2025年外研版三年级起点选择性必修3生物上册月考试卷含答案

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A.随着发酵的进行发酵液的pH会越来越大B.集气管里储存的氧气可以被酵母菌利用C.发酵过程中产生的酒精不会影响酵母菌的代谢D.可用重铬酸钾溶液检验发酵液中是否含有酒精2、下列有关传统发酵技术的叙述，正确的是（）A.制作果酒最快捷的途径是先制果醋，再制果酒B.酿制果醋所需酵母菌和醋酸菌的发酵底物、条件完全相同C.制作腐乳需利用毛霉产生的酶分解豆腐中的蛋白质等物质D.制作果酒果酷和腐乳过程都应防止微生物的生长繁殖3、下图表示单克隆抗体的制备过程。相关叙述错误的是（）

A.过程①注射特定抗原的目的是使小鼠产生能分泌特定抗体的浆细胞B.过程②诱导融合产生的融合细胞都能产生单克隆抗体，且能无限增殖C.过程③需要提供一定浓度的CO2，目的是维持培养液的pHD.单克隆抗体的主要优点有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备4、“治疗性克隆”可用胚胎干细胞克隆出人体不同的组织、细胞，以用于医学研究和治疗。下列相关叙述错误的是（）A.生殖性克隆用于产生新个体，而治疗性克隆用于治疗疾病B.我国政府不赞成、不允许、不接受任何治疗性克隆人实验C.用病人的细胞产生胰岛细胞以治疗糖尿病属于治疗性克隆D.治疗性克隆可解决器官移植时供体器官不足和免疫排斥问题5、为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞。下列叙述错误的是（）

A.用限制酶BsaBI和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因B.与只用KpnI相比，KpnI和XhoI处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确C.在含卡那霉素的培养基上能存活的植物细胞即为成功转入目的基因的细胞D.用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中6、关于蛋白质工程的叙述，错误的是（）A.定点诱变技术用于蛋白质的中改B.蛋白质工程可能创造出新的蛋白质C.蛋白质工程又被称为第二代基因工程D.在蛋白质分子中引入二硫键可以提高蛋白质的热稳定性评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)7、人参是一种名贵药材；具有良好的滋补作用。口服α-干扰素在慢性乙肝；丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程，①~④表示相关的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ为限制酶，它们的识别序列及切割位点如表所示。下列选项正确的是（）

。限制酶。

识别序列和切割位点。

EcoRI

BamHI

A.步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是干扰素基因两端的部分核苷酸序列B.科研人员在两种引物的一端分别加上了GAATTC和GGATCC序列，目的是方便后续的剪切和连接C.在过程③中T—DNA整合到受体细胞的染色体DNA上D.过程④中，科研人员最终未能检测出干扰素基因，其原因可能是干扰素基因未能导入人参愈伤组织细胞8、有关质粒的叙述，下述说法不正确的为（）A.质粒是细菌细胞不可缺少的遗传物质B.质粒可用于基因的扩增和蛋白质的表达C.每个细菌细胞都都含有一个质粒D.质粒都由4种脱氧核糖核苷酸脱水缩合而成9、利用PCR技术扩增目的基因；其原理与细胞内DNA复制类似（如图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列叙述正确的是（）

A.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列B.设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连C.退火温度过高可能导致PCR得不到任何扩增产物D.每一循环都消耗引物和原料，需要在操作中及时补充10、生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分数区，将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示，下列说法正确的是（）

A.倒成平板后直接培养可判断有无污染B.倒成平板后需要进行灭菌处理C.图示结果表明该菌需要生长因子乙和丙D.生长图形法还可用于某些菌种的筛选11、为保障公共健康；需要定期对公共饮用水进行卫生检测。饮用水的卫生标准是100mL不得检出大肠杆菌或者1000mL不超过3个大肠杆菌。若要确定饮用水是否合格，可采用膜过滤法检测，过程如下图所示。下列相关叙述错误的是（）

A.检测前一般需要对水样收集瓶、培养皿、镊子等进行干热灭菌B.完成过滤后需将滤膜置于固体培养基上，在25℃下培养观察C.为减少实验误差，应按照上述实验步骤多次取样重复进行检测D.可用血细胞计数板直接计数法替代膜过滤法检测饮用水中的大肠杆菌数量12、抗体的结构分为V区（识别并结合抗原的区域）和C区（抗体的支架），鼠源抗体具有外源性，会被人体免疫系统当作抗原而清除。用人抗体的C区替换鼠源抗体的C区，保留鼠单抗的V区，可构建人一鼠嵌合抗体，操作流程如图所示。下列相关说法错误的是（）

A.与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞为能分泌抗体的浆细胞B.用选择性培养基可筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞C.为获得结构正确的嵌合抗体，受体细胞应选用大肠杆菌D.人一鼠嵌合抗体在保留抗体特异性的同时外源性下降13、下列关于限制酶和DNA连接酶的理解，错误的是（）A.限制酶能在特定部位的两个核苷酸之间切断磷酸二酯键B.DNA连接酶可以恢复DNA分子中的氢键，将两条DNA片段的黏性末端之间的缝隙连接起来C.在基因工程操作中，可以用DNA聚合酶代替DNA连接酶D.限制酶广泛存在于动植物体内，微生物内很少分布14、胚胎干细胞体外培养时，要最大程度地抑制其分化、维持全能性，细胞为圆形或扁圆形，结构相对简单；细胞核大，细胞质少，核质比高。输卵管上皮细胞能合成、分泌细胞生长因子和细胞分化抑制因子。科学家通过病毒介导或者其他的方式，将四种与多能性相关的转录因子导入宿主细胞，使其重新编程为iPS细胞，iPS细胞特性与胚胎干细胞极为相似。下列叙述正确的是（）A.培养iPS细胞时可加入输卵管上皮细胞，以维持iPS细胞的未分化状态和全能性B.介导转录因子导入皮肤细胞时，应用灭活的病毒，以防止皮肤细胞被感染C.重编程为iPS细胞时，关闭了体细胞特异性表达的基因，开启了使细胞全能性分化的基因D.可以通过观察细胞形态，初步鉴定iPS细胞是否诱导成功15、先天性肾上腺皮质增生症是一种单基因遗传病；下图为该病的某家系图，这对夫妇为了避免再次妊娠患儿，胚胎植入前进行了遗传学检测（PGD），检测结果如下表，以下叙述正确的是（）

。胚胎编号PGD检测结果EA1携带母源致病基因EA2无致病基因EA3携带母源致病基因EA4携带母源致病基因EA5携带父源致病基因EA6致病基因纯合EA7单细胞扩增失败A.检测时应选择滋养层的少许细胞进行检测B.该过程中未用到核移植技术C.该技术可能会引发一定的伦理争议D.EA1～EA5均可以作为植入的胚胎评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)16、一般包括______、______等技术17、微生物________________的方法很多，最常用的是_____________和__________________。18、20世纪70年代以后；以基因工程为代表的一大批生物技术成果，进入人类的生产和生活，特别是在医药和农业生产上发挥了极大的作用，但是与其他高新技术一样，生物技术也同样具有双刃剑效应。如同其他高新技术一样，转基因成果和转基因技术也需要你的理性看待。在转基因生物安全方面；

（1）你认为转基因生物有哪些优点，①____________②___________③__________。

（2）你认为转基因生物有哪些缺点，①____________②___________③__________。

（3）你对于转基因生物的态度是__________。19、通过统计平板上的________________，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在_________________________的平板进行计数。20、PCR技术的DNA体外复制环境有DNA解旋酶、耐热DNA聚合酶、DNA母链、4种脱氧核苷酸和__________，它能使DNA聚合酶能够从引物的________端开始连接脱氧核苷酸。（人教P58列表），而引物是一段______________片段，用于PCR的引物长度通常为____个核苷酸。21、将DNA粗提取液在____________℃的恒温水浴箱中保温10—15分钟。22、纯化DNA，去除杂质有________________个方案。23、沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌；被感染了沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染的食品，会使人发生食物中毒。沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死。肉桂精油是从肉桂树中提炼获得的，具有不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发的特性，能抑制沙门氏菌的繁殖。回答下列问题：

（1）培养沙门氏菌时要进行无菌操作，常用的灭菌方法有________（答出两种）。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板________（填“倒置”或“正置”）。单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是________。

（2）从鸡粪便取样，经选择培养后需要经过一系列________才能将样品涂布到鉴别培养基上。对获得的沙门氏菌常采用________的方法长期保存。

（3）根据题干信息，为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中储存、加工食品的方法是________。

（4）根据肉桂精油的化学特性，可采用________法来提取，提取过程中影响精油品质的因素有________。24、应用分析与比较的方法，对生殖性克隆与治疗性克隆进行列表阐述｡

生殖性克隆与治疗性克隆的比较。比较项目生殖性克隆治疗性克隆含义__________用到的技术__________目的__________评卷人得分四、判断题(共3题，共6分)25、转基因生物可能会破坏生态平衡（______）A.正确B.错误26、酿酒酵母的最适生长温度为30度。()A.正确B.错误27、生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等。（选择性必修3P111）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共1题，共6分)28、干燥综合征（SS）是临床常见的一种自身免疫病；患者血清中存在多种抗体，其中以SSB抗体特异性最强。下图表示科研人员利用基因工程技术获得SSB蛋白及利用SSB蛋白对小鼠进行免疫的过程。回答下列问题：

(1)利用RNA通过①过程获得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。为了针对性获得cDNA，应如何设计逆转录第一步时的DNA引物______，设计引物的目的是______。

(2)为确保与pET41a质粒定向连接，对逆转录得到的cDNA扩增时，应在相应引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位点。

(3)③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌，目的是______，然后将处理后的大肠杆菌先接种在添加_______的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加______的培养基（B）上培养，收集_______菌落进一步纯化后将菌体破碎处理；筛选得到SSB蛋白。

(4)将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，则后续实验内容应为抽取小鼠血液_______。评卷人得分六、综合题(共2题，共18分)29、填空题：

（1）腐乳制作的过程中起主要作用的是________，它是一种丝状真菌，代谢类型为________________________。分布广泛；生长迅速，具有发达的白色菌丝。

（2）该微生物产生的_________可以将豆腐中的_________分解成小分子的_________和_________；________可以将__________水解成_________和_____。

（3）通过腌制并配以各种辅料，使蛋白酶作用缓慢，促进其他生化反应，生成腐乳的香气。配制卤汤时，加酒可以_________________，同时能使腐乳具有独特的香味，卤汤中酒精含量应控制在____左右，酒精含量过高___________；酒精含量过低，则不足以抑制微生物的生长，可能导致豆腐变质。卤汤中的香辛料既可以调制腐乳的风味，也具有_______________的作用。30、学习下列材料；并回答问题。

人造肉-——环境保护的新秀。

随着人口增长；肉类资源逐渐供不应求。传统肉类生产消耗大量自然资源，而人造肉的诞生大幅减少对自然资源的消耗，这为人造肉市场创造了机会。

人造肉主要包括细胞培养肉和植物蛋白肉。细胞培养肉是利用动物干细胞培养出的动物组织；其生产流程如下图所示。由于产量低，成本高等原因，细胞培养肉尚处于研究阶段。

植物蛋白肉是利用大豆蛋白等原料生产出的植物性肉制品；目前已成功商业化。但植物蛋白肉在颜色；风味上与动物肉差异较大。

对动物肉风味的分子机制研究表明；血红素辅因子是动物肉具有独特风味的关键。研究发现来自大豆液泡内的豆血红蛋白在烹任过程中会释放血红素辅因子。研究者将豆血红蛋白基因（LG）转入大肠杆菌，利用大肠杆菌发酵实现经济高效地生产豆血红蛋白。但大肠杆菌不能对豆血红蛋白进行翻译后修饰和分泌。故研究者尝试构建豆血红蛋白的酵母菌表达系统：①在LG末端加上His标签，构建LG-His融合基因（His标签的表达产物易与镍离子结合，且不改变目的蛋白的结构）；②将LCG-His整合到分泌型载体pPIC9K上；③将构建好的表达载体转入酵母菌并筛选阳性菌进行培养；④利用His标签的表达产物与镍离子的亲和性分离出豆血红蛋白。通过这种方法可以高效获得豆血红蛋白，将其添加到植物蛋白内中，以提升颜色和风味上的拟真性。

相比传统畜牧业；生产人造肉能够节省约75%的用水，减少约87%的温室气体排放量，减少约95%的土地占用量。人造肉在满足日益增长的肉类需求的同时，也有望成为环境保护问题的一个解决方案。

（1）生产细胞培养肉采用的细胞工程技术是________，初始细胞来源选择干细胞的原因是_______。

（2）为确保LG-His融合基因___________过程的启动，pPIC9K载体上还需插入启动子，它是__________的结合位点。

（3）相比大肠杆菌，酵母菌细胞具有__________，能够对豆血红蛋白进行翻译后修饰。对筛选的阳性酵母菌进行扩大培养，一段时间后进行离心，取___________（上清液/菌体）以获得豆血红蛋白。

（4）在豆血红蛋白的制备过程中，His标签起到了重要作用，对His标签作用的理解，正确的叙述是________。

A．His标签与LG融合；可以促进LG表达产生更多的豆血红蛋白。

B．His标签作为标记基因；便于筛选含有表达载体的阳性酵母菌。

C．His标签与LG融合；利于引导豆血红蛋白分泌到酵母菌细胞外。

D．His标签表达产物易与镍离子结合；便于对豆血红蛋白分离纯化。

（5）为确定添加了豆血红蛋白的植物蛋白肉是否能够产生丰富的血红素辅因子且具有动物肉相似的口感，还需要进一步的实验。请写出实验思路：__________。

（6）与生产传统肉类相比，生产人造肉会消耗更少的土地等自然资源，生态学上将维持人类生存所需的生产资源和吸纳废物的土地及水域的面积称为__________。生产人造肉比生产传统肉类减少约87%的温室气体排放量，减少的温室气体来源包括__________（请列举两点）。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、D【分析】【分析】

参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：

（1）在有氧条件下，反应式如下：

（2）在无氧条件下，反应式如下：

【详解】

A；酵母菌代谢产生的二氧化碳会溶解在发酵液中；使发酵液的pH变小，A错误；

B；集气管里收集到的是酵母菌细胞呼吸产生的二氧化碳；不是氧气，B错误；

C；发酵过程中产生的酒精是代谢的产物；积累过多会影响酵母菌的代谢，C错误；

D；在酸性条件下；可用重铬酸钾溶液检验发酵液中是否含有酒精，D正确。

故选D。2、C【分析】【分析】

1；在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖；再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2；醋酸菌好氧型细菌；当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。

3；豆腐的主要营养成分是蛋白质和脂肪；都是大分子有机化合物，难以消化、吸收，毛霉、酵母菌等多种微生物分泌的蛋白酶，能将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸，在多种微生物的协同下，豆腐转变成腐乳。

【详解】

制作果酒最快捷的途经是利用酵母菌进行发酵；A错误；酵母菌发酵底物是一般是葡萄糖，醋酸菌的发酵底物可以是葡萄糖，也可以是乙醇，B错误；毛霉等多种微生物分泌的蛋白酶，能将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸，C正确；制作果酒；果醋和腐乳过程都需要特定微生物的生长繁殖，果酒制备需要的菌种是酵母菌，果醋制备需要的菌种是醋酸菌，腐乳制备需要的菌种是毛霉，D错误。

故选C。3、B【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

A；过程①是向小鼠注射特定抗原；刺激其发生特异性免疫，产生能分泌特定抗体的浆细胞，A正确；

B；过程②诱导融合产生的融合细胞中存在骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞的融合；不能产生抗体，B细胞和B细胞融合形成的细胞不能无限增殖，B错误；

C、过程③进行动物细胞培养，需要一定浓度的CO2；维持培养液的pH，C正确；

D；单克隆抗体的主要优点有特异性强、灵敏度高；并可能大量制备，D正确。

故选B。

【点睛】4、B【分析】【分析】

对克隆人的争议：

（1）否定的理由：克隆人严重违反了人类伦理道德；是克隆技术的滥用；克隆人冲击了现有的婚姻；家庭和两性关系等传统的伦理道德观念；克隆人是在人为的制造在心理上和社会地位上都不健全的人。

（2）肯定的理由：技术性问题可以通过胚胎分级；基因诊断和染色体检查等方法解决．不成熟的技术也只有通过实践才能使之成熟。治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植；生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的；即用于产生人类个体。

【详解】

A；生殖性克隆就是以产生新个体为目的的克隆；即用生殖技术制造完整的克隆人，治疗性克隆的目的是治疗疾病，A正确；

B；我国政府不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验；B错误；

C；将病人的胚胎干细胞在一定的条件下；通过离体培养和诱导分化形成胰岛细胞以治疗糖尿病，属于治疗性克隆，C正确；

D；治疗性克隆的目的是培养出能够用于医学治疗的供体器官；以解决目前临床上存在的供体器官不足和移植后免疫排斥的问题，D正确。

故选B。5、C【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、复制原点和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4)）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术和PCR技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质一抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；由图可知；GNA、ACA都含有限制酶BsaBI的酶切位点，故用限制酶BsaBI和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因，A正确；

B；图中质粒与ACA-GNA上都含有KpnI和XhoI的酶切位点；与只用KpnI相比，KpnI和XhoI处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确，避免反向连接，B正确；

C；在含卡那霉素的培养基上能存活的植物细胞为成功转入目的基因的细胞或含有普通质粒的细胞；C错误；

D；PCR技术可用于基因探针的制备；可用来检测目的基因是否导入受体细胞，即用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中，D正确。

故选C。6、A【分析】【分析】

蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出的第二代基因工程；因为是对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质，所以必须通过基因修饰或基因合成实现。

【详解】

A；运用基因的定点诱变技术改造基因的碱基序列；属于小改，A错误；

B；蛋白质工程是通过修改基因或创造合成新基因来改变生物的遗传和表达形状；合成新的蛋白质，B正确；

C；蛋白质工程是以基因工程为基础延伸出来的第二代基因工程；包含多学科的综合科技工程领域，C正确；

D、蛋白质工程可以通过改造酶的结构，有目的地提高酶的热稳定性，如在T4溶菌酶中引入二硫键提高了它的热稳定性；D正确。

故选A。二、多选题(共9题，共18分)7、A:B:D【分析】【分析】

分析图解：图中过程①表示利用PCR技术扩增目的基因；过程②表示基因表达载体的构建，过程③表示将重组质粒导入根瘤农杆菌，过程④表示目的基因的检测和鉴定。

【详解】

A；步骤①中；利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是干扰素基因两端的部分核苷酸序列，A正确；

B；由于需要用EcoRⅠ、BamHⅠ两种限制酶切割目的基因和质粒；因此科研人员还在两种引物的一端分别加上了GAATTC和GGATCC序列，以便于后续的剪切和连接，B正确；

C；在过程③将重组质粒导入根瘤农杆菌；而根瘤农杆菌在侵染人参愈伤组织细胞时，T-DNA才整合到受体细胞的染色体DNA上，C错误；

D；干扰素基因未能导入人参愈伤组织细胞或导入人参愈伤组织细胞的干扰素基因未能转录；这会导致通过该方法不能检测出干扰素基因，D正确。

故选ABD。8、A:C【分析】【分析】

质粒是细胞染色体外能够复制得很小的环状DNA分子。广义上说几乎所有的细胞都有质粒(比如线粒体DNA)；狭义上指存在于许多细菌酵母菌；放线菌等生物中的质粒。质粒与染色体DNA一样都是双链DNA分子，质粒亦可携带遗传信息，质粒上面一般含有几个到几百个基因，控制着细菌的抗药性、固.氮、抗生素生成等性状。然而质粒也有一些与染色体DNA不同的特性。

质粒具有以下特点；质粒可以独立复制；质粒很小细菌质粒的分子量乙般较小，约为细菌DNA的0.5%~3%；质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用。

【详解】

A；细菌的遗传物质是DNA；质粒是某些细菌细胞质中小型的环状DNA，质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用，因此，质粒不是细菌细胞不可缺少的遗传物质，A错误；

B；质粒可以独立复制；因此，目的基因与质粒连接后形成重组质粒之后，目的基因可随着质粒DNA的复制而复制，质粒上有基因存在，如质粒上有抗性基因的存在，因此质粒还可控制蛋白质的表达，B正确；

C；细菌细胞不都含有质粒；且每个细菌细胞不都含有一个质粒，C错误；

D；质粒是小型的环状DNA分子；因此，是由4种脱氧核糖核苷酸脱水缩合而成的，D正确。

故选AC。

【点睛】9、A:B:C【分析】【分析】

PCR技术：①概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，所利用的原理为DNA分子的复制，因此PCR技术一般用于基因扩增；②原理：DNA复制；③条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指数的方式扩增，即约2n；⑤过程：高温变性；低温复性、中温延伸。

【详解】

A；用PCR方法扩增目的基因时；只要知道目的基因前后的序列用以设计引物就可以了，因此不必知道基因的全部序列，A正确；

B；PCR过程中需要两种引物分子；不同引物能靠碱基互补配对而形成（部分）双链的话会造成引物不能同模板DNA结合，也就不能发生进一步的链式反应，这一点需要避免，B正确；

C；若退火温度过高；则引物与模板DNA无法形成部分双链，PCR也就不能发生，C正确；

D；PCR技术中的引物和原料是一次性添加的；不需要补充，D错误。

故选ABC。

【点睛】10、A:C:D【分析】【分析】

本题考查微生物的培养及鉴定。据图分析；菌落主要分布于添加了乙和丙的区域的交界处，说明该嗜热菌所需的生长因子是乙和丙。

【详解】

A；倒平板后不接种任何菌种直接进行培养观察有无菌落的出现；可以判断培养基有无污染，A正确；

B；在制作培养基的过程中；需要先进行灭菌再倒平板，B错误；

C；分析题图可知；嗜热菌在添加了乙、丙生长因子的区域生长，故该菌需要的生长因子是乙和丙，C正确；

D；不同的菌种所需的生长因子不同；利用生长图形法可用于某些菌种的筛选，某菌种只会在提供其需要的生长因子区域生长，D正确。

故选：ACD。11、B:D【分析】【分析】

细菌的数目可以通过滤膜法来测定。将已知体积的水过滤后；将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养。在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈黑色，根据黑色菌落的数目，计算水样中大肠杆菌的数量。微生物接种时，为了避免其它杂菌的污染，接种过程要进行无菌操作。灼烧灭菌常适用于接种环；接种针；干热灭菌常适用于玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具；高压蒸汽灭菌常适用于无菌水、培养基。

【详解】

A；检测前需要对水样收集瓶、滤膜、培养基、镊子灭菌；防止杂菌干扰，A正确；

B；完成过滤后需将滤膜置于固体培养基上；在37℃下培养观察，B错误；

C；为减少实验误差；按照上述实验步骤多次取样重复进行检测，取平均值作为实验数据，C正确；

D；大肠杆菌较小；不能用血细胞计数板直接计数法替代膜过滤法检测，D错误。

故选BD。12、A:B:C【分析】【分析】

1；骨髓瘤细胞为无限增殖的细胞；分裂能力强，制备单克隆抗体的过程中还需该杂交细胞具备分泌特异性抗体的功能，而浆细胞为能够分泌抗体的细胞，故与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞为能分泌抗体的浆细胞。

2；骨髓瘤细胞与B淋巴细胞在融合的过程中可能会出现多种融合结果；如骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合，B淋巴细胞与B淋巴细胞融合，而实验需要的是骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合的细胞，需要用选择性培养基进行筛选，但只能筛选出能杂交瘤细胞，而要筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞则需要进行专一性抗体检测。

【详解】

A；与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞取自脾脏；不一定是能分泌抗体的浆细胞，A错误；

B；骨髓瘤细胞与B淋巴细胞在融合的过程中可能会出现多种融合结果；如骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合，B淋巴细胞与B淋巴细胞融合，而实验需要的是骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合的细胞，需要用选择性培养基进行筛选，但是只能筛选出能杂交瘤细胞，而要筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞则需要进行专一性抗体检测，B错误；

C；抗体为分泌蛋白；需要内质网和高尔基体对其进行加工，大肠杆菌为原核生物，无高尔基体和内质网，为获得结构正确的嵌合抗体，受体细胞不应该选用大肠杆菌，C错误；

D；结合题干“鼠源抗体具有外源性；会被人体免疫系统当作抗原而清除。用人抗体的C区替换鼠源抗体的C区，保留鼠单抗的V区，可构建人一鼠嵌合抗体”可知，该抗体不是原本的鼠源抗体，保留了其V区，但是其中还有一部分来自于人本身，使得人一鼠嵌合抗体在保留抗体特异性的同时外源性下降，D正确。

故选ABC。13、B:C:D【分析】【分析】

限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。

DNA连接酶是链接两个DNA的片段；形成磷酸二酯键。

【详解】

A；限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列；能在特定部位的两个核苷酸之间切断磷酸二酯键，A正确；

B；DNA连接酶可以恢复DNA分子中的磷酸二酯键；将两条DNA片段的黏性末端之间的缝隙连接起来，B错误；

C；DNA聚合酶将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端；形成磷酸二酯键，DNA连接酶是链接两个DNA的片段，形成磷酸二酯键。在基因工程操作中，不可以用DNA聚合酶代替DNA连接酶，C错误；

D；限制酶主要来源于微生物；D错误。

故选BCD。14、A:C:D【分析】【分析】

科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞；获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，将它称之为诱导多能干细胞，简称iPS细胞。因为诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内，理论上可以避免免疫排斥反应，因此iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞。

【详解】

A；由题干可知；输卵管上皮细胞能合成、分泌细胞分化抑制因子，为了维持iPS细胞的未分化状态和全能性，培养iPS细胞时可加入输卵管上皮细胞，A正确；

B；通过病毒介导或者其他的方式将转录因子导入皮肤细胞；应用有活性的病毒，灭活病毒不能将外源DNA片段带入宿主细胞，B错误；

C；体细胞重编程为iPS细胞时；关闭了体细胞特异性的表达的基因，同时开启了使细胞全能性分化的基因，可以维持iPS细胞的未分化状态和全能性，C正确；

D；由题干可知；iPS细胞特性与胚胎干细胞极为相似，胚胎干细胞为圆形或扁圆形，因此可以通过观察细胞形态，初步鉴定iPS细胞是否诱导成功，D正确。

故选ACD。15、A:B:C:D【分析】【分析】

1；胚胎植入前遗传学诊断通常是从体外授精后6～10个细胞阶段的胚胎活检；1～2个细胞进行DNA的分析，将无遗传病的胚胎植入子宫，从而防止有遗传病的患儿出生或孕育中发现问题后，面临终止妊娠的痛苦。

2；为行PGD而对配子或胚胎进行的操作；在心理和伦理上可能很难被一些患者接受。

【详解】

A；内细胞团的细胞将来发育成胎儿的各种组织。滋养层细胞；它们将来发育成胎膜和胎盘。所以做基因诊断时，通常取少量滋养层细胞诊断是否患有遗传病，A正确；

B；动物细胞核移植是将动物的一个细胞的细胞核；移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成一个新的个体；该过程中未用到核移植技术，B正确；

C；该技术在胚胎移植前进行了遗传学诊断；若该技术运用不当，如被用于性别鉴定等，可能会引发一定的伦理争议，C正确；

D；分析遗传系谱图；该病为常染色体隐性遗传病，双亲均为杂合子，EA1、EA3、EA4、EA5均为杂合子，EA2是显性纯合，EA1～EA5不患病均可作为植入的胚胎，D正确。

故选ABCD。

【点睛】三、填空题(共9题，共18分)16、略

【解析】①.动物细胞培养和核移植技术、②.动物细胞融合与单克隆抗体17、略

【解析】①.接种②.平板划线法③.稀释涂布平板法18、略

【分析】【分析】

基因工程是指按照人们的愿望；进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋子生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。

基因工程的原理是基因重组；其优点是打破了生殖隔离。但由于科学发展水平的限制，目前科学家对基因的结构；基因间的相互作用以及基因的调控机制等都了解得相当有限；再加上转移的基因虽然是功能已知的基因，但不少却是异种生物的基因；同时，由于外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，因此在转基因生物中，有时候会出现一些人们意想不到的后果。

【详解】

（1）转基因生物具有以下优点：

作物产量高；能解决粮食短缺问题；利用基因工程生产的抗虫作物能够减少农药使用，减少环境污染；利用基因工程培育的生长迅速；营养品丰富的生物，能增加食物营养，提高附加值；利用基因工程培育微生物，能够生产稀缺的生化药物。

（2）转基因生物受限于科学发展水平；可能会产生以下问题：

转基因生物与同种生物杂交；可能产生重组病菌；重组病毒或超级杂草；导入转基因生物的外源基因有可能与感染转基因生物的某些细菌或病毒杂交，从而重组出对人类或其他生物有害的病原体，可能使疾病的传播跨越物种障碍。

（3）转基因技术取得了巨大的成果；但科学技术是把双刃剑，面对转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，而不能因噎废食。

【点睛】

本题考查转基因生物的安全性问题，意在考查学生对转基因生物安全性问题的识记与理解。【解析】解决粮食短缺问题减少农药使用，减少环境污染增加食物营养，提高附加值能产生有毒蛋白或新过敏原可能产生重组病菌、重组病毒或超级杂草可能使疾病的传播跨越物种障碍趋利避害不能因噎废食19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】菌落数30～30020、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2种引物DNA或RNA20—3021、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】60—7522、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】323、略

【分析】【分析】

微生物实验中常用的灭菌方法有干热灭菌；高压蒸汽灭菌和灼烧灭菌；其中对于培养基一般用高压蒸汽灭菌，对于接种环一般用灼烧灭菌，对于培养皿等可以用干热灭菌。培养基放入培养箱中需要倒置培养，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，即将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养，当菌落长成后将试管放入4℃的冰箱中保藏，以后每3-6个月都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上；对于需要长期保存的菌种可以采用甘油管藏法，在3mL的甘油瓶中装入1mL甘油后灭菌，将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后放在-20℃的冷冻箱中保存。植物有效成分的提取方法主要有蒸馏法、压榨法和萃取法，如玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏，常采用蒸馏法提取；对于如橘皮精油，其主要储存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，又会产生原料焦糊问题，所以一般采用压榨法提取。

【详解】

（1）微生物培养中常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌法；灼烧灭菌法、干热灭菌法等。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板倒置；可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征，因此单个细菌在平板上会形成菌落，通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物。

（2）从鸡粪便取样；经选择培养后，如果要将样品涂布到鉴别培养基上，需要经过一系列梯度稀释。对获得的沙门氏菌进行长期保存常采用甘油管藏法。

（3）根据题干信息；沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死，因此为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中可采取低温储存；高温加工方法进行处理。

（4）根据题意；肉桂精油不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发，故可采用水蒸气蒸馏法进行提取，提取过程中蒸馏的温度、时间都会影响精油品质。

【点睛】

本题主要考查现代生物科技的原理和运用，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力，能运用所学知识，准确判断问题的能力。【解析】灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法倒置在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征梯度稀释甘油管藏低温储存、高温加工水蒸气蒸馏蒸馏的温度、时间24、略

【分析】【详解】

生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎；并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术，其目的是用于生育，获得人的复制品；治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术，其目的是用于医学研究和疾病的治疗。

据概念可知，实现生殖性克隆和治疗性克隆都会用到的技术有体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等；治疗性克隆在获取胚胎干细胞后，根据治疗目的诱导干细胞分化形成各种组织和器官，供患者移植用，故治疗性克隆还会应用到的技术为干细胞培养技术。【解析】生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎，并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等体细胞核移植技术，早期胚胎培养技术、动物细胞培养技术、胚胎移植技术、干细胞培养技术等用于生育，获得人的复制品用于医学研究和疾病的治疗四、判断题(共3题，共6分)25、A【分析】【详解】

转基因生物可能会破坏生态平衡，特别是对生物多样性的影响。大自然经过亿万年的演化，各种生物相对处于一种和谐的生态平衡状态。但是，如果我们用转基因技术把某种生物人为地变得更加“强悍”，那其他物种就会衰败以至灭绝，故本题正确。26、B【分析】【详解】

酿酒酵母的最适生长温度是28℃；但在发酵过程中，一般将温度控制在18-30℃，这是因为果皮表面附着的野生酵母菌可能有多种（有多种酵母菌参与了发酵过程），从实践的角度看，大致控制温度范围比较简单易行。

故本说法错误。27、A【分析】【详解】

生物武器是利用生物战剂杀伤人员、牲畜、毁坏植物的武器。生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等。故该说法正确。五、实验题(共1题，共6分)28、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作为受体细胞，其中以大肠杆菌应用最为广泛。研究人员一般先用Ca2＋处理大肠杆菌细胞；使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，然后再将重组的基因表达载体导入其中。

【详解】

（1）利用RNA通过①过程（逆转录）获得cDNA需要逆转录酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。逆转录第一步以mRMA为模板合成DNA单链；新链与模板链反向平行，由于新链只能由5'端向3'端延伸，所以逆转录第一步的引物应与mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互补配对，即用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物；设计引物的目的是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。

（2）对逆转录得到的cDNA扩增时；引物的5'端结合母链的3'端之后DNA聚合酶开始扩增DNA。为确保其与pET41a质粒定向连接，应使用不同种的限制酶切割质粒和目的基因，由图可知，使用EcoRI酶会破环SSB基因，故应在相应引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位点。

（3）由题图分析可知：质粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破坏了氯霉素抗性基因，所以成功组装的重组质粒不能在添加了氯霉素的培养基上生长，③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌；目的是使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态，然后分别将处理后的大肠杆菌先接种在添加卡那霉素的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加氯霉素的培养基（B）上培养，收集能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的菌落进一步纯化后将菌体破碎处理，经筛选即可得到SSB蛋白。

（4）将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，如果该蛋白有抗原性，会引起机体的免疫反应，产生相应抗体。则后续实验内容应为抽取小鼠血液提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体。【解析】(1)逆转录用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物

使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的。

(4