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第1页白果总黄酮优化提取工艺研究目录TOC\o"1-2"\h\u16027摘要: 17535前言 2323941仪器、试剂和材料 4323571.1仪器 43801.2试剂材料 4275661.3材料 482902实验方法 5326052.1白果总黄酮的含量测定 598202.2白果中总黄酮的提取工艺研究 6296923实验结果与讨论 10225173.1白果总黄酮含量测定 1018290超声波辅助提取法提取 10248173.2白果中总黄酮的提取工艺探究 1028163微波辅助提取正交试验设计及结果 16178703.3讨论 1624150结论 177733参考文献 18摘要:目的优化白果总黄酮的提取工艺,确定白果总黄酮的最佳提取条件。方法以白果为原料,采用超声波提取法和微波辅助提取法,分别以乙醇浓度、提取时间、提取功率、液料比四个因素为基础分别设计单因素实验,并对各个因素的最佳点进行优择,选定正交试验所需的数据范围,依据此范围设计正交试验,确定提取白果黄酮的最佳条件。结果超声波提取的最佳提取条件为功率200W,液料比35:1,提取时间60min,乙醇浓度为70%,白果总黄酮的最佳提取率为0.69%;微波辅助提取的最佳提取条件为功率400W,液料比25:1,提取时间20min,乙醇浓度为70%,白果总黄酮的最佳提取率为0.507%。结论由两种黄酮提取法的实验结果可知超声波辅助提取法优于微波辅助提取法。关键词:超声波提取;微波辅助提取;白果;黄酮前言白果又称为银杏果。银杏在中国、日本、朝鲜、韩国、加拿大、新西兰、澳大利亚、美国、法国、俄罗斯等国家和地区均有大量分布。银杏的自然地理分布范围很广据调查全国有23个省(区)有银杏古树分布[1]。白果主要含黄酮类化合物,其主要成分为山奈黄素、槲皮素、芦丁、白果素、银杏素、穗花双黄酮等。尚含奎宁酸等有机酸、银杏酸、银杏酚等酚类,以及银杏醇、蛋白质、脂肪、碳水化合物、钙、磷、铁、胡萝ト素等[2]。其毒性成分为白果酚。银杏酚酸、白果醇等具有杀虫效果[3]。银杏叶性平,味甘、苦、涩,归心经、肺经,是一味常见中药,具有活血化瘀、通络止痛,敛肺平喘,化浊降脂,主治瘀血阻络、胸痹心痛、肺虚咳喘等[4]。种子含少量氰、赤霉素和动力精样物质。内胚乳中还分离出两种核糖核酸酶。银杏果实、叶片和树皮均有很高的药食价值,主要含有黄酮类、内酯类、有机酚酸类、聚戊烯醇类、多糖类等生物活性物质[5-7],其中黄酮类和内酯类是主要药用成分[8]。目前,银杏的药用成分在临床上主要用于治疗心脑血管疾病、抗氧化[9]、抗肿瘤、抗衰老、抗炎、降低血液黏度、降血脂、提高机体免疫力等方面[10-13]。白果有抗结核、抗菌作用,并有祛痰作用[14][15]。银杏外种皮具有镇咳祛痰,降压,增加冠脉流量和血管流量,降低心肌耗氧量,提高耐缺氧能力,对抗急、慢性炎症及免疫性炎症等作用[16-18]。外种皮含有毒成分白果酸、氢化白果酸、氢化白果亚酸、白果酚和白果醇。我国银杏资源占世界总量的70%以上[19]。银杏的叶、果、树皮均可入药。国内外许多学者采用现代分离技术与测量手段对银杏叶提取物进行了大量研究。银杏黄酮类是低分子量化合物,均衍生于其母体化合物黄酮,以糖苷和甲基化的形式存在。银杏叶含黄酮类化合物35种,其中双黄酮6种,银杏黄酮苷元7种,黄酮苷17种。有很多黄酮类化合物都有很强的抗氧化作用[20],能够软化血管,改善微循环,降低血脂等。银杏除叶片外,果实中亦含丰富的黄酮。目前我国用银杏果和银杏叶提取物开发出来的食品饮料主要有:罐头类:如听装清水白果罐头;饮料类:主要有银杏晶、银杏露、白果露、白果汁等;银杏叶茶;酒类:如银杏啤酒、白果酒等;另外还有用银杏果和银杏叶提取物生产的糖果、口香糖和月饼等。为提高黄酮纯度和收率,提取工艺非常关键。目前用于提取银杏总黄酮的方法主要有水提取法、有机溶剂萃取法、碱性稀醇或碱性水提取法、超临界萃取法、超声波提取法、酶法等[21]。水提取法:水提法又称为煎煮法,就是将药材加水煎煮取汁的方法。该法是最早使用的一种简易浸出方法,至今仍是制备浸出制剂最常用的方法。由于浸出溶煤通常用水,故有时也称为“水煮法”。适用于有效成分能溶于水、对湿和热较稳定的药材。该法浸提成分范围广,但往往杂质较多,给精制带来不利,且煎出液易霉败变质。因其符合中医传统用药习惯,溶剂易得价廉,至今仍为最广泛适用的基本浸提方法。有机溶剂萃取法:利用溶质在互不相溶的溶剂里溶解度的不同,用一种溶剂把溶质从另一溶剂所组成的溶液里提取出来的操作方法。其主要特点为提取亲水性强的皂甙则多选用正丁醇、异戊醇和水作两相萃取。不过,一般有机溶剂亲水性越大,与水作两相萃取的效果就越不好,因为能使较多的亲水性杂质伴随而出,对有效成分进一步精制影响很大。超临界萃取法:超临界二氧化碳流体萃取分离过程的原理是利用超临界流体的溶解能力与其密度的关系,即利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。在超临界状态下,将超临界流体与待分离的物质接触,使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小的成分依次萃取出来。当然,对应各压力范围所得到的萃取物不可能是单一的,但可以控制条件得到最佳比例的混合成分,然后借助减压、升温的方法使超临界流体变成普通气体,被萃取物质则完全或基本析出,从而达到分离提纯的目的,所以超临界二氧化碳流体萃取过程是由萃取和分离过程组合而成的。超声提取法是利用超声波的空化作用、机械效应和热效应等加速胞内有效物质的释放、扩散及溶解[22],是显著提高提取效率的提取方法。与传统提取方法相比,超声辅助提取技术具有提取时间短、效率高、对有效成分结构破坏小、提取温度可控、适应性广等优点[23]。可用于生物和植物有效成份萃取、生物和植物细胞破碎、中草药有效成份的低温提取等。微波辅助提取是利用微波能来提高提取率的一种发展起来的新技术[24]。它的原理在学术界有许多不同的描述,其最基本的理论还是以微波穿透性加热的原理为基础,即微波对物料为立体加热,而常规方法大多为平面加热。微波场中,各种物料吸收微波能力的差异使得基体物质的某些区域或萃取体系中的某些组分被选择性加热,从而使得物质内部产生能量差,被萃取物质得到足够的动力从基体或体系中分离[25][26]。目前,科研人员对银杏中黄酮的研究主要集中在银杏叶片,已知的从银杏叶中分离出的黄酮有40余种,主要为单黄酮类和双黄酮类。大量实验数据已表明,银杏叶中含有的黄酮类化合物具有优异的抗氧化活性、抗肿瘤活性、防治心血管疾病和增强免疫力等作用[27-31]。然而,实验对于白果黄酮的研究却相对较少,本实验将通过超声提取法和微波辅助提取法[32][33]来提取白果总黄酮,并通过单因素实验和正交实验法优选白果总黄酮的最佳提取工艺,为白果总黄酮的进一步研究提供科学依据。仪器、试剂和材料仪器FA2004电子天平上海舜宇恒平科学仪器有限公司KQ-500DE型数控超声波清洗器昆山市超声仪器有限公司FMO-9410花琦微波炉上海花琦电气有限公司765型紫外-可见分光光度计上海仪电分析仪器有限公司试剂材料95%乙醇四川西陇科学有限公司蒸馏水佳木斯市虹源纯净水厂氢氧化钠(分析纯)广州光华科技股份有限公司亚硝酸钠(分析纯)天津市凯通化学试剂有限公司硝酸铝成都市科龙化工试剂厂芦丁对照品上海源叶生物科技有限公司材料银杏粉江苏邳州市实验方法白果总黄酮的含量测定2.1.1芦丁标准曲线的含量制作精密称量芦丁标准品20mg于50mL容量瓶中,加入少量浓度为60%乙醇,溶解并摇匀,加入60%乙醇定容至刻度。精密量取上述溶液25mL于50mL容量瓶,加入蒸馏水定容至刻度,得到0.2mg·mL-1芦丁标准溶液。精确量取对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL分别加入标号为1、2、3、4、5、6的20mL刻度试管中,各加去离子水至6mL。另取一刻度试管标记7,加入6mL去离子水作为空白对照样。然后在每根试管中加入1mL5%亚硝酸钠溶液,摇匀,放置6min;再在每根管中加入1mL10%硝酸铝溶液,摇匀,放置6min;最后在每根试管中加入10mL4%氢氧化钠溶液,摇匀,再加70%乙醇溶液至刻度,摇匀,放置15min后于510nm处测量吸光度。绘制标准曲线。黄酮含量计算方式:其中C为样品浓度(mg/ml),N为溶液稀释倍数,V为体积(ml),m为加入白果粉质量(g).2.1.2总黄酮的含量测定表2-SEQ表2-\*ARABIC1序号吸光度A黄酮含量总黄酮提取率10.01830.16250.6520.019380.170.6830.021530.1850.74表2-SEQ表2-\*ARABIC2序号吸光度A黄酮含量总黄酮提取率10.013070.1260.50420.013250.1270.50930.013250.1270.508白果中总黄酮的提取工艺研究超声波辅助提取法提取称取白果粉1g,加入一定浓度乙醇中,超声提取后过滤,滤液定容至50mL,然后取样1mL按测定标准曲线的方法于波长510nm处测定吸光值。单因素实验(1)乙醇浓度的选取精密称量1.0000g的白果粉5份,按乙醇溶液和白果粉30∶1的液料比分别加入浓度为60%、65%、70%、75%、80%的乙醇,在超声功率300W下进行60min的超声反应,分别测出各浓度乙醇的吸光值,通过计算得出黄酮提取率。具体见REF_Ref7359\h表2-1表2-SEQ表2-\*ARABIC3乙醇浓度单因素实验序号乙醇浓度(%)超声时间(min)液料比(mL∙g-1)超声功率(W)16060301300370603013005806030:1300超声时间的选取精密称量1.0000g的白果粉5份,按乙醇溶液和白果粉30∶1的液料比加入70%浓度的乙醇,在超声功率为300W下分别进行50、55、60、65、70min的超声反应。分别测出各超声时间下的吸光值,通过计算得出黄酮提取率。具体见REF_Ref8172\h表2-4表2-SEQ表2-\*ARABIC4序号乙醇浓度(%)超声时间(min)液料比(mL∙g-1)超声功率(W)17050301300370603013005707030:1300(3)液料比的选取精密称量1.0000g的沙棘果粉5份,分别按乙醇溶液和白果粉20∶1、25∶1、30∶1、35∶1、40∶1的液料比加入70%乙醇溶液,在超声功率为300W下进行60min的超声反应。分别测出各液料比下的吸光值,通过计算得出黄酮提取率。具体见REF_Ref8231\h表2-5表2-SEQ表2-\*ARABIC5序号乙醇浓度(%)超声时间(min)液料比(mL∙g-1)超声功率(W)17060201300370603013005706040:1300(4)超声功率的选取精密称量1.0000g的白果粉5份,按乙醇溶液和白果粉30∶1的液料比加入70%乙醇,分别在200W、300W、400W、500W、600W的超声功率下超声60min。分别测出各超声温度下的吸光值,通过计算得出黄酮提取率。具体见REF_Ref8325\h表2-6表2-SEQ表2-\*ARABIC6序号乙醇浓度(%)超声时间(min)液料比(mL∙g-1)超声功率(W)1706030:12002706030140047060301600正交试验将以上实验结果作为依据,分别确定各因素中对黄酮提取率影响较为显著的因素值范围,采用正交实验法,筛选白果总黄酮提取的最佳提取工艺条件。微波辅助提取法称取白果粉1g,加入一定浓度乙醇中,微波辅助提取后过滤,滤液定容至50mL,然后取样1mL按测定标准曲线的方法于波长510nm处测定吸光值。单因素实验(1)乙醇浓度的选取精密称量1.0000g的白果粉5份,按乙醇溶液和白果粉25∶1的液料比分别加入浓度为60%、65%、70%、75%、80%的乙醇,在功率400W条件下反应15min后,分别测出各浓度乙醇的吸光值,通过计算得出黄酮提取率。具体见REF_Ref8505\h表2-7表2-SEQ表2-\*ARABIC7序号乙醇浓度(%)超声时间(min)液料比(mL∙g-1)超声功率(W)16015251400370152514005801525:1400(2)提取时间的选取精密称量1.0000g的白果粉5份,按乙醇溶液和白果粉25∶1的液料比加入70%浓度的乙醇,在功率为400W条件下分别进行5、10、15、20、25min的反应。分别测出各超声时间下的吸光值,通过计算得出黄酮提取率。具体见REF_Ref8603\h表2-8表2-SEQ表2-\*ARABIC8序号乙醇浓度(%)超声时间(min)液料比(mL∙g-1)超声功率(W)1705251400370152514005702525:1400(3)液料比的选取精密称量1.0000g的沙棘果粉5份,分别按乙醇溶液和白果粉15∶1、20∶1、25∶1、30∶1、35∶1的液料比加入70%乙醇溶液,在功率为400W下进行15min的反应。分别测出各液料比下的吸光值,通过计算得出黄酮提取率。具体见REF_Ref8701\h表2-9表2-SEQ表2-\*ARABIC9序号乙醇浓度(%)超声时间(min)液料比(mL∙g-1)超声功率(W)17015151400370152514005701535:1400(4)微波功率的选取精密称量1.0000g的白果粉5份,按乙醇溶液和白果粉25∶1的液料比加入70%乙醇,分别在200W、300W、400W、500W、600W的超声功率下超声15min。分别测出各功率下的吸光值,通过计算得出黄酮提取率。具体见REF_Ref8822\h表2-10表2-SEQ表2-\*ARABIC10序号乙醇浓度(%)超声时间(min)液料比(mL∙g-1)超声功率(W)1701525:12002701525140047015251600正交试验将以上实验结果作为依据,分别确定各因素中对黄酮提取率影响较为显著的因素值范围,采用正交实验法,筛选白果总黄酮提取的最佳提取工艺条件。实验结果与讨论白果总黄酮含量测定芦丁标准曲线绘制如REF_Ref8956\h图3-1,绘制标准曲线:Y=93.05x+0.4631,相关系数R2=0.9996.图3-SEQ图3-\*ARABIC1芦丁标准曲线总黄酮的含量测定结果超声波辅助提取法提取微波辅助提取法白果中总黄酮的提取工艺探究超声波提取法单因素实验的结果(1)乙醇浓度对黄酮提取的影响随着乙醇浓度的增加,溶液的吸光值不断升高,当乙醇浓度增加到70%左右时,吸光值达到最大,此时提取液中黄酮含量达到最高,而后随着浓度的增加,溶液的吸光值开始下降。此实验结果表明,在该实验条件下,乙醇浓度在70%左右为宜。如REF_Ref9096\h图3-2图3-SEQ图3-\*ARABIC2乙醇浓度对黄酮提取的影响(2)时间对黄酮提取的影响在50~60min范围内,溶液的吸光值不断增加,在60min时达到最大值,此时提取液中黄酮含量亦达到最高,此后随着时间的增加,溶液的吸光值不断下降。此实验结果表明,在此实验条件下,反应在60min时的提取时间是比较适宜的。如REF_Ref9187\h图3-3图3-SEQ图3-\*ARABIC3提取时间对黄酮提取的影响(3)液料比对黄酮提取的影响随着液料比(mL∶g)的增大,提取液吸光值逐渐升高,提取液中黄酮含量不断增加,在料液比为30∶1时达到最大值,当料液比大于30∶1时,溶液吸光值有所下降。此实验结果表明,在该实验条件下,液料比在30∶1时为最佳。如REF_Ref9256\h图3-4图3-SEQ图3-\*ARABIC4液料比对黄酮提取的影响(4)功率对黄酮提取的影响随着提取功率的不断增加,溶液的吸光值不断升高,当超声提取功率增加到300W左右时,吸光值达到最大,此时提取液中黄酮含量达到最高,而后随着提取功率的增加,溶液的吸光值开始不断下降。此实验结果表明,在该实验条件下,超声提取功率在300W左右为宜。如REF_Ref9347\h图3-5图3-SEQ图3-\*ARABIC5功率对黄酮提取的影响正交试验的结果(1)超声波提取法最佳条件正交试验结果表明,影响银杏果总黄酮提取的因素大小为:提取时间>乙醇浓度>功率>液料比,各因素均不显著,因此无主因素。通过单因素试验和正交试验优选的银杏果总黄酮超声波提取的最佳条件:A2B2C3D1,即用70%乙醇作为提取剂,料液比35∶1,提取60min,功率200W。在9组试验中的黄酮提取率最大的为5号试验条件组合。对5号试验和A2B2C3D1组合分别做平行试验,结果表明,A2B2C3D1组合的提取率为0.69%,比5号试验得率高,为较优水平组合。如REF_Ref9668\h表3-1表3-SEQ表3-\*ARABIC1超声波法提取正交试验设计及结果序号乙醇浓度(%)时间(min)液料比(ml/g)功率(W)黄酮提取率(%)1655525:12000.1562656030:13000.5113656535:14000.4314705530:14000.1935706035:12000.6526706525:13000.5177755535:13000.1878756025:14000.4629756530:12000.535K11.0980.5361.1351.343K21.3621.6251.2391.215K31.2571.4831.271.086k10.3660.1790.3780.448k20.4540.5420.4130.405k30.4190.4940.4230.362R0.0880.3630.0450.086超声波法提取正交试验设计及结果微波辅助提取单因素实验结果(1)乙醇浓度对黄酮提取的影响乙醇浓度对黄酮提取的影响如图2所示,在60%~70%的浓度范围内,溶液的吸光值逐渐升高,在浓度为70%时黄酮含量达到最大值,当浓度大于70%之后,随着浓度的升高,吸光值开始逐渐减小。此实验结果表明,在该实验条件下,提取功率在300W左右为宜。如REF_Ref9821\h图3-6图3-SEQ图3-\*ARABIC6乙醇浓度对黄酮提取的影响(2)时间对黄酮提取的影响在5~20min范围内,溶液的吸光值不断增加,在20min时达到最大值,此时提取液中黄酮含量亦达到最高,此后随着时间的增加,溶液的吸光值缓慢下降。此实验结果表明,在此实验条件下,反应在20min时的提取时间是比较适宜的。如REF_Ref9909\h图3-7。图3-SEQ图3-\*ARABIC7提取时间对黄酮提取的影响(3)液料比对黄酮提取的影响随着料液比(mL∶g)的增大,提取液吸光值逐渐升高,提取液中黄酮含量不断增加,在料液比为25∶1达到最大值,当料液比大于25∶1时,溶液吸光值略有下降(如)。此实验结果表明,在该实验条件下,液料比在25∶1时为最佳。如REF_Ref10102\h图3-8。图3-SEQ图3-\*ARABIC8液料比对黄酮提取的影响(4)功率对黄酮提取的影响随着提取功率的不断增加,溶液的吸光值不断升高,当微波提取功率增加到300W左右时,吸光值达到最大,此时提取液中黄酮含量达到最高,而后随着提取功率的增加,溶液的吸光值开始不断下降。此实验结果表明,在该实验条件下,微波提取功率在300W左右为宜。如REF_Ref10174\h图3-9。图3-SEQ图3-\*ARABIC9功率对黄酮提取的影响正交试验结果(1)微波辅助提取法最佳条件由正交试验结果可知,影响总黄酮提取各因素的主次作用为:乙醇浓度>提取时间>功率>液料比。分析结果表明,各因素间差异均不显著,因此无主因素。通过单因素试验和正交试验优选的银杏果总黄酮提取的最佳条件为A2B3C2D2,即用70%乙醇作为提取剂,料液比25∶1,功率400W,提取时间20min。在9组试验中的黄酮得率最大为2号试验条件组合。对2号试验和A2B3C2D2组合分别做平行试验,结果表明,A2B3C2D2组合的提取率为0.507%,优于2号试验得率,为较优水平组合。如REF_Ref10291\h表3-2表3-SEQ表3-\*ARABIC2微波辅助提取正交试验设计及结果序号液料比(ml/g)提取时间(min)功率(W)乙醇浓度(%)黄酮提取率(%)120:110300650.166220:115400700.423320:120500750.344425:110400750.318525:115500650.282625:120300700.396730:110500700.313830:115300750.297930:120400650.349K10.9330.7970.8590.797K20.9961.0021.091.132K30.9591.0890.9390.959k10.3110.2660.2860.266k20.3320.3340.3630.377k 30.3200.3630.3130.320R0.0210.0970.0770.112微波辅助提取正交试验设计及结果讨论本次提取白果总黄酮利用了超声波提取法和微波辅助提取法,将从白果中提取黄酮作为研究作为背景,以黄酮提取率为评价指标,并用正交实验法对此方法进行优化,使白果总黄酮提取率达到较高值。以乙醇浓度、提取时间、液料比和功率四个因素为条件展开单因素实验,随着各因素条件的增加或延长,黄酮的提取率有一个先升高后下降的趋势,分析其原因可能是和黄酮的结构被破坏或有其他杂质被提取出来有关。确定好最佳影响范围后再进行正交实验,正交实验法将单因素的最佳条件范围重新进行组合,设计正交表,根据R值的大小,排出因素显著性的顺序,并比较k值选出最优水平组合,最后得出白果总黄酮最佳提取工艺。通过本次实验正交表R值大小判断,超声波提取法中超声时间对提取黄酮的影响最显著,表现为当提取时间小于60min时,黄酮提取率有升高趋势,当高于60min以后,可能由于提取时间延长,部分黄酮细胞细胞壁结构被损坏而导致提取率降低;其他三个因素对提取黄酮也有一定影响,影响顺序为:提取时间>乙醇浓度>功率>液料比;微波辅助提取法中乙醇浓度对提取黄酮的影响最显著,表现为当提取时间小于70%时,黄酮提取率有升高趋势,当高于70%以后,可能由于提取时间延长,部分黄酮细胞细胞壁结构被损坏而导致提取率降低;其他三个因素对提取黄酮也有一定影响,影响顺序为:乙醇浓度>提取时间>功率>液料比。对于黄酮来说,结构上的酚羟基是使其进行显色反应的主要依据,实验中常用Al(NO3)3等金属盐进行鉴定,因此在本实验中也正是运用了这种原理来验证黄酮类物质的存在;正交实验法是研究多因素多水平的一种设计方法,它依据Galois理论从全面试验中挑选出部分具有代表性的水平组合进行试验,并对结果进行分析从而找出最优的水平组合,是一种高效率、快速、经济的实验设计方法。根据单因素实验的结果设计正交表,据正交表R值的大小,可排出因素显著性的顺序,通过比较k值可选出优水平组合。结论在本课题实验过程中,分别以微波辅助提取法和超声波提取法来提取白果总黄酮,通过单因素试验确定乙醇浓度、提取时间、液料比、提取功率分别对白果总黄酮提取的影响,通过正交试验优选出提取白果总黄酮的最佳工艺条件。在探究此次超声辅助提取白果总黄酮的实验过程中,提取白果总黄酮的最优条件为乙醇浓度70%、提取时间60min、液料比35:1、提取功率200W,白果总黄酮的最佳提取率为0.69%。在探究此次微波辅助提取白果总黄酮的实验过程中,提取白果总黄酮的最优条件为乙醇浓度70%、提取时间20min、液料比25:1、提取功率400W,白果总黄酮的最佳提取率为0.507%。在探究提取白果总黄酮的最佳提取条件的实验过程中,分别采用了微波辅助提取法和超声波提取法,通过单因素试验和正交试验优选提取白果总黄酮的最佳提取条件。由此次实验数据可知,白果总黄酮的提取超声波提取法优于微波辅助提取法。参考文献刘政,胡孙田,李颖,朱培,褚旭东,孙勇.长兴县古银杏树龄检测与资源特征分析[J].浙江林业科技,2019,39(06):87-91.陈柏林,邹敏敏,苏二正,汪贵斌,郭起荣,王佳宏,曹福亮.银杏果食药物质基础及其加工利用现状[J].生物加工过程,2020,18(06):758-765+774.董俊,刘文漪.银杏果中有效杀虫成分的提取及效果检验[J].生物化工,2021,7(02):96-97国家药典委员会.中华人民共和国药典(2020年版一部)[S].北京:中国医药科技出版社,2020.祝玲,叶曼红.微波辅助萃取银杏中的黄酮类物质的研究[J].化工之友,2006(08):11-12.26.谷政伟.银杏叶黄酮实验室提取技术进展[J].食品安全导刊,2020(15):140-142.31.李根,任国艳,李倩,周明,张轶馨,肖枫.超声辅助提取鲵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