿肺成熟度测定（FLM）评价胎儿肺成熟度能帮助判断胎儿是否能获得最佳生存，主要用于①预产期不确定需进行剖腹产前、②妇科检查有提早分娩迹象，如早产、羊膜早破、母体有严重高血压或肾脏疾病、胎儿呼吸窘迫等

测定项目主要有5种：卵磷脂/鞘磷脂比值（L/S）、羊水泡沫试验、羊水吸光度、肺泡表面活性物质测定、薄层小体计数。肺表面活性物质中最具表面活性作用的脂质主要是卵磷脂，在羊水中的浓度随着妊娠期的延长而增加。鞘磷脂是肺表面活性物质的次要成分，几乎所有鞘磷脂都来自于不成熟的肺。羊水L/S常随妊娠期延长而增加，与胎儿肺成熟度密切相关。L/S>2.0、DSPC>5mg/L提示肺成熟。母亲有糖尿病，L/S>3、DSPC>10mg/L,才提示肺成熟。在多胎妊娠，对每个胎儿羊膜腔均应取样。1.羊水卵磷脂/鞘磷脂比率羊水中肺表面活性物质达到足够浓度时，能够形成一个高度稳定的膜，从而支撑泡沫的架构。但乙醇能将该类物质从膜中除去。在固定体积的未稀释羊水中，逐渐增加乙醇量并混合，在羊水能支持泡沫稳定的情况下，记录所需乙醇的最大体积。

泡沫稳定指数（FSI）＞0.47为肺成熟。实验必须在20～25℃下进行，温度过高或过低都会影响泡沫的稳定性。2.羊水泡沫试验是以羊水中磷脂类物质的含量与其浊度之间的关条为基础。测定的是设长为650nm处羊水的吸光度值。当A＞0.75时为阳性，表明肺成熟;当A＜0.05时为阴性，表明胎儿肺未成熟。3.羊水吸光度（A）

荧光偏振分析(FPA)是目前最普遍使用的定量方法，比测定L/S比率更加精确。

荧光染料NBD-磷脂酰胆碱(NBD-PC)或PC-16加人到羊水中后，会结合到磷脂等表面活性物质或清蛋白上，具有不同的偏振光。具有表面活性的磷脂含量越多,荧光偏振值越低，测得的偏振光值为表面活性物质/清蛋白的函效。也可直接用表面活性物质mg/g清蛋白表示。荧光偏振值<260mP提示肺明显成熟。在260-290mP，说明肺正向成熟过渡;>290mP提示肺不成熱;或表面活性物质>70mg/g清蛋白为肺成熟。

4.肺泡表面活性物质测定

薄层小体是肺泡Ⅱ细胞胞质中的特殊结构，是肺表面活性物质在细胞内存储的地方，通过胞吐作用到达肺泡表面，可进入到羊水中。

表面活性物质颗粒从2~20fl不等。使用血细胞计数仪的血小板通道，可以对羊水中薄层小体微粒直接进行计数测定。≥50000/μl（离心标本），提示肺成熟。

5.薄层小体计数（七）胎儿先天性缺陷筛查常见的胎儿先天性缺陷主要有神经管缺陷（NTDs