2025年湘师大新版选择性必修3生物上册月考试卷含答案

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A.将剪碎的牛组织置于无菌水中并加入一定量的胰蛋白酶处理可得到单细胞B.图中涉及基因工程、动物细胞培养、细胞核移植、胚胎移植等技术C.选用未受精的卵细胞作为受体细胞是因为其具有让细胞核全能性得到表达的环境D.经过胚胎分割获得同卵双胎或多胎属于无性繁殖4、下列不属于利用基因工程技术制取的药物是（）A.从大肠杆菌体内获得白细胞介素B.从酵母菌体内获得干扰素C.从大肠杆菌体内获得胰岛素D.从青霉菌体内获得青霉素5、下表为培养某种微生物的培养基配方，下列说法正确的是（）。成分NaNO3KHPO4KClMgSO4·7H2OFeSO4（CH2O）H2O青霉素含量3g1g0．5g0．5g0．01g30g1L0．1万单位

A.该培养基培养的微生物同化作用类型是自养型B.该培养基属于液体培养基，培养时均需在摇床上进行C.培养基中的唯一碳源是（CH2O），唯一氮源是NaNO3D.若用该培养基培养纤维素分解性细菌应除去（CH2O），添加纤维素6、下图是对基因型为Aabb的玉米所作的处理，据图分析下列叙述错误的是（）

A.过程a所采取的技术手段是花药离体培养B.过程b用秋水仙素处理后可以得到4种基因型的玉米C.c和d分别是脱分化和再分化过程D.图中过程a或过程c、d能够说明植物细胞具有全能性7、科学家培育了一种可以生产人血红蛋白的转基因烟草。下列叙述正确的是（）A.要获得该转基因烟草，首先要从人的成熟红细胞内获取目的基因B.人血红蛋白基因导入烟草细胞可采用农杆菌转化法C.PCR不能用于鉴定受体细胞中是否转入了目的基因D.该基因转到烟草染色体上使烟草发生染色体畸变评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)8、中国科学院动物研究所首席科学家；动物克隆与受精生物学学科带头人陈大元；曾主持科研攻关项目——“攀登”，进行大熊猫的异种克隆。他们将大熊猫的体细胞核放入兔子的去核卵母细胞之中，并使其成功发育成囊胚，标志着异种核质相容的问题得到解决，异种克隆大熊猫迈过了第一道“坎”；然后至关重要的是选择一种合适的“代孕母体”。下图是该研究的理论流程图。下列说法正确的是（）

A.整个过程用到的技术手段有动物细胞培养、动物体细胞核移植和胚胎移植等B.诱导超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞C.重构胚发育成囊胚所需营养主要来源于“代孕母体”D.步骤甲和步骤乙中的供体和受体需要同期发情处理9、下列关于发酵工程的应用，叙述正确的是（）A.柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂，可以通过黑曲霉发酵制得B.可以将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌通过发酵工程制备乙型肝炎疫苗C.利用发酵工程生产的白僵菌特异性强，只能用来防治一种农林害虫D.一种真菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水稻枯纹病10、研究发现；某些致病菌生长繁殖需要外界提供相应的生长因子。将流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同培养时，金黄色葡萄球菌周围的流感嗜血杆菌菌落较大，越远则菌落越小，称为卫星现象（图甲）为进一步探究流感嗜血杆菌所需生长因子的种类，把其菌悬液与不含生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分成四个区域，将从血液中提取的V；X两种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图乙所示。下列叙述正确的是（）

A.图甲中的不同菌落可以通过观察菌落特征进行鉴别B.卫星现象可能是金黄色葡萄球菌合成相关生长因子或引起溶血所致C.可用加热（破坏血细胞）血琼脂平板进行流感嗜血杆菌的纯培养D.图乙结果表明流感嗜血杆菌生长需要生长因子V或X11、谷氨酸棒状杆菌发酵过程中会生成大量的谷氨酸，经加工后可制成味精。在其发酵过程中，发酵罐中碳氮比（碳元素与氮元素的比值）为4：1时，菌体大量繁殖而产生的谷氨酸少；当碳氮比为3：1时，菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增。下列相关叙述正确的是（）A.谷氨酸棒状杆菌可以从自然界中筛选，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得B.分离、提纯产物是发酵工程的中心环节，有利于获得更多的优质发酵产品C.由题干信息可推知发酵过程中需调整发酵罐内营养成分的比例D.在发酵罐内发酵无需严格控制溶解氧、温度、pH等条件12、驱蚊草含有香茅醛，能散发出一种特殊的柠檬型香气，从而达到驱蚊且对人体无害的效果。驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的。下列关于驱蚊草培育的叙述，错误的是（）A.驱蚊草的培育属于细胞工程育种，优点是克服了远缘杂交不亲和的障碍B.驱蚊草培育过程要用到纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或电刺激等方法C.驱蚊草培育过程不同于植物组织培养，无细胞脱分化和再分化的过程D.驱蚊草培育利用了植物体细胞杂交技术，育种原理是基因突变13、生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分数区，将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示，下列说法正确的是（）

A.倒成平板后直接培养可判断有无污染B.倒成平板后需要进行灭菌处理C.图示结果表明该菌需要生长因子乙和丙D.生长图形法还可用于某些菌种的筛选评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)14、平板划线法是通过____________在_______________培养基表面______________的操作，将__________的菌种______________分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由____________繁殖而来的肉眼可见的_______________，这就是_______________________。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的______________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到_____________培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成____________，从而能在培养基表面形成___________________。15、人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质一一培养基。其中，配制成的_______________的基质称为液体培养基，配制成的固体状态的基质称为________________________。在液体培养基中加入凝固剂_______________________后，制成琼脂固体培养基，它是实验室中最常用的培养基之一。微生物在_________________培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。（琼脂是一种从红藻中提取的____________________。琼脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常规培养条件下呈现固态。）16、动物细胞融合的意义：克服了______，成为研究_____、_____、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。17、两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：

①相同点：都缝合______键。

②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。18、第三步：将目的基因导入______19、目的基因是指：______20、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了______，方法是采用______。评卷人得分四、判断题(共2题，共8分)21、理性看待转基因技术，就是听之任之，不管不问（______）A.正确B.错误22、蛋白质工程的基本思路是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。（选择性必修3P94）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共16分)23、铁皮石斛是我国名贵中药；生物碱是其有效成分之一，应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程如下：

在固体培养基上；PLBs的重量；生物碱含量随增殖培养时间的变化如图所示，请回答下列问题：

⑴选用新生营养芽为外植体的原因是_____，诱导外植体形成PLBs的过程称______。

⑵与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在_______，_______，____。

⑶脱落酸（ABA）能提高生物碱含量；但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养，推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案是探讨了以下问题：

①ABA的浓度梯度设置和添加方式：设4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复。因ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基______后按比例加入。②实验进程和取样：实验50天完成，每10天取样，将样品（PLBs）称重（g/瓶）后再测定生物碱含量。如初始（第0天）数据已知，实验过程中还需测定的样品数为______。

③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品（重复样）的_____时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。24、【生物技术实践】

科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白；这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。

（1）分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的______________、大小及形状不同，在电场中的________不同而实现分离。

（2）可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的抗菌特性。抗菌实验中所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供_________和_______________。

（3）分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的_____________；确定该蛋白质的抗菌效果。

（4）细菌培养常用的接种方法有_______和___________。实验结束后，对使用过的培养基应进行_____________处理。25、玉米是重要的粮食作物；其叶片细胞中的P蛋白是一种水通道蛋白，由P基因编码，在植物生长发育过程中对水分的吸收具有重要的调节功能。科研人员成功培育出超量表达P蛋白转基因玉米，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图所示，请回答下列问题：

(1)强启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被_______识别并结合，驱动基因的持续转录，如将强启动子插入到玉米叶绿体某基因内部，可获得该基因_______突变株。为使P基因在玉米植株中超量表达，应优先选用_______酶组合，将Ti质粒切开后构建重组表达载体。T-DNA在该实验中的作用是_______。

(2)将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌后进行组织培养，培养基中需加入_______进行筛选，此物质属于氨基糖苷类抗生素，它能抑制蛋白质在叶绿体和线粒体中合成，使植物的光合作用和_______受到干扰；从而引起植物细胞死亡。

(3)愈伤组织是一种相对没有分化的_______团，经液体悬浮培养叮以分散成胚性细胞，在适宜的培养基中，这种单细胞可以发育成_______；再继续发育成转基因玉米株系。

(4)影响玉米愈伤组织能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈伤组织继代次数以及_______等。目前，组织培养过程中培养瓶常用透气封口膜封口，目的是_______。26、科学家的发现给人类的生活带来了无限的想象；他们采集了某深海海域的沉积物样品，分离；鉴定得到其中的深海放线菌，以期获得具有前景的抗生素替代品。据此回答下列问题：

(1)研究人员欲筛选出深海放线菌进行研究，取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后取菌液通过_______________法接种到高氏一号（加数滴质量分数为10%的酚）培养基表面以获得单菌落。

(2)通过PCR技术扩增分离得到的放线菌的16SrRNA基因可进行菌株的种属鉴定。PCR技术中起关键作用的酶是_____________。该技术能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR产物一般可通过_________________鉴定。

(3)科学家还将Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中。2~3周后，这些细胞显示出ES细胞的形态、具有活跃的分裂能力，它们就是iPS细胞。在这个实验过程中，逆转录病毒的作用是_______________如何证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用？请写出实验设计思路______________评卷人得分六、综合题(共2题，共4分)27、利用体细胞杂交技术获得了“番茄—马铃薯”杂种植株；实验过程如图所示，遗憾的是该杂种植株并非是想象中的地上长番茄，地下结马铃薯的“超级作物”。

(1).材料中所用到的植物体细胞杂交技术应用了植物组织培养和_____技术，植物组织培养技术的理论基础是_____。

(2).图中①步骤所示用_____除去植物细胞的细胞壁；分离出有活力的原生质体。

(3).图中②过程细胞两两融合时，可出现_____种融合细胞，要促进杂种细胞分裂生长，培养基中应有_____和_____两类激素。

(4).由杂种细胞培育成试管苗，需要经过细胞的④_____和⑤_____过程。

(5).利用马铃薯和番茄的_____得到单倍体植株，然后取单倍体植株的细胞进行体细胞杂交，再用_____处理之后也可得到可育的“番茄—马铃薯”杂种植株。28、水稻穗粒数可影水稻产量。研究者筛选到一株穗粒数异常突变体；并进行了相关研究。

（1）农杆菌Ti质粒上的T-DNA序列，可以从农杆菌中转移并随机插入到被侵染植物的___________中；导致被插入的基因功能丧失。研究者用此方法构建水稻突变体库，并从中筛选到穗粒数异常突变体。

（2）研究者分别用EcoRⅠ；HindⅢ、BamHI三种限制酶处理突变体的总DNA；用HindⅢ处理野生型的总DNA，处理后进行电泳，使长短不同的DNA片段分离。电泳后的DNA与DNA分子探针（含放射性同位素标记的T-DNA片段）进行杂交，得到下图所示放射性检测结果。

（注：T-DNA上没有EcoRⅠ；HindⅢ、BamHI三种限制酶的酶切位点）

根据检测结果，可分析得到___________

A．突变体杂交带的位置不同；是由于不同限制酶切割后含T-DNA的片段长度不同。

B．结果表明野生型水稻DNA中不存在HindⅢ的酶切位点；突变体水稻细胞中有农杆菌。

C．突变体均出现杂交带；野生型无条带，表明T-DNA已成功转移到水稻DNA中。

D．突变体最可能为T-DNA单个位点插入；因为不同限制酶处理都只得到一条杂交带。

（3）研究者用某种限制酶处理突变体的DNA（如下图所示），用___________将两端的黏性末端连接成环，以此为模板，再利用图中的引物___________组合进行PCR；扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列。经过与野生型水稻基因组序列比对，确定T-DNA插入了2号染色体上的B基因中。

（4）研究发现，该突变体产量明显低于野生型，据此推测B基因可能___________（填“促进”或“抑制”）水稻穗粒的形成。参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、A【分析】【分析】

基因表达载体的构建的目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因；启动子在基因的首段；它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束。由于受体细胞有植物；动物以及微生物之分，以及目的基因导入受体细胞的方法不同，因此基因表达载体的构建是不完全相同的。

【详解】

A；基因表达载体中含有启动子；但未必有内含子，A错误；

B；构建基因表达载体需要限制酶切割目的基因和运载体；用DNA连接酶处理具有相同黏性末端的目的基因和运载体进而形成重组DNA，B正确；

C；基因表达载体的构建是基因工程的核心；在细胞外进行，使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用，C正确；

D；通常用抗生素基因作为标记基因；便于目的基因的鉴定和筛选，D正确。

故选A。

【点睛】2、D【分析】【分析】

1；基因重组是指具有不同遗传性状的雌、雄个体通过有性生殖时；控制不同性状的基因重新组合，导致后代不同于亲本类型的现象或过程。包括：（1）交叉互换；（2）自由组合；（3）肺炎双球菌的转化；（4）转基因技术。

2；单克隆抗体的制备的基本方法是：（1）用外界抗原刺激动物；使其发生免疫反应；（2）利用仙台病毒或聚乙二醇等作介导，使经免疫的动物的脾细胞与可以无限传代的骨髓瘤细胞融合；（3）经过筛选、克隆培养，获得来自单一细胞的既能产生特异性抗体、又能无限增殖的杂交瘤细胞克隆。

【详解】

A；转基因抗虫棉的原理是基因重组；但克隆羊多利的培育利用了动物细胞核的全能性，A错误；

B；植物组织培养的原理是细胞的全能性；但单克隆抗体的制备是利用细胞膜的流动性和细胞增殖的原理，B错误；

C；人鼠细胞融合的原理是细胞膜的流动性；但早期胚胎培养只是利用了细胞增殖的原理，C错误；

D；人参细胞培养和动物细胞培养的原理都是细胞增殖；D正确。

故选D。3、A【分析】【分析】

据图可知；首先把血清蛋白基因导入牛的细胞中，获得转基因的细胞，取该转基因的细胞核移植到去核的卵细胞中，经过早期胚胎培养及胚胎移植获得转基因奶牛。

【详解】

A；动物细胞需要在特定的培养液中培养；用胰蛋白酶可以分离得到单细胞，A错误；

B；图示有转基因技术、动物细胞的培养、核移植、早期胚胎培养及胚胎移植等技术；B正确；

C；未受精的卵母细胞较大；营养物质丰富，含有促进细胞核全能性表达的物质，C正确；

D；为获得同卵双胎或多胎；可通过胚胎分割获得多个胚胎，一般分割囊胚期的内细胞团，且需均等分割，该技术属于无性繁殖，D正确。

故选A。4、D【分析】【分析】

基因工程药物（从化学成分上分析都应该是蛋白质）：

（1）来源：转基因工程菌。工程菌是指采用基因工程的方法；使外源基因得到高效率表达的菌株类细胞系。

（2）成果：人胰岛素；细胞因子、抗体、疫苗、生长激素、干扰素等。

【详解】

A；利用基因工程技术可制取药物；如将外源白细胞介素基因导入大肠杆菌中并表达制取白细胞介素，A错误；

B；利用基因工程技术可制取药物；如使外源干扰素基因在酵母菌体内表达获得干扰素，B错误；

C；利用基因工程技术可制取药物；如使外源胰岛素基因在大肠杆菌体内表达获得胰岛素，C错误；

D；青霉素是青霉菌自身基因表达产生的；因此在青霉菌体内提取的青霉素不属于基因工程药品，D正确。

故选D。5、C【分析】【分析】

分析图表；该培养基的配方中，含有青霉素，可以抑制细菌的生长繁殖，所以该培养基为选择培养基。

【详解】

A、该培养基中含有有机物碳源（CH2O）；所以该培养基培养的微生物同化作用类型是异养型，A错误；

B；该培养基没有加入凝固剂；属于液体培养基，摇床可以增加培养液中的溶解氧，对于厌氧型微生物的培养不需要用摇床，B错误；

C、分析表格可知，（CH2O）含有C，NaNO3中含有N，该培养基中的唯一碳源是（CH2O），唯一氮源是NaNO3；C正确；

D、纤维素分解性细菌能利用纤维素（碳源），且青霉素能抑制细菌生长，若用该培养基培养纤维素分解性细菌应除去（CH2O）和青霉素；添加纤维素，D错误；

故选C。6、B【分析】【分析】

1；花药离体培养是指将发育到一定阶段的花药接种到培养基上；来改变花药内花粉粒的发育程序，形成愈伤组织，并由愈伤组织再分化成植株；

2；离体的植物组织或细胞；在培养一段时间后，会通过细胞分裂形成愈伤组织；愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞；由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化；脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化；再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植株体。

【详解】

A；a过程由花粉粒变为单倍体植株；要经过花药离体培养，A正确；

B、基因型为Aabb的玉米能产生2种基因型的花粉：Ab和ab，经花药离体培养后可得到2种单倍体幼苗，幼苗再经秋水仙素处理后得到AAbb和aabb；2种基因型的可育玉米，B错误；

C；由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程；称为脱分化，脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化，所以c是脱分化，d是再分化，C正确；

D；过程a或过程c、d是植物细胞培育成了植物个体；所以能够说明植物细胞具有全能性，D正确。

故选B。7、B【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤目的基因的获取:方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。目的基因的检测与鉴定∶分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；人的细胞都含有控制血红蛋白合成的基因；故要获得该转基因烟草，不一定要从人的成熟红细胞内获取目的基因，A错误；

B；为使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达；应将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，再采用农杆菌转化法使目的基因插入到烟草细胞中的染色体DNA上，B正确；

C；鉴定筛选时；通过PCR技术可以检测目的基因是否插入了受体细胞染色体DNA上，也可以检测目的基因是否转录出了mRNA，C错误；

D；该基因转到烟草染色体上；使控制不同性状的基因重新组合，属于基因重组，D错误。

故选B。二、多选题(共6题，共12分)8、A:B【分析】【分析】

1；析题图：步骤甲为细胞核移植；步骤乙为胚胎移植，其中诱导超数排卵用的是促性腺激素。

2；动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个胚胎最终发育为动物。

3；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物体内；使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体叫“受体”。

【详解】

A；步骤甲和步骤乙分别是指细胞核移植和胚胎移植作用；所以整个过程用到的技术手段有动物细胞培养（重组胚胎培养）、动物体细胞核移植和胚胎移植等，A正确；

B；诱导超数排卵所注射的激素是促性腺激素；只能作用于性腺，B正确；

C；重组细胞发育成早期胚胎所需营养主要来源于去核的卵母细胞；C错误；

D；步骤乙中的供体和受体需要同期发情处理；甲不需要，D错误。

故选AB。

【点睛】

分本题结合图解，考查胚胎工程的相关知识，要求考生识记体外受精的过程及条件；识记早期胚胎培养的过程及条件，能结合图中信息准确判断各选项。9、A:B【分析】【分析】

发酵工程是指采用现代工程技术手段；利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育；培养基的配制、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。

【详解】

A；柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂；可以通过黑曲霉发酵制得，A正确；

B；可以将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌通过发酵工程制备乙型肝炎疫苗；B正确；

C；利用发酵工程生产的白僵菌可以用来防治80多种农林害虫；C错误；

D；一种放线菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水稻枯纹病；D错误。

故选AB。

【点睛】10、A:B:C【分析】【分析】

据图分析可知；流感嗜血杆菌的菌落主要分布于添加了X和V的区域的交界处，说明该菌生长需要的生长因子是X和V。

菌落的特征：形状；大小、颜色、隆起程度、质地、边缘等。

培养基的营养组成：碳源；氮源、水、无机盐、特殊生长因子。

【详解】

A；鉴定不同种的菌落可以观察菌落的特征；比如形态、颜色、隆起程度等，A正确；

B；流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同培养时；金黄色葡萄球菌周围的流感嗜血杆菌菌落较大，越远则菌落越小，由此推测卫星现象可能是金黄色葡萄球菌合成相关生长因子或引起溶血所致，B正确；

C；分析题干信息可知；可用加热（破坏血细胞）血琼脂平板进行流感嗜血杆菌的纯培养，C正确；

D、图乙结果表明流感嗜血杆菌生长需要生长因子V和X，不是V或X，D错误。11、A:C【分析】【分析】

微生物发酵指的是利用微生物；在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。谷氨酸棒状杆菌为原核生物，为异养需氧型。

【详解】

A；用于发酵的谷氨酸棒状杆菌可以从自然界中筛选；也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，A正确；

B；发酵工程的中心环节是发酵过程；B错误；

C；由题意可知“在其发酵过程中；发酵罐中碳氮比（碳元素与氮元素的比值）为4∶1时，菌体大量繁殖而产生的谷氨酸少；当碳氮比为3∶1时，菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增”，说明在发酵过程中需调整发酵罐内营养成分的比例以保证先获得大量谷氨酸棒状杆菌，在获得大量发酵产物的目的，C正确；

D；谷氨酸棒状杆菌为需氧菌；其发酵过程需要适宜的温度和pH，所以在发酵罐内发酵需严格控制溶解氧、温度、pH等条件，D错误。

故选AC。12、C:D【分析】【分析】

植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞；进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。在进行植物体细胞杂交时需要使用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁，使用化学方法（聚乙二醇）或物理方法诱导原生质体融合，不能用灭活的病毒诱导。可根据植物细胞的质壁分离和复原鉴定杂种细胞是否再生细胞壁，从而确定原生质体融合是否完成。植物体细胞杂交的意义：在克服远源杂交不亲和的障碍；培育作物新品种方面所取得的重大突破。

【详解】

A；驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的；采用了植物体细胞杂交技术，属于细胞工程育种，其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍，A正确；

B；要获得天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体；需要采用酶解法（纤维素酶、果胶酶），诱导天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体的融合可采用化学法（PEG等试剂）或物理法（电刺激等），B正确；

C；驱蚊草培育过程不同于植物组织培养；但需要采用植物组织培养技术，因此有细胞脱分化和再分化的过程，C错误；

D；驱蚊草培育利用了植物体细胞杂交技术；育种原理是染色体数目变异，D错误。

故选CD。13、A:C:D【分析】【分析】

本题考查微生物的培养及鉴定。据图分析；菌落主要分布于添加了乙和丙的区域的交界处，说明该嗜热菌所需的生长因子是乙和丙。

【详解】

A；倒平板后不接种任何菌种直接进行培养观察有无菌落的出现；可以判断培养基有无污染，A正确；

B；在制作培养基的过程中；需要先进行灭菌再倒平板，B错误；

C；分析题图可知；嗜热菌在添加了乙、丙生长因子的区域生长，故该菌需要的生长因子是乙和丙，C正确；

D；不同的菌种所需的生长因子不同；利用生长图形法可用于某些菌种的筛选，某菌种只会在提供其需要的生长因子区域生长，D正确。

故选：ACD。三、填空题(共7题，共14分)14、略

【解析】①.接种环②.琼脂固体③.连续划线④.聚集⑤.逐步稀释⑥.一个细胞⑦.子细胞群体⑧.菌落⑨.梯度稀释⑩.琼脂固体⑪.单个细胞⑫.单个的菌落15、略

【解析】①.液体状态②.固体培养基③.琼脂④.固体⑤.多糖16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】远缘杂交的不亲和性细胞遗传细胞免疫、17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】磷酸二酯18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】受体细胞19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】是人们所需要转移或改造的基因20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因DNA分子杂交技术。四、判断题(共2题，共8分)21、B【分析】【详解】

理性看待转基因技术，正确的做法是趋利避害，而不能因噎废食，所以本题错误。22、A【分析】【详解】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。蛋白质工程的基本思路是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。

故正确。五、实验题(共4题，共16分)23、略

【分析】【分析】

【详解】

⑴新生营养芽分裂能力强；细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs；根据题干可知，PLBs，类似愈伤组织，外植体形成愈伤组织的过程是脱分化。⑵据图分析，光照下PLBs的重量高于黑暗条件下，原因可能是生长起始较快，快速生长时间较长，PLBs产量较高。⑶①由于ABA受热易分解，所以各种液体培养基灭菌后，冷却，再加入不同浓度的ABA。②根据题干可知，实验50天完成，每10天取样，需要取5次样；空白组不需要重复，处理组，每组重复三次，因此每次取样中，需要记录15个样品中的数据，取样5次共需要测定的样品数为75。③适量的ABA可提高生物碱产量，当样品的PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。

【考点】

本题主要考查植物组织培养和设计实验，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系、具有对一些生物学问题进行初步探究的能力和并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理的能力。【解析】细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs细胞的脱分化生长起始较快快速生长时间较长PLBs产量较高灭菌、冷却75PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大24、略

【分析】【详解】

（1）电泳法分离蛋白质；是根据蛋白质分子的电荷；大小及形状不同，在电场中的迁移速度不同而实现分离。

（2）牛肉膏和蛋白胨中蛋白质较多；可作为碳源和氮源。

（3）加入抗菌蛋白的培养基中；金黄色葡萄球菌应该不能生长或生长很少，未加入抗菌蛋白的培养基中金黄色葡萄球菌应该能生长，菌落较多。

（4）平板划线法、稀释涂布平板法都能使接种的菌种在固体培养上充分分散，对使用过的培养基应进行灭菌处理，是为了防止细菌扩散污染。【解析】①.电荷（带电情况）②.迁移速度③.碳源④.氮源⑤.数量⑥.平板划线法⑦.稀释涂布平板法（稀释混合平板法）⑧.灭菌25、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原—抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点；能驱动基因的转录；如将强启动子插入到玉米叶绿体某基因内部，则会破坏该基因，获得该基因沉默（失活）突变株。为使P基因在玉米植株中超量表达，则需要强启动子和P基因不被破坏，因此应优先选用BamHⅠ和SacⅠ酶组合，将Ti质粒切开后构建重组表达载体。农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，因此T-DNA在该实验中的作用是将强启动子和P基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞染色体DNA上。

（2）由图可知；G418抗性基因位于Ti质粒的T-DNA上，随T-DNA一起整合到玉米细胞染色体DNA上，因此将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌后进行植物组织培养，培养基中需加入G418进行筛选，此物质属于氨基糖苷类抗生素，它能抑制蛋白质在叶绿体和线粒体中合成，其中叶绿体是光合作用的场所，线粒体是细胞有氧呼吸的主要场所，因此可使植物的光合作用和呼吸作用（能量代谢）受到干扰，从而引起植物细胞死亡。

（3）愈伤组织是一种相对没有分化的薄壁细胞团；经液体悬浮培养可以分散成胚性单细胞，在适宜的培养基中，这种单细胞可以发育成胚状体，再继续发育成转基因玉米株系。

（4）影响玉米愈伤组织能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈伤组织继代次数以及玉米的基因型等。目前，组织培养过程中培养瓶常用透气封口膜封口，目的是防止杂菌污染。【解析】(1)RNA聚合酶沉默##失活BamH和SacⅠ酶将强启动子和P基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞的染色体DNA上。

(2)G418呼吸作用##能量代谢

(3)薄壁细胞胚状体。

(4)玉米的基因型防止杂菌污染26、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

【详解】

（1）分析题意可知；研究人员取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后可通过稀释涂布平板法接种到培养基表面以获得单菌落。

（2）PCR技术是一项通过体外控制温度扩增DNA的技术，该技术中由于温度较高，起关键作用的酶是耐高温DNA聚合酶；PCR扩增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析题意，该技术能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是：引物是根据16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列设计合成的；PCR产物一般可通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定：凝胶中的DNA分子通过染色；可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来。

（3）分析题意，科学家将Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中，该过程中逆转录病毒是载体，能将外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纤维细胞；分析题意，实验目的是iPS细胞的产生不是由于培养基的作用，故实验的自变量是外源基因的有无，因变量是IPS细胞的产生情况，实验设计应遵循对照与单一变量原则，故可设计实验如下：将转入外源基因的细胞和没有转入外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中，在相同且适宜的条件下，如果只有转入外源基因的细胞转化成了iPS细胞，则可以证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用。【解析】(1)稀释涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高温DNA聚合酶引物能与16SrRNA基因特异性结合（引物是根据16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列设计合成的）琼脂糖凝胶电泳。

(3)逆转录病毒是载体，能将外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纤维细胞。将转入外源基因的细胞和没有转入外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中，在相同且适宜的条件下，如果只有转入外源基因的细胞转化成了iPS细胞，则可以证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用六、综合题(共2题，共4分)27、略

【分析】【分析】

据图示可知：利用植物体细胞杂交技术培育杂种植物细胞；具体过程包括诱导植物细胞融合成杂种细胞和植物组织培养技术培育成杂种植株两过程。过程①是通过酶解法去除细胞壁获得原生质体，过程②通过物理或化学方法（如聚乙二醇试剂）诱导原生质体融